全 文 ：131※工艺技术 食品科学 2007, Vol. 28, No. 06
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选取超声功率、超声提取全程时间、提取温度和料液
比四个对提取效果影响较大的因素进行正交试验。
3.3通过正交试验，确定脉冲超声波同时提取条斑紫
菜中的蛋白和多糖最佳工艺参数为：超声功率720W、
超声提取全程时间为85min、提取温度为30℃、料液比
为15mg/ml。在优化后的工艺条件下，多糖提取得率达
35.065%，蛋白提取得率达45.728%。
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收稿日期：2006-07-31
基金项目：集美大学创新团队基金项目(2006A002)；厦门市科技项目(3502Z20063011)
作者简介：吴国宏(1977-)，男，助理实验师，主要从事天然产物提取工艺研究。
荔枝叶中多酚类物质的提取制备
吴国宏，熊何健
(集美大学生物工程学院，福建 厦门 361021)
摘 要：通过单因素分析和正交试验，确定了荔枝叶中多酚制备的工艺：荔枝叶干燥，粉碎，用5倍体积的70%
丙酮溶液室温浸提1h，浸提三次，浸提液真空浓缩，回收溶剂。浓缩液脱色后用等体积的乙酸乙酯萃取三
次，酯相浓缩、冻干得荔枝叶多酚。采用该工艺，产品得率为3.22%，多酚纯度为70.21%，原料中多酚收
率为71.5%，清除DPPH的IC50值为5.71mg/L。
关键词：荔枝多酚；提取；D P P H
Study on Processing Lichi Leaves Polyphenols
WU Guo-hong，XIONG He-jian
(School of Biotechnology, Jimei University, Xiamen 361021, China)
Abstract ：In this paper, the extraction technology of polyphenols from lichi leaves was studied. Lichi leaves were ground,
then infused with 5 volumes (V/W) of 70% acetone solution at room temperature for 3 times with 1 h per time. Then the extracts
were concentrated. Being eliminated pigment, the decolored liquid was extracted with the same volume of acetic ether for
3 times. Ester part was concentrated and freezed out and then the polyphenols product of lichi leaves was obtained. The
purity of the product is 70.21%, with a total polyphenols recovery rate 71.5%, and the elimination rate of IC50 value of
DPPH as 5.71 mg/L.
Key words：lichi polyphenols；extraction；DPPH
2007, Vol. 28, No. 06 食品科学 ※工艺技术132
因 素
水平 A B C
浸提浓度(%) 溶剂:溶质(V/V) 浸提时间(h)
1 50 3:1 1
2 60 5:1 2
3 70 8:1 4
表1 荔枝多酚三因素三水平正交试验
Table 1 Factors and levels of litchi polyphenols extraction
orthognal test
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)06-0131-05
荔枝属无患子科植物，种植历史悠久，我国荔枝
现以广东、广西、福建、台湾等地栽培为主，栽培
面积居世界首位。荔枝的营养价值很高，含有丰富的
糖类和VC。荔枝的药用价值也较高，是国家卫生部公
布的法定的药食两用植物，其性温味甘、酸，常用于
脾虚久泻、病后体弱、哮喘等症，具补脾生津、养
肝、理气、益血的作用；而荔枝核则有温中理气止痛
的作用[1]。
荔枝中含有大量的多酚类物质，主要为类黄酮类。
荔枝多酚在荔枝果皮叶、果肉、果核种皮中都有分布。
如能将荔枝中的多酚类物质进行利用，开发一种新的植
物多酚资源，在化妆品、食品、医药等领域进行应用
性研究，则对我国荔枝资源的综合利用、荔枝产后深
加工技术的开发有积极意义[2]。
本研究以荔枝叶为原料，分析荔枝叶中多酚类物质
的浸提、分离条件，确立荔枝叶中多酚类物质的提取
制备工艺，为荔枝多酚的工业化生产提供依据。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1原料
荔枝叶 福建漳州永泰县。
1.1.2试剂
AR福林-酚、AR焦性没食子酸、DPPH(α,α-二
苯-β-苦味肼) Sigma公司，其它试剂均为分析纯。
1.2方法
1.2.1多酚的测定
采用Dennins-Folin法[3]，样品中总多酚的含量以没
食子酸量计。
1.2.2DPPH自由基清除活性的测定[4]
以95%乙醇为溶剂，配制成浓度为2×10－4mol/L
的DPPH溶液。
精确移取2.0ml一定浓度的荔枝壳提取物溶液于10ml
试管中，加入2ml DPPH溶液，使总体积为4ml，混匀。
室温下放置30min后，倒入光径1cm的比色皿，记录
517nm吸光度(用2ml 95%乙醇与2ml样品溶液调零，以
扣除试样本身颜色的影响)。向2ml DPPH液中加入2ml
相应样品溶剂，记录吸光值为A空白，即空白对照。
根据公式得样品抑制率。
清除率计算公式：
清除率η(%)=(A空白－ 样品)/A空白×100
调零：2ml 95%乙醇+2ml样品溶液；空白：2ml
DPPH+2ml 相应样品溶剂。
1.2.3荔枝叶多酚浸提条件研究
1.2.3.1浸提剂对浸提效果的影响
准确称取荔枝叶粉2.00g，分别用20ml 20%、4 、
60%、80%、95%的甲醇、乙醇、丙酮溶液室温浸提
2h，离心收集浸提液，定容，测定浸提液多酚含量(实
验中，以各处理浸提液在相同体积条件下的吸光值表示
多酚含量)，分析比较多酚在三种有机溶剂水溶液中的
浸出效果。
1.2.3.2多酚浸提条件选择正交试验
称取2.00g荔枝叶粉末，选用L9(34)正交设计(见表
1)，进行浸提条件的选择；分析多酚在不同浸提条件下
的浸提率。
1.2.3.3浸提次数对浸提效果的影响
准确称取2.00g荔枝叶粉末，结合上组正交试验数
据，分析浸提次数对浸提效果的影响。
1.2.4纯化工艺研究
1.2.4.1乙酸乙酯纯化处理
乙酸乙酯纯化处理脱色液采用等体积的乙酸乙酯萃
取，测定萃取液中的多酚含量。分析萃取次数对脱色
液中多酚的萃取率的影响。
1.2.4.2柱层析分离纯化
取经预处理的AB-8型树脂装入40cm高，内径
2.8cm的层析柱中，先用2～3倍树脂体积的蒸馏水洗
柱，然后将脱色液上柱吸附，控制流速2～3ml/min。上
样完成后，用蒸馏水洗脱2～3倍树脂体积，然后用70%
乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，真空浓缩冻干。
1.2.5荔枝叶多酚制备工艺
荔枝叶→浸提→浓缩→脱色→脱色液
脱色液冻干
——→ 乙酸乙酯萃取→酯相回收→冻干
AB-8型树脂吸附纯化→洗脱液浓缩→冻干
2 结果与分析
2.1不同溶剂对浸提效果的影响
133※工艺技术 食品科学 2007, Vol. 28, No. 06
选择浸提溶剂主要是根据溶剂的极性、被提取成分
及共存杂质的性质来决定的。其基本要求是溶剂对所提
取成分溶解度大，杂质在溶剂中的溶解度小，溶剂不
能与被提取成分起化学变化，以及溶剂经济易得、卫
生安全、对环境污染小等[5]。多酚类物质具有酚羟基结
构，具有一定的极性。可以用极性较强的有机溶剂进
行提取。实验中利用不同浓度的甲醇、乙醇、丙酮水
溶液对原料进行浸提，结果见图1。
酚浸提效果的影响。试验结果见表2和图2。
由表2和图2可看出：三因素对多酚提取效果的影
响顺序为：B＞A＞C。浸提体积比对浸提效果的影响
最大，体积比越大，浸提效果越好。在实验条件下，
浸提时间、浸提液浓度对浸提效果影响都不大。
因为浸提溶剂浓度对荔枝多酚浸出效果影响不显
著，考虑到：(1)低浓度浸提液含水量大，在后续浓缩
等工艺过程中能量损耗就大；(2)选用70%的浓度进行浸
提，可减少多糖、蛋白质大分子物质等水溶性杂质的
浸出，有利于后期的纯化。
因此，浸提溶剂的浓度可选择70%。浸提时间选
择1h。
考虑到浸提容积的体积对工业生产成本的影响，
对浸提次数和浸提体积做进一步的试验分析。结果如图
3所示。
由图1可看出，相同浓度下，丙酮的浸提效果明
显比甲醇和乙醇好，因此，选用丙酮溶液作为浸提剂
进行浸提实验。丙酮溶液浓度在60%处浸提的吸光度出
现峰值，因此，可以判定，丙酮溶液最佳浸提浓度在
60%左右。
2.2荔枝多酚浸提条件正交试验
影响原料中目标组分的因素有浸提温度、浸提时
间、浸提溶剂、浸提剂浓度、浸提次数等因素。由
于多酚类的物质高温浸提容易引起氧化，同时增加工厂
化生产时的操作成本，所以本实验采用室温进行浸提。
在单因素试验的基础上，选用L9(34)正交试验，分
析浸提溶剂体积、浸提液浓度、浸提时间三因素对多
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 20 40 60 80 100
吸
光
度
浸提剂浓度(%)
乙醇
丙酮
甲醇
图1 浸提溶剂对多酚浸提效果的影响
Fig.1 Effects of extraction solvent on polyphenols extraction
序号 丙酮浓度(%) 体积比 浸提时间(h) 吸光度
1 50 3 1 0.510
2 50 5 2 1.064
3 50 8 4 1.362
4 60 3 2 0.552
5 60 5 4 1.042
6 60 8 1 1.396
7 70 3 4 0.550
8 70 5 1 1.146
9 70 8 2 1.396
K1 0.979 0.537 1.017 0.983
K2 0.997 1.084 1.004 1.003
K3 1.031 1.385 0.985 1.020
极差 0.052 0.848 0.032 0.037
表2 浸提条件正交试验
Table 2 Results of polyphenols extraction orthogonal test
1.6
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 2 4 6 8 10
吸
光
度
图2 浸提正交试验分析图
Fig.2 Analytic diagram of polyphenols extraction
orthogonal test
丙酮浓度(%)
体积比
浸提时间(h)
1 2 3
图3 浸提次数对浸提效果的影响
Fig.3 Effects of extraction times on polyphenols extraction
浸提次数
100
80
60
40
20
0
多
酚
浸
提
率
(
%
)
5倍体积
8倍体积
4
9
.
4
4
%
5
5
.
1
7
% 8
3
.
9
0
%
8
5
.
5
6
%
9
9
.
6
2
%
1
0
0
.
0
%
以8倍体积70%丙酮浸提三次的多酚浸出率为100%
计。由图3可看出，第一次浸提时，5倍体积浸提多
酚的浸出率明显低于8倍体积，但两次浸提后，浸出率
迅速接近，分别为83.9%、85.6%，浸提三次后，5倍
体积和8倍体积溶剂浸提出的总多酚含量基本相当，故
浸提工艺采用：5倍体积70%的丙酮溶液，室温浸提三
2007, Vol. 28, No. 06 食品科学 ※工艺技术134
样品 1* 2* 3*
荔枝多酚纯度(%) 70.21 42.63 67.52
表3 样品的多酚含量
Table 3 Polyphenols contents in different samples
100
80
60
40
20
0
0 5 10 15 20 25
清
除
率
(
%
)
多酚浓度(mg/ml)
图5 样品清除DPPH活性
Fig.5 DPPH scavenging activities of different samples
y=－0.0023x2+0.1036x－0.0171
y=－0.0017x2+0.082x－0.0585
y=－0.0036x2+0.118x－0.048
乙酸乙酯纯化
未处理
层柱析
DPPH自由基由于苯环的共扼和位阻及硝基的吸电
子作用，是一种稳定的自由基，在517nm有强吸收。
有自由基清除剂存在时，DPPH的单电子被配对而使其
紫色变浅，吸光度变小。因此，可通过检测自由基的
清除情况，来评价试验样品的抗氧化能力[10]。
检测乙酸乙酯萃取纯化样品(1*样)的DPPH清除活
性，并与脱色液直接冻干样品(2*样)和脱色液经1.2.4.2
柱层析分离纯化工艺制备样品(3*样)的清除活性比较，
结果见表3和图5。
次，每次1h。工业生产中，为节约溶剂损耗和降低操
作成本，也可采用8～10倍体积浸提两次，浸出率也可
达85%以上。
2.3纯化工艺研究
浸提液经脱色处理后，仍是含有各种浸出物的混合
体系，除多酚成分以外，还存在糖等水溶性的杂质，
还需要进一步分离纯化。
分离纯化的原理主要是根据目标产物与其他杂质成
分物化性质的差异而进行的，这种差异越大，分离纯
化越简单。天然产物的分离纯化，通常采用萃取、柱
层析分离、结晶、蒸馏、沉淀、膜分离等方法[8]。多
酚类具有一定的极性，所以它既可以溶解在水中，又
可以溶解在极性较弱的有机溶剂里，所以可以利用与水
不溶的乙酸乙酯将水相中的多酚类物质萃取，与水相中
的其他杂质分离，达到纯化的目的。本实验利用乙酸
乙酯萃取法对脱色液进行分离纯化。
脱色液用等体积的乙酸乙酯萃取，测定每次萃取酯
液相中的多酚含量，探讨萃取次数对萃取效果的影响
(以四次萃取量为100%计)。
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
萃
取
率
(
%
)
58.24%
79.75%
91.16%
100.00%
一次
萃取
酯相
二次
萃取
酯相
三次
萃取
酯相
图4 萃取次数对多酚萃取率的影响
Fig.4 Effects of extrction times on polyphenols extraction rate
四次
萃取
酯相
由图4可看出：随着萃取次数的增加，所得的多
酚含量越多，在萃取第二次时，明显比一次萃取多，
当萃取三次时，萃取率达到91.16%，到萃取四次时，
多酚增加的并不明显。但是水相中仍有一部分多酚未被
萃取出来，这部分多酚主要是小分子量、水溶性较强
的多酚组分。
由此确定浸提纯化工艺为：原料用5倍体积的70%
丙酮溶液浸提1h，浸提三次。合并浸提液，真空浓缩，
浓缩液脱色[9]，脱色液用同体积的乙酸乙酯萃取纯化三
次，冻干制备得到多酚。
取50.00g原料用确定的条件进行浸提和制备多酚，
粗多酚得率为3.22%，多酚纯度为70.21%，原料中多酚
回收率为71.5%。
2.4清除DPPH自由基活性
三种样品的IC50分别是5.71、8.19、5.60mg/L。
经过乙酸乙酯和层柱析纯化处理的多酚样品清除
DPPH自由基活性基本相当，但明显强于粗提物。
3 结 论
3.1荔枝叶、梗、果皮、种仁中都含有较多的多酚
类物质，不同组织间多酚含量不同，不同荔枝品种间，
多酚含量也有明显差异。
3.2荔枝叶多酚提取制备工艺条件为：原料用5倍体
积的70%丙酮溶液室温浸提1h，浸提三次，浸提液真
空浓缩，回收溶剂。浓缩液脱色后用等体积的乙酸乙
酯萃取三次，酯相浓缩、冻干得荔枝叶多酚。采用该
工艺，粗多酚得率为3.22%，多酚纯度为70.21%，原
料中多酚收率为71.5%。
3.3荔枝叶多酚有良好的DPPH清除活性，IC50值为
5.71mg/L，可以作为抗氧化剂进行进一步的研究与开发
应用。
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收稿日期：2006-07-21
基金项目：新疆维吾尔自治区高校科研计划立项项目(XJEDU2006S29)；新疆师范大学2005年校基金资助项目
作者简介：关明(1975-)，男，讲师，主要从事色谱分离分析的研究。
新疆胡麻卵磷脂提取工艺及含量测定的研究
关 明1，杜卫军1，李茵萍1，王 岩2，陈 坚2
(1.新疆师范大学生命科学与化学学院，新疆 乌鲁木齐 830054；
2.新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830054)
摘 要：本研究建立了以新疆本地胡麻油脚为原料的卵磷脂提取工艺及双波长薄层扫描法测定胡麻卵磷脂中磷脂酰
胆碱含量的分析方法。提取工艺为水化油脚真空浓缩脱水，丙酮脱油得粗磷脂；粗磷脂用超临界流体二氧化碳萃
取纯化得磷脂；乙醇提取后最终得到以磷脂酰胆碱为主的卵磷脂。含量测定结果表明胡麻卵磷脂中磷脂酰胆碱的含
量为62.4%，平均回收率为99.6%，RSD=3.42%。方法经济实用、结果可靠。
关键词：胡麻卵磷脂；提取工艺；含量测定
Study on Extraction Technology and Content Determination of Xinjiang Flax Lecithin
GUAN Ming1，DU Wei-jun1，LI Yin-ping1，WANG Yan2，CHEN Jian2
(1.Life and Environment Science Institute, Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China；
2.College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China)
Abstract ：The extraction technology of lecithin was proposed and the content of PC in lecithin was determined by dual
wavelength thin-layer scanning chromatography. Coarse phospholipids was prepared first, then refined with supercritical fluid
extraction and organic solvent extraction successively. The factors affecting the extraction rate were investigated through orthogonal
test. The optimum extraction conditions were determined. The content of PC in lecithin is 62.4%, with the average recovery as
99.6% and the RSD as 3.42%. This method is economical, practical and reliable.
Key words：flax lecithin；ex raction technology；content determination
中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)06-0135-03
卵磷脂广泛应用于医疗保健、药品辅料、食品和
化妆品的添加剂等多个领域，国内外需求旺盛，也是
出口创汇的重要品种，具有广阔的开发和应用前景[1-2]；
但目前国内外除了选择新鲜蛋黄或蛋黄粉制备高纯度的
试剂级卵磷脂外，市售的商品卵磷脂(lecithin)大多是
以大豆油脚为原料制得的由磷脂和甘油酸脂等组成的混
合物，主要成分为磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline，
PC)[3-6]，以其他原料生产卵磷脂的报道很少。目前卵磷
脂的质量分析主要采用薄层色谱法和高效液相色谱法分
离卵磷脂中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺(PE)等主要成
分，并对其中磷脂酰胆碱进行定量[7-9]。高效液相色谱
法虽具有快速、自动化等特点，但试剂及色谱柱较为
昂贵，实验成本相对较高[10]。双波长薄层扫描法设备简
单，实验成本低，分离条件易掌握，而且结果直观[11]。