全 文 ：收稿日期:2010-04-19;修回日期:2010-05-17
作者简介:刘　丽(1982-),女 ,贵州平坝人 ,硕士研究生。研究方向:应用生物化学与生化分离工程。 E-mail:kitenniu@sina.com
＊通讯作者:国兴明 ,教授。研究方向:应用生物化学及天然产物化学。 E-mail:gordenguo123@163.com
　　　
金盏菊总皂苷提取及其抗氧化 、降血脂作用研究
刘　丽 ,国兴明＊
(贵州大学 生命科学学院 ,贵州　贵阳　550025)
摘　要:通过对金盏菊总皂苷的实验室提取工艺及其抗氧化 、降血脂作用研究 ,结果表明:金盏菊总皂苷较为理想
的实验室提取工艺为:提取温度 75℃,提取时间 55min,乙醇浓度 75%,料液比 1∶35。在此条件下 ,总皂苷的提取
率为 2.01%,总固物中总皂苷含量达到 35.4%。金盏菊总皂苷对 O2· 、· OH皆表现出较好的清除效果 ,清除率
分别达到 47.29%和 88.42%;小鼠血清中的 TC、TG、LDL-C与模型组相比 ,均有一定程度的下降 。
关键词:金盏菊;总皂苷;抗氧化;降血脂
中图分类号:R284.2;R285.6　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0457(2010)03-0246-03
ExtractionofTotalSaponinsfrom CalendulaOficinalisLanditsEfectsofAnti-oxidation
＆ Hypolipidemic
LIULi, GUOXing-ming＊(ColegeofLifeSciences, GuizhouUniversity, GuiyangGuizhou550025, China)
Abstract:ThetotalsaponinswasextractedfromCalendulaoficinalisL., anditsefectsofanti-oxidationas
welashypolipidemicwerecariedoutinthecurentwork.Theresultsshowedthattheoptimaltechnicalcon-
ditionswereasfolowing:extractiontemperature75℃, totalextractiontime55minutes, proportionofethanol
75%, solid-liquidratio1∶35, bywhichanextractionyieldof2.01%andatotalsaponinsofsolidyieldofup
to35.4% couldbeobtained.ThetotalsaponinsdemonstratedagoodremovaleficiencytoO2 andOH, and
theremovalrateswere47.29% and88.42%, respectively.Furthermore, thetotalsaponinsmightobviously
reducethelevelsofTC, TG, andLDL-Cofmiceserum.
Keywords:CalendulaoficinalisL.;Totalsaponins;Anti-oxidation;Hypolipidemic
　　金盏菊(calendulaoficinalisL.)又名大金盏花 , 在植物分类系统中属菊科(Compositate),金盏菊属
(ClaendulaL.)[ 1] 。我国药典[ 1]早有记载 ,金盏菊全草均可入药 ,根能行气活血 ,花有凉血止血之功效。自
20世纪 5O年代以来 ,国内外众多学者对金盏菊花的化学成分及药用成分进行了广泛的研究。研究结果
表明 ,金盏菊含有类黄酮 、三萜皂苷等活性物质 [ 2-4] 。皂苷具有广泛的药理作用和生物活性 ,如抗氧化[ 5] 、
调节血糖血脂[ 6]等 。自由基攻击生命大分子物质造成组织细胞损伤是引起机体衰老的根本原因 ,也是诱
发肿瘤等恶性疾病的重要原因 , 高脂血症近年来其发病率呈现出逐年增高及年轻化的趋势 ,严重威胁着
人类的健康 。因此 ,从天然产物中筛选出副作用小 、价格便宜的抗氧化 、降脂类药物或保健品 ,有着明显的
经济效益和社会效益 。金盏菊易栽培 ,资源丰富 ,但目前有关金盏菊皂苷的提取研究的报道较少。笔者等
通过对金盏菊总皂苷的实验室提取工艺 ,以及其总皂苷的抗氧化 、降血脂作用进行初步研究 ,旨在为对金
盏菊的进一步研究和开发提供一定的理论依据 。
山 地农业 生物学报 29(3):246 ～ 248 , 2010
JournalofMountain Agriculture and Biology
DOI :10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2010.03.018
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　金盏菊　购买于贵阳新添寨花卉市场(全草烘干 ,粉碎过 80目筛)。
1.1.2　供试小鼠　昆明种雄性小鼠 60只 ,体重 18 ～ 22g(贵阳医学院实验动物中心提供)。
1.1.3　供试饲料(提取物中总皂苷含量为 35.4%)
1.1.3.1　基础饲料　由贵阳医学院实验动物中心提供。
1.1.3.2　高脂饲料　由实验室自行配制 ,配方为:840g/kg基础饲料 , 100g/kg市售猪油 , 10g/kg胆固醇 ,
50g/kg鸡蛋黄 ,加适量的自来水充分搅拌混匀 ,制成条状 ,放入烘箱 ,在 70℃烘干 ,备用。
1.1.3.3　低剂量组饲料　方法同高脂饲料的制作 。在制作时 1kg高脂饲料加入 200mg(以总皂苷质量
计)金盏菊总皂苷 。
1.1.3.4　中剂量组饲料　方法同上 ,每 1kg高脂饲料加入 400mg(以总皂苷计)金盏菊总皂苷 。
1.1.3.5　高剂量组饲料　方法同上 ,每 1kg高脂饲料加入 600mg(以总皂苷计)的金盏菊总皂苷。
1.1.4　试剂与仪器　齐墩果酸标准品(中国药品生物制品检定所)、95%乙醇 、石油醚﹑正丁醇﹑高氯酸 、
冰乙酸 、香草醛 、tris、硫酸亚铁 、双氧水 、水杨酸等 ,以上药品均为分析纯。 HH.S21-6型电热恒温水浴锅
(天津泰斯特仪器公司), JY3002电子天平(上海天平仪器厂),双光束紫外分光光度计(北京普析通用仪
器有限公司), 101-2型干燥箱(上海博达实业有限公司医疗设备厂),粉碎机(天津市泰期特仪器有限公
司),旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),总胆固醇测定试剂盒(温州津玛生物科技有限公司)、甘油三酯
测定试剂盒(温州津玛生物科技有限公司),低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒(浙江东瓯生物工程有限公
司)。
1.2　方法
1.2.1　金盏菊总皂苷提取及含量测定
1.2.1.1　金盏菊总皂苷提取　采用石油醚回流去色素后 ,按提取温度 75℃、提取时间 55min、乙醇浓度
75%、料液比 1∶35的条件进行总皂苷的提取 。
1.2.1.2　金盏菊总皂苷测定　采用文献 [ 7]的方法进行。齐墩果酸作为标准品 ,配制成 200μg/mL的储
备溶液 。然后分别取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL标准溶液 ,于 70℃水浴中挥干溶剂后加入新制
5%香草醛 -冰乙酸 0.2mL,再加入 0.8mL高氯酸溶液 ,在 70℃水浴中加热 15min,取出 ,冷水冷却 10min
后加入 5mL冰乙酸 ,摇匀 ,随行试剂做空白 ,在 545nm处测定吸光度 。
1.2.2　金盏菊总皂苷抗氧化作用测定　采用文献 [ 8]的方法测定金盏菊总皂苷对自由基模型体系所产生
的 O2· 、· OH的清除作用。
1.2.3　金盏菊总皂苷降血脂作用测定　采用预防性高脂模型试验方法 [ 9] ,即将供试小鼠用基础饲料喂养
7d,待小鼠适应环境后进行试验(试验设计见表 1)。试验期满前 1d,各组均改喂基础饲料 ,采血前 12h禁
食 ,于次日清晨摘眼球采血 ,于 3 000r/min离心 15min分离得血清 ,按试剂盒说明书测定 TC、TG、LDL∶C,
研究金盏菊总皂苷对小鼠血脂的影响 。
表 1　降血脂作用的动物试验设计
Tab.1　Theanimaltestdesignofhypolipidemiceffect
组　别 动物数(只) 供试饲料 投料(g/d·只) 喂养时间(周)
正常对照组 12 基础饲料 5 8
高脂模型组 12 高脂饲料 5 8
低剂量组 12 低剂量组饲料 5 8
中剂量组 12 中剂量组饲料 5 8
高剂量组 12 高剂量组饲料 5 8
247第 3期　 刘　丽 ,等:金盏菊总皂苷提取及其抗氧化 、降血脂作用研究
2　结果与分析
2.1　金盏菊总皂苷最佳提取工艺
为了消除色素对金盏菊总皂苷提取的干扰 ,试验设计了石油醚回流去色素程序 。通过该过程 ,能有效
地消除色素对金盏菊总皂苷提取的影响。再通过单因素试验和正交试验得到了金盏菊总皂苷的最佳提取
工艺:提取温度 75℃,提取时间 55min,乙醇浓度 75%,料液为 1∶35。在此条件下 ,总皂苷的提取率为
2.01%,总固物中总皂苷含量可达 35.4%。
2.3　金盏菊总皂苷的抗氧化作用
从表 2可见 ,金盏菊总皂苷对超氧阴离子自由基 、羟基自由基皆表现出较好的清除效果 ,其中 ,对羟基
自由基的清除效果更好 , 100μg/mL样品浓度的清除率达到了 88.42%;对超氧阴离子自由基的清除作用
相对来说要差一些 , 100μg/mL样品浓度的清除率为 47.29%。
表 2　金盏菊总皂苷对超氧阴离子自由基(O2· 、· OH)的抑制作用
Tab.2　TheinhibitiveeffectsofCalendulaofficinalisLtotlesaponinsonradicals(O
2
· and· OH)
样品号 1 2 3 4 5
样品浓度(μg/mL)
自氧速率
对O2·清除率(%)
对· OH清除率(%)
20
9.59×10-4
0.68
21.73
40
8.43×10-4
11.79
35.45
60
7.54×10-4
33.78
50.78
80
6.81×10-4
44.91
79.97
100
6.02×10-4
47.29
88.42
2.4　金盏菊总皂苷降血脂作用
从表 2可见 ,金盏菊总皂苷低剂量 、中剂量 、高剂量组与高脂模型组比较 ,血清胆固醇含量分别降低了
19.44%、20.68%和 33.64%,血清中的甘油三酯含量分别降低了 6.08%、21.62%和 31.76%,血清中的低
密度脂蛋白胆固醇含量分别降低了 18.84%、35.51%和 36.96%。结果显示:各剂量组小鼠血清中的 TC、
TG、LDL-C与模型组相比 ,都有一定程度的降低 。其中 ,中剂量组和高剂量组降脂效果尤为明显 。
表 3　金盏菊总皂苷对小鼠血清 TC、TG和 LDL-C的影响
Tab.3　TheeffectofCalendulaofficinalisLtotlesaponinsonthecontentsofserumTC, TGandLDL-Cinmice
组　别 动物数(只) TC含量(mmol/L) Tg含量(mmol/L) LDL-C含量(mmol/L)
正常对照组 12 1.58±0.23 0.94±0.29 0.75±0.16
高脂模型组 11 3.24±0.39a 1.48±0.22a 1.38±0.24a
金盏菊总皂苷低剂量组 10 2.61±0.24b 1.39±0.18b 1.12±0.21b
金盏菊总皂苷中剂量组 12 2.57±0.28b 1.16±0.24b 0.89±0.25b
金盏菊总皂苷高剂量组 10 2.15±0.19b 1.01±0.17b 0.87±0.19b
注:a为 P<0.05,与正常组相比;b为 P<0.05,与高脂模型组相比。
3　讨论
在金盏菊总皂苷的粗提物中 ,含有糖类 、蛋白质及少量其他活性成分 。经检测 ,粗提物中除皂苷外的
活性成分物质含量极少 ,对试验结果的影响极小;金盏菊总皂苷含量达到 35.4%,初步断定粗提物中其活
性作用的物质为金盏菊总皂苷 。
本试验对金盏菊总皂苷的抗氧化能力及降血脂作用的研究表明:金盏菊总皂苷对超氧阴离子自由基 、
羟基自由基均表现出较好的清除效果 ,其中对羟基自由基的清除效果更好 , 100μg/mL样品浓度的清除率
达到 88.42%。可见 ,金盏菊总皂苷是一种新的来自天然食物的抗氧化剂 ,对自由基具有良好的清除效果 ,
为金盏菊的进一步开发和应用提供了一定的理论依据。
该试验表明 ,各剂量组小鼠血清中的 TC、TG、LDL-C与模型组相比 ,都有一定程度的 (下转第 278页)
248 山地农业生物学报 2010年
益 。但要注意 ,越冬雌成虫开始产卵时应及时用药 ,用药重点掌握在越冬雌成虫产卵高峰之前 ,一般 4月
份左右较好 。
自然条件下 ,雨水等自然气候条件对药剂冲防治效果的影响有待进一步的试验研究 。同时 ,在进一步
扩大田间试验范围的基础上 ,通过工业化生产 ,可在实际生产上推广应用。
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(上接第 248页)
降低。其中 ,中剂量组和高剂量组降脂效果尤为明显。在药理试验中 ,小鼠有少量的死亡现象 ,高脂模型
组死亡了 1只 ,低剂量组和高剂量组各死亡了 2只。因无法确定小白鼠的死亡是否由金盏菊总皂苷造成 ,
还是有别的其他原因 ,因此 ,金盏菊总皂苷的安全性还有待进一步验证 。
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