全 文 ：第 30卷第 2期
2005年 6月


广 州 化 学
Guangzhou Chemistry


Vol. 30，No. 2
June，2005

苎麻叶中绿原酸的分光光度法测定1
李 勃 1， 瞿 龙 1， 施树云 2
（1. 中南大学 化学化工学院，湖南 长沙 410083；
2. 浙江大学 药学院，浙江 杭州 310027）

摘 要：探讨了采用分光光度法测定苎麻叶中绿原酸的含量的方法。12.5%的醋酸用量为 0.1 mL，
7%尿素 2.0 mL，0.5%亚硝酸钠 0.25 mL，3 min后加入 5%氢氧化钠 0.5 mL，绿原酸与试剂形成
鲜红色络合物，通过在 510 nm处测定溶液的吸光度确定绿原酸的含量。绿原酸浓度在 0.01~0.12
g/L范围内与吸光度值有良好的线性关系，回收率为 95%~107%，相对标准偏差（RSD）为 2.4%。
该方法简便、快速。
关键词：苎麻叶；绿原酸；分光光度法
中图分类号：O657.32 文献标识码：A 文章编号：1009-220X（2005）02-0041-04


苎麻是我国外销特产，国际上称为“中国草”。它在传统医学中具有重要的药用价值。
我国民间利用苎麻治疗疾病的历史悠久。现代药学研究表明，苎麻叶具有丰富的药用和保健
价值成分。特别是绿原酸（图 1）具有利胆、抗菌、降压、增高白血球及兴奋中枢神经系统
等多种药用功能[1]。
目前，绿原酸的分析方法主要采用高效液相色
谱法[2~4]，分析仪器昂贵，操作过程繁杂，对绿原酸
的分光光度法测定未见详细报道。本研究在绿原酸
与亚硝酸钠－氢氧化钠的显色反应[5]基础上，对影响
绿原酸定量分析的有关条件进行了研究，摸索出一
种可行的定量测定绿原酸含量的方法。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
756-MC 紫外-可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。Explorer 全自动电子天
平（瑞士 OHAUS公司）。
绿原酸标准品购自中国生物制备研究所，纯度为 99.5%。精确称取 0.0100 g绿原酸标准
品，用甲醇溶解，50 mL容量瓶定容，配成 0.2000 g/L的标准品溶液。
12.5%醋酸溶液，7%尿素溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，5%氢氧化钠溶液均为自行配置。
其它试剂均为分析纯。水为二次蒸馏水。苎麻叶 5月份采自湖南宁乡，50℃烘干，粉碎备用。

收稿日期：2004-07-11
作者简介：李勃（1981－），男，黑龙江大庆人，中南大学硕士研究生，从事药物开发与分子设计方向研究。
C
OH
OH
O
OH
OH
O
OH
HOOC

图 1 绿原酸的化学结构

DOI:10.16560/j.cnki.gzhx.2005.02.009

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广 州 化 学 第 30卷
1.2 实验方法
量取适量绿原酸样品液（相当于 0.01 ~ 0.12 g/L的绿原酸）于 5 mL比色管中，水浴蒸
干甲醇，然后加入 0.5 mL水，0.1 mL 12.5%的醋酸溶液，2.0 mL 7%的尿素溶液，0.25 mL 0.5%
的亚硝酸钠溶液混合均匀，3 min后加入 0.5 mL 5%的氢氧化钠溶液及水。于 510 nm 处测定
吸光度，以水为空白，进行条件实验和样品分析。
2 结果与讨论
2.1 吸光光谱
分别取 1.0 mL及 1.5 mL绿原酸标准溶
液，按[1.2]中方法显色，以水为空白，测量体
系的吸光光谱，结果见图 2。绿原酸显色后溶
液在 510 nm 处有一特征吸收峰，因此比色分
析在 510 nm处测定溶液的吸光度。
2.2 显色反应条件的确定
取 1.0 mL绿原酸标准溶液，按[1.2]方法
测定绿原酸在不同温度下显色后的吸光度
值。结果表明，温度对吸光度值影响不大（见图 3），故本法选用室温。
取 1.0 mL绿原酸标准溶液，在室温下进行显色，测定不同显色时间的吸光度，结果见
图 4。从图 4中可看出，显色反应体系稳定， 10 min后体系吸光度值稍有减小，故本实验
定容后 5 min开始测定吸光度。
10 15 20 25 30 35 40 45
0.26
0.28
0.30
0.32
0.34


A
/ 显色温度 ℃

0 2 4 6 8 10 12 14 16
0.20
0.22
0.24
0.26
0.28
0.30
0.32
0.34
0.36
0.38
0.40

A
/ min显色时间


2.3 醋酸用量的确定
分别吸取 0.6 mL绿原酸标准品于七个 5 mL的比色管中，水浴蒸干甲醇，各加入 0.5 mL
水，0.025 mL，0.050 mL，0.075 mL，0.100 mL，0.125 mL，0.150 mL，0.175 mL 12.5%的醋
酸，以下操作同[1.2]实验方法。显色后，用石英比色皿在 510 nm处测定吸光度。醋酸用量
与吸光度的关系见图 5。
实验表明，醋酸的用量对吸光度的影响很大，在 0.1 mL时吸光度最大，故实验选用 12.5%
的醋酸 0.1 mL。
450 500 550 600
λ/nm
2


1
0.600
0.450
0.300
0.150
0.000
吸
光
率
A



图 3 显色温度的影响 图 4 显色时间的影响
图 2 绿原酸显色后吸收光谱
C 绿原酸：1—0.04g/L；2—0.06g/L

第 2期

李勃，等：苎麻叶中绿原酸的分光光度法测定 43
2.4 尿素用量的确定
分别吸取 0.6 mL绿原酸标准品于七个 5 mL的比色管中，水浴蒸干甲醇，各加入 0.5 mL
水， 0.1 mL 12.5%的醋酸，再分别加入 0.5 mL，1.0 mL，1.5 mL，2.0 mL，2.5 mL，3.0 mL，
3.5 mL 7%的尿素溶液。以下操作同[1.2]实验方法。显色后，用石英比色皿在 510 nm处测定
吸光度。尿素用量与吸光度的关系见图 6。结果表明，尿素用量在 1.5 ~ 3.5 mL范围内，吸
光度值最大且恒定。实验选用 2.0 mL。





图 5 醋酸的影响 图 6 尿素的影响
2.5 NaNO2用量的确定
分别吸取 0.6 mL绿原酸标准品于六个 5 mL的比色管中，水浴蒸干甲醇，各加入 0.5 mL
水，0.1 mL 12.5%的醋酸，2.0 mL 7%的尿素溶液，再分别加入 0.05 mL，0.10 mL，0.15 mL，
0.20 mL，0.25 mL，0.30 mL 0.5%的亚硝酸钠溶液。以下操作同[1.2]实验方法。显色后，用
石英比色皿在 510 nm处测定吸光度。亚硝酸钠用量与吸光度的关系见图 7。结果表明，亚
硝酸钠用量在 0.20 ~ 0.30 mL范围内，吸光度值最大且恒定。实验选用 0.25 mL。








图 7 NaNO2的影响 图 8 NaOH的影响
2.6 NaOH用量的确定
分别吸取 0.6 mL绿原酸标准品于七个 5 mL的比色管中，水浴蒸干甲醇，各加入 0.5 mL
水，0.1 mL 12.5%的醋酸，2.0 mL 7%的尿素溶液，0.25 mL 0.5%的亚硝酸钠溶液，混合均匀，
3 min后再分别加入 0.1 mL，0.2 mL，0.3 mL，0.4 mL，0.5 mL，0.6 mL，0.7 mL 5%的氢氧
化钠溶液，以水定容显色后，用石英比色皿在 510 nm处测定吸光度。NaOH用量与吸光度
的关系见图 8。
结果表明，NaOH用量在 0.4 ~ 0.7 mL范围内，吸光度值最大且恒定。实验选用 0.5 mL。
0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 0.14 0.16 0.18
0.258
0.260
0.262
0.264
0.266
0.268


A
/ mL醋酸体积
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5
0.230
0.235
0.240
0.245
0.250
0.255
0.260


A
/ mL尿素 体积
0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30
0.16
0.18
0.20
0.22
0.24
0.26
0.28


A
NaNO2 / mL体积
0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30


A
NaOH / mL体积

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2.7 标准曲线的制作
分别取 0.25 mL，0.5 mL，1.0 mL，2.0 mL，3.0 mL标准品溶液置于 5 mL比色管中，
按[1.2]方法测定吸光度。绿原酸浓度（x）在 0.01 ~ 0.12 g/L范围内与吸光度（A）呈良好的
线性关系。标准曲线方程为：A = 0.035 + 8.01 x，线性相关系数 r = 0.9998。
2.8 苎麻叶绿原酸的测定
称取 4.00g干燥好的苎麻叶粉末放于 100 mL烧杯中，加入 48 mL pH = 4.0的乙醇溶液
于 70℃下搅拌浸提 2 h，采用三级浸提，合并滤液，真空浓缩至 20 mL，加入等体积的三氯
甲烷脱色三次。将萃余液于 100 mL容量瓶中定容，按[1.2]方法进行比色分析，平行测定三
次，得苎麻中绿原酸的含量为 0.54%。
2.9 回收率与精密度实验
准确量取 5份已知含量的同一样品 0.5 mL于 5 mL的比色管中，各准确加入一定量的标
准品溶液，每个加标样品均在[1.2]所示的实验方法下测定绿原酸的含量，计算回收率，结果
见表 1（每个加标样品平行测定三次）。
称取同一批苎麻叶样品 4份，按[2.8]方法制备样品溶液，各取 0.5 mL溶液放于 5 mL的
比色管中，按[1.2]方法显色，测吸光度值，得绿原酸浓度的 RSD为 2.4%。
表 1 回收率测定结果
编号 加入量 CA /g•L－1 测定含量 CF /g•L－1 回收率/%
1 0.02 0.019 95
2 0.04 0.043 107
3 0.06 0.062 103
4 0.08 0.076 95
3 结论
（1）通过上述几个条件实验，得出用比色法测定绿原酸含量的操作参数为：12.5%醋
酸用量为 0.1 mL，7%尿素 2.5 mL，0.5%亚硝酸钠 0.25，5%氢氧化钠 0.5 mL；苎麻叶中绿
原酸的含量为 0.54%。
（2）本文系统地探讨了分光光度法分析苎麻叶中绿原酸的含量，分析过程简便、快速，
结果具有较好的精确度与重复性，可满足分析要求，并可用于生产过程中的连续性检测。
参考文献：
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会. 中华本草[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1996.129-130.
[2] 将受军, 朱斌. 测定金银花中绿原酸的含量[J]. 广西医科大学学报, 2002, 19(5): 695-696.
[3] 赵珊, 罗仁才. 反相高效液相色谱法测定保健食品中的绿原酸[J]. 中国卫生检验杂志, 2002, 12(2): 167-168
[4] De Maria C A B, Turgo L C, Moreira R F A. Simultaneous determination of total chlorogenic acid,
trigonelline and caffeine in green coffee samples by high performance gel filtration chromatography [J]. Food
Chemistry, 1995, 52(4): 447-449.
[5] 阴健, 郭弓力. 中药现代研究与临床应用[M]. 北京: 中医药出版社, 1993. 450-451. （下转第 50页）

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Research Development of Compatibilized Polystyrene Blends
CAI Ze-wei， MAI Kan-cheng*
（Materials Science Institute，College of Chemistry and Chemical Engineering，
Key Laboratory for Polymeric Composites and Functional Materials of the Ministry of Education，
Zhongshan University，Guangzhou 510275，China）
Abstract：The research development of compatibilized polystyrene blends with polyethylene,
polypropylene, polyamide was reviewed. The effect of block and graft copolymers as
compatibilizing agents, and reactive compatibilization on the morphology and properties of
polystyrene blends was discussed. The size of phase, interfacial interaction and adhesion were
improved and the mechanical properties of different polystyrene blends were increased by addition
of different kinds of compatibilizing agents. The compatibilizing efficiency depend upon the kinds,
the content and molecular structure of compatibilizing agents.
Keywords：compatibilized polystyrene blend，polyethylene，polypropylene，polyamide




（上接第 44页）

Spectrophotometric Determination of Chlorogenic Acid
in Leaves of Ramie

LI Bo1， QU Long1， SHI Shu-yun2
(1.College of Chemistry and Chemical Engineering，Central South University，Changsha 410083，China；
2. College of Pharmaceutical Sciences，Zhejiang University，Hangzhou 310027，China)

Abstract: A method for the spectrophotometric determination of chlorogenic acid in leaves of
ramie has been established. The additive amount of acetic acid（12.5%）is 0.1 mL, urea（7%）and
sodium nitrite（0.5%）is 2 mL and 0.25 mL respectively. Then 0.5 mL sodium hydroxide（0.5%）
was added 3 minutes later. At that time, the red complex was formed, and then chlorogenic acid
was determined by spectrophotometer at 510 nm. The linear range is 0.01 ~ 0.12 g/L with a
correlation coefficient of 0.9998. The recovery and RSD are 95% ~ 107% and 2.4% respectively.
This method is simple and rapid.
Keywords：leaves of ramie，chlorogenic acid，spectrophotometry