全 文 ：收稿日期:2005-06-14;　修订日期:2005-12-26
作者简介:陈　博(1981-),男(汉族),四川宜宾人 ,现
在读成都中医药大学硕士研究生 ,主要从事中药新药
研制与开发工作.
高效液相色谱法测定祖师麻胶囊中祖师麻甲素的含量
陈　博 , 王　万 , 原红果 , 吴纯洁
(成都中医药大学 ,四川 成都　610072)
摘要:目的 建立祖师麻胶囊质量标准。方法 高效液相色谱(HPLC)法。 Krom asil-C18色谱柱(4. 6 mm ×150 mm , 5 μm),
流动相:甲醇-0. 5%醋酸溶液(32∶68), 流速 0. 5m l m in-1 ,检测波长 327 nm。结果 祖师麻甲素在 0. 0353 0 ～ 0. 423 6μg
间呈很好的线性关系 , r=0. 999 9, 回收率为 101. 75%, RSD =2. 21%。结论 该法操作简便 , 准确 ,可作为该制剂的含量测
定方法。
关键词:祖师麻胶囊;　祖师麻甲素;　高效液相色谱法
中图分类号:R248. 3　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)03-0366-01
Determ ination ofDaphnetin in Zushmi a Capsules by HPLC
CHEN Bo,WANG W an, YUAN H ong-guo,WU C hun-jie
(ChengduUn iversity of Trad itionalCh ineseMed icine, Chengdu 610072, China)
Abstract:Objective To e stablish the quality contro l standa rd of Daphne C apsu les(Zushim a C apsu les). Methods Using HPLC
w ith K rom asil C18 co lumm (4. 6 mm ×150 mm , 5 μm)Them obile phase w as me thano l:0. 5% ace tid acid so lution(32∶68)w ith
0. 5m l /m in o f flow ra te, and the de tection w ave leng th w as at 327 nm. R esu lts Daphnetin showed good linea r re lationship a t the
range o f 0. 035 30 ～ 0. 423 6 μg. The recove ry w as 101. 75% and RSD was 2. 21%. C onclusion This me thod is easy, accurate
and can be used for con tent de term ination of sy ring in Zushim a.
Key words:Daphne Capsules;　Daphne tin;　HPLC
　　祖师麻胶囊系新药转正标准 [标准编号:
W S3-159(Z-53)-94(Z)]祖师麻片改剂型而来 ,
具有祛风除湿 , 活血止痛之功 [ 1] 。主要用于风
湿痹证 、关节炎 、类风湿性关节炎诸症 , 疗效显
著。本方仅由祖师麻 1味药材组成 , 祖师麻为
瑞香科植物唐古特瑞香 Daphne tangutica M ax-
im. 的干燥根皮及茎皮 , 祖师麻甲素 (又名瑞香
素)为其主要活性成分之一。 查阅大量文献资
料 , 祖师麻甲素的高效液相含量测定报道很
少 [ 2] , 并且通过实验发现 ,其方法不是很理想。
为更加方便和准确地控制制剂质量 , 我们经过
反复实验 , 最终选用 HPLC法进行实验 ,并在文
献报道的基础上改进了方法 , 为该制剂建立方
便 、稳定和可控的质量标准提供了依据。
1　实验材料
1. 1　仪器 高效液相色谱仪:岛津 LC-2010A
高效液相色谱仪 , SPD-M10Avp检测器 , 岛津
CLASS-VP色谱工作站;美国 K romasil公司色谱
柱:Krom asil-C18 (美国 )4. 6 mm ×150 mm , 5μm;BP211D型 1 /10万电子分析天平:德国
Sartorius公司。
1. 2　试药与试剂 祖师麻甲素对照品(中国药
品生物制品检定所提供 , 批号:900-200203, 供
含量测定用);祖师麻胶囊 (本课题组生产 , 批
号:030301, 030302, 030303)。 甲醇为 HPLC专
用试剂 , 其余为分析纯。
2　实验方法与结果
2. 1　色谱条件与系统适用性实验 流动相:甲
醇-0. 5%醋酸溶液 (32∶ 68);流速:0. 5 m l
m in-1;柱温:35℃;检测波长:327 nm;进样量:
5μl;理论板数按祖师麻甲素峰计算应不低于 2 000。
2. 2　线性关系考察 精密称取祖师麻甲素对照品适量 , 加 85%甲醇配制成每 1 m l
含祖师麻甲素 35. 30 μg的溶液。精密吸取上述溶液 1, 2, 4, 8, 10, 12 μl, 注入高效
液相色谱仪 ,依法测定 , 以峰面积积分值为纵坐标(Y), 祖师麻甲素进样量(μg)为
横坐标(X), 绘制标准曲线 ,结果表明祖师麻甲素在 0. 035 30 ～ 0. 423 6 μg范围内
呈良好的线性关系。回归方程为:Y =7. 946 3×106X-1. 103 3×104 , r=0. 999 9。
2. 3　对照品溶液的制备 精密称取祖师麻甲素对照品 14. 71 mg, 置 50 m l量瓶中 ,
加 85%甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀;精密量取 3 m l,置 25 m l量瓶中 ,用 85%甲醇
稀释至刻度 ,摇匀 , 即得(每 1m l含祖师麻甲素 35. 30μg)。
2. 4　供试品溶液的制备 取本品 20粒 ,倾取内容物 , 称重 , 研细 ,称取 0. 2 g,精密
称定 ,置 50 m l量瓶中 , 精密加入 85%甲醇 40 m l,超声处理(150W , 50kH z)30 m in,
取出 ,放冷 , 用 85%甲醇稀释至刻度 ,离心 ,即得。
2. 5　阴性对照溶液的制备 按质量标准中处方比例制成缺祖师麻的样品 ,制备阴
性对照溶液 ,依法测定。结果表明 ,祖师麻胶囊中其他成分对祖师麻中祖师麻甲素
的测定无干扰。结果见图 1。
图 1　祖师麻胶囊 HPLC图
2. 6　精密度实验 精密吸取祖师麻甲素对照品溶液(35. 30 μg m l-1), 重复进样
五次 ,测定祖师麻甲素峰面积积分值的平均值为 1 391 874,其 RSD =0. 74%。
2. 7　稳定性实验 精密吸取祖师麻甲素对照品溶液和供试品 (批号:030301)溶
液 ,于 0, 2, 4, 8, 16 h测定 , 测定得祖师麻甲素积分值的平均值为 1 715 438和
1 397 871, 其对照品 RSD =0. 17%,供试品 RSD =0. 49%。
2. 8　重复性实验 精密称取供试品(批号:030301)5份 , 依法测定 , 测得 5份含量
平均值为 10. 61 mg /g, RSD =1. 19%,说明此方法重复性好。
2. 9　加样回收率实验 采用加样回收法 ,精密称取已知含量的祖师麻胶囊(批号:
366
时珍国医国药 2006年第 17卷第 3期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 3　
030301)约 0. 1 g, 分别精密加入祖师麻甲素对照品适量 , 按上述色谱条
件测定 , 计算回收率。结果见表 1。
表 1　回收率实验
峰面积
积分值
取样量
m /g
样品中祖师麻
甲素含量 m /mg
加入祖师麻
甲素量 m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 904 615 0. 116 1 1. 231 8 1. 176 8 2. 435 1 102. 25
1 727 372 0. 099 7 1. 057 8 1. 176 8 2. 208 5 97. 78
1 846 298 0. 114 6 1. 146 0 1. 176 8 2. 360 6 103. 21 101. 75 2. 21
1 904 548 0. 115 3 1. 223 3 1. 176 8 2. 435 1 102. 97
1 845 089 0. 108 6 1. 152 2 1. 176 8 2. 359 0 102. 55
2. 10　样品的含量测定 分别吸取对照品溶液和供试品溶液 , 依法测
定 , 结果见表 2。
表 2　样品中祖师麻甲素的含量测定结果
批号 测定结果 C /mg g-1
1 2
每粒平均含
量 m /mg
RSD
(%)
030301 10. 63 10. 58 4. 03 1. 3
030302 10. 25 10. 36 3. 92 1. 9
030303 10. 60 10. 54 4. 02 1. 6
3　小结
3. 1　 曾用文献 [ 2]报道的祖师麻甲素的含量测定方法进
行实验 , 发现其流动相不是很理想 ,保留时间过长 , 并且基
线不能很好地分离 , 后经过反复实验 , 确定甲醇-0. 5%醋酸
溶液(32∶68)作为流动相 , 结果表明 ,用甲醇-0. 5%醋酸溶
液(32∶68)作为流动相测定 , 保留时间大大缩短 , 能达到
良好的基线分离 , 且阴性无干扰 , 故确定选用此比例流动
相。
3. 2　 本法样品处理方法简单 , 回收率好 , 操作快速 , 准确
度高 , 可作为祖师麻胶囊的定量检测方法。
参考文献:
[ 1] 　国家药典委员会. 卫生部新药转正药品标准 , 第 8册 [ S] .
1996:7.
[ 2] 　王晓云 ,邸立杰 ,刘静洁. HPLC法测定祖师麻片中祖师麻甲
素的含量 [ J] .中国药事 , 2003, 17(4):232.
收稿日期:2005-05-11;　修订日期:2005-12-26
作者简介:韩　海(1977-),男(汉族),浙江宁波人 ,现任暨南大学药学院
药物分析教研室讲师 ,硕士学位 ,主要从事药物分析工作.
反相高效液相色谱法测定胃肠康
颗粒剂中陈皮苷的含量
韩　海
(暨南大学药学院药物分析教研室 ,广东 广州　510632)
摘要:目的 建立胃肠康颗粒剂中陈皮苷含量测定的方法 。方法 以甲醇为提取溶剂 , ShimpackC l8柱为分析柱 , 乙腈-3%
醋酸溶液(22∶78)为流动相;280 nm 为检测波长 , 采用反相高效液相色谱 (RP-HPLC)法测定陈皮苷含量。结果 在
1. 936 ～ 9. 680 μg范围内 , 陈皮苷峰面积与进样量之间呈良好的线性关系 (r=0. 999 8);日内 RSD 为 1. 44%(n =5);平
均加样回收率为(98. 97±2. 05)%(RSD =2. 07%, n =5)。结论 该方法分离良好 ,稳定 , 准确 ,可用于该制剂的质量控制。
关键词:胃肠康颗粒剂;　陈皮苷;　反相高效液相色谱法;　含量测定
中图分类号:R917;R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)03-0367-02
Determ ination ofHesperid in inW eichangkang Granules byRP -HPLC
HAN H ai
(Pharmacy Department of J inan University, Guangzhou 510632, Ch ina)
Abstract:Objective To estab lish an HPLC me thod fo r the determ ination o f hespe rid in in Weichangkang g ranules. Meth-
ods Shim pack C
18
co lumn as analy tic co lum n;acetonitrile-3% acetic ac id so lu tion (22∶78) asm obile phase, 280 nm as de tec-
tive w ave length to estab lish RP-HPLC m ethod. Resu lts The e stablished RP -H PLCm e thod had good linea rity and p recision w ith-
in the range o f 1. 936 ～ 9. 680μg of he sper idin(r=0. 999 8) and theRSD o fw ithin-dayw as le ss than 1. 44% (n =5), the av-
e rage recove ry o f the m e thod was 98. 97% ±2. 05% (RSD =2. 07% , n=5). Conc lu sion The me thod is se lec tive, simp le,
accuracy and prec ise fo r the determ ination of hespe ridin inWeichangkang granules.
Key words:Weichangkang granu les;　H espe rid in;　RP-HPLC;　Con tent determ ina tion
　　胃肠康颗粒剂是按照现代制剂技术新开发的中西药复方制
剂 , 由陈皮 、次硝酸铋 、藿香 、石菖蒲等 7味药组成 , 用于消化不
良 、食欲不振 、脾胃虚寒等胃肠疾病。陈皮是胃肠康颗粒剂中的
君药 , 味苦性温 ,具有理气健脾 , 燥湿化痰之功 , 所含陈皮苷具有
抗炎 、利胆等药理作用 [ 1] ,可作为制剂质量控制的有效成分。陈
皮苷的测定方法有薄层扫描法 [ 2 , 3] 、分光光度法 [ 4]等。为了更加
专属 、灵敏地测定其中的陈皮苷 ,有效控制制剂质量 ,本文建立了
胃肠康颗粒剂中陈皮苷含量测定的 RP-H PLC法 , 方法准确 , 稳
定 、重现性好 、回收率高 , 制剂中其它成分对陈皮苷的测定无干
扰。
1　仪器与试药
1. 1　仪器 高效液相色谱仪:Shim azdu高效液相色谱仪 , Shim a-
zduLC-10A泵 , RHEODYNE7725 i进样器 , Shim azduSPD-10A tVP型
紫外检测器;N2010色谱工作站;Sh im adzuL ibro rAEL 40SM(十万
分之一 )天平(日本岛津所 );SYZ-A石英亚沸高纯水蒸馏器 (江
苏信达仪器厂);KQ-SOB超声波清洗机(昆山市超声设备有限公
司 , 功率:250W)。
1. 2　试药 乙腈(色谱纯 ,美国 TEDIA公司), 水 (重蒸馏 , 临用
前制备 ),醋酸(分析纯 ,南京化学试剂厂), 陈皮苷对照品 (中国
药品生物制品检定所提供 , 含量测定用 , 批号:0721-9909);成药
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 3 时珍国医国药 2006年第 17卷第 3期