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银耳菌分离方法的研究



全 文 :中国食用菌 E D I B L E F U N G I O F C H IN A V o l . 1 3 , N o .
表 2
F 1 29
三明 一号
展 , 最终不能结实 。 而有的生长很快能长满试管 ,
最终能够结实 , 对这些结实菌株镜检观察未发现锁
状联合 。 介于二者之间生长较满 , 但也能长满试管
的较少发现有结实现象 。
2
.
3 单抱结实菌 株 与非 单 抱 结 实菌株 间 的 交
配 见表 2是三明一号单抱结实菌株与 F 1 2 9非单抱
结实菌株的交配结果 · , 可以看出交配表现有明显的
极性反应 , 说明单抱结实菌株在交配行为上仍受 A B
因子的控制 , 其它菌株间的交配有类似的结果 。 实
际在黄色菌株间交配成功 23 2个结合 , 与白色 菌 株
交配成功 41 个组合 。 白色菌株间交配成功 1 65 个组
合 。 通过对所有交配成功的组合进行出菇品比 , 结
果筛选出 4个黄色优 良菌株 2 个淡黄色菌株 , 有较
大的增产优势 。 白色菌株间未出现理想组合 。
3 小结
( 1 ) 本试验中金针菇 6 个品种的单抱菌丝平
均约有 6 % 的结实性能 , 对能够结实的单抱菌株镜
检没有发现锁状联合 , 其单抱菌丝结实的机理需进
一步的研究 。 ( 2 ) 黄色菌株间 , 以及与白色菌株
的 39 7 个组合中 , 筛选出 6 个强优组合 , 显然 比从
随机交配中选择强优组合的比率要高 , 达到 了 1 . 5%
为强 优 组 合 。 因此 , 选择单抱结实菌株可做为选
配杂交组合的一个指标 , 有关其杂交优势的增产机
理还有待进一步研究 。 白色菌株间的交配未出现理
想组合 , 也准备再扩大交配组合的数量 , 来继续研
究 。
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分离方法的研究
张炳炽
( 山东师范大学生物系 济南 2 5。。 14)
摘要 用 单袍分 离、 葱本分离和组织 分离 获 得 银 耳
菌 , 银耳 菌的纯培养与伴生菌长在一起成为银耳母种 。 在
三 种方法中 , 以单饱分 离获得 的银耳原基 、 基内菌丝 与伴
生 菌配 制的母种质量好 , 成 功率 亦高。 塞内分离纯培养的
方法 不 如单抱分离的方 法 好 , 基内分离银耳菌丝和伴生菌
的 混合物 , 得到 的 毋种 质量不 稳 定 。 组 织分 离的 方法 不 能
采用 。
关键词 银耳 单饱分 离 银耳原基 基 内菌丝 毋
种质量
银耳母种必须是银耳菌与俗称香灰菌的伴生菌
长在一起的混合物才能用于扩接 原种 、 生产种和栽
培 。 文 献记载和 目前生产中采用银耳菌丝与香灰菌
配制母种或用基内分离银耳菌丝和香灰菌的混和物
得到再生母种 。 分离银耳菌丝有三种方法 , 用不同
的方法分离的银耳菌生话力不 同 , 母种质量差别很
大 , 质量差的母种不能用于扩接原种 。
1 材扦
1
.
1 菌株 银耳 ( T r e脚 e [ I a j u e i l o r 切 15 ) 8 召0 1 、 0 5 、
1 1 分别来自福建省古 田县食用菌厂 、 山 东省梁山
县食用菌研究所的原种、 栽培种 , 本 室分离 、 制种
和栽培 。
1
.
2 培养基 1 . 母种培养基: 综合马铃薯培养基 ,
另加黄豆粉汁和磷肥 ;
2
。 原种 、 生产种 : 木屑 1 00 0克 , 数 皮 30 克 ,
黄豆 粉30 克 , 石膏35 克 , 磷肥 30 克 , M g S O 4 1。克 ,
维生素 B ; 2 片 , 料 : 水 = 1 : 1 · l ~ l · 1 5 ;
3
. 栽培培养基 : 棉籽壳 10 0公斤 , 鼓皮 20 ~ 2 5
公斤 , 石膏 2 , 5~ 3 . 5公斤 , 黄豆粉 3 公斤或二钱 0 . 5
公斤 , 水 1 10 公斤 。
2 方法
2
.
1 分离方法
2
.
1
.
1 单抱分离 : 剪取出耳 15 天的耳片 , 悬挂于含
母种培养基的三角瓶内 , 23 ℃ , 培养一天后去掉耳
片 , 培养 2 天后 取抱子在平板上划线 , 培养。
2
.
1
.
2 基内分 离 银 耳 菌 和 香 灰 菌 的 纯 培 养 :
挑选好的 出耳瓶或 出耳袋 , 在底部取少许培养基接
在试管斜面上得到香灰菌 , 将其余培养基风干后 ,
取中、 下部培养基接在 试管斜面或平板上 , 23 ℃培
养。
2
.
1
.
3 基内分离银耳菌丝 和 香 灰 菌 的 混 合 物 :
挑选 好的出耳瓶或出耳袋 , 取中、 上都 培 养 基 少
第 3 1卷 第 3 期 中国食用菌 E D IB L E F U N G I O P C H IN A
许 , 接在试管斜面上 , 23 ℃培养 。
2
.
1
.
4 组织分离 : ’ 以菌蕾和耳基作分离材料 。
2
.
2 配制母种 在母种培 养基 上 先 接 银 耳 菌 ,
23 一 25 ℃培养 , 待菌落长到玉米粒大时 , 在 距 0 . 5
厘米处接少许香灰菌丝 , 继续培养 。
2
.
3 母种质最检验
2
.
3
.
1 菌种扩大 : 选吐黄水 或 有 银 耳 原 基 的 母
种 , 1 支母种接 1一 3 瓶原种 , 选白 毛 团 丰 盛 ,
吐黄水或已有原基的原种 , 将中上部培养基混匀 ,
接 4。一 90 瓶生产种 , 观察生长速度 , 白毛团多少 , 是
否吐黄水或形成原基 。
2
.
3
.
2 栽培 : 用接生产种的同样方 法 进 行 栽培 ,
观察生长速度 , 白毛团多少 , 吐黄水和形成原基时
间 , 银耳产量和质量 。
3 结 果
3
.
1 单抱分离在母种培养基上形成 纤 细 的 银耳次
生菌丝和原基 。 转接培养 , 在原基块周围产生基内
菌丝 (见图板 ) , 银耳菌丝可断裂成节抱子 , 原基
块和节抱子堆上形成绒毛 。 纤细的 菌 丝 、 原基 组
织 、 基内菌丝和绒毛 , 都能与从同一培养基中分离
到的香灰菌丝合交成为银耳母种 , 银耳菌生长快 ,
用于扩接菌种和栽培时 , 扩接数量大 , 白毛团旺埔 ,
吐黄水多 , 银耳朵形好 , 产量高。
3
.
2 基内分离 : 在 母 种 培 养 基 上 得 到 银耳 菌
丝 、 节抱子或银耳原基 。 银耳菌丝和原基组织能与
从同一基 内分离的香灰菌丝合交成为母种 , 用原基
组织与香灰菌合交得到母种的机率很低。 用银耳菌
丝与香灰菌丝合交时 , 银耳菌丝生长较快 , 能够用
于扩大菌种和栽培。 虽然生活力低于单抱分离的银
耳菌 , 也能获得 良好的银耳产量 。
3
.
3 基内分离银耳菌丝和香灰菌的混合物 , 香灰菌
和银耳菌长在一起 , 多数试管白毛 团弱 , 选白毛 团
长势较好且吐黄水试管 , 再传代增加 白毛团数量 ,
也能用于扩接菌种和栽培 , 由于银耳菌生活力低 ,
有时成批菌种不能使用。
3
.
4 组织分离菌蕾和耳基虽然能够 得 到纤 细的银
耳菌丝 , 但很难与香灰菌合交成为母种 , 即使长有
少许白毛团 、 微吐黄水或小原基 , 用于扩接菌种生
长势很弱 , 不能用于银耳栽培。
4 讨论
单抱分离得到纤细的银耳菌丝 、 原基块 、 基内
菌丝和绒毛 , 是来自有性杂交的异核双核体 , 生活
力强 , 因此 , 母种 、 原种 、 生产种和栽培时都表现
极强的生活力 , 用基内菌丝和原基块与香灰菌配制
母种 , 不仅质量好 , 成功率亦高。 应 注意淘汰掉初
生菌丝 、 酵母状分生抱子 , 甚至还有担抱子和次生
担抱子 , 以及不能形成原基的双核菌丝 。 在分离过
程中若得到原基和基内菌丝 , 则使纯化工作变得容
易进行 。
基内分离到的银耳次生菌丝和原基 , 由于菌龄
长 , 比用单抱分离的银耳菌生活力弱 , 主要表现在
银耳原基配制母种成功率低 , 但分离方法简单 , 易
操作 , 即使在分离时得到节抱子 , 节抱子可萌发成
菌丝 , 因此 , 生产中广泛采用。 基内分离银耳菌丝
和香灰菌丝混合物 , 得到再生母种 , 不仅菌龄长 ,
而且香灰菌易过剩 , 母种质量不稳 , 给生产造成损
失 , 不宜采用 、
组织分离菌蕾和耳基较难得到银耳菌丝 , 由于
胶质化 和菌龄过长 , 即使得到菌丝 , 也不能配制银
耳毋种 。
实践证 明 , 应该用单抱分离法得 到原基块 、 基
内菌丝 , 已 习惯用基内分离银耳菌丝者 , 也应与单
抱分离方法交替使用 。
S t u d y o n t h e i s o l a t i o n o 王 rn y e e l i a o f T r e o e l l a f u c f f o r 。 ?’ s
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T h e m y e e l i a o f T r e 阴 e l l a f u e i f o r m is e a n b e o b t a i n e d b y s i n g l e s p o r e i s o l a t i o n , m y e e l i a
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B u t t h e p u r e e u l t u r e o f m v e e l i a i s o l a 七i o n i n m e d i u m 15 n o t a s g o o d a s t h a t o f s i n g l e
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T h e m i x e d m a t t e r o f t h e m y e e l i a a n d t h e a s s o e 三a 比 d f u n g i w h i e h a r e o b t a i n e d b y
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