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青刺尖茶汤对便秘模型小鼠润肠通便的效果



全 文 :※营养卫生 食品科学 2014, Vol.35, No.11 265
青刺尖茶汤对便秘模型小鼠润肠通便的效果
方 玉1,刘 刚1,2,*,张晓喻1,2,张 宏1,2
(1.四川师范大学生命科学学院,四川 成都 610101;
2.四川师范大学植物资源应用与开发研究所,四川 成都 610101)
摘  要:目的:研究青刺尖茶汤对便秘模型小鼠的润肠通便作用。方法:将雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型
组、阳性组和低、中、高3 个剂量的给药组。给药组分别经口给予低、中、高剂量(1、2、6 g/(kg·d))的青刺
尖茶汤;空白组和模型组给予0.3 mL/20 g的蒸馏水;阳性组给予0.9 g/(kg·d)的麻仁丸。连续灌胃7 d后,观察各
组小鼠的首次排黑便时间、5 h内排便粒数,测定粪便含水量和小肠墨汁推进率。结果:3 个剂量组与模型组和阳性
组比较,各测定指标都有显著性差异;青刺尖茶汤能明显缩短小鼠首次排黑便时间,增加小鼠5 h内排便数量、粪
便含水量和小肠推进率。结论:青刺尖茶汤有明显的润肠通便功效。
关键词:青刺尖茶;通便;小鼠;便秘
Laxative Effect of Prinsepia utilis Tea on Mouse Constipation Model
FANG Yu1, LIU Gang1,2,*, ZHANG Xiao-yu1,2, ZHANG Hong1,2
(1.College of Life Sciences, Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China;
2. Institute of Phytochemistry, Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China)
Abstract: Objective: To explore the laxative effect of Prinsepia utilis tea (PUT) infusion on constipated mice. Methods:
Male Kunming mice were randomly divided into control group, model control group, positive control group and low,
medium- and high-dose treatment groups which were administered with PUT infusion at 1, 2 and 6 g/(kg·d)) for 7 days,
respectively. The mice from both the blank control and model control groups were administered with distilled water at a
volume of 0.3 mL/20 g for 7 days, while those from the positive control group were administered with Marenwan at a dose
of 0.9 g/(kg·d) for 7 days. After the administration period, the time of the first black feces excretion and the number of
feces granules within 5 h were recorded. Fecal water content and ink propelling rates were measured. Results: All the tested
parameters differed significantly between each dose of PUT infusion and either the model group or the positive control
group. PUT could markedly shorten the time of the first black feces excretion, increase the number of feces granules within 5 h.
In addition, water content of mouse feces and ink propelling rates also revealed a significant increase. Conclusion: Prinsepia
utilis tea has an obvious laxative effect.
Key words: Prinsepia utilis tea; defecation; mouse; constipation
中图分类号:S567.1;TS272.5 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2014)11-0265-04
doi:10.7506/spkx1002-6630-201411053
收稿日期:2013-06-29
作者简介:方玉(1989—),女,硕士研究生,研究方向为生物化学与分子生物学、植物化学。E-mail:jmtx613@163.com
*通信作者:刘刚(1968—),男,副教授,硕士,研究方向为天然植物成分分离及其功能。E-mail:rh682@sohu.com
青刺尖(Prinsepia utilis Royle)属蔷薇科李亚科扁核
木属的落叶灌木,别名炮筒果、牛奶捶、鸡蛋糕、梅花
刺、枪子果、阿那斯、蒙自扁核木等[1],其冬季开花,夏
季结果,雌雄同株,主要分布云南、贵州、四川、西藏
等地,生于山坡、荒地、山谷或路旁等处[2-3]。青刺尖的
根、茎、叶和果实均可入药,在纳西族、白族、彝族、
摩梭人等少数民族中已有上千年的应用历史。在《贵州
草药》、《中药大词典》等均有记载:青刺尖茎叶主治
痈疽毒疮、风火牙痛、枪伤、骨折、蛇咬伤;根主治虚
咳、久咳、积食、风湿关节炎;果主治目翳多泪、消化
不良等[4-5]。近几年,人们对青刺尖进行了大量研究,发
现它具有很高的药用价值、营养价值、经济价值和生态
价值[6-7]。
便秘是一种临床常见病[8],多由饮食、排便习惯不
良、肠道蠕动减退、肠黏膜应激性减退等原因而逐渐形
成,在中老年人群中常见,据调查显示:在北京、上
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海、广州、西安、成都和沈阳6 个地区,8 252 名60 岁以
上老年人的便秘发生率为11.5%,且发病率随年龄上升而
增加[9]。长期便秘会加剧肠道内有害菌的大量增殖,有毒
代谢物明显增加,使肠道微生态失衡,形成恶性循环,
甚至诱发肠癌[10]。目前临床上常用的治疗方法是给患者
服用能刺激肠道分泌和减少吸收、增加肠道内渗透压和
流体静力压的泻药,但长期应用泻药有副作用,如引起
肠黏膜吸收障碍,严重的会出现机体脱水、电解质紊
乱,甚至出现依赖性及顽固性便秘[11]。因此便秘越来越
受重视,成为近几年常见疾病研究的重点[12-13]。
用当年生青刺尖的叶可制备成茶,用开水冲泡即成
茶饮,该茶饮的润肠通便功能目前尚未见文献报道。本
研究对青刺尖茶汤的润肠通便功能进行初步动物研究,
以期为青刺尖资源的开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 材料与动物
青刺尖茶,产自盐源县左所乡,成都某公司提供。
雄性昆明小鼠,体质量18~22 g,合格证号SCXK
(川)2008-24,成都达硕实验动物公司提供。小鼠专用
饲料,合格证号SCXK(川)2010-01,成都达硕实验动
物公司提供。
1.1.2 试剂
蒙脱石散粉末(批号120414) 山东颐和制药有限
公司;研碎麻仁丸(批号12110040) 重庆桐君阁药厂
有限公司。
墨汁的制备:准确称取阿拉伯树胶100 g,加800 mL
水后煮沸至溶液透明,再称取50 g活性碳(粉状)加入上
述溶液中,煮沸3 次,待溶液凉后加水定容至1 000 mL,
4 ℃保存。
蒙脱石散混悬液的配制:取蒙脱石散粉末6 g加蒸馏
水100 mL配制成质量浓度为60 mg/mL的蒙脱石散混悬
液,灌胃剂量为0.9 g/(kg·d)。
麻仁丸混悬液的配制:研碎麻仁丸,取6 g加入蒸馏
水100 mL,制成质量浓度60 mg/mL的麻仁丸混悬液,灌
胃剂量为0.9 g/(kg·d)。
1.2 方法
1.2.1 青刺尖茶汤的制备
准确称取青刺尖茶75 g,以料液比1∶20(m/V)加
入1 500 mL煮沸的蒸馏水,立即移入沸水浴中浸提,每
10 min摇晃烧杯一次,浸提45 min立即过滤,茶渣用沸蒸
馏水洗涤数次,滤液减压浓缩后定容至500 mL,得质量
浓度为0.15 g/mL的青刺尖茶汤,按灌胃量0.3 mL/20 g计
算,即得6.0 g/(kg·d)高剂量的青刺尖茶汤,稀释制
备1.0、2.0 g/(kg·d)的低剂量和中剂量青刺尖茶汤,
冷藏备用。
1.2.2 动物饲养
参照吴光杰等 [14]的方法,制定实验方案:雄性昆
明小鼠72 只,随机分组装笼,每笼6 只,饲养于相对湿
度为64%,温度为27 ℃的动物房中,适应性饲养3 d后
进行正式实验,每天每笼饲喂小鼠专用饲料90 g,供水
120 mL,每天换水和垫料一次以确保小鼠生长环境干净
舒适。随机分成6 组,即空白组、模型组、阳性组和3 个
剂量水平的给药组,每组12 只,每组进行不同的实验处
理,测定相应的指标[15-16],实验重复3 次。
1.2.3 动物分组及给药
根据预实验的结果,3 个给药组小鼠分别灌胃1.0、
2.0、6.0 g/(kg·d)的低、中和高剂量的青刺尖茶汤
(相当于人体推荐量的5、10、30 倍);空白组和模型组
均灌胃蒸馏水;阳性组灌胃0.9 g/(kg·d)的麻仁丸混
悬液。各组灌胃量0.3 mL/20 g,每天1 次,连续7 d,实
验前每只小鼠称体质量,实验结束时再称一次。实验期
间小鼠自由饮食,每日分别记录各组小鼠的体质量和排
出粪便的性状,并观察小鼠实验前后进食量的变化。
1.2.4 小鼠排便实验
末次给药的当天晚上,各组小鼠禁食但不限饮水
16 h,除空白组小鼠灌胃同体积的蒸馏水外,其他组的小
鼠分别灌胃0.9 g/kg蒙脱石散混悬液0.3 mL。30 min后,
阳性组和实验处理组灌胃含相应受试物的墨汁,空白
组和模型组灌胃墨汁,同时开始计时。每只小鼠单独饲
养,自由饮水、摄食,观察记录每只小鼠首次排黑便的
时间、5 h排便粒数并及时称量排出粪便的湿质量,再在
100 ℃条件下干燥粪便至恒质量,计算出粪便的含水量。
1.2.5 小肠运动实验
再选雄性小鼠72 只,动物饲养分组及处理方式同
1.2.2节和1.2.3节。
小鼠灌胃墨汁25 min后,颈椎脱臼处死,打开腹腔
分离肠系膜,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,
置于托盘上,轻轻将小肠拉成直线进行测量,得到“小
肠总长度”,从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”,
按下列公式计算墨汁推进率。
墨汁推进率/%= ×100
L0
L1
式中:L0为墨汁推进长度/cm;L1为小肠总长度/cm。
1.3 统计分析及结果判定
其他各组与空白组的体质量比较采用t检验的方法,
用SPSS 13.0软件进行统计分析[17]。在便秘模型成立的条
件(P<0.01)下,小鼠的首次排黑便所需时间、5 h内排
便粒数、粪便含水量和墨汁推进率的显著性分析先采用
阳性组、给药组与模型组间的t检验,再对给药组与阳性
组进行t检验。
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上述任何一项指标显阳性,可判定该受试物具有润
肠通便的功能[18]。
2 结果与分析
2.1 青刺尖茶汤对小鼠体质量的影响
表 1 肠运动实验前、后小鼠体质量的比较(x±s)
Table 1 Mouse body weights on the first and seventh days of the bowel
movement experiments (x ± s)
组别 小鼠数量/只
灌胃剂量/
(g/(kg·d))
小鼠体质量/g
实验前 7 d后
空白组 12 0 21.85±0.881 29.86±1.578
模型组 12 0 22.73±1.170 29.21±1.469
低剂量组 12 1 22.25±0.922 29.45±1.547
中剂量组 12 2 22.54±0.809 29.51±0.782
高剂量组 12 6 22.64±1.245 30.28±1.923
阳性组 12 0.9 22.53±1.357 28.74±1.125
由表1可知,在小鼠肠运动实验中,各组小鼠的初
始体质量分别与空白组比较,均无显著性差异(P>
0.05),说明肠运动实验的小鼠分组是均衡的。经灌胃处
理7 d后,各组的小鼠体质量与空白组比较,无显著性差
异(P>0.05),说明各受试物没有影响小鼠体质量的正
常增加。
表 2 排便实验前、后小鼠体质量的比较(x±s)
Table 2 Mouse body weights on the first and last days of the defecation
experiments (x ± s)
组别 小鼠数量/只
灌胃剂量/
(g/(kg·d))
体质量/g
实验前 实验后
空白组 12 0 23.56±0.729 29.15±1.047
模型组 12 0 23.52±0.832 29.47±1.289
低剂量组 12 1 22.25±0.922 29.76±1.291
中剂量组 12 2 22.54±0.809 29.37±0.933
高剂量组 12 6 22.64±1.245 29.77±1.170
阳性组 12 0.9 22.53±1.357 30.02±1.113
由表2可知,在小鼠排便实验中,各组小鼠的初
始体质量分别与空白组进行比较,均无显著性差异
(P>0.05),说明排便实验的小鼠分组是均衡的。经灌
胃处理7 d后,各组的小鼠体质量与空白组比较,也无显
著性差异(P>0.05),说明各受试物没有影响小鼠体质
量的正常增加。
2.2 青刺尖茶汤对小鼠排便的影响
由表3可知,小鼠排便实验中,与空白组比较,模型
组的首次排黑便的时间、5 h内排便粒数和粪便含水量均
有极显著性的差异(P<0.01),表明小鼠便秘模型建立
成功。与模型组相比,青刺尖茶汤的低、中和高剂量组
小鼠的粪便粒数和粪便含水量有显著性的差异(P<0.05
和P<0.01),而首次排黑便所需时间减少,有明显差异
(P<0.05和P<0.01)。随剂量的增加,青刺尖茶汤的
排便效应增加,呈一定的剂量依从性。统计分析表明:
高剂量组的青刺尖茶汤对便秘小鼠的通便作用优于阳性
组,有显著的差异(P<0.05)。
表 3 青刺尖茶汤对小鼠排便的影响(x±s)
Table 3 Effect of Prinsepia utilis tea on indices of defecation (x ± s)
组别 小鼠数量/只
灌胃剂量/
(g/(kg·d))
小鼠排便实验指标
首次排黑便时间/min 5h内排便粒数 粪便含水量/%
空白组 11 0 36.07±3.245△## 13.5±2.339**△△ 47.36±3.273**△
模型组 12 0 56.12±22.057**△△ 6.5±1.581△△## 39.41±2.897△##
低剂量组 11 1 24.47±17.197*## 15.0±2.594**△△ 44.14±2.308*
中剂量组 11 2 22.12±15.874*## 17.3±5.362** 46.46±3.101**
高剂量组 12 6 11.19±4.580**△## 19.8±7.557** ## 49.51±3.442**△△
阳性组 12 0.9 22.54±2.152*## 20.5±5.665** 43.52±7.764*#
注:#. 与空白组比较,差异显著(P < 0.05);##. 与空白组比较,差异
极显著(P < 0.01);*. 与模型组比较,差异显著(P < 0.05);**. 与
模型组比较,差异极显著(P < 0.01);△ . 与阳性组比较,差异显著
(P < 0.05);△△ . 与阳性组比较,差异极显著(P < 0.01)。下同。
2.3 青刺尖茶对便秘小鼠小肠蠕动的影响
表 4 青刺尖茶对小鼠小肠墨汁推进率的影响(x±s)
Table 4 Effect of Prinsepia utilis tea on intestinal ink propelling (x ± s)
组别 小鼠数量/只 灌胃剂量/(g/(kg·d)) 小肠总长度/cm 墨汁推进长度/cm 推进率/%
空白组 11 0 56.81±2.78 29.83±6.34 56.12±10.54**
模型组 12 0.9 60.64±14.48 24.90±4.64 41.89±7.51##
低剂量组 11 1 57.37±3.98 32.22±8.38 55.77±12.50**
中剂量组 11 2 50.15±10.31 28.19±4.84 56.65±3.08**
高剂量组 11 6 56.69±10.17 35.28±7.06 62.69±4.04**
阳性组 12 0.9 57.15±1.15 26.36±6.91 49.96±11.90*
由表4可知,模型组的墨汁推进率与空白组差异极
显著(P<0.01),说明便秘模型成立。青刺尖茶汤给药
组小鼠的墨汁推进率均高于模型组,经数据统计分析发
现,高、中、低剂量青刺尖茶汤给药组小鼠的墨汁推进
率与便秘模型组比较,均有显著性差异(P<0.01),表
明青刺尖茶汤具有促进小鼠小肠蠕动的作用。
3 讨 论
本实验小鼠灌胃不同剂量的青刺尖茶汤7 d后,与模
型组相比,低、中和高剂量组的小鼠小肠碳末推进率得
到显著提高,排黑便时间也显著地缩短,5 h排便粒数增
加显著,因此,可以认为青刺尖茶汤对便秘模型小鼠具
有润肠通便的作用。
目前对于便秘的治疗主要依靠渗透性、容积性和润
滑性类的泻药。渗透性和润滑性药物可减轻部分患者便
秘症状,但可能会伴随一些副作用,也可能会形成药物
依赖等。实验过程中,青刺尖茶汤没有对小鼠的体质量
造成影响,也没有观察到小鼠有腹泻症状,并且实验前
后小鼠进食量差异不大,表明了其润肠通便作用的温和
性,在低剂量水平(1 g/(kg·d)),其润肠通便作用
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表现良好。目前对于青刺尖茶汤润肠通便的有效成分和
机制还不清楚,还有待深入研究,为青刺尖茶汤开发成
为保健饮品提供理论支持。
茶叶是世界三大软饮料之一,在我国农业经济中占
据重要地位,2011年,我国茶叶产量排名世界第一, 达
到163.32万 t,占全球总量的38.49%[19]。近年来,随着
食品加工技术的发展及现代生活节奏的加快,茶制品多
元化发展将会越来越受到人们的关注,尤其是功能性茶
制品。本研究中的青刺尖茶是一种用青刺尖嫩叶制成的
天然无任何添加剂的代用茶。青刺尖是云南等多民族习
用中药之一,在民间已有很悠久的习用历史,青刺尖叶
与车前草、海棠果一同煨服,有消炎、清凉、解毒作
用;青刺尖叶捣碎挤出汁液服用,可排毒解毒;青刺尖
嫩叶作为蔬菜或腌制成咸菜食用,有开胃消食、清热去
火、抑制口腔及肠道炎症等作用;青刺尖果实、叶煮水
洗脚,可预防和治疗脚气病。研究报道,青刺尖药理作
用主要表现在抑菌,抗炎,免疫调节、耐缺氧,调节血
脂,降血糖,抑制血小板聚集等方面。青刺尖茶在我国
云南丽江的纳西族、白族、彝族、摩梭人等少数民族中
具有悠久的延用历史,这种茶饮能预防和治疗各种痔
疮、便秘和肛周疾病。青刺尖茶具有很大的开发利用价
值,将其开发为茶制品是很有意义的。
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