全 文 ：制剂与质量控制
高效液相色谱法测定当药中獐牙菜苦苷的含量
张卫红
(河北省石家庄市中医院药学部，河北 石家庄 050051)
【关键词】 色谱法，高压液相;当药;獐牙菜苦素
【中图分类号】 Ｒ284． 2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002 － 2619( 2014) 05 － 0740 － 02
作者简介:张卫红(1963—)，女，副主任中药师，学士。从事中药
房管理及中药鉴别工作。
当药为河北、内蒙古一带的民间草原，来源于獐牙菜
属植物，主要的有效成分为獐牙菜苦苷，具有清肝利胆、清
热除湿功能，并且抗炎作用强，该属植物中的多个品种都
被临床广泛用于治疗急慢性黄疸型肝炎、胆囊炎等疾
病［1］。现代研究表明，獐牙菜苦苷能有效的保护肝细胞，
防止或减轻肝组织损伤，并促进受损细胞修复，并且还能
明显抑制中枢神经系统，具有显著的镇痛和镇静作
用［2 － 3］。本研究拟采用高效液相色谱(HPLC)法，测定当
药中獐牙菜苦苷的含量，以保证当药的药品质量。
1 材 料
1． 1 仪器 电子天平:德国赛多利斯 BS124S 型电子天
平;紫外 －可见分光度计:尤尼柯(上海)仪器有限公司
UV － 2102PCS 扫描型紫外 －可见分光光度计;HPLC 仪:
美国戴安公司 DIONEX P680 型。
1． 2 药品及试剂 当药，购自于安国市中药材交易大厅，
河北省食品药品检验院主任药师段吉平鉴定为龙胆科植
物瘤毛獐牙菜的干燥全草，编号与产地分别为:1、2、3 号
的产地均为河北省，4、5、6 号的产地均为内蒙古自治区;
獐牙菜苦苷对照品，购自中国药品生物制品检定所，含量
81． 32%，批号:0785 － 200203;甲醇，Fisher 色谱纯;水，蒸
馏水。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱:CAPCELL PAK － C18(5 μm，
4． 6 mm × 150 mm);流动相:甲醇 － 水(20 ∶ 80);流速:
1． 0 mL /min;检测波长为 238 nm;柱温:25 ℃;进样量:
10． 0 μL。
2． 2 对照品溶液的制备 取獐牙菜苦苷 0． 020 32 g，置
50 mL容量瓶中，用甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为
獐牙菜苦苷浓溶液。取此溶液 10 mL，置 100 mL 容量瓶
中，加入甲醇，并稀释到刻度，混合，摇匀，得对照品溶液。
2． 3 供试品溶液的制备 取当药样品粉碎后通过 50 目
药筛，混合均匀，取粉末 0． 2 g，精密称量，置200 mL具塞三
角瓶中，加甲醇 100 mL，密塞，称质量，超声处理(功率为
300 W，频率为 33 kHz)30 min，放冷，再称质量，用甲醇补
足减失的质量，振摇，滤过，续滤液即为供试品溶液。
2． 4 线性关系考察 取獐牙菜苦苷浓溶液 10 mL，置
200 mL容量瓶中，加入甲醇，并稀释到刻度，混合，摇匀，作
为獐牙菜苦苷稀溶液。取此种稀溶液 5． 0、10． 0 μL 和浓
溶液 5． 0、10． 0、15． 0 μL，分别注入 HPLC仪，依法测定，以
吸收度为纵坐标，所进对照品量为横坐标，制作工作曲线，
其回归方程为 y = 1 135 380 X + 22 638 Ｒ = 0． 999 9。结果
獐牙菜苦苷的线性范围是 0． 082 60 ～ 4． 958 μg。
2． 5 精密度试验 吸取供试品溶液 10． 0 μL，连续进样 6
次，测定獐牙菜苦苷积分值，计算相对标准差(ＲSD)=
0． 56%，实验证明仪器精密度优良。
2． 6 稳定性试验 分别吸取对照品溶液和供试品溶液
10． 0 μL，注入 HPLC 仪 12 次，每次间隔 2 h，测定獐牙菜
苦苷峰面积，计算其 ＲSD。结果对照品 ＲSD = 0． 78%，供
试品 ＲSD = 0． 24%，由此可知，对照品和供试品溶液在
24 h内稳定。
2． 7 重复性试验 取 1 号当药样品粉末 0． 16、0． 2、
0． 24 g各 3 份，精密称量，参照 2． 3 项方法制成供试品溶
液，依法测定，样品的平均含量为 39． 40 mg /g，ＲSD =
1． 3%，重复性好。
2． 8 加样回收率试验 取 1号当药样品粉末 9 份，每份约
0． 2 g，每 3 份为 1 组，分别用浓度为 0． 030 63、0． 051 04、
0． 071 45 mg /mL獐牙菜苦苷甲醇溶液代替甲醇溶剂，各加
100 mL，密塞，称质量，超声处理(功率为300 W，频率为
33 kHz)30 min，放冷，再称质量，用甲醇补足减失的质量，
振摇，滤过，续滤液即为供试品溶液。依法测定，根据测定
值和对照品加入量计算其回收率。结果獐牙菜苦苷的平
均回收率为 99． 9%，ＲSD = 1． 4%，符合规定。
2． 9 样品测定 取 6 个批次的当药样品，依法制成供试
品溶液，测定峰面积，计算样品中獐牙菜苦苷的含量，结果
见表 1，对照品及供试品谱图见图 1、2。
表 1 6 批样品的獐牙菜苦苷含量测定结果
批 号 1 2 3 4 5 6
獐牙菜苦苷含量(%) 3． 9 8． 5 4． 2 5． 2 3． 6 5． 8
047 河北中医 2014 年 5 月第 36 卷第 5 期 Hebei J TCM，May 2014，Vol 36，No． 5
獐牙菜苦苷对照品 HPLC图谱
供试品 HPLC图谱
3 讨 论
本研究还采用了另外 3 个公司的色谱柱，色谱柱型号
分别为:Agilent 安捷伦 HC － C18 液相色谱柱(5 μm，4． 6
mm × 250 mm)、迪马 Diamonsil 色谱柱(5 μm，4． 6 mm ×
250 mm)、Waters Symmetry C － 18 液相色谱柱(5 μm，250
mm ×4． 6 mm)，研究对分离及测定值的影响，结果 3 种品
牌 C18 色谱柱柱效、分离度均符合要求，并且含量测定值
无明显的区别，所以本法对 C18 色谱柱品牌没有特别要
求。獐牙菜苦苷具有解痉、镇痛和镇静作用［4］，为当药的
有效成分，用 HPLC 法测定当药中獐牙菜苦苷尚未见报
道，本研究建立的 HPLC检测方法精密度、重现性好，杂质
干扰少，獐牙菜苦苷的峰纯度、峰型、分离度均比较理想，
样品稳定性和回收率均较高，是一种理想的测定方法。
参考文献
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(收稿日期:2013 － 11 － 14)
(本文编辑:石 康
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)
(上接 733 页) 补充人工泪液，刺激泪液分泌，减少泪液流
失，但多是暂时缓解症状，不能从根本上治愈。
干眼症属中医白涩症范畴，发病多因肝血不足、阴血
亏虚、津液缺乏，或肝肾阴虚、虚火上炎、灼伤津液，或脾气
虚弱、生化无力，或因燥热伤肺、肺阴不足、津液不能上濡
于目所致。泪液的生成和分布有赖于肝的排泄功能，津液
在肾功能的调节下，不断上输于目，为目外润泽之水及充
养目内之液。摄入到人体的水液，需经过脾的传输，气化
成津液，再经过肺的宣发，肾的气化，肝的疏泄才能布达全
身，发挥其滋润、濡养作用，而泪液中 90%以上是水，水液
的代谢正常与否直接影响泪液的质量。故治疗以益气养
阴生津、养肝明目为治疗原则。遂自拟养阴生津汤治疗，
方中玄参、生地黄、麦门冬 3 味为增液汤处方组成，具有养
阴、软坚润下、泻火散结之功;黄芪、山药益气生津;当归补
养阴血;丹参养血生津;枸杞子益精明目;黄精润肺滋阴;
石斛益胃生津、清热;知母清热泻火;菊花清肝明目;密蒙
花明目退翳。诸药合用，补气、补血、活血、化瘀兼顾，可使
气旺血生，从而促进造血，促进眼结膜、视乳头、视网膜微
循环血流速度，提高萎缩泪腺组织的分泌功能［3］。现代药
理研究表明，枸杞子所含的胡萝卜素可在人体内转变成维
生素 A，能促进视网膜内视紫质的合成或再生，维持正常
视力［4］;石斛可抑制晶状体的浑浊进程，延缓白内障的发
生［5］;菊花挥发油可抑制金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、
肺炎双球菌、革兰阳性菌等病菌的活性［6］，对单纯疱疹病
毒性角膜炎有明显的治疗作用［7］;滋补阴精中药大多具有
稳定泪膜、增强血中老化相关酶的活力，使过氧化脂质含
量显著降低，有利于泪液的生成和正常分布［8］。
综上，养阴生精汤方中重用补阴药，益气滋阴润目，使
津液生化有源，改善体内津液不足、泪液减少所致的眼部
不适等症状。通过临床对比观察，取得较好的治疗效果，
优于西药治疗，值得临床推广应用。
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(收稿日期:2013 － 05 － 20)
(本文编辑:李珊珊)
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