全 文 ：现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2008, Vol.24, No.6
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HPLC 法测定毛杨梅树皮中杨梅醇的研究

翟青，郭祀远，吴亚梅
（华南理工大学轻化工研究所，广东 广州 510640）
摘要：研究从毛杨梅树皮中提取杨梅醇的工艺条件及用 HPLC 法测定其含量的色谱条件。实验数据显示，以甲醇作为溶剂，提
取时间45 min，提取效率最高，可达4.78%。采用Dima ODS柱（4.6 mm×250 mm, 5 µm），流动相为V 乙睛:V 水=80:20，体系流速为1mL·min¯1,
紫外检测器(254 nm 的检测条件下，以实验室制备的杨梅醇为标准品，在 2.552~12.76 μg，范围内,相关系数为 1.00，平均回收率为 100.1
％。研究结果表明，该方法简便可行、精密度高、稳定性强、重复性好，可作为毛杨梅资源的进一步合理开发的依据及其质量评价的
方法。
关键词：高效液相色谱；毛杨梅；杨梅醇
中图分类号：TS207.3；文献标识码：A；文章篇号:1673-9078(2008)06-0606-03
Study on the Determination of Myricanol in Myrica esculenta Bark by
HPLC
ZHAI Qing, GUO Si-yuan, Wu Ya-mei
（Research Institute of Light Industry and Chemical Engineering, South China University of Technology, Guangzhou
510640, China）
Abstract: The extraction conditions of myricanol in Myrica esculenta bark were studied and its content was determined by HPLC. The
highest extraction rate of myricanol reached 4.78% by methanol extraction for 45 min. Gradient elution of the extract was performed on a Dima
ODS （4.6 mm ⅹ 250 mm, 5µm）column using UV detector at 254nm. A mixture of acetonitrile and water (80:20 by volume) was used as
mobile phase at a flow rate of 1 ml/min-1. Within a linear range of 2.552~12.76 μg , the coefficient and RSD were of 1 and 100.1% , respectively.
This method was simple, reliable and reproducible with highly sensitive. It can be used for the quality evaluation of Myrica esculenta resources
for their further development.
Key words: HPLC; myrica esculenta; myricanol

毛杨梅(Myrica esculenta Buch.Ham)系杨梅科
(Myricae)杨梅属(Myrica)植物，为药食两用芳香植物
[1]。宋代<<食疗本草>>和明代<<本草纲目>>对杨梅属
的药用功效均有记载，其枝叶和根皮在中国和日本等
地常用作收敛剂、解毒剂和肠胃止泻剂等中药成分[2]。
毛杨梅树皮中主要含黄酮类、单宁类、三萜类和二芳
基环庚烷类等多种化合物成分[3-4]，其中杨梅醇含量可
观。目前尚未有关于毛杨梅的质量标准和含量测定的
研究报道,本研究的目的是建立测定杨梅醇含量的
HPLC 法，为其质量控制提供简便、准确的方法。
1 材料与仪器
收稿日期：2008-02-23
作者简介：翟青，女（1982-），硕士研究生，研究方向：天然糖质分离纯化
新方法新技术
通讯作者：郭祀远，博导
毛杨梅树皮购于广西栲胶厂, 广东药学院中药学
院曾令杰博士鉴定为毛杨梅（Myrica rubra (Lour.)
Sieb.Et zucc.）的树皮。杨梅醇对照品为实验室自行制
备，从毛杨梅树皮中提取分离得到，纯度在 98 %以上
（见图 1），提取用的试剂为分析纯，其它试剂均为色
谱级。
TU-1810 紫外可见分光光度计（北京普析通用仪
器公司），sartorius BP211D 电子天平，水浴锅（北京
中兴伟业仪器有限公司），JL-180DTH 超声波清洗器，
Waters HPLC ( Binary HPLC Pump： Waters 1525；
Autosampler:：Waters 717 plus；Dual λ Absorbance
Deteror: Waters 2487)
2 色谱条件的选择
通过试验，选用确定下列的色谱检测条件：
色谱柱：Dima ODS 柱（4.6 mmⅹ250 mm, 5 µm）；
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2008.06.022
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流动相：乙腈-水（V/V=80/20）；流速：1 mL/min；柱
温：25℃；检测波长：254 nm；进样体积：20 µL。
在此条件下，杨梅醇获得较好的分离，理论塔板
数按杨梅醇峰计算应不低于 3000。对照品与供试品在
约 4 min 相同时间有一色谱峰（见图 1、图 2）。

图1 杨梅醇对照品的HPLC
Fig.1 HPLC chromatogram of the reference substance of
myricanol

图2 毛杨梅树皮药材的HPLC
Fig.2 HPLC chromatogram of the extracts from Myrica
esculenta bark
3 提取条件的选择
3.1 溶剂的选择
杨梅醇为二芳基环庚烷类化合物，选择甲醇、乙
酸乙酯、氯仿为提取溶剂，分别精密称取杨梅树皮约
20 g 共 3 份，置具塞锥形瓶中，各加入上述溶剂 100
mL,称定重量，超声处理 30 min,放至室温，加溶剂补
足重量，滤过，取滤液作为供试品溶液，另取杨梅醇
对照品适量，加甲醇制成每 1 mL 含 0.638 mg 的对照
品溶液。吸取上述供试品溶液和对照品溶液各 20μL,
分别注入液相色谱仪中，测得杨梅醇含量分别为
4.77%、4.61%、4.54%。甲醇提取物中杨梅醇的含量
最高，故采用甲醇作为提取溶剂。
3.2 提取时间的确定
精密称取毛杨梅树皮各 20 g 共 4 份，分别置锥形
瓶中，各加入甲醇 100 mL，称定重量，超声处理 20，
30，45，60 min，放至室温，加溶剂补足重量，滤过，
取续滤液作为供试品溶液，结果测定分别为 4.54%、
4.65%、4.77%。45 min 与 60 min 提取效果最好，选
用 45 min 提取时间。
4 检测方法的考察
4.1 线性关系检验
精密称取干燥至恒重的杨梅醇对照品 31.90 mg。
置 50 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
即得（每 1 mL 含杨梅醇 0.638 mg）。液相自动进样仪
分别吸取 4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μL 注入液相
色谱仪中，按上述色谱条件测定对照品峰面积，将进
样 量与 峰面 积进 行回 归处 理， 回归 方程 为
y=1727590.56x- 996567.50，相关系数：R2 = 1.00,杨梅
醇对照品进样量在 2.552~12.76 μg 范围内与峰面积呈
良好的线性关系。
4.2 精密度试验
自动吸取供试品溶液 20μL，按上述色谱条件重
复进样 5 次，记录色谱图及峰面积积分值，结果
RSD=1.39 ％<2%(n=5)，表明仪器精密度良好，测定
结果见表 1。
表1 仪器精密度
Table 1 Precision of the method
进样次数 1 2 3 4 5
峰面积 652714 652711 652718 652713 652715
平均值: 652714.2; RSD: 1.39%
4.3 稳定性试验
自动吸取供试品溶液 20 μL，按上述色谱条件，
每隔 0.5 h 测定供试品溶液中杨梅醇峰面积，共测定到
第 3 h，计算供试品溶液中杨梅醇峰面积相对标准差。
表明二氢杨梅素在供试品溶液制备 3 h 内基本稳定，
RSD=1.27%<2%(n=7)，可以满足试验的分析要求。结
果见表 2。
表2 样品稳定性
Table 2 Effect of standing time on the myricanol concentration
放置时间(h) 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
峰面积积分值 652710 652717 652714 652716 652801 652811 652771
峰面积平均值: 652716.4; RSD: 1.27 %
4.4 加样品回收率试验
分别精密称取已知含量的样品 5 份，每份约 100
g 。置具锥形瓶中，精密加入杨梅醇对照品（0.638
mg/mL）3 mL，再精密加入甲醇 500 mL，称定重量，
超声处理 45 min，放至室温，加溶剂补足重量，滤过，
取续滤液，按含量测定项下色谱条件，仪器自动吸取
20μL，注入液相色谱仪中进行含量测定，计算回收率，
结果平均回收率为 99.38 %，RSD=1.02 %，表明 HPLC
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法用于本品的质量控制具有良好的准确性。（见表 3）
表3 回收率试验结果
Table 3 Recovery test results
试验号 试样量/g
杨梅醇含
量/g
对照品加入量
/g
实测值 回收率
1 100.0021 4.76 1.9910 6.7712 1.003
2 100.1352 4.78 1.9910 6.7612 0.999
3 100.1262 4.79 1.9910 6.7674 0.998
4 100.0821 4.80 1.9910 6.8181 1.004
5 100.1469 4.82 1.9910 6.8041 0.999
平均回收率: 100.1%; RSD:1.02%
4.5 重现性试验
精密称取样品 5 份各 20 g，照样品测定项下实验
方法制成供试品溶液，按样品测定项下色谱条件进行
测定，结果见表 4，含量的相对标准偏差为 1.32 %，
表明该方法重现性良好。
表4 重现性试验结果
Table 4 Experimental results of the repeatability of the method
试验号 1 2 3 4 5 RSD/%
含量% 4.75 4.78 4.79 4.80 4.82
平均含量 4.78%
1.32
5 样品测定
称取干燥的杨梅树皮 5 份，每份约 20 g，按供试
品制备方法制备，依上述方法操作，测定结果表明药
材中杨梅醇的平均含量为 4.78 %（见表 5）。


表 5 样品中二氢杨梅素的含量测定结果
Table 5 Myricanol contents in examined samples
试验号 试样量/g 杨梅醇含量/g 杨梅醇含量/% 平均含量/%
1 20.0032 0.9541 4.77
2 20.0129 0.9506 4.75
3 20.0361 0.9577 4.78
4 20.0545 0.9626 4.78
5 20.0211 0.9630 4.82
4.78
6 结论
以甲醇作为溶剂从毛杨梅树皮中提取杨梅醇，提
取时间 45min，可得高达 4.78%的提取效率。杨梅醇
的含量可用 HPLC 法测定。色谱检测条件为：采用
Dima ODS 柱（4.6 mm ⅹ 250 mm,5 µm），流动相为 V
乙睛:V 水=80:20，体系流速为 1 mL⋅min¯1,紫外检测器
(254nm) 。以实验室制备的杨梅醇为标准品，在
2.552~12.76 μg 范围内,相关系数为 1.00，平均回收率
为 100.1％。表明该方法简便可行、精密度高、稳定性
强、重现性好，可作为毛杨梅资源的进一步合理开发
的依据及其质量评价的方法。
参考文献
[1] 《中国植物志》,21:002.
[2] 江苏新医学院.中药大辞典(上册)[M].上海:上海科学技术
出版社,2000
[3] Sun D, et al. Phytochmistry.1988,27:599
[4] Zhao Z, et al. chemistry and industry of Forest
Produces,1987,7(3):1

科学家绘出棕榈树大部分基因组草图
马来西亚研究人员 5 月 21 日宣布，他们与美国研究人员共同绘制出了棕榈树的大部分基因组草图，并在麻风
树基因组的研究上也取得了进展。他们希望这些研究有助于提高这两种油料植物的产油量和抗病能力。
马来西亚亚洲基因组技术中心当天在吉隆坡举行的记者会上说，棕榈树基因组由约 18 亿个碱基对组成，马来
西亚和美国的研究小组已完成了棕榈树基因组 70%的测序工作。在下一阶段，研究者们将努力检测其余的棕榈树
基因组，并开始详细分析工作。
该中心的专家指出，某些品种的棕榈树是高产油植物，从其果实中榨取的棕榈油可制成食用油或用于制造某
些化妆品和润滑油等。
马来西亚研究者说，他们在麻风树研究上也取得了进展。麻风树在贫瘠的土地上也能生长，并且耐旱，其种
子含油量高，可被用来提炼生物柴油。研究人员分析后发现，麻风树基因组约有 5 亿个碱基对。
研究人员表示，分析这些高产油植物的碱基对，有助于发现与其产量和健康有关的基因，进而培育出更高产、
抗病能力更佳的品种。
（新闻来源：中国食品科技网）