全 文 :盐制柚核炮制工艺研究
钟红兰,苏潮品,林云斌,申 健,陈铁钎,秦 冰
(广东省生物制品与药物研究所,广东 广州510440)
摘 要:目的:筛选盐制柚核的最佳炮制工艺。方法:采用紫外分光光度法测定盐制柚核中柠檬苦素含
量,以烘制温度、烘制时间和浸盐量为考察因素,采用正交试验设计对盐制柚核的炮制工艺进行优选。
结果:浸盐量为2%,在70℃下烘烤60min为最佳炮制工艺。结论:正交试验确定的盐制柚核炮制工艺
合理可靠,稳定性好,可为大批量生产提供参考依据。
关键词:盐制柚核;柠檬苦素;炮制工艺;正交设计
中图分类号:R282.02 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2015)22-0036-02
DOI:10.11954/ytctyy.201522015
收稿日期:2015-06-26
基金项目:广东省建设中医药强省立项课题(20122183)
作者简介:钟红兰(1965-),女,广东省生物制品与药物研究所副主任中药师,研究方向为预防药物及中药质量标准。
Study on the Processing Technology of Pomelo Nuclear by Salty Water
Zhong Honglan,Su Chaopin,Lin Yunbin,Shen Jian,Chen Tieqian,Qin Bing
(Guangdong Provincial Institute of Biological Products and Materia Medica,Guangzhou 510440,China)
Abstract:Objective:To optimize the processing technology of Pomelo nuclear by salty water through orthogonal test.Methods:
Ultraviolet spectrophotometry was applied to determine the limonin content,which was extracted from processed Pomelo nuclear,and
the processing was designed by orthogonal design,selecting three factors:soaking temperature,time and salt solution.Results:The
best sample was soaked by 2%salt solution at 70℃for 60minutes.Conclusion:The processing of Pomelo nuclear by salty water is
reasonable and reliable and has a practical applicability.
Keywords:Pomelo Nuclear Processed by Salty Water;Limonin;Processing Technology;Orthogonal Design
柚核为芸香科柑橘属植物柚(Citrus grandis(L.)Os-
beck)干燥成熟的核(种子),性平、温,味苦,归肝经,具有疏
肝理气、宣肺止咳的功效,临床可用于治疗疝气、咳嗽、呃逆
等疾病[1]。其来源和功效与橘核(芸香科柑橘属植物橘及
其栽培变种的干燥成熟种子)相似,关于橘核历代有多种炮
制方法,在2010版《中华人民共和国药典》也有规定其炮制
方法:盐橘核(盐水炙法)[2]。但历代均没有记载关于柚核
的炮制方法,而临床和其他行业又常常会用到柚核。为促
进传统中药的综合开发,更好地利用药用资源,变废为宝,
有必要对柚核的炮制工艺进行研究,为其临床使用提供科
学依据。现代研究表明,柚核的主要活性成分和橘核相似,
主要为柠檬苦素类化合物[3]。故本研究参照橘核(盐炙法)
的炮制方法,但考虑到盐炙药材加热温度不宜过高,因此对
该方法进行改良,采用烘箱烘烤的方法使盐分渗入到药材
内部。采用正交试验对柚核的最优炮制工艺进行筛选,现
报道如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
722型可见分光光度计(上海菁华科技);Denver In-
strument Company AA-200 型 分 析 天 平 (美 国 产 );
HX1001T电子天平(慈溪市天东衡器厂);TG-16高速离心
机(巩义市宇华仪器);XW-80漩涡混合器(上海医科大学仪
器厂);HK-电热恒温干燥箱(智能电脑,广州市旭郎机械);
微型植物试样粉碎机。
1.2 试剂
柠檬苦素对照品购于北京德威钠生物技术有限公司
(含量(HPLC)为99.3%);所用试剂均为分析纯:无水乙
醇、石油醚(60~90℃)、硫酸、三氯化铁、丙酮、对二-甲氨基
苯甲醛;纯化水。
反应液:125mg对二甲氨基苯甲醛溶解于100mL硫酸
-无水乙醇混合液(硫酸65mL,无水乙醇35mL,放冷使用)
—63—
中,加入0.5mL 0.9%三氯化铁溶液,现配现用。
1.3 实验原料
柚核为梅州产沙田柚的果核,经鉴定为芸香科柑橘属
植物柚(Citrus grandis(L.)Osbeck)干燥成熟的核(种子),
于50℃下烘干至恒重,保存于干燥环境中。
2 方法
2.1 柠檬苦素标准曲线制备
精密称取柠檬苦素对照品1.30mg于100mL容量瓶
中,用无水甲醇配成130μg/mL标准工作液。在6支刻度试
管中分别加入0、0.5、0.8、1.2、1.5、2.0mL标准溶液,分别
加无水乙醇至2.0mL,再分别加入反应液5.0mL,摇匀,静
置30min,于500nm波长下测定吸光度[4]。以空白溶液(精
密吸取2.0mL无色乙醇,加入反应液5.0mL)为参比溶液,
以标准品加入量为横坐标,吸光度为纵坐标,采用直线回归
方法计算出标准曲线的回归方程,并绘制标准曲线(见图1),
结果表明,柠檬苦素线性范围为9.291 6~37.166 6μg/mL,
回归方程为Y=0.0177X+0.269,R2=0.997 6(Y:吸光值,
X:标准品相当量)。
图1 标准曲线
2.2 盐制柚核制备
取生柚核9份,每份100g,将药材平铺于托盘中,厚度
约为2cm,分别加盐水30mL至密闭容器内拌匀,焖润2h,
待盐水全部吸干后将药材放入烘箱内烘制。根据预实验结
果可知低温烘制即可获得稳定的实验结果,故烘制温度不
宜过高。选择正交试验因素为加盐量(A)、烘制温度(B)、烘
制时间(C),每个因素取3个水平(见表1),采用L9(34)正交
表[5]安排实验。
表1 盐制柚核因素水平
水平 A加盐量(%) B烘制温度(℃) C烘制时间(min)
1 1 60 60
2 2 70 70
3 3 80 80
注:加盐量(%)为质量分数,即每100g柚核中盐用量克数。
2.3 柠檬苦素类物质总量测定
2.3.1 样品液制备 取柚核炮制品10g,粉碎,过40目
筛。精确称取0.2g供试品(精确到0.001g)于10mL刻度
试管中,加2mL石油醚,涡流混合3min,于4 000r/min条件
下离心,吸走石油醚提取物,再加入适量石油醚重复以上操
作,至提取物无色为止。试管中的剩余物中加入2mL丙酮,
涡流提取3min,4 000r/min条件下离心,收集上清液,再加
入丙酮重复以上操作数次。丙酮提取物用无水乙醇定容至
10mL,待测[6]。
2.3.2 含量测定 精密吸取2.0mL样品制备液,测定其
吸光度,根据标准曲线计算柠檬苦素含量,按照下列公式计
算出原料中柠檬苦素类似物的含量。结果见表2,方差分析
见表3。原料中柠檬苦素类似物含量(%)=(10C/LM)×
100(其中C:检测值;L:样品加入体积;10:样品制备定容体
积;M:样品质量)。
表2 正交试验表及实验结果
样号 浓度 温度 时间 含量(mg/L)
1 1 1 1 25.875 7
2 1 2 2 24.519 8
3 1 3 3 24.237 3
4 2 1 2 24.689 3
5 2 2 3 25.423 7
6 2 3 1 28.474 6
7 3 1 3 24.858 8
8 3 2 1 28.192 1
9 3 3 2 24.915 3
K1 24.878 25.141 27.514
K2 26.196 26.045 24.708
K3 25.989 25.876 24.840
R 1.318 0.904 2.674
注:最佳条件为A2B2C1。
表3 正交实验(方差分析)
项目 MS 自由度 F P
浓度 3.015 2 6.716 0.130
温度 1.385 2 3.085 0.245
时间 15.043 2 33.502 0.029
误差 0.449 2
注:F0.05(2,2)=14.434。
2.3.3 最佳炮制工艺验证实验 按照最佳炮制工艺
A2B2C1制备3批盐制柚核样品,每批100g,测定其中柠檬
苦素类物质总量。结果见表4。
表4 3批盐制柚核烘制实验 (mg/L)
序号 柠檬苦素含量
1 28.474 6
2 28.079 1
3 28.587 6
均值 28.380 4
3 结论
实验结果显示,以柠檬苦素为考察指标,盐制柚核的最
佳炮制工艺A2B2C1,即生柚核加2%盐水拌匀,焖润2h,待
盐水全部吸干后置于70℃烘箱烘制60min,取出,放凉。其
中各因素对柠檬苦素含量的影响由大到小依次为:烘制时
间>浸盐浓度>烘制温度。
4 讨论
目前,中药材炮制工艺大多缺乏科学合理的技术参数,
而柚核作为一种常用中药,在历版药典及古籍中均未收载
其炮制方法。柚核在抗癌、抗氧化、抑菌、抗炎、镇痛、抗病
毒等方面的功效备受关注,其提取物不仅可作为食品风味
改良剂和添加剂应用在食品工业,亦可用于化妆品行业[6]。
因此,对柚核炮制工艺的研究具有重要意义。
—73—
酸枣仁汤治疗失眠相关研究
臧印竹,王 慧*
(贵阳中医学院,贵州 贵阳550002)
摘 要:酸枣仁汤是治疗失眠的代表方剂之一,具有养血安神、清热除烦的功效,主治肝血不足、虚热内
扰证,症见虚烦失眠、心悸不安、头目眩晕、咽干口燥。总结酸枣仁汤治疗失眠症的基础研究和临床应
用,为该病的临床治疗提供参考依据。
关键词:失眠;酸枣仁汤;金匮要略
中图分类号:R289.5;R256.23 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2015)22-0038-02
DOI:10.11954/ytctyy.201522016
收稿日期:2015-07-09
作者简介:臧印竹(1988-),女,贵阳中医学院硕士研究生,研究方向为失眠疾病机制。
通讯作者:王慧(1967-),女,贵阳中医学院教授,研究方向为失眠疾病机制。
1 酸枣仁汤组方分析
酸枣仁汤始见于东汉张仲景的《金匮要略》,由酸枣仁、
知母、川芎、茯苓、甘草等组成,具有补血调肝、养心安神、清
热除烦的功效,主治肝血不足、虚热扰神证,如失眠心悸、虚
烦不安、头晕目眩、咽干口燥等。《金匮要略》记载:“虚劳虚
烦不得眠,酸枣仁汤主之。”说明该方是治疗失眠的代表方
之一。
本方所治之证皆由肝血不足、阴虚内热所致,治宜补血
调肝、养心安神、清热除烦,使肝血足、心神宁、虚烦除,诸证
得解。方中重用酸枣仁养血补肝、宁心安神,为君药;茯苓
宁心安神,知母苦寒质润、滋阴清热,共为臣药;佐以川芎之
辛散,调肝血而疏肝气,调畅气机,与君药相配,酸收与辛散
并用,相反相成,可养血调肝安神;甘草和中缓急,调和诸
药,一者与茯苓相伍可健脾和中,二者与酸枣仁相伍以养肝
阴,为使药。诸药相伍,共奏养血安神、清热除烦之功,可使
阴血得补、心神得养、虚热得清,虚烦不眠、心悸等皆可除。
酸枣仁汤的治方特点以酸收为主,辛散为辅,兼以甘缓,充
分体现了《素问·脏气法时论》中“肝欲散,急食辛以散之,
用辛补之,酸泄之”和“肝苦急,急食甘以缓之”的配伍理论
和治疗法则[1]。
目前,酸枣仁汤主要用于治疗精神系统常见疾病,如失
眠、抑郁、焦虑证等,还可用于改善女性更年期综合征和男
性生殖系统疾病,在皮肤疾病方面也有一定应用。对于酸
枣仁汤作用机制的研究主要集中在其抗焦虑和镇静作用方
面,研究显示其作用机制与抑制中枢神经系统兴奋性,升高
脑组织内啡肽和GABA受体含量有关[2]。酸枣仁汤发挥治
疗作用的物质基础为酸枣仁中的皂苷类和黄酮类成分。
2 失眠病因病机
失眠是由各种原因引起的入睡困难、频度过短、睡眠深
度浅、早醒及睡眠时间不足或质量差的综合征,以入睡困
难、睡后较易醒、醒后不能再睡、时睡时醒、彻夜不眠为主要
特点,并常伴有白天精神不振、反应迟钝、乏力体倦甚则心
烦懊恼等症状。随着生活节奏的加快,生活压力的加大及
人口老龄化进程的加快[3],失眠的发病率逐渐升高。2000
年,我国一项万人以上的调查显示,45.6%人群存在不同程
度的失眠症状[4],严重影响人们的工作、学习和生活[5]
。
参考文献:
[1] 南京中医药大学.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版
社,1985:2225-2226.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业
出版社,2015.
[3] 钟红兰,苏潮品,林云斌,等.中药柚核(种子)研究进展[J].
亚太传统医药,2014,10(8):38-40.
[4] 田庆国,丁霄霖.测定橘核中柠檬苦素中柠檬苦素类似物的
分光光度法[J].分析测试学报,1999,18(9):45-47.
[5] 付志玲,房敏峰,王启林,等.烘法炮制苦杏仁工艺及影响因
素研究[J].云南民族大学学报:自然科学版,2010,19(2):
140-142.
[6] 徐玉娟,施英,肖更生,等.橘核中柠檬苦素类物质测定方法
的研究[J].现代食品科技,2007(2):80-81.
(责任编辑:尹晨茹)
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