全 文 ：B UL L E TIN O FI B OL OG Y ( M
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T h e d os is in (le se rt
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S e e d s di s p e rs al h y ro d e n t
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S t u d y o n t h e a n it 一 h e r b i o i d e tr a n s g e n i c p l a n t
· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … … W a n g Y il i n L i H o n g (巧 )
P r i m a 叮 d i s e u s s i o n a b o u t e v o l u t io n a r y s t a b l e s t r a t e g y (E S S) · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … … J i a n g X u e w e i F e n g J i a n j u (2 0 )
M e ta b o l i s n l a n d fu n (
·
t i o n o f IA A i n p l a n t e e ll
· · · · · · · · · · · · · · · · · · … … Y u a n B o h u a L i a o X i a n g ru Z h e n g X i a ( )j i e o t a l . (2 1)
T h e e o m m (
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r a i n d i e a t o r o f w a t e r q u a l i t y i n n a t u r a e n v i r o n m e n t
· · · · · · · · · · · · … … Z h a n g S h i y i W u Y u m i n g (2 5 )
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· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · …… L i Z h i x ia n g S h i Z h u (5 1)
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· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … … Y u a n P e n g W a n g x i a o q ia , 19 1· i n (· h u n o t , ,1. (5 4 )
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蛇苔叶状配子体组织培养与观察 `
蛇 并 又 称蛇 地 钱 (以) n( 、 叩力al u m 〔 on ,阴 nI ) . 是 一 种 分 布广
的常 见 叶状体 答 类植物 , 容 易采集 二其叶状 配子 体肥大 , 颜色鲜
绿 , 是研 究 叶绿 素 、 细胞 生 理生 化特 别 是 光合作 用 , 基因 表达 、
调控 的非 常好 的材 料 对 其进行组 织培 养和 观察的方 法如 下 :
1 方 法
1
.
1 采集和保存 将蛇 苔植株丛 连 同附着的厚 约 2 c m 的土 一
起采 下 ,密封 于塑料袋 中 ,快 速带 回实 验室 ,置人 下 气候箱 内具沙
层的瓷盘中 . 浇透水 . 1 0 0 0 lx 光强 , 90% 相对湿度 , 25士 l℃下保存 、
1
.
2 配制培 养基 采用 >rI a t 配 方配制蛇苔培 养基 , 即 1 O00 m L
溶液 中含 N H 4N O 。 2 5 0 9 、 M g SO ; · 7 H ZO 0 . 83 9 、 K H Z P O 4 O. 7 4 g _ p H
值控制在 5 . 8一 6 2 之 间 按加琼脂 (琼脂量 为 6 留)L 和不加琼脂分
别制 成固体 培养基和液体培养基 、 液体 培养基采用 滤纸桥方法
即在滤纸 中部底 而热 一团脱脂棉 ,使 滤纸周边浸人培养液 中部凸
出担空 , 以 利 于气体 交换 培养容器为直径 6 0 : n m 培养 l现 灭菌 、
接种 前无菌条件下每套 皿中倒人 约 10 m L 培 养液 、晃匀 。
1
.
3 材 料消 毒 剪 取蛇 苔生 长健壮 , 色泽鲜 绿 的叶状 体部分
在超净 丁 作 台 l一 , 用 清水 和蒸 馏水 分 别清洗 后 . 放 人体 积分 数
7 0 % 酒精 溶液 ` } . 消 毒 2 0 一 3 0 5 . 再 放 入体 积分数 2 % 安替 福 民溶
液 中消毒 4 m , r l 用 无菌水 冲洗数 次 , 待用
2 接种
无菌条件下 . 将蛇 井叶状体垂 直于中肋 切成 0 . 5 、二 宽 . 1 《· m
左 石长的小块 . 要求林块 「都 要有 中肋 并均匀摆放在 固体培 养基
{ 或滤纸桥 , } ,部 . 睡洲 10 块 盖 卜盖 . 置光照培养箱 中培养
* 河北 省科 技局玫 关 i }划项 } J( 2 0 0 3 4 2 0 1)
3 培养 与观察
3
.
1 培养 条件 培 养初期 自天 温度 25 士 l 〔 夜问 2 0士 I t :长出配
子体 后 , 自天 28 士 l℃ , 夜间 23 士 l℃ . 光照 时 问 14 h . 光强 l 0 0( ) -
1 ZO0 l
x
_
3
.
2 观察记 录 每 日两 次在解 剖镜 卜观察 详细 记 录每块 外
植体 的外 观形 态变 化 发现 变化 后 , 选 择 具代表 性 的外 植体 做
成活 体临 时水装 片 , 置 显 微镜 下详 细观察 其 发育特 点井记录
4 结果
4
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1 接 种后第 1 天 开始 , 外植 体腹 面中 肋处 泞先伸 出芽状 配
子体 。 与叶片细 胞相 比 , 中肋 细胞 分化形 成时 间较 短 , 产「活 力
强 , 易进 行 脱 分 化和 再 分 化 , 加 之细 胞 体 积小 而密 集 , 结 构 紧
凑 , 代谢旺盛 , 有 利 于细胞 分裂 和新配 子体 的生 成
4
.
2 第 巧 天开始 细 胞长 出芽状 配 子体 以 后 , 芽状配 子体继
续 生 长 ,数 量逐 渐增 加 , 面 积 不断 加 大 , 形 成 二歧 分枝 宽带状 叶
状配 子体 蛇苔 外 植体经 过适 宜 的培 养 , 可 从细 胞处 直接 长出
配子 体 , 而不经 过 原丝 体 阶段 ,这 与培 养葫 芦 鲜 ( 凡alI rl 。 协邵。 -
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c a ) 叶片状 配子 体先生 成原 丝体 , 再在 原 扮体 L 形 成配 子
体植 株 的发育过 程 明 显不 同 另 外 . 长 出配 子体 的细 胞 一 般 都
处于 外植体 近边缘 的位 置 这可 能 与外 缘细 胞吸 收培 养基养 分
较 多 ,代谢 旺盛 , 易合成 有利新 配子 体形 成 和牛 长的 物质有 关
唐伟斌 . 石 晓 云 刘 占牛
( )日;台斗 院 产} 物 系 于「,J北 J日宝台 ( )5 4 ( )o } ) (B F )
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