全 文 :第35卷 第4期 宁夏大学学报(自然科学版) 2014年12月
Vol.35No.4 Journal of Ningxia University(Natural Science Edition) Dec.2014
文章编号:0253-2328(2014)04-0358-04
草石蚕中水苏糖的提取技术
王启为
(宁夏大学 化学化工学院,宁夏 银川 750021)
摘 要:优化草石蚕中水苏糖的超声波法提取工艺.以新鲜草石蚕为原料,在单因素实验的基础上,以超声波功率、
提取温度、提取时间和料液比为因素,设计4因素3水平的正交实验,研究提取水苏糖的最佳工艺条件.结果表明,
超声波法提取水苏糖的最佳工艺条件是:功率为160W,温度为50℃,时间为30min,原料与试剂的比例为1∶1.该
条件下,草石蚕中水苏糖的得率为61.32%.该方法提取工艺简单、结果准确,且草石蚕可以得到充分利用.
关键词:草石蚕;水苏糖;超声波提取
分类号:(中图)O65 文献标志码:A
收稿日期:2014-06-09
基金项目:国家自然科学基金资助项目(21365016)
作者简介:王启为(1961—),男,副教授,主要从事天然产物的提取与分离研究,(电子信箱)wangqw_4010@126.com.
草石蚕(Chinese artichoke),又名宝塔菜、地牯
牛、甘露子、地瘤等,在我国重庆、江苏、河北等地都
有种植.草石蚕块茎为螺旋状,含约12%~15%以
水苏糖为主的低聚糖[1].水苏糖(Stachyose)属于棉
子糖是半乳糖苷类非还原性功能性低聚糖[2],可被
人体吸收,使体内双歧杆菌增殖,提高免疫力;能够
显著增加血液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和含
量,延缓机体衰老;可以降低肠内有害酶的代谢活
性,减少肠道内的甲基酚等腐败产物,并加速其排
泄,减少有毒代谢物质的吸收;具有良好的润肠通便
效果,可以调整肠道微生态平衡和保护肠道;有利于
增加维生素的合成量,防止体内胆固醇积蓄,降低血
脂、血糖,并有助于钙、镁等微量元素的吸收[3].水苏
糖的保健作用日益受到人们的重视,并被广泛应用
于食品、医药、饲料等领域.已有的研究表明,用草石
蚕干品进行研究的较多,而用新鲜草石蚕进行水苏
糖提取的较少.笔者以刚收获的新鲜草石蚕为提取
原料,既减省了制作草石蚕干品的脱水、烘干、磨粉、
浸泡等工序,又缩短了提取周期,降低了提取成本;
通过提取温度低、提取率高、提取时间短的超声波辅
助提取技术提取草石蚕中的水苏糖.实验利用超声
波辐射压强产生的空化、振动、乳化、扩散、击碎和搅
拌等多级效应,增大了物质分子运动频率和速度,增
加溶剂穿透力,从而加速目标成分水苏糖进入溶剂,
促进提取的进行并提高提取率.同时由于提取温度
可以控制在60℃以下,提取水苏糖后的草石蚕依然
可以作为腌制泡菜的原料,减少了原料浪费.该提取
方法为草石蚕中水苏糖提取的工业化生产、草石蚕
的综合开发利用拓宽了途径.
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
草石蚕(宁夏回族自治区贺兰县金贵乡).水苏
糖标准品(美国Sigma公司);果糖、葡萄糖、蒽酮等
均为分析纯.
722S分光光度计(上海天普分析仪器有限公
司);KQ32OODB数控超声波清洗仪(上海普渡生
化科技有限公司);ALLEGRA台式高速离心机(美
国贝克曼库尔特有限公司);惠普高效液相色谱仪
HP1100示差折光检测器(上海宝曼生物科技有限
公司).
1.2 实验方法
提取草石蚕中水苏糖的工艺流程:新鲜草石
蚕→洗涤→切丝→称重→加水加热浸出→榨汁过
滤→去除杂质→脱色与浓缩.具体操作:称取一定
质量经洗净、切丝的草石蚕,加人相同质量的水,
将其置于超声波发生设备中,在一定温度和时间
下,进行超声波处理.将处理过的草石蚕丝用榨汁
机取得草石蚕浸出液,然后在草石蚕浸出液中加
第4期 王启为:草石蚕中水苏糖的提取技术
入石灰乳,调节浸出液为碱性,并通入二氧化碳气
体使其呈中性.减压过滤,除去草石蚕浸出液中的
蛋白质、果胶、有机酸等杂质[4].经脱色处理即可
得到无色、无杂质的水苏糖提取液.然后进行水苏
糖质量含量的检测.
1.3 水苏糖的测定
1.3.1 标准曲线的制作 用 HP1100示差折光检
测器,色谱柱为Inertsil-NH2(250mm ×4.6mm,
5μm),柱温为30℃;流动相为V乙腈∶V水=70∶30,
体积流量为1.0mL/min,进行等梯度洗脱[5].将水
苏糖标准品真空干燥24h,称取33.62mg,用50%
甲醇 在 室 温 条 件 下 定 容 至 25 mL,摇 匀 即 为
1.34mg/mL储备液.分别移取1,3,5mL储备液于
10mL容量瓶中,用50% 甲醇定容.3个洗脱溶剂
梯度依次为0.134,0.402,0.670mg/mL,进样量为
10μL.以峰面积A为纵坐标,水苏糖的质量含量ρ
为横坐标,绘制标准曲线.
图1 水苏糖的标准曲线
1.3.2 水苏糖质量含量的测定 将水苏糖提取液
稀释一定倍数后,经0.45μm微孔过滤膜过滤,再
用微量进样器吸取10μL,注入高效液相色谱仪中,
测定峰面积.用外标法计算水苏糖的质量含量.
水苏糖的提取率e=V(提取液)×ρ(提取液中
水苏糖)/m(草石蚕)×100% ;
水苏糖的得率r=ρ(提取液中水苏糖)/ρ(草
石蚕中水苏糖)×100%.
2 结果与分析
2.1 单因素对水苏糖得率的影响
2.1.1 提取时间对水苏糖得率的影响 在提取温
度为60℃、m(原料)∶m(溶剂)=1∶1时,测定不同
提取时间t下水苏糖得率r的变化(图2).由图2可
知,r随t的增加而快速提高,但是t超过40min
后,r提高幅度明显下降.
图2 提取时间对水苏糖得率的影响
2.1.2 提取温度对水苏糖得率的影响 在
t=30min、m(原料)∶m(溶剂)=1∶1时,测定不同
提取温度T 下水苏糖得率r的变化(图3).由图3
可知,r随T 的升高而上升,在T=80℃时,r=
91.47%,此后随T的升高,r的变化趋向平稳.
图3 提取温度对水苏糖得率的影响
2.1.3 原料与试剂配比对水苏糖得率的影响 在
t=30min、T=60℃,测定原料与试剂配比导致水
苏糖得率r的变化(图4).由图4可知,随着提取剂
(水)用量的增加,r也随之升高,但是在m(原料)∶m
(溶剂)<1∶3后,r随提取剂(水)用量增加而趋于
平缓.
2.1.4 超声波功率对水苏糖得率的影响 在
t=30min、T=40℃、m (原料)∶m (溶剂)=1∶1
时,测定在不同超声波功率P条件下水苏糖的得率
r(图5).由图5可知道,随着P的增加,r也随之升
高,但是P=144W 后,r的变化随P 的增加变化越
来越小.
根据上述各个单因素实验结果,可知在水苏糖
提取过程中,提取温度、时间、料液比、超声波功率对
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水苏糖得率有直接关系.为了研究提取条件对水苏
糖得率的影响,在分别进行单因素实验的基础上,取
提取温度A(T=40~60℃)、提取时间B(t=10~
30min)、原料配比C(m(原料)∶m(溶剂)=1∶1~
1∶3)、超声波功率D(P=128~160 W)因素进行
L9(34)正交实验设计,并通过实验确定最佳工艺条
件(表1).
图4 料液比对水苏糖得率的影响
2.2 水苏糖最佳提取条件的确定
以水苏糖得率为考察指标,依据表2正交实验
结果,从极差分析得知,各因素作用的主次为D>B
>A>C,说明超声波功率对水苏糖得率的影响最
大,其次是提取时间,然后是提取温度,原料配比对
水苏糖得率的影响最小.提取水苏糖的最佳条件是
A2B3C1D3,即P=160W、t=30min、T=50℃和
m(原料)∶m(溶剂)=1∶1.
图5 超声波功率对水苏糖得率影响
表1 正交实验因素水平表
因素
水平
A B C D
1 40 10 1∶1 128
2 50 20 1∶2 144
3 60 30 1∶3 160
表2 正交实验结果
实验号
A B C D
T/℃ t/min m(原料)∶m(溶剂) P/W
r/%
1 40 10 1∶1 128 54.35
2 50 20 1∶1 144 58.83
3 60 30 1∶1 160 62.56
4 40 20 1∶2 160 61.58
5 50 30 1∶2 128 57.27
6 60 10 1∶2 144 58.74
7 40 30 1∶3 144 56.70
8 50 20 1∶3 160 60.92
9 60 10 1∶3 128 57.66
K 172.63 170.75 175.74 169.28
K 177.02 181.33 177.59 174.27
K 178.96 176.53 175.18 185.06
R 6.33 10.58 2.41 15.78
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第4期 王启为:草石蚕中水苏糖的提取技术
3 结论
超声波提取法可使草石蚕中水苏糖得率有较大
幅度的提高.根据极差分析和生产实际情况确定影
响草石蚕中水苏糖得率的各因素,并获得各因素的
主次顺序:超声波功率、提取时间、提取温度和料液
比.草石蚕中水苏糖超声波法提取的最佳工艺条件
为A2B3C1D3,即超声波功率P=160W,提取时间
t=30min,提取温度T=50℃,m(原料)∶m(溶
剂)=1∶1,此条件下水苏糖得率为61.32% .采用超
声波法提取草石蚕中水苏糖,提取温度低,水苏糖得
率高,与热水浸出法提取水苏糖的得率(45.17%)[6]
相比,该方法的得率提高了16.15%.该实验利用超
声波提取技术,在优选的条件下提取新鲜草石蚕中
的水苏糖,缩短了提取周期,降低了能耗,减轻了水
苏糖提取液纯化工序的负担.同时提取水苏糖后
的草石蚕仍可以作为腌制泡菜的原料加以利用,且
不影响草石蚕的食用功能及其口感,有效地提高了
草石蚕综合利用的经济价值.
参考文献:
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Study on the Extractive Technique of Stachyose from Chinese Artichoke
Wang Qiwei
(School of Chemistry and Chemical Engineering,Ningxia University,Yinchuan 750021,China)
Abstract:This article is about the optimization of stachyose’s extraction process from Chinese artichoke
via ultrasonic method.Taking fresh Chinese artichoke as the material,the author designed the orthogonal
experiment of 4factors and 3levels,basing on the single factor experiment,to study the optimal
technological condition for the extraction of stachyose with the factors of ultrasonic power,extracting
temperature,extracting time and material liquid ratio.The result shows that the optimal technological
condition of ultrasonic method extraction of stachyose is when the ultrasonic power is 160 W,the
extracting temperature reaches 50℃,the extracting time is 30min,and the proportion of material and
reagent is 1∶1.Under this condition,the receiving rate of stachyose from Chinese artichoke is 61.32%.
The extractive technique with the ultrasonic method is simple with precise result,and the Chinese
artichoke can be fuly applied.
Key words:Chinese artichoke;stachyose;ultrasonic extraction
(责任编辑、校对 高继红)
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