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一叶秋碱诱导K562细胞凋亡及对[Ca~(2+)]i的影响



全 文 :
1 12 8
A CT A A CA D E M IA E ME D IC IN A E S U ZHO U 19 8
; 18 ( 11 )
S E c 作用 3o m in 后显著提高 [ CaZ 令 11水平( 附表 ) 。
3m mo l/ I
J
EG T A 不能诱导 K 56 2 细胞凋亡 , 但可显
著降低 S E C 诱导的凋亡率 (附表 ) 。
附表 S E C 诱导 K 5 62 细胞 D N A 链断裂对 K 56 2 ha 胞〔C扩` ] i 的影响
及 EG T A 对 SE C 诱导 K 56 2 细胞阴亡的影响 (又士 S )
药物
( m创 L )
对照组
N D A 链断裂
程度 ( % )
〔e a Z ` ] i
(
n m o l / L )
凋亡细胞
( % )
S E C 10
20
4 0
80
1 6 0
0
.
5 % 乙醇
3m m o l / L EG T A
+ S EC 1 0
4 0
160
10 108 土 2 59
5 7 8 2 士 94
5 1 2 2 士 5 97 ”
4 0 58 士 5 73 二
3 59 2 土 5 3 4 二
3 6 81 土 2 96 ”
10 7 97 士 1 15 ’
13 9
.
2 4 士 18 . 4 1
2 1 6
.
7 5 土 8 . 6 8二
25 0
.
30 土 7 . 4 0 “ .
27 8
.
60 士 9 . 3 1 . ’
34 1
.
9 5 士 35 . 3 3二
33 5
.
6 4 士 8 . 7 1二
14 5
.
9 1 土 3 2 . 2 6 .
0
.
4 3 士 0 . 15
2
.
23 士 0 . 23
4
.
53 士 0 . 3 2
8
.
8 7 士 1 . 0 0
00,JQ了吮6429563
0
.
33 士 0 . 06。
0
.
60 土 0 . 10。 。
0
·
7 7 士 0 . 1 2“
1
.
30 士 0 , 17。 △
. n = 3
. 余均 n = 6 ; 与对照组比较 , , P > 0 . 05 . , ,
△△ < 0 . 0 1
3 讨论 .
近几年的研 究表 明 , 多种化学结构 不
同 、 作用靶点各异的抗肿瘤药物均可诱导肿
瘤细胞凋亡〔“ 〕。 我 们发现 s E c 具有抗肿瘤
作用 , 本文发现 SE C 也能诱导 K 562 细胞凋
亡 , 这可能是其抗肿瘤机制之一 。
【C护十 」i 的升高与凋亡的特征性改变如
胞浆出泡 、核染色质凝取 、 D N A 断裂密切相
关 。 本文采用 F aur 一 2 技术研究证实 : K 562
细胞内静息钙水平为 13 9 . 2 4 土 18 . 41 unr ol /
L
,
1 0 一 1 6 o m g / L S E C 作 用 3 0 m in 后 ,
[伪 2 + ] i 水 平 最 高 达 到 3 4 1 . 9 5 士 3 5 .
33
~ l/
L
, 提示 SE C 可提高 K 562 细胞内钙
离子浓度 。 为进一步确定【C矛十 〕i 的升高是
否参与 SE C 诱导的 K 562 细胞凋亡 , 用钙离
子络合剂 EG T A 络合体系中 Q Z 十 后 , 流式
细胞仪检测到细 胞凋亡率 显著下 降 , 提示
C扩+ 参与了 S EC 诱导的细胞凋亡 。 凋亡过
程中〔C扩 十 〕i 的升高主要来 自细胞外钙离子
的内流 [,] 或 ca “ ` 在胞内的转移〔` 0] 。 本文
结果表明 : S E C保进外钙内流 , 升高细胞内
钙与凋亡有关 。 磷醋酞肌醇系统参与细胞
P < 0
.
01 ;与 S E C 单独处理组比较 ,合 > 0 . 05 ,
内 c a Z 十 平衡的调控 。 . 文献报道三型三磷酸
肌醇受体 ( IP 3 R 3 )含量增加可诱导 胸腺细胞
及胸腺瘤细胞 凋亡 。 反义 I P 3 R 3 可抑 制凋
亡的产生「” ] 。 s E c 是否通过作用于磷酷酸
肌醇系统而升高〔C扩十 」i , 值得进一步研究 。
参 考 文 献
吴葆杰 , 主编 . 中草药药理学 . 北京 : 人民卫生出
版社 , 1 9 83 : 5 4 一 56
邢俊家 , 等一叶秋碱的体外抗 H S V 病毒的研
究及其滴眼液的制备 . 中国药学杂志 , 19 96 ; 31
( 11 )

68 4
刘卫军 , 等一 叶秋碱的抗肿瘤的作用 . 中草药 ,
待发表
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1 99 5 ; 2 1 8
: 27 1
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M e t h司 19 9 1 ; 1 4 5 : 1 8 5
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(下转第 1叻贾 )
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中药连翘中铜元素含量的测定
苏州医学院化学教研室 ( 2 15 0 7) 刘建成 朱琴玉 周幼宝 李惠珍
摘要 用 PJ 一 2型示波极谱仪在乙二玻一傲铁试荆一硝酸伎作底液 ,利用钥的极谱催化波侧
定连翘中铜的含量 。 通过对标准参考物质潞党参中铜的侧定 ,表明本侧定方法较准确 、连翘己被国
家技术监督局批准为标准物质 ( G BW E O g加 14) 。
关健词 连翅 ;钥 ;示波极谱法
中图法分类 R 927 . 2
前文报道侧定连翘中锌 、铁 、锰元素的含
量 , 本文利用乙二胺一铁试剂一硝酸按作底
液 1z[ , 利用铜的极谱催化波测定连翘中铜的
含量 , 并对标准物质潞党参中铜含量进行测
定 ,结果表明本法测定结果较准确 。
1 测定资料
1
.
1 仪器与试剂 : J P一 2 型示波极谱仪 ,三电极系统 ,
二阶导数部分 。 2% 乙二胺 , 1 % 钦铁试剂 , 1 m ol / L
硝酸钱 ,试剂均 为优级纯或分析纯 。 铜标准溶液 (1
m g / iln
,上海爱建现成试剂厂生产 )使用时按适当比
例稀释 。 潞党参 、 连翘由南开大学提供 ,实验用水为
去离子水经石英蒸馏器重蒸 ,仪器经 1 : 1 硝酸浸泡
后使用 。
1
.
2 测定方法和条件 :取一定量经消化后的祥品 ,
加入 1 m l Z% 乙二胺溶液 , l 耐 1% 钦铁试剂 , 1 m l
lm of l/ 硝酸按溶液 ,然后定容至 10 m l . 于 JP 一 2 型示
波极谱仪上进行测定 ,起始电位一。 . 20 V ,在一。 . 45
V 处铜有一灵敏的极谱吸附波 . 用标准加入法 ,经扣
除空白值后 ,计算含量 .
1
.
3 结果
1
. 东 1 璐竟参中钥的含量 (4 次侧定结果均值 ) :
7
.
12
,
6
.
80
,
7
.
0 6
,
6
·
5 0
,
7
·
0 1
,
.6 9 7
,
6
.
4 2 滩29 , X 士
sD ~ .6 81 士 。
.
2 7陀 / g , G BW定值为 ` 80 士 。 . 62 .
1
.
3
.
2 连翘中铜的含量 (4 次侧定的均值 ) : 5 . 56 ,
5
.
6 4
,
5
.
43
,
6
.
5 0
,
6
.
2 1
,
5
.
66
,
5 55 雌棺 , X 士 S D =
5
.
7 9士 0 . 4 0 拌g / g , G B W 定值为 5 . 7 5士 0 . , o 。
2 讨论
植物中铁的含量较高时会干扰铜的测定
结果 , 前法图报道用 20 %乙二胺沉淀铁来消
除干扰 , 但由于增加沉淀 、 过滤等步骤 ,使操
作步骤较复杂 。 经多次试验 , 改变底液 的组成
后 ,本法所提出的底液中 ,可不经沉淀的方法
即可消除铁的干扰 ,且测定结果较准确 。
参 考 文 献
刘建成 ,等 . 中药连翘中锌 、 铁 、锰元素含量同时
测定 . 苏州医学院学报 19 98 ; 1 5 ( 10 )
周幼宝 ,等 . 示波极谱法测定 白麻中的微量铜 .
苏州医学院学报 , 19 89 ; ( 9 ) l : 51
( 1 9 9 8 年 2 月 6 日收稿 )
(上接第 I一2 8页 )
B io e h e m B io p h y s
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1 9 8 9 ; 2 6 Q ( 1 )
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( 1 9 9 7 年 7 月 1 1 自收稿》