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古田产绞股蓝茶中总黄酮的含量测定



全 文 :收稿日期:2010-11-15
作者简介:张小华(1947—),女,副主任中医师,从事古田中草药与
农产品的开发指导。
通讯作者:李孝栋(1969—),男,副教授,E-mail:lxdtcm@263.net
福建省古田产绞股蓝 (Gynostemma heptaphyl-
lum)又名七叶胆等,系葫芦科绞股蓝属,在我国陕
西、贵州等省也有种植,被列为新资源食品,是一种
十分优良的功能性食品原料。 明代《救荒草本》曾有
记载:“绞股蓝在饥馑的岁月可以充饥”。绞股蓝含有
80 多种绞股蓝皂苷成分、多糖、总黄酮、各种氨基酸
和微量元素,具有辅助治疗咳嗽、降血脂、降血糖和增
进食欲等功效 [1-4]。 本文采用紫外分光光度法,测定
古田产绞股蓝茶中的总黄酮含量, 为绞股蓝茶产品
的质量标准和工业化生产提供理论依据。
1 材 料
1.1 仪器 FA2004N 电子分析天平(上海精密科学
仪器有限公司提供),HH-S 型数显恒温水浴锅 (国
华电器有限公司),752 紫外光栅分光光度计 (上海
第三仪器厂提供),DZF-300 真空干燥箱 (郑州长城
科教工贸有限公司提供),SHB-Ⅲ循环水式多用真
空泵 (郑州长城科教仪器有限公司提供),KQ-500E
超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),4802 型
双光束紫外可见分光光度计 (上海尤尼柯仪器有限
公司)。
1.2 试剂 绞股蓝茶(福建省古田老年科技工作者
协会基地提供),芦丁对照品(中国药品生物制品检
定所提供 ,批号 100080-200707),亚硝酸钠 、硝酸
铝、氢氧化钠、甲醇、乙醇等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液制备
2.1.1 对照品溶液制备 精密称取芦丁对照品适
量于量瓶中,加甲醇溶液溶解并定容,配得实际浓度
为 360 μg /mL的溶液,即得。
2.1.2 供试品溶液制备 精密称取绞股蓝茶 500 g,
加 100倍水煎煮 3次,每次 30 min,过滤,合并滤液,
浓缩至流浸膏, 再经真空干燥得到绞股蓝茶提取物
的干燥粉末,放入干燥器中保存,备用。临测定前,精
密称取一定量的绞股蓝茶提取物干燥品, 加甲醇充
分溶解、过滤后转移到量瓶定容,制成每 1 mL 含 30
mg提取物的供试品溶液。
2.2 检测波长的确定 取对照品和供试品溶液,
在 200~760 nm 范围内进行扫描, 结果二者在 510
nm 处均有最大吸收峰,且阴性空白溶液在此波长无
干扰,与文献[5-7]一致,故选择(510±2)nm 作为检
测波长。
2.3 总黄酮测定
2.3.1 标准曲线绘制 分别精密量取上述对照品
溶液 1、2、3、4、5 mL 于 25 mL 量瓶中, 各加水至 10
mL, 加 5%亚硝酸钠溶液 1 mL, 静置 6 min 后,加
10%硝酸铝溶液 1 mL,静置 6 min 后,再加 4%氢氧
化钠溶液 10 mL,再加水至刻度,摇匀,放置 15 min,
照分光光度法(2010 年版《中华人民共和国药典》附
录 VA),在 510 nm 的波长处测定吸光度值,同时随
行试剂做空白。 以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,
经线性回归, 得标准曲线方程如下:A=0.0128C+
0.0175,r=0.9993。 在 14.4~72 μg /mL 浓度范围内
吸收度和浓度呈良好的线性关系,见图 1。
2.3.2 精密度试验 将浓度为 43.2 μg /mL 的芦丁
对照品溶液按照 2.3.1 项下操作,平行测定 6 次,结
果见表 1。
古田产绞股蓝茶中总黄酮的含量测定
张小华 1,李孝栋 2,李素云 2,池奖云 1
(1. 古田县老年科技工作者协会,福建 古田 352200;2. 福建中医药大学药学院,福建 福州 350108)
摘 要: 目的 测定古田产绞股蓝茶中总黄酮的含量。 方法 采用紫外分光光度法, 对 3 个品种绞股蓝茶
中总黄酮的含量进行测定。 结果 芦丁在 14.4~72 μg /mL 范围内与吸光度呈良好线性关系,A=0.0128C+0.0175
(r=0.9993),罐装绞股蓝茶总黄酮为 8.17 mg / g,梗茎类为 0.99 mg / g,袋装类为 10.17 mg / g。 结论 绞股蓝茶中总
黄酮的测定方法可行,结果准确,对古田产绞股蓝产品的质量标准和工业化生产提供了理论依据。
关键词:绞股蓝;古田;总黄酮;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:1000-338X(2011)02-0053-02
图 1 芦丁标准曲线



浓度 / (μg /mL)
福建中医药 2011年 4月 第 42卷 第 2期
Fujian Journal of TCM April 2011,42 (2) 53
DOI:10.13260/j.cnki.jfjtcm.010171
大 医 精 诚 止 于 至 善
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项 目
吸光度
1 次
0.562
表 1 精密度试验结果
2 次
0.567
3 次
0.571
4 次
0.564
5 次
0.575
6 次
0.568
RSD /%
0.83
时间 / h
0.5
1
2
4
6
8
平均值
RSD /%
罐装绞股蓝
茶吸光度
0.461
0.465
0.466
0.469
0.475
0.472
0.468
1.08
表 2 稳定性实验结果
梗茎绞股蓝
茶吸光度
0.167
0.163
0.169
0.165
0.166
0.170
0.167
1.55
袋装绞股蓝
茶吸光度
0.531
0.542
0.526
0.530
0.536
0.540
0.534
1.16
2.3.3 稳定性试验 精密吸取 10.0 mL 供试品溶
液,加甲醇溶解后,滤入 25 mL 量瓶中并定容,再精
确吸取样品溶液 3 mL于 25 mL量瓶中, 按照 2.3.1
项下方法操作,自“各加水至 10 mL”起,每隔一段时
间测定吸光度值,从表 2可知稳定性试验结果良好。
2.3.4 重复性试验 精密吸取 6 份 10 mL 供试品
溶液,同 2.3.3 项下方法操作,结果罐装绞股蓝茶吸
光度值 RSD 为 1.26%,梗茎绞股蓝茶吸光度值 RSD
为 1.76%,袋装绞股蓝茶吸光度值 RSD 为 1.55%,表
明重复性试验结果良好。
2.3.5 加样回收率试验 分别精密吸取 1.0 mL 罐
装绞股蓝茶供试品溶液 6 份, 分别加入精密称定的
1 mg芦丁对照品, 加甲醇超声 10 min 使其溶解,滤
入 25 mL量瓶中, 甲醇定容。 再精确吸取样品溶液
3 mL于 25 mL量瓶中,按照 2.3.1项下方法操作,自
“各加水至 10 mL”起测定吸光度值。 结果罐装绞股
蓝茶回收率=98.04%,RSD=2.13%, 从表 3 可知加
样回收率结果良好。同法,对梗茎类和袋装绞股蓝茶
提取物样品的加样回收率进行测定, 结果梗茎绞股
蓝茶回收率为 96.19%,RSD=1.86%;袋装绞股蓝茶
回收率 97.50%,RSD=2.02%,回收率结果均良好。
2.3.6 绞股蓝茶中总黄酮的测定 按照 2.3.4 项下
方法操作, 平行测定 3 批各品种绞股蓝茶中总黄酮
的含量,结果见表 4。
3 讨 论
综上所述,本测定方法准确、可行,可用于古田
产绞股蓝茶中总黄酮的含量测定。 在整个测定操作
过程中,减少人为的误差十分重要,这将直接影响到
结果的准确性,如保证称样的准确性、加入显色剂时
由专人操作等。
参考文献:
[1] 张育松 . 绞股蓝茶的保健功效 [J]. 农业考古 ,2003(4):200-
201.
[2] 李金青,杨洪军 . 绞股蓝的药理作用研究进展 [J]. 中国现代
药物应用,2009,3(7):189-190.
[3] 覃小间,何娟,梁红 . 近 10 年绞股蓝总苷对多器官保护作用
的研究进展[J]. 中外健康文摘,2008,5(2):138-140.
[4] 沈宏伟,肖彦春,车仁国,等. 绞股蓝化学成分研究的现状[J].
时珍国医国药,2008,19(7):1561-1564.
[5] 王德才,冯蕾,吴从平. 泰山四叶参中总黄酮和多糖的含量测
定[J].医学研究杂志,2009,38(3):86-87,93.
[6] 卢金清,陈黎,肖波,等 . 分光光度法测定绞股蓝中总黄酮的
含量[J]. 湖北中医学院学报,2007,9(2):26-27.
[7] 蒋伟哲,周燕文,李锦燊 . 6 种广西产绞股蓝中总黄酮的含量
测定[J]. 中国药房,2006,17(1):74-75.
项 目
吸光度均值
RSD /%
总黄酮含量 / (mg / g)
罐装绞股蓝
茶吸光度
0.469
1.25
8.17
表 4 3 种古田产绞股蓝茶中总黄酮的含量测定
梗茎绞股蓝
茶吸光度
0.166
1.70
0.99
袋装绞股蓝
茶吸光度
0.530
1.42
10.17
取样量
/mL
1.00
0.96
0.95
1.02
0.97
0.96
样品含
量 /mg
0.73
0.71
0.70
0.75
0.71
0.71
表 3 加样回收率测定结果(n=6)
对照品加
入量 /mg
1.00
0.92
0.89
0.77
0.86
0.93
测得量
/mg
1.74
1.59
1.58
1.52
1.54
1.60
回收率
/%
100.53
96.16
99.10
100.07
96.20
96.20
平均回
收率 /%
98.04
RSD /%
2.13
福建中医药 第 42卷54