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紫外可见分光光度法测定青刺尖总黄酮含量



全 文 : 基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:30660240);云南省教育厅科研基金项目(编号:5E0489C)
 *通讯作者:韦群辉 , Tel:13708477386;E-mail:km weiqh386@163.com
·实验研究·
紫外可见分光光度法测定青刺尖总黄酮含量
左爱华1 , 韦群辉1* , 曾元儿2 , 江 滨2 , 杨 晶1
(1.云南中医学院 , 云南 昆明 650200;2.广州中医药大学 , 广东 广州 510006)
  摘 要:目的:建立青刺尖(P rinsepia utilis Royle)总黄酮
含量的测定方法。方法:以芦丁为对照品 ,采用紫外分光光度
法在 510nm 处测定青刺尖中总黄酮类化合物的含量。结果:
芦丁在 0.00810~ 0.0486mg/ m L 范围内线性良好 , 总黄酮平
均回收率为 101.41%, RSD 为 0.50%。结论:该方法简便 、快
速 、准确 、灵敏 ,可作为测定青刺尖总黄酮含量的方法。
关键词:紫外分光光度法;青刺尖;黄酮类;芦丁
中图分类号:R927.2 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2008)06-0043-02
青刺尖来源于蔷薇科扁核木属植物扁核木(P rinsepia uti-
lis Roy le)的全株。别名炮筒果 、牛奶捶 、鸡蛋糕 、梅花刺 、枪子
果 、阿那斯 、蒙自扁核木。青刺尖生长于海拔 1000 ~ 3000m 的
山坡 、溪边或灌木丛中 , 主要分布于云南 、贵州 、四川 、台湾 、西
藏等省区[ 1] 。云南地区在昆明 、蒙自 、大理 、丽江 、维西 、宁蒗 、
思茅 、南涧 、巍山 、宾川等县均有分布[ 2] , 为云南多民族常用
药 ,其资源极为丰富。据文献资料记载[3] , 青刺尖用于痈疽毒
疮 ,风火牙痛 , 枪伤 ,骨折 , 蛇咬伤;根用于虚咳 , 久咳 , 积食 , 风
湿关节炎;果用于目翳多泪 , 消化不良等。目前尚未见对其进
行药用价值及化学成分的报道。本文首次采用紫外分光光度
法 ,对其总黄酮进行含量测定 , 为合理开发青刺尖资源提供质
量控制评价手段。
1 仪器及试剂
1.1 仪器 T U-1800 紫外-可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限公司), 电子分析天平(上海仪器厂)。
1.2 试剂 芦丁(购于中国药品与生物制品检定所 , 批号:
0080-9705),其他试剂均为分析纯。
1.3 样品 青刺尖药材:分别采于云南昆明金殿、丽江及蒙自
冷泉镇 3 个地区。经云南中医学院中药鉴定教研室韦群辉高
级实验师鉴定为蔷薇科植物青刺尖(P rinsepia utilis Royle)。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 精密称取 10.12mg 芦丁标准品至
10mL容量瓶中 , 加甲醇适量 , 水浴上微热使溶解 ,加甲醇定容
至刻度 ,即浓度为 1.012mg/ mL 。精密量取 5mL , 置 25mL 容
量瓶中 ,加水至刻度 , 摇匀 ,即得 0.2024mg/m L的标准溶液。
2.2 测定波长的选择 取芦丁标准溶液 , 于 200 ~ 800nm 波
长范围内测定吸收曲线 , 结果表明在 510nm 波长处有最大吸
收 ,故选择 510nm 作为总黄酮测定波长。
2.3 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液 1.0、2.0 、3.0 、
4.0 、6.0mL 分别置于 25mL 的容量瓶中 , 加水至 6mL , 加 5%
的亚硝酸钠溶液 1mL , 混匀 ,放置 6min , 加 10%的硝酸铝溶液
1m L , 混匀 ,放置 6min , 加氢氧化钠溶液 10mL ,再加水至刻度 ,
摇匀 ,放置 15min ,以相应试剂为空白 , 在 510nm 波长处测定
吸光度 ,以吸光度(A)为纵坐标 ,浓度(C)为横坐标 , 绘制标准
曲线 ,其回归方程为:A=12.344C-0.0052 , r=0.9998 , 结果
表明浓度在 0.00810 -0.0486mg/m L 浓度范围内线性关系
良好。
2.4 供试品溶液的制备 精密称取青刺尖茎叶粉末约 1g , 置
于 50mL 锥形瓶中 , 加 20BV 80%乙醇水浴加热回流提取 3
次 ,每次 80min ,过滤 , 合并滤液 , 滤液挥干 , 加甲醇溶解 , 溶解
液转移至 50mL 容量瓶中 , 加甲醇定容至刻度。 精密量取
1m L溶液至 25mL容量瓶中 , 自“加水至 6mL” 起按标准曲线
项下操作 ,测定其吸光度。
2.5 精密度实验 精密吸取浓度为 0.2024mg/ mL 的芦丁标
准溶液 , 同“标准曲线的制备”操作 , 连续测量 6 次 , 测定吸光
度值 ,结果表明 , RSD%=0.73%, 说明该方法仪器精密度良
好 ,结果见表 1。
表 1 仪器精密度实验结果
编号 1 2 3 4 5 6
吸光度 0.194 0.193 0.194 0.192 0.193 0.191
2.6 稳定性实验 精密称取样品约 1g ,按“供试品溶液的制
备”方法制成供试液 , 在 20min 内对样品溶液反复测定 , 测定
吸光度值 ,计算 RSD%为 3.01%, 说明样品在 20min 内稳定 ,
结果见表 2。
表 2 稳定性实验结果
时间 0min 5min 10min 15min 20min RSD(%)
样品吸光度 0.462 0.457 0.444 0.439 0.424
3.01对照品吸光度 0.1968 0.1961 0.1938 0.1927 0.86
2.7 重复性实验 精密称取同一批青刺尖样品 6 份每份约
1g ,按“供试品溶液的制备” 方法制成供试液 , 测定其吸光度 ,
计算其含量 ,得出 RSD%=0.51%,测定结果见表 3。
表 3 重现性实验结果
编号 1 2 3 4 5 6
含量 2.75 2.72 2.71 2.74 2.72 2.74
2.8 加样回收率实验 精密称取已知含量的青刺尖茎叶粉
末共 6 份 , 加入一定量的芦丁标准品 , 按照样品测定的方法测
定含量 , 计算回收率和 RSD 值。 结果表明平均回收率为
101.41%, RSD 为 0.50%,说明该方法的准确度很好 , 实验结
果见表 4。
432008 年第 29 卷第 6 期          云 南 中 医 中 药 杂志
    
表 4 加样回收率实验结果


样品溶液所含的
芦丁的量(mg)
加入芦丁的
量(mg)
实测值
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 15.20 8.61 23.90 101.05
2 15.17 8.58 23.94 102.21
3 15.25 8.63 24.00 101.14
101.41 0.43
4 15.18 15.1 30.46 101.19
5 15.16 15.1 30.45 101.19
6 15.20 15.1 30.50 101.32
2.9 样品测定 分别精密称取青刺尖茎叶昆明 、丽江及蒙自
3 个产地的样品 6 份 , 按照“供试品溶液的制备”方法制备样品
供试液 ,测定其吸光度 , 计算其总黄酮含量 ,结果见表 5。
表 5 样品含量测定结果
样品 1(%) 2(%) 3(%) 4(%) 5(%) 6(%)平均含量(%)
昆明地区 2.96 2.95 2.99 2.97 2.98 2.96 2.97
丽江地区 3.01 3.19 3.09 3.06 3.11 3.15 3.10
蒙自地区 2.97 3.05 3.08 2.99 3.06 3.04 3.03
3 小结与讨论
本实验考察了药材的提取方法 , 考察了提取次数 、不同的
提取时间 、加入溶媒量以及溶媒的浓度 , 从而得出 2.4 项下的
最佳提取工艺。方法学考察证明 , 本方法简便 、准确 、灵敏 , 可
作为青刺尖黄酮类化合物含量的测定方法。
黄酮类化合物是青刺尖的主要活性成分 , 具有降脂 、抗血
栓 、抗氧化 、抗衰老 、抗心率失常等作用 , 因此广泛用于医药 、
卫生等行业。本实验首次对青刺尖中总黄酮进行含量测定 ,
为该药的进一步开发研究及利用奠定了基础。
参考文献:
[ 1].《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编[ M ] .上册.北京:人
民卫生出版社.1975.349.
[ 2].云南省药材公司.云南中药资源名录[ M ] .北京:科学出版社 ,
1993.189.
[ 3].江苏植物研究所.新华本草纲要.第 3册[ M ] .上海:上海科学
技术出版社, 1990.27.
(收稿日期:2008-03-12。)
附片口服液的药效学研究
李 特1 , 舒 可2 , 李 颖3 , 舒 晔4
(1.云南省玉溪市人民医院药剂科 , 云南 玉溪 653100;2.云南省第一人民医院神经内科 , 云南 昆明 650031;
3.昆明医学院第一附属医院干疗科 , 云南 昆明 650031;4.昆明医学院药理教研室 , 云南 昆明 650031)
  摘 要:目的:对中药制剂附片口服液进行药理学研究 ,
为其临床应用提供理论依据。方法:用麻醉大鼠经颈动脉放
血造成动物急性失血性休克模型;经腹部静脉恒速输注普萘
诺尔和维拉帕米混合液 , 造成大鼠急性心功能不全模型。观
察经十二指肠给予不同剂量的附片液后对上述 2 种动物模型
的影响。此外 ,还观察了附片液对垂体一肾上腺皮质功能的
影响。结果及结论:附片液有明显抗急性失血性休克和缓解
化学物质所致急性心功能不全的作用 , 同时还具有兴奋垂
体—肾上腺皮质轴 ,提高肾上腺皮质功能的作用。
关键词:附片口服液;药效学;急性失血性休克;急性心功
能不全;垂体—肾上腺皮质功能
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2008)06-0044-02
附片系传统的正品中药 , 广泛用于中医临床, 具有回阳救
逆、温中固阳 、温阳通脉 、祛寒逐湿 、益气强心 、助补肝肾等功
效。但对其炮制有特殊要求, 否则安全性难以保证。云南白药
集团股份有限公司经数年研究, 采用科学方法和现代先进生产
工艺制成附片液, 不仅解决了附片应用中的安全问题 , 还提高
了药效 ,本文对附片口服液有关药理作用的进行了初步研究。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 SD大鼠 , 体重 250~ 300g , 雌雄兼用 , 由云
南省天然药物药理重点实验室提供(合格证号:滇实动证第
00206)。
1.1.2 药物及试剂 附片口服液(云南白药集团股份有限公
司);心宝丸(广东省药物研究所制药厂);普萘诺尔注射液(北
京制药厂);参茸丸(腾冲制药厂)。其余化学试剂均匀为
AR级。
1.1.3 主要实验仪器 (1)1MS-2B 型二道生理记录仪(成
都仪器厂生产);(2)6511型心电图机(上海 KOHDEN 医用电
子仪器厂);(3)WSQ-B 型微量输液器(江苏沙州仪器厂);
(4)7520型分光光度计(上海分析仪器厂)。
1.1.4 统计分析 采用 SPSS10.0 软件分析 , 组间比较采用
方差分析。
1.2 实验方法
1.2.1 附片液对急性失血性休克大鼠的影响 取大鼠 32
只 ,均分 4 组 , 每组 8 只 , 雌雄各半。 用 3%的戊巴比妥纳
1ml/kg 腹腔麻醉 , 背位固后分离一侧颈总动脉 , 插入动脉道
管 ,再经三道管活塞连接于二道生理记录仪的压力的压力传
感器。三道管的一个接头入一具 5mL 注射器相接。 管道系
统和注射器用 1%肝素生理盐水湿润。在上腹正中剑突下切
口 ,于幽门下找出十二指肠 , 用细软乳胶管从肠系膜穿过 , 以
便在给药时找出十二指肠。描记正常颈动脉血压后 , 使动脉
导管经三通管与注射器连通 , 以 0.5mL/min 的速度缓慢将大
鼠血液抽入注射器内 , 当血压降至 6.5kpa 时停止抽血。此后
44 云 南 中 医 中 药 杂 志          2008 年第 29 卷第 6 期
Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
Vol.29.No.6 (General No.180) June , 2008
Main Content
Clinical Observation on the Treatment of 40 Senile Chronic Cerebral Circulatory Insufficiency Patients with Shuxuetong Injection
   KANG Shan-ping , PENG Shao-jie⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Determination of the Total Flavones Content in Prinsepia Utilis Royle with Ultraviolet Spectrophotometry
   ZUO Ai-hua , Wei Qun-hui , ZENG Yuan-er , etc.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
An Experimental Study on the Effect of Erigeron Breviscapus on TGF-β1 and Renal Function of Diabetes Rats
   XIAO Hua , YANG Qiu-ping , ZHAO Yan , etc.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the Technology of Extraction of Volatile Oil of Anisi Stellati andβ-Cyclodextrin Inclusion   QIU Jiao-ying , ZHANG Hui-fang⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Clinical Observation on the Treatment of 40 Senile Chronic Cerebral Circulatory Insufficiency Patients with Shuxuetong Injection
KANG Shan-ping , PENG Shao-jie
(Ruikang Hospital Affriliated to Guangxi University of Traditional Chinese Medicine , Nanning , Guangxi , 530001)
Abstract:Objective:To observe the effect of Shuxuetong injection on the treatment of senile chronic cerebral circulato ry insufficiency
patients.Methods:80 elderly patients were randomly divided into one test group and one contro l group.Each group was equally given a 4-
week basic treatment.The test group w as added with Shuxuetong injection treatment while the control group was added with Buflomedil
treatment.The dizziness of the two groups w as observed before and after the treatment.A transcranial Doppler w as used to detect the
change of average blood flow and determine the change of hemorrheoelogy index .Results:The total effective rate , the average blood flow
speed of cerebral ar teries and hemorrheoelogy index of the test group were superior to that of the control group (P<0.05 , P <0.001).
Conclusion:Shuxuetong injection has a definite effect on the treatment of senile chronic cerebral circulato ry insufficiency.
Key words:Shuxuetong injection;chronic encephalic circulatory insufficiency;traditional Chinese medicne
Determination of the Total Flavones Content in Prinsepia Utilis Royle with Ultraviolet Spectrophotometry
ZUO Ai-hua , Wei Qun-hui , ZENG Yuan-er ,etc.
(Yunnan University of Traditional Chinese Medicine ,Kunming ,Yunnan ,650200)
Abstract:Objective:To establish a method for determining the content of total flavones in Prinsepia Utilis Royle.Methods:An
ultraviolet spectropho tometry was used to determine the content of the to tal flavones in Prinsepia Utilis Roy le at 510nm with rutin as a
standard control.Results:The rutin had a good linear at the range of 0.00810-0.0486 mg/ml.The average recovery rate of the total
flavones was 101.41%, RSD was 0.50%.Conclusion:The method was easy , quick , accurate and sensitive and can be used to determine the
content of total flavones in Prinsepia Utilis Roy le.
Key words:ultraviolet spectrophotometry;Prinsepia Utilis Royle;flavones;rutin
An Experimental Study on the Effect of Erigeron Breviscapus on TGF-β1 and Renal Function of Diabetes Rats
XIAO Hua , YANG Qiu-ping , ZHAO Yan , etc.(Department of Renal Disease and Department of Diabetes , No.1 Hospital Affiliated to
Kunming Medical College , Kunming , Yunnan , 650031)
Abstract:Objective:To study the effect of erigeron breviscapus on TGF-β1 and renal function of diabetes rats.Methods:70 healthy male
rats were selected and divided randomly into one normal group(N)with 20 rats , one diabetes group(DM)with 25 rats and one breviscanine
treatment g roup(EB)with 25 rats.The later two groups were made as a diabetes nephropathy model induced by injecting streptozotocin(STZ).N group and DM group were injected into the abdominal cavity with normal saline solution while EB group was injected the
abdominal cavity with 20mg.kg-1d-1 erigeron breviscapus.These rats were killed after a 2-week and a 6-week medicine treatment to collect
blood to examine serum TGF-β1 , creatinine(Cre)and blood urea nitrogen(Bun).Results:A .The level of the serum TGF-β1 , Cre and
BUN was the diabetes group>the breviscanine treatment group>the normal g roup and the decrease of Cre was more obvious in the 2-week
group(P<0.01);B.The comparison of urea creatinine egestion was the normal group> the breviscanine treatment group> the diabetes
group.The statistical difference was(P<0.05).Conclusion:Erigeron breviscapus may inhibit the renal overg rowth , increase the urea
creatinine egestion and reduce the concentration of Bun and Cre through the influence of TGF-β1 , thus protecting Kidney.
Key words:erigeron breviscapus;diabetes;rats;renal function;TGF-β1
Study on the Technology of Extraction of Volatile Oil of Anisi Stellati andβ-Cyclodextrin Inclusion
QIU Jiao-ying , ZHANG Hui-fang
(School of Medicine , Jinhua Vocational and Technical College , Jinhua , Zhejiang , 321000)
Abstract:Objective:To find a preference technology of the ex traction of vo latile oil of anisi stellati andβ-cyclodex trin inclusion.Methods:
Orthogonal tests were conducted to take the yield rate of anisi stellati oil as an index preference ex traction technology and take the yield rate
of inclusion compound and the envelopment rate of volatile oil as an index preference inclusion technology.Results:The preference ex traction
technology was that the grinding degree of anisi stellati was 12-14 mesh powder with 10 times water for 3 hours.The inclusion compound
preference technology was that the ratio of the volatile oil andβ-cyclodex trin were 1:5 with the inclusion at 500C for 1.5 hours.Conclusion:
The preference technology has a higher yield rate and the inclusion technology is appropriate.KeyWords:anisi stellati;volatile oil;orthogonal
test;inclusion