全 文 ：药 物 研 究
The medicine study
基金项目:广西科技攻关项目 (桂科产 09321001) ;广西卫生厅项目 (Z200914) ;《广西壮族自治区壮药质量标准 (第二卷)》标准研
究项目 (MZY2010044)。
作者简介:宋志钊，男，助理研究员，Tel:0771 － 5868275，E － mail:songzhizhao1978@ yahoo． com． cn。
通讯作者:刘元，女，高级实验师，新药开发，Tel:0771 － 5868275，E － mail:liuyuan0821@ vip. 163. com。
HPLC法测定亮叶杨桐叶中槲皮苷的含量
宋志钊 刘 元 李文琪
广西中医药研究院，广西 南宁 530022
【摘 要】 目的:建立亮叶杨桐叶中槲皮苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法，以 TC － C18 色谱柱为分离柱，以乙腈 －
0. 1%磷酸 (20:80)为流动相，254nm为检测波长，柱温为室温。结果:槲皮苷在 0. 05 ～ 1. 60μg范围内，峰面积与其浓度呈良好线性关
系 (r = 0. 9992) ，平均回收率为 97. 4%，RSD为 1. 00% (n = 6)。结论:该方法简便、准确、重复性好，可作为该药材含量测定方法。
【关键词】 亮叶杨桐叶;槲皮苷;HPLC
【中图分类号】R284. 2 【文献标识码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2011)05 － 0027 － 02
Determination of Quercitr in Adinandra Nitida by HPLC
Zhi － zhao Song，Yuan LIU，Wen － qi LI
(Guangxi Institute of Chinese Medicine ＆Pharmaceutical Scince，Nanning，Guangxi 530022)
Abstract:Objective:to assay the content of Quercitr in Adinandra Nitida by HPLC． Method:The TC － C18 (4． 6 mm ×
250mm，5μm)column was used，the mobile phase consisted of acetonitrile － 0． 1% phosphoric acid (20:80) ，the detection wave
length was 254nm and the column temperature was room temperature． Resuilts:Linearity of Quercitr was good at 0. 05 ～ 1. 60μg (r =
0. 9992)． The average recovery of buddleodide was 97. 4% with RSD less than 1. 00% (n = 6)． Conclution:The method is simple，
accurate and repeatable，which can be applied in determination of Quercitr in Adinandra Nitida．
Key words:Adinandra Nitida;Quercitr;HPLC
亮叶杨桐叶，别名:石芽茶、亮叶红淡、亮叶黄瑞
木、石崖茶，系山茶科植物亮叶杨桐 Adinandra nitida
Merr. ex Li的干燥叶。主要分布于我国广东、广西和贵州等
省区，资源丰富。民间制作、饮用及服用该种绿茶已有悠
久历史，具有较突出的消炎、解毒、止血和降压等功效［1］，
是一种保健和药用价值很高的野生植物。亮叶杨桐叶中主
要含有黄酮类、茶多酚类和咖啡因三类活性成分，其中总
黄酮含量为 28. 4%，还含有 20. 9%的茶多酚，咖啡因的含
量较低。其总黄酮主要有:芹菜素、山茶苷 A、山茶苷 B、
槲皮苷和长梗冬青苷［2、3］。因此摸索亮叶杨桐叶中槲皮苷的
含量测定方法，可作为控制本品质量标准的指标之一。现
参考《中国药典》2005 年版一部和相关文献［4 ～ 6］，测定亮
叶杨桐叶中槲皮苷的含量。
1 仪器与试药
日本岛津 LC － 10ATVP高效液相色谱仪，SPD － 10AVP
紫外检测仪;威玛龙色谱工作站;TC － C18 柱 (4. 6mm ×
250mm，5μm) ;KQ －100VDB双频数控超声清洗仪。乙腈
为色谱纯，水为超纯水，其余所用试剂均为分析纯。槲皮
苷对照品 (中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，
批号 111538 － 200403;亮叶杨桐叶药材 10 批，由本院黄云
峰同志采集，赖茂祥研究员鉴定，金秀 4 批，批号为:
090204、090605、 090802、 091221;马 山 2 批，批 号:
090712、091118;昭平 2 批，批号为:090711、091210;上
思 2 批，批号为:090711、091215。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:TC － C18 色谱柱 (4. 6mm ×
250mm，5mm) ;检测波长为 270nm;流动相:乙腈 － 0. 1%
磷酸 (20:80) ;流速:1. 0 mL·min －1;柱温为室温。理
论塔板数按槲皮苷峰计算不低于 3000。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取槲皮苷对照品 10. 0mg，
置 25ml 量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成
400μg /ml对照品溶液，备用。精密吸取上述对照品溶液
0. 25mL，置 10mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤
过，即得 (10. 0μg·mL －1)。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品药材粉末 (过 80 目筛)
0. 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50% 甲醇
50ml，称定重量，加热回流 1 小时，放冷，再称定重量，
用 50%甲醇补足缺失的重量，摇匀，滤过，即得。加甲醇
至刻度，摇匀，滤过，即得。
2. 4 标准曲线及线性范围考察 精密称取槲皮苷对照品
10. 0mg，置 25ml量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
制成 400μg /ml 对照品溶液，备用。精密吸取 12. 5ml 置
25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成 200μg /ml对
照品溶液，分别精密吸取 200μg /ml 槲皮苷对照品溶液
0. 25、0. 5、1. 0、2. 0、4. 0、8. 0ml，分别置 10ml 量瓶中，
加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样 10ul，测定。以槲皮苷对
照品进样量 μg 为横坐标 (X) ，峰面积积分值为纵坐标
(Y)绘制标准曲线，得回归方程为:Y = 2. 61 × 106X +
4. 52 × 103，r = 0. 9992。结果表明:槲皮苷进样量在 0. 05
～ 1. 60μg之间与峰面积积分值呈线性关系。
2. 5 精密度试验 分别吸取同一供试品溶液，进样 5 次，
依次测定，即得。测得供试品 RSD为 0. 77%。
2. 6 重复性试验 取同一批号 (090204)样品，按供试品
溶液制备方法制备 6 份，分别进样，测定，即得。结果测
得槲皮苷含量为 0. 535%，RSD = 1. 28% (n = 6)。表明该
方法重复性良好。
2. 7 稳定性试验 取同一供试品溶液分别于 0，4，8，12，
16h进行测定，即得。结果供试品中槲皮苷含量的 RSD 为
1. 42%，表明供试品溶液在 16h内保持稳定。
2. 8 加样回收试验 取已测知含量 (0. 535%，批号
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中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
药 物 研 究
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090204)的供试品 0. 1g，精密称定，精密加入槲皮苷对照
品溶液 (400μg·mL －1)1. 4mL，按供试液制备项下的方法
制备。结果槲皮苷平均回收率为 97. 4%，RSD为 1. 00% (n
= 6) ，结果见表 1。
表 1 加样回收试验测量结果 (n = 6)
样品中含
量 (μg)
对照品加
入量 (μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
平均回收
率 (%)
RSD
(%)
541. 4 560. 0 1084. 4 96. 9
537. 1 560. 0 1081. 9 97. 2
538. 2 560. 0 1077. 4 96. 1
546. 2 560. 0 1100. 6 99. 0
542. 5 560. 0 1090. 6 97. 8
566. 0 560. 0 1112. 0 97. 5
97. 4 1. 00
2. 9 样品测定 按供试液的制备及检测方法，测定 10
批亮叶杨桐叶药材中槲皮苷含量，结果见表 2。槲皮苷含量
(%)在 0. 314 ～ 1. 08 之间。
表 2 10 批石崖茶药材中槲皮苷测量结果
样品批号 产地 含量 (%)
090204 金秀 0. 594
090605 金秀 0. 835
090711 昭平 0. 534
090712 马山 0. 352
090711 上思 0. 614
090802 金秀 0. 314
091118 马山 0. 639
091210 昭平 1. 08
091215 上思 0. 412
091221 金秀 0. 485
3 讨论
3. 1 对槲皮苷对照品溶液进行紫外扫描，结果其在 254nm
处有最大吸收，故确定检测波长为 254nm。参照《中国药
典》2005 年版一部里有关槲皮苷含量测定方法，以乙腈 －
0. 1%磷酸为流动相，考察多个比例，最后确定乙腈 －
0. 1%磷酸 (20:80)的比例较为适合。
3. 2 采用超声处理 30min、加热回流 1h、索氏提取 2h进行
提取方法考察，超声提取含量测定结果较低，加热回流与
索氏提取结果相差不大，但加热回流更简便、快捷，故采
用加热回流法。采用甲醇、水、50%甲醇作提取溶剂进行
考察，用 50%甲醇提取所得含量比高，且杂质较少，故采
用 50%甲醇作为提取溶剂。以加热回流 30min、1h、2h，
进行提取时间考察，加热回流 30min，测得结果较低，加热
回流 1h、2h，两者无明显差别，故加热回流时间定为 1h。
参考文献
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［6］ 国家药典委员会编． 中华人民共和国药典 (2005 年版一部) ［M］:149
－ 150．
(收稿日期:2011. 01. 01
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
(上接第 24 页)
3 讨论
研究表明，弱视是一种发育障碍性疾病，其发生大部
分与屈光不正有关［5］。学龄儿童处于双眼视觉发育敏感期，
极易造成弱视［6］。
本研究选取 3 岁 ～ 7 岁、8 岁 ～ 15 岁两个年龄段的屈光
不正性弱视患儿进行对比。结果显示低年龄组治疗效果优
于高年龄组，具有统计学意义。在 3 岁 ～ 7 岁可塑性关键期
内，异常的视觉环境可造成功能障碍，而去除异常视觉环
境后，视细胞的发育仍可以恢复到正常状态。当可塑性关
键期终止后，视觉环境对视觉通路和视觉功能发育的影响
将不可逆转。因此，目前国内外学者一致强调应对儿童早
期进行屈光状态及弱视的筛查和检测。
同时，本研究还进行了弱视程度及选用不同疗法对治
疗效果的影响的对比分析。结果显示:①轻度弱视疗效优
于重度弱视;②综合治疗效果更好，优于单一遮盖疗法。
说明对弱视进行多点物象刺激，反复训练则有利于其更好、
更快地提高视力，甚至是正视眼。由此得出结论:屈光不
正性弱视患儿早期给予综合治疗，效果较好。
定期开展儿童屈光不正的医学调研和检查相当重要。
应当至少半年至 1 年做 l次屈光检查，密切跟踪掌握青少年
儿童的视力状况。及时纠正人为导致屈光不正情况的出现，
正确引导和安排青少年儿童学习和休息。
参考文献
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评价标准 ［J］． 中国斜视与小儿眼科杂志，1996，4 (3) :97．
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中国实用眼科杂志，2000，18 (1) :570．
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(5) :303．
(收稿日期:2010. 12. 30)
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