全 文 ：2012 年 5 月第 29 卷第 3 期
May 2012，Vol． 29，No． 3
收稿日期:2011 － 08 － 25
作者简介:翟明 (1984 －) ，女，助教
通讯作者:刘军民 (1973 －) ，博士，教授;Email:liujunmin812@ 163. com
基金项目:广东省重大科技专项 (编号:2007A032200001) ;广东省教育部科技部企业科技特派员行动计划专项 (编号:2009B090600135)
鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别研究
翟明1， 刘军民2
(1． 嘉应学院医学院，广东梅州 514031;2． 广州中医药大学中药学院，广东广州 510006)
摘要:【目的】探讨鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别条件，并开展鸡血藤薄层色谱指纹图谱的初步研究，分析不同
居群鸡血藤野生种质在化学组分上的差异。【方法】采用三氯甲烷—甲醇—甲酸 (体积比为 7 ∶ 1 ∶ 0. 2)和三氯甲烷—丙酮
—甲酸 (体积比为 8 ∶ 1 ∶ 0. 5)为展开剂，体积分数 5%硫酸乙醇溶液显色，可鉴别鸡血藤与其常见混淆品;三氯甲烷—甲
醇—甲酸 (体积比为 10 ∶ 1 ∶ 0. 4)能很好地分离不同居群鸡血藤中的组分，采用 Ntsys 2. 10 软件非加权组平均法
(UPGMA)聚类分析不同居群鸡血藤种质品质间的差异性。【结果】建立了鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别方法;
建立了 13 个特征荧光斑点构成的鸡血藤薄层色谱指纹图谱。通过聚类分析，可将 11 个不同居群正品鸡血藤归为 4 类。【结
论】薄层色谱法可以有效地鉴别鸡血藤类药材，不同居群鸡血藤野生种质品质间存在较大的差异性。
关键词:鸡血藤 /化学;色谱法，薄层
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1007 － 3213 (2012)03 － 0305 － 03
鸡血藤为豆科植物密花豆 Spatholobus suberectus
Dunn 的干燥藤茎。具补血、活血、通络的功效，
临床上主要用于月经不调、血虚萎黄、麻木瘫痪、
风湿痹痛等症，广泛用于妇科、风湿痹痛等疾病的
中成药生产和配方用药中［1］。由于地区用药习惯的
不同，商品鸡血藤类药材基源植物除了 《中国药
典》收载的密花豆外，还有豆科、五味子科、木
通科等共 6 个属 15 种和变种的植物，如常春油麻
藤、香花崖豆藤及大血藤等［2］。目前，有关鸡血藤
与其混淆品的鉴别也常局限于 2 ～ 3 种药材的性状
及显微特征的比较［3 － 4］。为了确保鸡血藤药用基源
的准确和药材质量的稳定，本研究在对鸡血藤种质
资源调查与收集的基础上，采用薄层色谱法鉴别鸡
血藤与其常见混淆品，并构建鸡血藤中黄酮类成分
的薄层色谱指纹图谱，分析不同居群鸡血藤品质间
的差异，现报道如下。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 三用紫外分析仪 (中国上海精科实业
公司) ;20 cm × 10 cm GF254高效薄层板 (美国
Merk公司) ;定量毛细管 (瑞士 Camag 公司) ;薄
层板加热器 (瑞士 Camag公司) ;薄层色谱自动成
像分析系统 (中国北京先驱威峰技术开发公司) ;
双槽展开缸。
1. 2 试剂与药材 对照品原儿茶酸 (批号:
110809-200503，纯度 ＞ 98%)、芒柄花素 (批号:
11703-200501，纯度 ＞ 98%)、大豆苷元 (批号:
11502-200101，纯度 ＞ 98%)、染料木素 (批号:
11704-200501，纯度 ＞ 98%)均购自中国药品生物
制品检定所;实验用试剂三氯甲烷、甲醇等均为分
析纯。
实验用鸡血藤类药材来源及采集地点见表 1。
样品均经广州中医药大学刘军民教授鉴定并确定其
学名，标本存于广州中医药大学中药资源教研
室。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 取原儿茶酸、大豆苷元、
染料木素、芒柄花素适量，精密称定，加甲醇溶
解，分别配成 2. 1、0. 91、0. 93、1. 13 mg /mL的溶
液，作为对照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 取样品粉末 (过 24 目
筛)2 g，加石油醚 (60 ℃ ～ 90 ℃)50 mL，加热
回流 1 h，弃去石油醚液，药渣连同滤纸筒挥干溶
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广州中医药大学学报
Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine
2012 年第 29 卷
表 1 鸡血藤类药材来源
Table 1 Sources of medicinal material of Caulis Spatholobi
序号 样品 采集地 植物拉丁学名
01 鸡血藤 广州中医药大学三元里药圃 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
02 鸡血藤 广州从化流溪河 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
03 鸡血藤 深圳布吉 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
04 鸡血藤 深圳梧桐山 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
05 鸡血藤 广西岑溪 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
06 鸡血藤 广东罗定 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
07 鸡血藤 广东平远规范化种植 (GAP)研究基地 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
08 鸡血藤 广西八步 (栽培) 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
09 鸡血藤 广西八步 (野生) 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
10 鸡血藤 广东英德 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
11 鸡血藤 广东平远 (商品) 密花豆 Spatholobus suberectus Dunn
12 大血藤 广州 (商品) 大 血 藤 Sargentodoxa cuneata (oliv. )Rehd. et wils．
13 白花油麻藤 广东深圳 白花油麻藤 Mucuna birdwoodiana Tutch
14 常春油麻藤 云南昆明 常春油麻藤 Mucuna sempervirens Hemsl．
15 香花崖豆藤 江西赣州 香花崖豆藤 Millettia dielsiana Harms．
16 异形南五味子 广州 (商品) 异形南五味子 Kadsura heteroclita (Roxb. )Craib
剂后，加体积分数 95%乙醇 50 mL，加热回流 2
次，每次 1 h，用少许体积分数 95%乙醇反复冲洗
药渣连同滤纸筒，合并提取液，水浴挥尽乙醇，用
醋酸乙酯 15 mL萃取 3 次，减压回收溶剂，残渣用
甲醇溶解，转移至 2 mL 量瓶中，稀释至刻度，摇
匀，作为供试品溶液。
2. 3 薄层色谱条件
2. 3. 1 鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱条件
按照《中国药典》［1］法，分别取对照品溶液 1 μL，
供试品溶液 5 μL，点于同一硅胶 GF254板，分别以
展开剂 (A)三氯甲烷—甲醇—甲酸 (体积比为
7 ∶ 1 ∶ 0. 2)、展开剂 (B)三氯甲烷—丙酮—甲酸
(体积比为 8 ∶ 1 ∶ 0. 5)上行展开约 9 cm，取出，晾
干，置紫外灯 (254 nm)下检识，结果见图 1 (见
彩图页第 340 页)。4 种对照品极性大小顺序为原
儿茶酸 ＞大豆苷元 ＞染料木素 ＞芒柄花素，在图 1-
a中，4 个对照品的比移值 (R f)分别为 0. 25、
0. 50、0. 56、0. 69。
图 1 结果显示:正品鸡血藤供试品色谱中，在
与各对照品色谱相应位置上，均显相同颜色的斑
点;大血藤供试品色谱中，与对照品染料木素、大
豆苷元、芒柄花素色谱相应位置上无相同颜色的斑
点;白花油麻藤供试品色谱中，在与对照品芒柄花
素色谱相应位置上无相同颜色的斑点;常春油麻藤
与异型南五味子供试品色谱中，在与 4 个对照品色
谱相应的位置上均无相同颜色的斑点;香花崖豆藤
供试品色谱中，在与对照品大豆苷元、芒柄花素色
谱相应的位置上无相同颜色的斑点。
2. 3. 2 不同居群鸡血藤的薄层色谱条件 按照
《中国药典》［1］方法，分别取对照品溶液 2 μL，供
试品溶液 2 μL，点于同一硅胶 GF254板，温度为
27 ℃，相对湿度为 81%，以三氯甲烷—甲醇—甲
酸 (体积比为 10∶ 1∶ 0. 4)上行展开约 9 cm;取出，
晾干，喷以体积分数 5%硫酸乙醇溶液，105℃加
热 2 min，置紫外灯 (254 nm、365 nm)下检识，
结果见图 2 (见彩图页第 340 页)。
图 2 结果显示:不同居群鸡血藤其内在化学成
分组分的含量间存在较为明显的差异性。置紫外灯
(365 nm)下可以辨认 13 个荧光斑点 (图 2-b) ，
R f 值依次为 0. 96、0. 91、0. 80、0. 76、0. 69、0. 65、
0. 56、0. 49、0. 45、0. 38、0. 29、0. 24、0. 09。
2. 4 不同居群鸡血藤薄层色谱图的聚类分析 采
用 Ntsys 2. 10 软件，非加权组平均法 (UPGMA)
对不同居群鸡血藤药材薄层色谱图 2-b 进行聚类分
析，构建其内在化学成分关系树状图，结果见
图 3。
603 广州中医药大学学报
第 3 期
图 3 不同居群鸡血藤薄层色谱图的聚类分析图
Figure 3 The cluster analysis diagram of different
populations of Caulis Spatholobi
图 3 结果显示:不同居群鸡血藤共聚为 2 大
类，4 小类。其中，三元里、广西八步野生和英德
产归为第 1 类;梧桐山、岑溪和罗定产归为第 2
类;从化和布吉产归为第 3 类;平远 GAP 研究基
地和平远商品药材与广西八步栽培产归为第 4 类。
3 讨论
鸡血藤类药材其内在组分及药理作用具明显的
差异，临床主治功效亦不相同，不能混用。本研究
以原儿茶酸、大豆苷元、染料木素、芒柄花素为对
照品，三氯甲烷—丙酮—甲酸 (体积比为 8 ∶ 1 ∶
0. 5)为展开剂，可以较好地区分鸡血藤与其常见
混淆品大血藤、白花油麻藤、常春油麻藤、香花崖
豆藤及异形南五味子。
鸡血藤为多年生野生藤茎类药材，野生资源近
年来不断减少，商品药材质量有呈下降的趋势。不
同居群鸡血藤藤茎的粗度及断面含树脂的偏心性环
纹数均不一致。本研究薄层色谱结果显示:其内在
组分间存在较明显的差异。因此，今后如何确保其
药材资源的可持续利用及其药材质量的稳定尤为重
要。
参考文献:
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中国医药科技出版社，2010:180，附录 34．
［2］陈道峰，徐国钧，徐珞珊，等． 中药鸡血藤的原植物调查与商
品鉴定 ［J］． 中草药，1993，24 (1) :34．
［3］李玉梅，金晓玲． 鸡血藤及其混淆品大血藤、白花油麻藤的鉴
别 ［J］． 时珍国医国药，2003，14 (1) :33．
［4］冯静华． 浅谈“大血藤”与“鸡血藤”在应用中存在问题
［J］． 海峡药学，2001，12 (10) :86．
Identification of Caulis Spatholobi and Its Common
Adulterants with Thin Layer Chromatography
ZHAI Ming1， LIU Junmin2
(1． Medical College of Jiaying University，Meizhou 514031 Guangdong，China;2． School of Chinese Herbal
Medicine，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006 Guangdong，China)
Abstract:Objective To investigate thin layer chromatography (TLC) conditions for the identification of Caulis
Spatholobi and its common adulterants，and to study the differences in chemical composition of different populations
of wild germplasm through TLC fingerprint analysis． Methods With the mixture of chloroform-methanol-formic
acid (volume ratio being 7 ∶ 1 ∶ 0. 2)and chloroform-acetone-formic acid (volume ratio being 8 ∶ 1 ∶ 0. 5)as
developing agents，and with 5% (volume fraction)sulfuric acid-ethanol solution as the color developing reagent，
TLC was used for the identification of Caulis Spatholobi and its common adulterants ． The composition of different
populations of Caulis Spatholobi was well separated with the mixture of chloroform-methanol-formic acid (volume
ratio being 10 ∶ 1 ∶ 0. 4)． Finally，we used unweighted pair-group method of Ntsys 2. 10 software and arithmetic
means (UPGMA)for cluster analysis of the quality differences in various populations of Caulis Spatholobi． Results
We have established TLC method for the identification of Caulis Spatholobi and its common adulterants，and
established Caulis Spatholobi TLC fingerprints which consisted of 13 specific fluorescent spots． Through cluster
analysis，11 populations of genuine Caulis Spatholobi were grouped into four categories． Conclusion TLC can be
used to effectively identify the medicinal material of Caulis Spatholobi． Great variability exists in different
populations of wild germplasm of Caulis Spatholobi．
Key words:CAULIS SPATHOLOBI /chemistry;CHROMATOGRAPHY，THIN LAYER
703翟明，等． 鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别研究
2012 年第 3 期
(“鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别研究”的彩图，正文见第 306 页)
a. 展开剂:三氯甲烷—甲醇—甲酸 (7∶ 1∶ 0. 2) b． 展开剂:三氯甲烷—丙酮—甲酸 (8∶ 1∶ 0. 5)
1. 对照品原儿茶酸、染料木素的混合;2. 大豆苷元、芒柄花素的混合;
3 ～ 8. 依次为鸡血藤、大血藤、白花油麻藤、常春油麻藤、香花崖豆藤、异形南五味子
图 1 鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱图
Figure 1 Thin layer chromatograms of medicinal material of Caulis Spatholobi and its common adulterants
a. 254 nm下检识
b. 365 nm下检识
展开剂:三氯甲烷—甲醇—甲酸 (10∶ 1∶ 0. 4)
1 ～ 11. 来源依次为三元里、从化、深圳布吉、深圳梧桐山、岑溪、罗定、平远 GAP基地、八步栽培、八步野生、
英德、平远的样品;12 ～ 15. 依次为对照品原儿茶酸、芒柄花素、染料木素、大豆苷元;点样量 2 μL
图 2 不同居群鸡血藤的薄层色谱图
Figure 2 Thin layer chromatograms of different populations of Caulis Spatholobi
043 广州中医药大学学报