免费文献传递   相关文献

岗梅根、茎体外抗呼吸道病毒的作用比较研究



全 文 :2016 年 2 月 第 18 卷 第 2 期 中国现代中药 Mod Chin Med Feb. 2016 Vol. 18 No. 2
·基础研究·
△[基金项目] “十二五”科技重大专项(2012ZX09201-201-001) ;广东省科技计划项目(2012A030100006)
*[通信作者] 谈英,高级工程师,研究方向:创新中药研究与开发,E-mail:tanying@ 999. com. cn;
陈蔚文,教授,研究方向:创新中药研究与开发,E-mail:chenww@ gzucm. edu. cn
岗梅根、茎体外抗呼吸道病毒的作用比较研究△
陈炜璇1,2,韩正洲1,2,仰铁锤1,马庆1,詹若挺2,谈英1* ,陈蔚文2* ,张奉学3
(1. 华润三九医药股份有限公司,广东 深圳 518110;
2. 广州中医药大学 中药资源科学与工程研究中心 岭南中药资源教育部重点实验室,广东 广州 510006;
3. 广州中医药大学 热带医学研究所,广东 广州 510405)
[摘要] 目的:观察比较岗梅根和岗梅茎水提物对多种呼吸道病毒的抑制作用,为岗梅药材扩大药用部位提供
参考。方法:分别接种甲 1 型流感病毒 FM1 株、呼吸道合胞病毒、鼻病毒 R14 型、腺病毒 3 型和副流感病毒 3 型于
MDCK、A549、HEL和 LLC-MK2 细胞,采用鸡红血球凝集法观察岗梅根、茎水提物对甲 1 型流感病毒 FM1 株的抑
制作用,采用细胞病变抑制法(CPE)观察岗梅根、茎水提物对呼吸道合胞病毒、鼻病毒 R14 型、腺病毒 3 型和副流
感病毒 3 型的抑制作用。结果:在无毒浓度下,岗梅根水提物能抑制甲 1 型流感病毒 FM1 株、腺病毒 3 型、合胞病
毒 RSV和副流感 3 型病毒,而岗梅茎水提物仅能抑制腺病毒 3 型及呼吸道合胞病毒 RSV。结论:岗梅根、茎水提物
均有一定的体外抗呼吸道病毒作用,岗梅根水提物体外对呼吸道病毒的抑制作用略优于岗梅茎。
[关键词] 岗梅根;岗梅茎;体外抗病毒;呼吸道病毒
Comparative Study on Effect of Ilex asprella Root and Stem against Respiratory Viruses
CHEN Weixuan1,2,HAN Zhengzhou1,2,YANG Tiechui1,MA Qing1,ZHAN Ruoting2,
TAN Ying1* ,CHEN Weiwen2* ,ZHANG Fengxue3
(1. China Resources Sanjiu Medical & Pharmaceutical Co.,Ltd.,Shenzhen 518110,China;
2. Research Center of Chinese Herbal Resources and Engineering of Guangzhou University of Chinese Medicine,
Key Laboratory of Chinese Medicine Resources of Ministry of Education,Guangzhou 510006,China;
3. Tropical Medicine Institute,Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou 510405,China)
[Abstract] Objective:To observe and compare the inhibitory effect of Ilex asprella root aqueous extract and I. asprella
stem aqueous extract on several respiroviruses, in order to provide references for expansion of I. asprella’s medicinal
parts. Methods:MDCK,A549,HEL and LLC-MK2 cell were infected with influenza virus type A FM1 strain,RSV,
rhinovirus type 14,adenovirus type 3,parainfluenza virus type 3 separately. The inhibitory effect of I. asprella root aqueous
extract and I. asprella stem aqueous extract on influenza virus type A FM1 strain was observed by using chicken
hemagglutination method. And CPE was used to observe the inhibitory effect of I. asprella root aqueous extract and I. asprella
stem aqueous extract on RSV,rhinovirus type 14,adenovirus type 3,parainfluenza virus type 3. Results:At the nontoxic
concentration,I. asprella root aqueous extract can inhibit influenza virus type A FM1 strain,RSV and parainfluenza virus type
3,while I. asprella stem aqueous extract only inhibit adenovirus type 3 and RSV. Conclusion:Both I. asprella root aqueous
extract and I. asprella stem aqueous extract can inhibit some of respiratory viruses in vitro. The inhibitory effect of I. asprella root
aqueous extract on respiratory viruses in vitro is better than that of I. asprella stem aqueous extract.
[Keywords] Ilex asprella root,Ilex asprella stem,anti-respiratory in vitro,respiratory viruses
doi:10. 13313 / j. issn. 1673-4890. 2016. 2. 006
岗梅为南方常用中草药,临床应用广泛,也是
多种中成药和凉茶饮料的重要原料,临床多用于感
冒发热、肺热咳嗽,热病津伤口渴,咽喉肿痛等病
症[1]。据研究报道,岗梅提取物具有抗病毒和抗菌
·651·
2016 年 2 月 第 18 卷 第 2 期 中国现代中药 Mod Chin Med Feb. 2016 Vol. 18 No. 2
等多种药理活性[2-4]。
岗梅来源于冬青科植物梅叶冬青 Ilex asprella
(Hook. et Arn. )Champ. ex Benth. [5],《中华人民共和
国药典》2010 版在附录部分规定岗梅的药用部位为
“根”[6],而 《广东省中药材标准》(第一册)和
《湖南省中药材标准》(2009 年版)则收载岗梅的药
用部位为“根和茎”[1,7]。目前市场上岗梅药材存在
根、茎混用等现象,随着市场需求的日益增长,岗
梅野生资源不断减少,若能以岗梅茎代替传统的岗
梅根入药,将有利于扩大岗梅的药材来源,从而更
好地保护药材资源。
本研究将通过实验比较岗梅根和茎水提物体外
抗呼吸道病毒的作用效果,评价岗梅茎入药的合理
性,从药效作用的角度为岗梅药材扩大药用部位提
供科学参考。
1 材料
1. 1 仪器和试剂
不锈钢立式电热蒸汽消毒器(上海三申医疗器械
有限公司) ;YJ-875 医用净化工作台(苏州净化设备
厂) ;Hfsafe-1500A2 型生物安全柜(上海力康) ;8
道移液器(百得) ;20 ~ 200 μL移液器(赛默飞)。
小牛血清(广州蕊特生物科技有限公司,批号:
090721) ;DMEM培养基(GIBCO) ;0. 5%的鸡血红
细胞溶液(自制)。
1. 2 病毒和细胞株
甲 1 型流感病毒 FM1 株,于狗肾细胞(MDCK)
传代,TCID50 = 4. 67;呼吸道合胞病毒(RSV)long
株,引进自美国 ATCC(VR-26) ,于人肺癌细胞
(A549)中传代,TCID50 = 3. 5;鼻病毒 R14 型,引
进自 ATCC(VR-284) ;腺病毒 3 型,引进自广州医
科大学呼吸道疾病研究所,均于人肺二倍体细胞
(HEL)传代;副流感病毒 3 型,引进自广州医科大
学呼吸道疾病研究所,于恒河猴肾细胞(LLC-MK2)
上传代。
狗肾细胞(MDCK) ,恒河猴肾细胞(LLC-MK2) ,
引进自广州医科大学呼吸道疾病研究所;人肺癌细
胞(A549) ,人肺二倍体细胞(HEL) ,引进自昆明动
物研究所。
以上病毒和细胞株均由广州中医药大学热带医
学研究所病毒研究室冻存保种。
1. 3 受试药物
1. 3. 1 岗梅根和岗梅茎水提物 取 2013 年 1 月采集
于广东省平远县的野生岗梅根、茎各 8 kg,分别以
水提取,浓缩后得到相应的水提物浸膏,其中每克
岗梅茎浸膏相当于生药 8. 78 g,每克岗梅根水提物
相当于生药 8. 0 g。
分别精密称取岗梅茎、岗梅根水提物各0. 1 mL,
称重后分别为 0. 094 5 g、0. 106 6 g。500 IU 双抗处
理过夜后,用 DMEM培养基充分溶解。其中岗梅根
水提物母液浓度为 106. 6 mg·mL -1,岗梅茎水提物
母液浓度为 94. 5 mg·mL -1。实验时分别用培养基稀
释到一定浓度。
1. 3. 2 阳性对照药 利巴韦林(原料药) ,购自肇庆
星湖药业有限公司,批号:20120523。实验时称取
一定量的利巴韦林后用培养基充分溶解,将其配制
成质量浓度为 10 mg·mL -1的母液。实验时用培养基
稀释到一定浓度。
2 方法
2. 1 抗甲 1 型流感病毒 FM1 株实验
2. 1. 1 岗梅水提物在 MDCK 上毒性浓度的测定 浓
度为 1. 0 × 105 个·mL -1的 MDCK以 0. 1mL /孔接种于
96 孔细胞培养板中,待细胞生长至紧密单层后,分
别加入岗梅根水提物、茎水提物(50、12. 5、3. 12、
0. 78 mg·mL -1)和利巴韦林(2. 0、0. 5、0. 125、
0. 031 mg·mL -1) ,每个浓度 4 复孔,置于 35 ℃培养
箱中继续培养 4 d。4 d后终止实验,以 MTT法检测
受试样品对细胞的毒性作用[8]。
2. 1. 2 岗梅水提物在 MDCK 上对流感病毒抑制作用
的测定 浓度为 1. 0 × 105 个·mL -1的 MDCK 以
0. 1 mL /孔接种于 96 孔细胞培养板中,待细胞生长
至紧密单层后,弃上清液加入用含 2%小牛血清的
DMEM培养基稀释的各浓度药物 0. 1 mL,岗梅根水
提物和茎水提物每个浓度接种 4 个复孔,同时攻击
100TCID50的病毒悬液 0. 1 mL,于 35 ℃吸附 2 h 后,
弃上清液。重新加入相应浓度的含药培养基继续培
养 4 d。终止实验后,以鸡红血球凝集法判断待测样
品对病毒的抑制作用。实验过程中同时设阳性药物
利巴韦林对照、病毒对照和正常细胞对照[8]。
2. 2 抗呼吸道合胞病毒实验
浓度为 1 × 105 个·mL -1的人肺癌细胞(A549)按
·751·
2016 年 2 月 第 18 卷 第 2 期 中国现代中药 Mod Chin Med Feb. 2016 Vol. 18 No. 2
0. 1 mL /孔接种 96 孔细胞板,待细胞汇合紧密后,
先用含 2%小牛血清的 DMEM培养基稀释受试样品,
每个样品上 4 个梯度浓度。每个浓度接种 4 个细胞
复孔,其中孔 1、孔 2 观察岗梅水提物对细胞的毒性
作用;孔 3、孔 4 加药后同时攻击 100TCID50病毒悬
液 100 μL。实验同时设置正常细胞对照、阳性药物
利巴韦林对照及病毒对照。在 35 ℃、5% CO2 条件
下培养 4 d,终止实验[9]。
2. 3 抗鼻病毒 R14 型和抗腺病毒 3 型实验
浓度为 1 × 105 个·mL -1人肺二倍体细胞(HEL)
按 0. 1 mL /孔接种 96 孔细胞板,待细胞汇合紧密后,
按照 2. 2 项的方法,观察岗梅根、茎水提物对鼻病
毒 R14 型和腺病毒 3 型的抑制作用。
2. 4 抗副流感病毒 3 型实验
浓度为 1 × 105 个·mL -1恒河猴肾细胞(LLC-
MK2)按 0. 1 mL /孔接种 96 孔细胞板,待细胞汇合紧
密后,按照 2. 2 项的方法,观察岗梅根、茎水提物
对副流感病毒 3 型的抑制作用。
3 结果
3. 1 抗甲 1 型流感病毒 FM1 株实验
3. 1. 1 岗梅水提物体外对狗肾细胞(MDCK)的毒性
作用 经初步检测,岗梅根水提物在 MDCK 细胞
上的半数毒性浓度为 23. 04 mg·mL -1,相当于生药
184. 32 mg·mL -1;岗梅茎水提物在 MDCK 细胞上
的半数毒性浓度为 10. 82 mg·mL -1,相当于生药
95. 00 mg·mL -1。见表 1。
3. 1. 2 岗梅水提物对病毒的抑制作用 在毒性浓度
50 mg·mL -1浓度下,岗梅根水提物与岗梅茎水提物
均能完全抑制流感病毒的血凝素,其岗梅根水提物
在 12. 5 mg·mL -1浓度(< TC5023. 04 mg·mL
-1)下虽
然对细胞有 35. 80%的毒性作用,但在该浓度下能完
全抑制流感病毒 FM1 株的血凝素;而岗梅茎水提物
在 12. 5 mg·mL -1浓度(接近于 TC50)下,对病毒有抑
制作用,在低毒浓度 3. 12 mg·mL -1对病毒无抑制作
用。见表 2。
阳性药物利巴韦林在 2. 0 ~ 0. 125 mg·mL -1浓度
下对病毒具有完全抑制作用,而在最小实验浓度
0. 031 mg·mL -1下对流感病毒具有 50%的抑制作用。
见表 2。
表 1 岗梅水提物体外毒性浓度的测定结果(MTT,n = 4)
样品名称
质量浓度
/mg·mL -1
λ490(珋x ± s)
破坏率
(%)
TC50
/mg·mL -1
岗梅根水提物 50 0. 29 ± 0. 01 64. 20 23. 04
12. 5 0. 52 ± 0. 05 38. 80
3. 12 0. 65 ± 0. 12 19. 75
0. 78 0. 85 ± 0. 05 0. 00
岗梅茎水提物 50 0. 28 ± 0. 01 65. 43 10. 82
12. 5 0. 37 ± 0. 09 54. 32
3. 12 0. 77 ± 0. 08 12. 35
0. 78 0. 69 ± 0. 03 14. 81
利巴韦林 2. 0 0. 71 ± 0. 04 12. 73 < 2. 0
0. 5 0. 74 ± 0. 01 8. 72
0. 125 0. 75 ± 0. 03 7. 33
0. 031 0. 77 ± 0. 10 5. 41
细胞对照 0. 81 ± 0. 06
表 2 岗梅水提物体外对甲 1 流感病毒的抑制作用
(鸡红血球凝集抑制法)
样品名称
质量浓度
/mg·mL -1
天然血凝素
凝集程度
病毒对鸡红细胞
凝集程度
复孔 1 复孔 2 复孔 1 复孔 2
岗梅根水提物 50 - - - -
12. 5 - - - -
3. 12 - - ++ ++
0. 78 - - ++ ++
岗梅茎水提物 50 - - - -
12. 5 - - - -
3. 12 - - + +
0. 78 - - ++ ++
利巴韦林 2. 0 - - - -
0. 5 - - - -
0. 125 - - - -
0. 031 - - + -
正常细胞对照 - - - -
注: +++表示50% ~75%鸡红血球发生凝集,表示病毒存在; ++
表示 25% ~50%的鸡红血球发生凝集,表示病毒存在; +表示小于
25%的鸡红血球发生凝集,表示有一定量的病毒存在; -表示鸡红
血球不发生凝集,表示药物对病毒有抑制作用。
3. 2 岗梅水提物在 A549 细胞中对 RSV的抑制作用
岗梅根水提物和岗梅茎水提物在最大实验浓度
40 mg·mL -1下对 A549 细胞均无明显的毒性作用。
岗梅根水提物在无毒浓度 40 mg·mL -1(相当于
生药 320 mg·mL -1)及 20 mg·mL -1浓度(相当于生药
浓度 160 mg·mL -1)均能抑制呼吸道合胞病毒(RSV)
的致细胞病变,其中 40 mg·mL -1能完全抑制,而
·851·
2016 年 2 月 第 18 卷 第 2 期 中国现代中药 Mod Chin Med Feb. 2016 Vol. 18 No. 2
20 mg·mL -1能抑制 90%的病毒。而岗梅茎在无毒浓
度下 40 mg·mL -1(相当于 351. 2 mg·mL -1)对 RSV呼
吸道合胞病毒有 90%的抑制作用,而在 20 mg·mL -1
浓度下对呼吸道合胞病毒无抑制作用。阳性药物利
巴韦林在 2. 0 ~ 0. 125 mg·mL -1无毒浓度下对 RSV均
有完全抑制作用,而最小实验浓度 0. 031 mg·mL -1
浓度下对 RSV无抑制作用。见表 3。
表 3 岗梅水提物体外抗 RSV实验结果(CPE法)
样品名称
质量浓度
/mg·mL -1
样品的毒性
作用
病毒对细胞的
致病变作用
复孔 1 复孔 2 复孔 3 复孔 4
岗梅根水提物 40 - - - -
20 - - ± ±
10 - - +++ +++
5. 0 - - +++ +++
岗梅茎水提物 40 - - ± ±
20 - - + +
10 - - +++ +++
5. 0 - - +++ +++
利巴韦林 2. 0 - - - -
0. 5 - - - -
0. 125 - - - -
0. 031 - - + +
病毒对照 ++++ ++++
细胞对照 - - - -
注: -为细胞生长正常,无病变出现; ±为细胞病变少于整个单
层细胞的 10%; +为细胞病变约占整个单层细胞的 25%; ++为细
胞病变约占整个单层细胞的 50%; +++为细胞病变约占整个单层细
胞的 75%; ++++为细胞病变约占整个单层细胞的 75%以上;下同。
3. 3 岗梅水提物在 HEL细胞中对鼻病毒 14 型的抑制
作用
岗梅根水提物最大实验浓度 46. 6 mg·mL -1
(相当于 372. 8 mg·mL -1)对 HEL细胞无明显毒性作
用;岗梅茎水提物最大实验浓度 55. 05 mg·mL -1(相
当于生药 483. 34 mg·mL -1)对细胞具有毒性作用,
使细胞完全破碎,在 27. 52 mg·mL -1(相当于生药
241. 63 mg·mL -1)浓度下,对 HEL 细胞有 20%的毒
性作用。
岗梅根水提物和岗梅茎水提物的最大实验浓度
均对鼻病毒 14 型无明显的抑制作用,不能抑制病毒
致细胞病变作用,提示岗梅水提物对鼻病毒无效。
阳性药物利巴韦林在 2. 0 ~ 0. 5 mg·mL -1无毒浓
度下对鼻病毒 14 型具有较好的抑制作用,完全能抑
制病毒的致细胞病变作用。见表 4。
表 4 岗梅水提物体外抗鼻病毒 14 型实验结果(CPE法)
样品名称
质量浓度
/mg·mL -1
样品的毒性
作用
病毒对细胞的
致病变作用
复孔 1 复孔 2 复孔 3 复孔 4
岗梅根水提物 46. 6 - - ++++ ++++
23. 3 - - ++++ ++++
11. 65 - - ++++ ++++
5. 83 - - ++++ ++++
岗梅茎水提物 55. 05 ++++ ++++ ++++ ++++
27. 52 + + ++++ ++++
13. 76 - - ++++ ++++
6. 88 - - ++++ ++++
利巴韦林 2. 0 - - - -
1. 0 - - - -
0. 5 - - - -
0. 25 - - ++++ +++
病毒对照 ++++ ++++
细胞对照 - - - -
3. 4 岗梅水提物在 HEL 细胞中对腺病毒 3 型的抑制
作用
岗梅根水提物最大实验浓度 46. 6 mg·mL -1
(相当于 372. 8 mg·mL -1)对 HEL 细胞无明显毒性
作用;岗梅茎水提物最大实验浓度 55. 05 mg·mL -1
(相当于生药 483. 34 mg·mL - 1)对细胞具有毒性
作用,使细胞完全破碎,在 27. 52 mg·mL - 1浓度
下对细胞无明显毒性。岗梅根水提物在无毒浓度
46. 6 mg·mL -1和 23. 3mg·mL -1浓度下能完全抑制病
毒,在 11. 65 mg·mL -1浓度下能抑制 90%的病毒;
岗梅茎水提物在毒性浓度 55. 05 mg·mL -1下和无毒
浓度 27. 52 mg·mL -1下均能完全抑制病毒所致的细
胞病变作用。阳性药物利巴韦林仅在最大实验浓度
(无毒浓度)2. 0 mg·mL -1对腺病毒 3 型有抑制作用。
见表 5。
3. 5 岗梅水提物在 LLC - MK2 细胞中对副流感病毒 3
型的抑制作用
岗梅根水提物最大实验浓度 50 mg·mL -1(相当
于 400 mg·mL -1)对 LLC-MK2 细胞无明显毒性作
用;岗梅茎水提物最大实验浓度 50 mg·mL -1(相当
于生药 439 mg·mL -1)对细胞具有毒性作用,使细
胞完全破碎,在 25 mg·mL -1浓度下(相当于生药
219. 5 mg·mL -1)对细胞无明显毒性。岗梅根水提物
在无毒浓度 50 mg·mL -1能完全抑制副流感病毒 3 型
·951·
2016 年 2 月 第 18 卷 第 2 期 中国现代中药 Mod Chin Med Feb. 2016 Vol. 18 No. 2
所致的细胞病变作用,而岗梅茎在无毒浓度
25 mg·mL -1下对副流感 3 型的致细胞病变作用无明
显抑制作用。阳性药物利巴韦林在无毒浓度 5. 0 ~
1. 0 mg·mL -1下均能完全抑制副流感 3 型病毒,而在
0. 25 mg·mL -1浓度下对副流感 3 型无抑制作用。见
表 6。
表 5 岗梅水提物体外抗腺病毒 3 型实验结果(CPE法)
样品名称
质量浓度
/mg·mL -1
样品的毒性
作用
病毒对细胞的
致病变作用
复孔 1 复孔 2 复孔 3 复孔 4
岗梅根水提物 46. 6 - - - -
23. 3 - - - -
11. 65 - - - ±
5. 83 - - ++++ ++++
岗梅茎水提物 55. 05 ++++ ++++ - -
27. 52 - - - -
13. 76 - - ++++ + + +
6. 88 - - ++++ ++++
利巴韦林 2. 0 - - - -
1. 0 - - + +
0. 5 - - ++++ ++++
0. 25 - - ++++ ++++
病毒对照 ++++ ++++
细胞对照 - - - -
表 6 岗梅水提物体外抗副流感病毒 3 型实验结果(CPE法)
样品名称
质量浓度
/mg·mL -1
样品的毒性
作用
病毒对细胞的
致病变作用
复孔 1 复孔 2 复孔 3 复孔 4
岗梅根水提物 50 - - - -
25 - - ++++ ++++
12. 5 - - ++++ ++++
6. 25 - - ++++ ++++
岗梅茎水提物 50 ++++ ++++ 细胞毒性 细胞毒性
25 - - ++++ + + +
12. 5 - - ++++ + + +
6. 25 - - ++++ ++++
利巴韦林 5. 0 - - - -
2. 0 - - - -
1. 0 - - - -
0. 25 - - ++++ ++++
病毒对照 ++++ ++++
细胞对照 - - - -
4 讨论
呼吸道病毒是引起急性上呼吸道感染的主要病
原体,其中包括流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病
毒等,中药治疗呼吸道疾病历史悠久,现代研究表
明中药及其成分具有抗病毒的药理活性[10]。岗梅是
南方习用中草药,临床报道应用岗梅可有效治疗上
呼吸道感染,药理学研究也发现岗梅提取物具有抗
病毒作用[2,11]。针对岗梅药材入药标准不统一、根
茎混用和药材供求关系日益紧张等情况,通过扩大
岗梅药用部位将有助于解决岗梅的资源问题。因此
本研究通过实验比较岗梅根和茎水提物体外抗呼吸
道病毒的作用效果,评价岗梅茎入药的合理性。
实验结果表明,岗梅根与岗梅茎水提物在各种
细胞毒性作用各不相同。其中在恒河猴肾细胞
(LLC-MK2)和人胚肺细胞(HEL)上,岗梅茎水提
物在同浓度下的毒性作用比岗梅根水提物大;而在
狗肾细胞(MDCK)上情况正好相反。在人胚肺癌细
胞(A549)上,岗梅根水提物与岗梅茎水提物最大
实验浓度 40 mg·mL -1对细胞均无明显毒性作用。
在甲 1型流感病毒 FM1株中,岗梅根在低毒浓度
12. 5 mg·mL -1浓度下能完全抑制甲 1 型流感病毒血凝
素,对甲 1型流感病毒 FM1株有一定的抑制作用。
在合胞病毒实验中,岗梅茎水提物 40 mg·mL -1、
岗梅根水提物在 20 mg·mL - 1对 A549 细胞无毒且
对呼吸道合胞病毒 RSV 具有较好的抑制作用。在
腺病毒实验中,岗梅茎水提物在 27. 52 mg·mL - 1
(相当于生药浓度 241. 63 mg·mL - 1)、岗梅根水提
物在 23. 3 mg·mL -1(相当于生药浓度186. 4 mg·mL -1)
无毒浓度下对腺病毒 3 型均具有完全的抑制作用。
在鼻病毒实验中,岗梅茎和岗梅根水提物在无毒
浓度下两者对鼻病毒 14 型均无作用;在对副流感
3 型的实验中,岗梅根在 50 mg·mL - 1(相当于生
药浓度 400 mg·mL - 1)无毒浓度下能完全抑制病
毒致细胞病变作用,而岗梅茎对副流感 3 型无明
显抑制作用。
岗梅根水提物能抑制甲 1 型流感病毒 FM1 株、
腺病毒 3 型、合胞病毒 RSV 和副流感 3 型病毒,而
岗梅茎水提物仅能抑制腺病毒 3 型及呼吸道合胞病
毒 RSV。岗梅根水提物体外对呼吸道病毒的抑制作
用略优于岗梅茎。由于体外实验只能从一定角度反
映药物的作用,尚需在后续研究中比较岗梅根、茎
水提液的体内抗病毒作用。
(下转第 163 页)
·061·
2016 年 2 月 第 18 卷 第 2 期 中国现代中药 Mod Chin Med Feb. 2016 Vol. 18 No. 2
多,类方形,单个散在或多个成群,直径 20 ~
35 μm。单细胞非腺毛长 30 ~ 160 μm。嵌晶纤维长
80 ~ 150 μm。淀粉粒常见,类圆形,单粒,直径6 ~
12 μm。气孔偶见,直径 12 ~ 20 μm。草酸钙簇晶偶
见,直径 5 ~ 12 μm。见图 4。
图 4 水浸风全株粉末图
3 小结
水浸风别名白罕亮、水浸木、大叶水杨梅等[7],
根茎易分离且均不易折断,不同之处根质轻而韧,
断面不平坦,茎质地坚硬,进行石蜡切片时很难取
得连续的根茎切片。同时,显微特征表明水浸风根
髓部木化程度高,粉末显示单细胞非腺毛明显,类
方形石细胞众多,嵌晶纤维常见。水浸风药材显微
特征明显,可以用于区分水浸风药材,也为其后续
开发利用奠定基础。
参考文献
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].
上海:上海科学技术出版社,1999:403-404.
[2] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编:下册[M].北
京:人民卫生出版社,1978:14l.
[3] 江苏新医学院. 中药大辞典:上册[M]. 上海:上海人民
出版社,1977:485.
[4] 中国科学院《中国植物志》编委会.中国植物志:第 71 卷
第 11 分册[M].北京:科学出版社,1999:279.
[5] 赵璞.中国高等植物图鉴:第四册[M]. 北京:科学出版
社,1985:183.
[6] 福建省医药研究所. 福建药物志:第一册[M]. 福州:福
建人民出版社,1979:441.
[7] 戴斌.中国现代瑶药[M]. 南宁:广西科学技术出版社,
2009:153.
[8] 王娴. 风箱树的生药学鉴别[J]. 中医药导报,2007,13
(4) :86,103.
(收稿日期 2015-02-11
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
)
(上接第 160 页)
参考文献
[1] 广东省食品药品监督管理局. 广东省中药材标准:第一
册[S].广州:广东科技出版社,2004:111-113.
[2] 朱伟群,刘汉胜,晏桂华,等. 岗梅水提取物抗流感病毒
的实验研究[J].热带医学杂志,2007,7(6) :555-557.
[3] 何少璋,张一萍,喻丽元.岗梅对微生物的作用研究[J].
现代医院,2008,8(5) :12-13.
[4] Zhou M,Xu M,Ma X X,et al. Antiviral triterpenoid
saponins from the roots of Ilex asprella[J]. Planta Med,
2012,78(15) :1702-1705.
[5] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志:第 45
卷第 2 分册[M].北京:科学出版社,1999:258-260.
[6] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典:一部[S]. 北
京:中国医药科技出版社,2010:附录 24.
[7] 湖南省食品药品监督管理局. 湖南省中药材标准[S].
长沙:湖南科学技术出版社,2010:84.
[8] 符林春,徐培平,刘妮,等. 牛蒡子苷元复方抗流感病毒
的实验研究[J]. 中药新药与临床药理,2008,19(4) :
266-269.
[9] 张振亚,方学平,刁志花,等. 野菊花提取物抑制呼吸道
合胞病毒作用的体外实验研究[J]. 解放军药学学报,
2006,22(4) :273-276.
[10]魏晓露,彭成,万峰.广藿香醇体外抗呼吸道病毒作用研
究[J].中药新药与临床药理,2013,29(1) :26-29.
[11]李宝传,刘珠英. 岗梅感冒灵颗粒的制备及其功效评
价[J].临床医学工程,2011,18(3) :414-415.
(收稿日期 2015-04-14)
·361·