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[ 收稿日期] 2009-06-24
[作者简介] 朱丽 ,女 ,学士 ,电话:13871312439 , E-mai l:ljq59169@sohu.com
高效液相色谱法测定神农香菊不同营
养器官中木犀草素的含量
朱丽1 ,卢化1 ,詹晓莲2 ,卢金清2 　(1.武汉市第三人民
医院药剂科 ,湖北 武汉 430060;2.湖北中医学院 , 湖北 武汉
430065)
[ 摘要] 　目的:研究神农香菊植株中木犀草素的含量 , 探讨
木犀草素在神农香菊不同营养器官中的分布规律。方法:采
用 DIONEX-ACCLAIM.120 C18(250 mm ×4.6 mm , 5 μm)
色谱柱;磷酸盐缓冲溶液(pH 2.5)-甲醇为流动相;流速0.5
mL·min -1 ;柱温 35 ℃;检测波长为 350 nm。结果:木犀草素
在0.012 ～ 1.2 μg 范围内线形关系良好 , 平均回收率为
97.3%, r=0.999 9 , RSD 为1.30%。结论:木犀草素在神农
香菊中的含量分布规律依次为花 、茎 、全草和叶 , 其在花中的
含量最高。
[ 关键词] 　高效液相色谱法;神农香菊;木犀草素;含量测
定;分布规律
[中图分类号] R927.2　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-
5213(2010)05-0435-02
　　神农香菊为菊科植物神农香菊[ Dendranthema indicum
(L.)Des Monl.Var.ar omaticum Q.H.Liu.et S.F.
Zhang] 的干燥的头状花序 , 为神农架特有植物。 分布于湖北
省神农架地区2 000 m 以上的山地[ 1] 。具有平肝明目 、清热
解毒 、散风降压的功效 , 木犀草素是其中主要有效成分之一 ,
具有镇咳 、祛痰 、抗炎症 、抗过敏等作用。鄂西山区民间用于
防治感冒 、头痛和治疗慢性肝炎等疾病。并已被用来提取精
油或浸膏 ,广泛用于中药 、饮料 、香烟及化妆品中。随着神农
香菊的不断被开发 ,其需求量急剧增加。本实验采用高效液
相色谱法测定神农香菊花 、茎 、叶及全草中木犀草素的含
量[ 2-3] ,探讨神农香菊次生代谢产物的分布规律 , 以为神农香
菊的开发利用提供科学依据。
1　材料
DIONEX-ULTIM ATE 3000 液相色谱仪;甲醇为色谱
纯;其他试剂均为分析纯 , 水为注射用水。木犀草素对照品
(0.240 g·L-1 , 中国药品生物制品检定所 , 批号 111520-
200201),神农香菊于 2003 年 11 月采集于神农架燕子垭 ,并
由中国科学院武汉植物园赵子恩教授鉴定。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:DIONEX-ACCLAIM .120 C18(250
mm×4.6 mm , 5 μm);以磷酸盐缓冲溶液(pH 2.5)-甲醇为
流动相;流速0.5 mL·min-1 ;柱温 35 ℃;检测波长 350 nm;
进样量 5 μL。按表 1 梯度洗脱。结果见图 1 ～ 6。
表 1　梯度洗脱条件
Tab 1　Mobile phase of g radient elution table
时间/min 流动相 A/ % 流动相 B/ %
0 ～ 20 62 38
20 ～ 35 62※52 38※48
35 ～ 90 52 48
90 ～ 120 52※0 48※100
120 ～ 140 0 100
·435·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 5期 Chin H osp Pharm J , 2010 Mar , Vol 30 , No.05
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液　精密称取木犀草素对照品适量 , 加甲
醇溶解 ,制成0.24 g·L -1的溶液 ,作为对照品溶液 。
2.2.2　供试品溶液　分别取神农香菊花 、茎 、叶及全草粉末
(过二号筛)1.0 g , 精密称定 , 分别精密加入甲醇 20 m L ,称定
质量 ,超声提取 30 min , 放冷 , 再称定质量 , 分别用甲醇补足
各个样品减失的质量 ,过滤 , 滤液置蒸发皿中蒸干 , 残渣用甲
醇溶解并分别转移至 50 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 , 滤
过 ,取续滤液 , 即分别得供试品溶液。
2.3　线性关系考察　分别 4 次精密吸取对照品溶液 1.0
mL , 再分别置于 5 , 10 , 50 , 100 mL 量瓶中 , 均用甲醇溶解稀
释至刻度 ,摇匀 , 以稀释后对照品各自 1 μL 及对照品储备液
1 μL 为标准曲线系列溶液 , 共 5 个浓度 , 依次注入液相色谱
仪 ,记录木犀草素的峰面积 , 以进样量(μg)为横坐标(X),峰
面积为纵坐标(Y),得回归方程:Y =118.01X -0.464 5 , r=
0.999 9 , 木犀草素在 0.012 ～ 1.200 μg 范围内呈线形关系 ,
定量限是0.004 μg 。
2.4　精密度试验　吸取对照品溶液 5 μL , 在上述色谱条件
下 ,连续进样 5 次 , 注入液相色谱仪 , 木犀草素的峰面积的
RSD为1.30%。
2.5　稳定性试验　分别精密吸取神农香菊各个部位供试品
溶液 ,在上述色谱条件 , 分别置室温 0 , 3 , 6 , 9 , 24 , 48 h 后记录
木犀草素的峰面积 ,样品溶液在 48 h 内稳定性良好。
2.6　重复性试验　分别精密称取神农香菊各个部位的同一
批样品 5 份 , 每份1.0 g , 精密称定 ,按供试品溶液的制备方法
下制备 ,在上述色谱条件下测定 , 进行测定 , 计算各个样品中
木犀草素的平均含量 , 神农香菊花为0.065 g·L-1 , RSD 为
1.0%;茎为 0.017 g·L-1 , RSD 为 1.6%;叶为0.004 g·L-1 ,
RSD为1.8%;全草为0.006 g·L-1 , RSD为1.5%。
2.7　加样回收率试验　分别精密称取已知含量的同一批样
品 6 份 ,每份1.0 g , 精密称定 , 加入一定量的木犀草素对照
品 ,按供试品溶液的制备方法制备 , 在上述色谱条件下依法
测定 ,结果见表 2。
2.8　样品溶液的测定　按上述测定方法 , 测定 5 批各个样
品的木犀草素含量 ,结果见表 3。
3　讨论
木犀草素在神农香菊中的含量分布规律依次为花 、茎 、
全草和叶 ,其在花中的含量最高 , 说明在神农香菊植株中木
犀草素主要存在花这一营养器官中。
　　神农香菊为湖北特有品种 , 相关研究较少 , 其中木犀草
素具有镇咳和祛痰作用 , 此外还有抗炎症 、抗过敏和免疫增
强作用 ,本实验首次采用高效液相色谱法测定神农香菊不同
表 2　加样回收率试验结果
Tab 1　Experimenta l re sults o f sample recover y
供
试
品
样品含木
犀草素的量
/mg·g -1
添加木犀
草素的量
/m g·g -1
测得量
/mg·g -1
回收率
/ %
平均回
收率/ %
RSD
/ %
花 2.870 1.500 4.320 96.400
3.010 1.500 4.490 98.800
2.980 1.500 4.410 95.600 97.3 1.8
2.940 1.500 4.450 100.400
3.080 1.500 4.530 96.800
2.880 1.500 4.270 95.800
茎 0.871 0.800 1.666 99.375
0.862 0.800 1.643 97.625
0.901 0.800 1.672 96.375 97.69 1.2
0.882 0.800 1.661 97.375
0.932 0.800 1.703 96.375
0.843 0.800 1.635 99.000
叶 0.232 0.200 0.426 97.000
0.226 0.200 0.419 96.500
0.229 0.200 0.422 96.500 96.58 0.6
0.218 0.200 0.413 97.500
0.236 0.200 0.428 96.000
0.235 0.200 0.427 96.000
全草 0.291 0.200 0.481 95.000
0.286 0.200 0.480 97.000
0.295 0.200 0.493 99.000 96.75 1.3
0.299 0.200 0.485 97.000
0.289 0.200 0.480 96.500
0.296 0.200 0.488 96.000
表 3　样品测定实验结果
Tab 3　Experimenta l re sults o f sample s determination
样品 木犀草素/mg·g -1
RSD
/ %
平均含量
/mg·g -1
花 2.900 2.400
2.980 1.100
2.910 2.100 2.974
3.130 1.200
2.950 1.500
茎 0.873 1.600
0.892 1.500
0.907 1.700 0.878
0.853 2.000
0.863 1.800
叶 0.227 1.100
0.235 2.000
0.229 1.600 0.228
0.221 1.500
0.226 1.700
全草 0.295 1.700
0.310 1.000
0.291 1.600 0.298
0.297 1.100
0.296 1.700
营养器官中木犀草素的含量 , 并得出神农香菊全草中木犀
草素含量为花最高的结论 ,证实民间用其花作为药用部位是
具有合理性 ,为神农香菊的综合利用提供了科学依据。
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[收稿日期] 2009-09-27
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