全 文 ：金樱根不同炮制品中总黄酮的含量测定
单于超1，田素英2
(1． 广东省肇庆星湖制药有限公司，广东 肇庆 526060;2．广东药学院中山校区，广东 中山 5284582)
摘要:目的 考察金樱根生品及其不同炮制品中总黄酮含量的变化，以确定不同炮制方法对总黄酮含量的影响。方法 采用紫外 －可见
分光光度法测定金樱根不同炮制品的总黄酮含量。结果 总黄酮含量为:醋制品(7． 83%) ，盐制品(6． 63%) ，黑豆汁制品(6． 01%) ，
生品(5． 88%)。结论 不同炮制方法对金樱根中总黄酮含量的影响较大。
关键词:金樱根;不同炮制品;总黄酮;含量测定
中图分类号:R284． 2 文献标志码:A 文章编号:1673 － 4610(2011)07 － 0414 － 02
作者简介:单于超，制药工程师，主要从事中药应用与制剂研究工作
通讯作者:田素英，副教授，Tel:15362965291，E-mail:zsxqtsy@ 126． com
Content Determination of Total Flavonoids from
Different Preparations of Rdix Rosae Laevigatae
SHAN Yu-chao1，TIAN Su-ying2
(1． Pharmaceutical Co． Ltd，Zhaoqing，Guangdong 526060，China;
2． Zhongshan Branch，Guangdong College of P harmacy，Zhongshan，Guangdong 528458，China)
Abstract:Objective To investigate the content of total flavonoids in Radix Rosae Laevigatae (RRL)and its processed
product in order to study the effect of different processing method on the content of total flavonoids． Methods The content
of total flavonoids in different preparations of RRL was determined by UV-visible spectrophotometry． Results The content
of total flavonoids in RRL preparratua cum aceto (7． 83%)＞ RRL cum salina(6． 63%)＞ R． R． L cum black soybean
milk (6． 01%)＞ RRL concisa (5． 88%)． Conclusion The different methods affect the content of total flavonoids of RRL
before and after the processing．
Key words:RRL;different preparations;total flavonoids;content determination
金樱根为蔷薇科植物金樱子(Rosa laevigata
Michx．)的干燥根，其性味酸涩平，有固精涩肠的作用，
可用于治疗子宫脱垂、细菌性痢疾、小儿脱肛等症［1］。
近年来金樱根受到较广泛的应用，如金鸡片、金鸡胶
囊、广东凉茶、三金片、妇科千金片、快应茶、金鸡颗粒、
三金颗粒、广东凉茶颗粒等。现代研究表明，中药金樱
根中的主要成分含有黄酮、皂苷、鞣质、多糖类等多种
化合物。目前黄酮类化合物被证实有抑癌作用、降血
糖作用、激素样作用、抗氧化作用等。实验研究表明金
樱根具有很强抗噬菌体作用、有一定的抑菌活性，抗炎
作用和抗氧化性活性等。
根据中药学理论，中药炮制可改变中药功能，金樱
根在不同应用时其功能应有所侧重，为此其应有不同
炮制品应用于临床相应功效。但现临床应多用生品。
为此本实验研究采用不同炮制方法，测定炮制前后金
樱根总黄酮含量的变化情况，为其临床应用及开发利
用提供实验依据。
1 仪器与材料
1． 1 仪器
中药粉碎机(LH-08B 型，新昌县城关红利数据制
造厂) ;电热恒温水浴锅(HWS-26 型，上海恒科仪器有
限公司) ;精密电子天平(AUY-220 型，广州仪通兴仪表
有限公司) ;紫外可见分光光度计(UV1102 型，上海天
美科学仪器有限公司) ;数控超声波清洗仪(KQ-500DB
型，山市超声仪器有限公司)。
1． 2 材料
金樱根药材(购于广州市致信中药饮片有限公司，
414
Pharmacy Today ·2011 07 Vol． 21 No． 07·
产地:湖南，批号:20090910) ;芦丁对照品(中国药品生
物制品检定所，批号:100080-200306) ;水为纯化水;其
他所用试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2． 1 金樱根炮制品的制备［1］
2． 1． 1 醋炙金樱根 将净制或切制后的金樱根药物
300 g，加入定量的醋(药 ∶ 醋 = 100 ∶ 20)搅拌均匀，闷
润，待醋被吸尽后，置炒制容器中，先预热锅底，用中火
炒至一定程度(微黄) ，取出晾凉，即得。
2． 1． 2 盐炙金樱根 将食盐 6 g 加适量清水溶解，与
药物金樱根 300 g 搅拌均匀(药 ∶ 盐 = 100 ∶ 2) ，放置闷
润，等待盐水被吸尽后，置炒制容器中，先预热锅底，用
中火炒至一定程度(微黄) ，取出晾凉，即得。
2． 1． 3 黑豆汁炙金樱根 取黑豆 1 kg加适量水，煮约
4 h，熬汁得黑色浑浊液体 1． 5 kg;黑豆渣再加水煮 3 h，
熬汁 1． 0 kg，合并得黑豆汁约 2． 5 kg。然后取金樱根药
物 300 g 与黑豆汁按比例量搅拌均匀，放置闷润，使黑
豆汁深入药物内部，再置炒制容器中，先预热锅底，用
中火炒至一定程度(微黄) ，取出晾凉，即得。
2． 2 金樱根不同炮制品总黄酮含量的研究［2］
2． 2． 1 对照品溶液的制备 取干燥至恒重的芦丁对
照品 20 mg，精密称定，置 20 ml棕色量瓶中，加甲醇 15
ml，置水浴上微加热使溶解，放冷，再用甲醇定容至 20
ml。摇匀，即得 1 mg /ml 的芦丁对照品储备溶液。精
密量取 10 ml，置 50 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即
得(每 1 ml中含芦丁 0． 200 mg)。
2． 2． 2 标准曲线的制备 吸取该溶液 0、1、2、3、4、5、6
ml，分别置 25 ml棕色量瓶中，对应标记为 0、1、2、3、4、
5、6，加 5%亚硝酸钠溶液 1 ml，摇匀，静置 6 min;加
10%硝酸铝溶液 1 ml，摇匀，放置 6 min;加 4%氢氧化
钠溶液 10 ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置 15 min，待
测定。
2． 2． 3 绘制标准曲线 以“0”号瓶作为空白，采用紫
外-可见分光光度法在 510 nm 处(全波长扫描，在 510
nm处有最大吸收)测定吸光度，以吸光度 A为纵坐标，
浓度 C(mg /ml)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程:
A = 12． 7C － 0． 009，相关系数:R2 = 0． 999 2。实验表
明，芦丁的进样浓度在 0． 008 ～ 0． 048 mg /ml 范围内呈
良好的线性关系。
2． 2． 4 供试品溶液的制备 取 4 种金樱根不同炮制
品剪成段，低温烘干，粉碎成细粉后密封保存。精密称
取金樱根粉末生品 2． 004 g、盐制品 2． 000 g、醋制品
2. 002 g以及黑豆汁制品 2． 001 g，分别置于 4 个具塞棕
色三角瓶中，超声提取 2 次，每次加甲醇 50 ml，超声 30
min，合并 2 次滤液，置 100 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻
度，摇匀。精密吸取上述溶液 3． 0 ml，置 10 ml 棕色量
瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品液。
2． 2． 5 精密度试验精密移取浓度为 0． 200 mg /ml 的芦丁
对照液 1 ml，依次按“2． 2． 2”项方法加入显色剂后测定其
吸光度，连续测定 6次并计算含量。RSD为 0． 17%。
2． 2． 6 稳定性试验 取用甲醇超声所制备的供试品
溶液，按“2． 2． 2”项下所述方法，在室温下每隔 5 min
测定吸光度。RSD为 2． 95%。
2． 2． 7 重复性试验 精密称取同一炮制品金樱根(醋
制品)样品 5 份，按照“2． 2． 2”方法进行吸光度测定。
RSD为 0． 92%。
2． 2． 8 加样回收率试验 精密称取 5 份已知总黄酮
含量为 7． 835% 的醋制金樱根粉末约 2． 000 g，按
“2. 2. 4”项下方法得到样品溶液;分别移取上述样品溶
液及一定量的芦丁对照品溶液(其中加入的芦丁的量与
醋制品中的总黄酮含量之比约为 1∶ 1)各 0． 5 ml置 25 ml
量瓶中，以下按照“2． 2． 2”项下的相同测试条件进行吸
光度测定。结果 RSD为 1． 92%，加样回收率为97． 92%。
2． 2． 9 供试品总黄酮含量测定 精密移取上述各供
试品溶液 1． 0 ml，分别置 25 ml棕色容量瓶中，加水 5． 0
ml，加 5%亚硝酸钠溶液 1． 0 ml，摇匀，静置 6 min;加
10%硝酸铝溶液 1． 0 ml，摇匀，放置 6 min;加 4%氢氧
化钠溶液 10． 0 ml，加水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜
滤除沉淀，在波长 510 nm 处测定吸光度，根据标准曲
线算出样品溶液中的总黄酮含量，结果见表 1。
表 1 供试品总黄酮含量测定结果
炮制方法
称样量
(g)
总黄酮含
量(%)
平均含量
(%)
RSD
(%)
P值
(与生品比较)
5． 899
生品 2． 004 5． 899 5． 888 0． 320
5． 866
7． 802
醋制 2． 000 7． 802 7． 835 0． 730 ＜ 0． 01
7． 901
6． 653
盐制 2． 002 6． 588 6． 631 0． 570 ＜ 0． 01
6． 653
6． 030
黑豆汁制 2． 001 5． 997 6． 008 0． 310 ＜ 0． 01
5． 997
注:样品总黄酮的含量(%)=(C1 × 25 × 10 × 100)÷ 3 ÷ 2 000 ×
100%;C1:所测得的样品浓度(mg /ml)
(下转第 439 页)
514
·2011 年 07 月第 21 卷第 07 期· 今日药学
2． 9 样品含量测定
取样品按“2． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，各进
样 20 μl，测定，以外标法计算含量，结果见表 2。
表 2 样品中黄芩苷含量测定结果
批号
黄芩苷含量(mg /g)
1 2
珋x ± s(mg /g)
20090303 20． 6 20． 8 20． 7
20090304 21． 4 21． 8 21． 6
20090305 18． 0 18． 6 18． 3
3 小结与讨论
3． 1 供试品溶液制备方法考察
从复方鱼腥草滴丸中提取分离黄芩苷一般有聚酰
胺柱层析法和酸沉法 2 种，聚酰胺柱层析法中分别对
醇洗浓度进行了考察［2］，经 HPLC 分析结果表明，80%
醇洗黄芩苷的转移率最高，为 75． 24%。而酸沉法操作
简便［3］，节省时间，约 90%以上黄芩苷均被分离提取，
转移率高。因此笔者选择酸沉法进行黄芩苷的分离提
取。为检查黄芩苷是否沉淀完全，酸沉后的上清液作
了薄层跟踪，结果无黄芩苷斑点，表明酸沉法分离完
全。此外，为考察酸沉淀法中放置温度对黄芩苷的分
离提取的影响，进行了常温放置过夜和置冰箱中放置
过夜后黄芩苷分离提取率的比较，发现温度对其影响
不大。
3． 2 流动相的确定
笔者分别采用甲醇 －水冰醋酸(50∶ 50∶ 1)与甲醇-
水-磷酸(43∶ 57 ∶ 0． 2)进行比较，发现后者黄芩苷峰形
良好，能达到基线分离，样品中杂质干扰少，保留时间
适宜。故选用甲醇-水-磷酸(43∶ 57∶ 0． 2)作为本文流动
相。
3． 3 波长的选择
取黄芩苷对照品溶液适量，在 200 ～ 400 nm 波长
范围内进行紫外扫描，黄芩苷对照品溶液在 280 nm 波
长有最大吸收。
文中所建立的方法具有分离效果好，峰性对称，溶
剂及其他杂质干扰小等特点。可用于该制剂的药材原
料、中间产品及成品的三级质量控制。
参考文献
［1］2010 年版中华人民共和国药典(一部) ［S］． 北京:化
学工业出版社，2000:125．
［2］华丽群，高效液相色谱法测定消痒涂膜剂中黄芩苷的
含量［J］．中国现代应用药学杂志，1999，16(4) :65．
［3］黄启华，紫外分光光度法测定双黄连注射液中黄芩苷
的含量［J］．中成药，2000，22(12) :836．
(收稿日期:2011 － 04 － 25

)
(上接第 415 页)
3 讨论
中药材通过各种炮制方法后可达到增加疗效，减
低毒性等作用。中药盐制法中的食盐，味咸性寒，有清
热凉血，软坚散结，润燥的作用，可引药下行，专于入肾
经，多用于补肾固精、疗疝、利尿和泻相火的药物;中药
醋制法传统理论认为醋与药物相须配伍炮制，可以引
药入肝经，增强散瘀止痛、疏肝行气功效，自《五十二病
方》中记载至今，中药醋制法相关文献多见于历代医
方、本草典籍;黑豆性味甘、平，能活血、利水、祛风、解
毒、滋补肝肾，中药材经黑豆汁制后能增强药物的疗
效，降低药物毒性或副作用等。
在金樱根不同炮制品总黄酮含量的研究实验中，实验
结果总黄酮含量为:醋制品(7． 830%)＞盐制品(6． 630%)
＞黑豆汁制品(6． 010%)＞生品(5． 880%)。P值 ＜0． 01，
具有显著性差异。
依据本实验结果，笔者建议在今后临床应用金樱
根时，应根据不同功效采用不同炮制品，以确保临床
疗效。
参考文献
［1］张镜潮，何镜华，兰水中，等．实用中药炮制学［M］． 广
州:广东科技出版社，1993:21 － 36．
［2］韩潇，赵艳龙． 毛头牛蒡子中总黄酮最佳提取工艺研
究［J］．亚太传统医药，2010，6(8) :34 － 35．
(收稿日期:2011 － 01 － 26)
934
·2011 年 07 月第 21 卷第 07 期· 今日药学