全 文 ：异 ,其药理作用及临床应用的差异值得深入研究 。
本实验结果为花椒在食品和医药中的研究及应用提
供了重要的数据参考 。
参 考 文 献
[ 1] 干信 ,吴士筠 , 高雯琪 .花椒挥发油抑菌作用研究 [ J] .
食品科学 , 2009, 30(21):128-130.
[ 2] 袁娟丽 .花椒挥发油的抗炎 、镇痛作用 [ J] .中药材 ,
2010, 33(5):794-797.
[ 3] 曾晓会 ,周瑞玲 , 陈玉兴 ,等 .花椒超临界萃取物治疗哮
喘的药效学研究 [ J].中药材 , 2005, 28(2):132-134.
[ 4] 郭红祥 , 袁超 , 郭爱芳 , 等 .超临界 CO2萃取花椒挥发
油的杀虫活性研究 [ J] .河南农业大学学报 , 2005, 39
(1):79-82.
[ 5] 邱琴 ,崔兆杰 , 刘廷礼 ,等 .花椒挥发油化学成分的 GC-
MS分析 [ J] .中药材 , 2005, 22(3):327-328.
[ 6] 郭治安 ,赵景婵 , 谢志海 .气相色谱-质谱联用分析花椒
挥发油的成分 [ J] .色谱 , 2001, 19(6):567-568.
[ 7] 陈训 , 贺瑞坤.顶坛花椒和四川茂县大红袍花椒挥发油
的 GC-MS分析比较 [ J] .安徽农业科学 , 2009, 37(5):
1879-7880.
[ 8] 赵丽娟 , 辛广 ,张捷莉 .两种方法提取太行山地区花椒
中挥发性化学成分的气相色谱-质谱分析 [ J] .食品科
学 , 2007, 28(11):420-423.
[ 9] 莫彬彬 , 连宾 , 万固存 , 等 .超临界 CO2分步萃取花椒
香气和麻味物质的初步研究 [ J] .食品科学 , 2009, 30
(8):201-203.
[ 10] LEEJH, CHANGKM, KIMGH.Compositionandan-
ti-inflammatoryactivitiesofZanthoxylumschinifoliumes-
sentialoil:suppressionofinduciblenitricoxidesynthase,
cyclooxygenase-2, cytokinesandcellularadhesion[ J] .
JournaloftheScienceofFoodandAgriculture, 2009, 89
(10):1762-1769.
[ 11] WANGLu, WANGZiming, LIXueyuan, etal.Analysisof
volatilecompoundsinthepericarpofZanthoxylumbun-
geanumMaxim.byultrasonicnebulizationextractioncou-
pledwithheadspacesingle-dropmicroextractionandGC-
MS[ J] .Chromatographia, 2007, 71(5):455-459.
大叶秦艽中脂肪酸及挥发油成分的 GC-MS分析
李勇慧 1 ,曹晓燕2 ,押辉远 1
(1.洛阳师范学院生命科学系 ,河南 洛阳 471022;2.陕西师范大学生命科学学院 /教育部药用植物资源与
天然药物化学重点实验室 ,陕西 西安 710062)
摘要 目的:分析大叶秦艽中脂肪酸及挥发油成分。方法:分别利用索氏提取法和水蒸气蒸馏法提取大叶秦
艽中的脂肪酸和挥发油成分 , 采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行分析鉴定 , 运用气相色谱峰面积归一化法
确定了其相对百分含量 。结果:分别鉴定了脂肪酸中的 27个化合物和挥发油中的 26个化合物 ,脂肪酸中主要是
亚油酸和油酸等不饱和脂肪酸 ,挥发油中含量较高的是羟甲香豆素(39.52%)、鲨烯(18.28%)、棕榈酸(8.9%)、
邻苯二甲酸二异丁酯(4.96%)。结论:该结果为进一步认识大叶秦艽的活性成分和研究其药理药效作用提供了理
论依据。
关键词 大叶秦艽;脂肪酸;挥发油;GC/MS
中图分类号:R284.1/R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)04-0559-04
收稿日期:2010-11-18基金项目:青年科学基金项目(30800204/C050604)作者简介:李勇慧(1977-),女,硕士研究生 ,讲师 ,主要从事植物生物技术方面的研究;Tel:13598465162, E-mail:huiyongli8209@126.com。
中药秦艽的 4种原植物分别是龙胆科多年生草
本植物大叶秦艽 GentianamacrophylaPal.、粗茎秦
艽 G.crassicaulisDuthieexBurk.、麻花秦艽 G.stra-
mineMaxim.和小秦艽 G.dahuricaFisch.〔1〕。传统
认为这 4种秦艽中 ,大叶秦艽的药用品质最佳 。其
以根入药 ,有祛风湿 、清湿热 、止痹痛之功效 〔2〕。化
学成分为环烯醚萜苷类 ,主要是龙胆苦苷 、秦艽苷等
生物碱〔3〕 ,对风湿性关节炎有显著的作用 , 对真菌
也有明显的抗性 〔4〕。 《晶珠本草 》记载其味苦 、平 ,
列为中品 ,具有清热利胆 、舒筋止痛的功效 ,用于治
疗肺结核 、低热盗汗 、黄疸型肝炎等症 〔5〕。秦艽的
研究目前主要集中在苦苷类方面 ,对于脂肪酸和挥
发油等脂溶性化学成分 ,尚无系统报道 ,尤其是其成
分与药效之间的关系研究甚少。本研究采用索氏提
·559·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 34卷第 4期 2011年 4月
取法提取大叶秦艽中的脂肪酸 ,水蒸气蒸馏法提取
挥发油 ,利用气相色谱 -质谱(GC-MS)联用技术对大
叶秦艽中脂溶性和挥发性成分进行了较为全面的定
性定量分析 ,为进一步认识秦艽的活性成分和研究
其药理药效作用提供了理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器 GC/MS-QP2010型气相色谱 -质谱联用
仪(日本 SHIMADZU公司);FZ102微型植物粉碎机
(黄骅市中兴有限责任公司);Q/BKYY31-2000型电
热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂);SL202N
型药物电子天平(上海明桥精密科学仪器有限公
司);HH-6B数显恒温水浴锅(国华电器有限公司);
RE-52AA旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂);
MILLI-Q超纯水仪;索氏提取装置;水蒸气蒸馏提取
装置。
1.2 材料 实验用样品为陕西凤县东河桥采集的
不同时期的栽培秦艽 ,经陕西师范大学生命科学学
院植物分类教研室任毅老师鉴定为龙胆科植物大叶
秦艽 GentianamacrophylaPal.的根 。将用于测定
的样品在 37 ℃的烘箱中烘干 ,去除残茎 ,抖净泥土
杂质 ,撞掉老皮 ,再用毛刷刷掉根表面的微尘 ,粉碎
机粉碎 ,过 40目筛后置干燥器中备用 。所用试剂均
为分析纯 ,水为超纯水 。
2 方法
2.1 脂溶性成分的提取和甲酯化 精密称取
20.00 g大叶秦艽样品至于索氏提取器中 ,以石油醚
为溶剂 80℃回流提取 8h,旋转蒸馏回收溶剂 ,得黄
绿色秦艽脂肪酸。样品的甲酯化采用氢氧化钾 -甲
醇直接酯化法。取大叶秦艽脂肪酸置于 20mL试管
中 ,加入 4mL苯 -石油醚(1∶1 /v∶v)混合溶剂使之溶
解 ,再加入 0.4 mol/L氢氧化钾 -甲醇溶液 4 mL,震
荡混匀 , 40 ℃恒温水浴 30 min,再加入 10 mL超净
水 ,静置 ,待分层清晰后取上清液 ,丙酮稀释 10倍后
作为色谱分析试样 。
2.2 脂肪酸成分的 GC-MS分析条件
2.2.1 GC条件:RTX-5MS5%diphenyl-95%dime-
thylpolysiloxne型弹性石英毛细管色谱柱(0.25 mm
×30 m, 0.25 μm);进样口温度为 250 ℃;升温程
序:从 80 ℃开始 ,先以 10 ℃/min升至 200 ℃,再以
1 ℃/min升至 220 ℃, 220 ℃维持 2 min,然后以 8
℃/min升至 280 ℃, 280 ℃再维持 3 min;载气为高
纯度氦气;柱内载气流量 1.26 mL/min;分流比为 20
∶1;进样量 2 μL;汽化室温度为 250 ℃。
2.2.2 MS条件:EI离子源 ,电子能量 70 eV;离子
源温度 200℃;接口温度 250℃;溶剂延时 4 min;倍
增器电压 0.9kV;扫描范围 m/z:40 ～ 600。
2.3 挥发油的提取 取大叶秦艽样品 10.00 g,溶
于 100 mL烧杯中 ,水蒸气蒸馏 7 h提取挥发油 ,提
出的液体加入分液漏斗中静置 ,加入乙醚混匀 ,静置
分成取上清 ,用无水 Na2SO4吸取剩余的水 ,用 0.45
μm滤膜过滤 ,过滤液稀释待用。
2.4 挥发油成分的 GC-MS分析条件
2.4.1 GC条件:RTX-5MS5%diphenyl-95%dime-
thylpolysiloxne型弹性石英毛细管色谱柱(0.25 mm
×30 m, 0.25 μm);进样口温度为 250 ℃;升温程
序:从 60 ℃以 7 ℃/min上升至 140 ℃,然后以 5
℃/min上升至 280 ℃;载气为高纯度氦气;柱内载
气流量 1.51 mL/min;分流比为 20∶1;进样量 2μL;
汽化室温度为 250℃。
2.4.2 MS条件:EI离子源 ,电子能量 70 eV;离子
源温度 200 ℃;接口温度 250℃;溶剂延时 4min;倍
增器电压 0.9kV;扫描范围 m/z:40 ～ 600。
3 结果与讨论
用毛细管气相色谱法对大叶秦艽的脂溶性及挥
发性成分进行了分析 ,其成分的离子流图见图 1、图
2。脂溶性成分共分离出 27个成分(表 1),挥发性
成分共分离出 26个成分(表 2),经气相色谱机用面
积归一法测定各组分的百分含量 ,并用气相色谱-质
谱联用技术做挥发性成分的 GC/MS总离子流色谱检
测 ,所得质谱图经计算机质谱数据库检索 ,并按各峰
的质谱裂片图与文献资料核对 ,确定了大叶秦艽的脂
溶性成分和挥发性成分。其分析结果见表 1、表 2。
图 1 大叶秦艽脂肪性成分的离子流图
图 2 大叶秦艽挥发油成分的离子流图
·560· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 34卷第 4期 2011年 4月
表 1 大叶秦艽脂肪酸成分气-质联用分析结果
NO. 化学名称 分子量 分子式 保留时间/min 峰面积 相对含量/%
1 3, 4-Hexanedione, 2, 2, 5-trimethyl 2, 2, 5-三甲基 , 3, 4-己酮 156 C9H16O2 6.288 21904 0.01
2 Nonane, 3, 7-dimethyl- 3, 7-二甲基壬烷 156 C11H24 7.457 42661 0.03
Decane, 6-ethyl-2-methyl- 6-乙基-2甲基十二烷 184 C13H28
3 Undecane, 3, 8-dimethyl- 3, 8-二甲基十一烷 184 C13H28 8.608 58915 0.04
4 Dodecane, 2, 7, 10-trimethyl- 2, 7, 10-三甲基-十二烷 212 C15H32 9.731 64787 0.04
5 Octadecanoicacid 十八烷酸(硬脂酸) 298 C19H38O2 10.06 45295 0.03
6 Hexane, 2, 4, 4-trimethyl- 2, 2, 4-三甲基己烷 128 C9H20 11.019 67628 0.04
7 Dodecane, 2, 7, 10-trimethyl- 2, 7, 10-三甲基十二烷 212 C15H32 12.645 74052 0.05
8 未鉴定 12.733 41406 0.03
9 9-Octadecenoicacid(Z)- 9-十八碳烯酸 (油酸) 296 C19H36O2 12.820 59417 0.04
10 Hexadecanoicacid 十六烷酸(棕榈酸) 270 C17H34O2 14.616 10707362 5.93
11 2-Bromododecane 2-溴十二烷 248 C12H25Br 14.607 114982 0.07
12 Heptadecanoicacid 十六烷酸(棕榈酸) 284 C18H36O2 0.05
13 9, 12-Octadecadienoicacid 9, 12-十八碳二烯酸(亚油酸) 294 C19H34O2 18.209 109541975 59.87
14 9-Octadecenoicacid 9-十八碳烯酸(油酸) 296 C19H36O2 18.316 49578773 27.25
15 9-Octadecenoicacid 9-十八碳烯酸(油酸) 296 C19H36O2 17.189 1399275 0.86
16 Hexanol-1, 6-cyclohexyl- 1, 6-环己基己醇 184 C12H24O 17.425 188064 0.12
17 Octadecanoicacid 十八烷酸(硬脂酸) 298 C19H38O2 17.674 5298859 3.25
18 Heptadecane, 2, 6, 10, 15-tetramethyl- 2, 6, 10, 15-四甲基十七烷 296 C21H44 19.535 327897 0.20
19 Heptadecane, 2, 6, 10, 15-tetramethyl- 2, 6, 10, 15-十七烷 296 C21H44 22.428 585498 0.36
20 11-Eicosenoicacid 11-二十碳烯酸(花生烯酸) 324 C21H40O2 22.600 352924 0.22
21 Hexadecanoicacid 十六烷酸(棕榈酸) 270 C17H34O2 23.387 340277 0.21
22 Heptadecane, 2, 6, 10, 15-tetramethyl- 2, 6, 10, 15-四甲基十七烷 296 C21H44 25.601 399403 0.24
23
Phenol, 2, 2′-methylenebis[ 6-(1, 1-dimethylethyl)] -4-methyl-
2, 2′-亚甲基双二烷基氧膦 [ 6-(1, 1-二甲基乙烷基)] -4-甲基苯酚 340 C23H32O2 26.592 426126 0.26
24 Heptadecane, 2, 6, 10, 15-tetramethyl- 2, 6, 10, 15-四甲基十七烷 296 C21H44 29.594 331537 0.20
25 Docosanoicacid 二十二碳烷酸(山嵛酸) 354 C23H46O2 30.726 109305 0.07
26 1, 2-Benzenedicarboxylicacid 邻苯二羧酸 390 C24H38O4 31.302 656642 0.40
27 Undecane, 3, 8-dimethyl- 3, 8-二甲基十一烷 184 C13H28 32.472 210009 0.13
表 2 大叶秦艽挥发油成分气-质联用分析结果
NO. 名称 分子量 化学式 保留时间/min 峰面积 百分含量/%
1 Tyranton 二酮醇 116 C6H12O2 4.099 42223 0.44
2 Alcanfor 冰片 , 樟脑 152 C10H16O 8.287 26261 0.27
3 Naphthalene 萘 128 C10H8 9.060 227055 2.37
4 2-Furanacetaldehyde, .alpha.-methyl-.alpha.-vinyl-α-甲基 , α-乙烯基-2-呋喃乙醛 150 C9H10O2 10.456 129594 1.35
5 1-Phenyl-1-butanol 1-苯基-1-丁醇 150 C10H14O 12.371 32207 0.33
6 4-Methylbenzylalcohol 4-甲基-苯甲醇 122 C8H10O 12.721 42244 0.44
7 Undecane, 3, 8-dimethyl- 3, 8-二甲基十一烷 184 C13H28 15.041 38957 0.41
8 4-Heptanone, 2-methyl- 2-甲基-4-庚酮 128 C8H16O 16.340 25255 0.27
·561·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 34卷第 4期 2011年 4月
续表
NO. 名称 分子量 化学式 保留时间/min 峰面积 百分含量/%
9 Butanedioicacid, methyl-, bis(1-methylpropyl)ester丁二酸 , 甲基-,二(1-甲基丙基)酯 244 C13H24O4 16.724 39451 0.41
10 Tridecane, 1-iodo- 1-碘代十三烷 310 C13H27I 17.098 33028 0.35
11
Methyl(methyl2, 4-di-O-methyl-.alpha.-D-mannopyrano-side)uronate 250 C10H18O7 18.193 59637 0.62
12 Hymecromone 羟甲香豆素 176 C10H8O3 18.677 3777694 39.52
13 Diisobutyladipate 己二酸二异丁酯 258 C14H26O4 18.928 104152 1.08
14 Erythrocentaurin 红白金花内酯 176 C10H8O3 19.900 325320 3.40
15＊ Tetradecanoicacid 十四烷酸(肉豆蔻酸) 228 C14H28O2 20.431 188533 1.97
16 Pentopyranose 戊呲喃糖 150 C5H10O5 22.417 53673 0.56
17＊ Diisobutylphthalate 邻苯二甲酸二异丁酯 278 C16H22O4 22.709 473469 4.96
18 1-Dodecene 1-十二烯 168 C12H24 23.984 59308 0.62
19＊ Hexadecanoicacid 十六烷酸(棕榈酸) 256 C16H32O2 24.366 849851 8.90
20 Butyloctylphthalate1-Butyl 邻苯二甲酸丁基辛基酯 334 C20H30O4 24.529 130027 1.35
21 3-Eicosyne 3-二十炔 278 C20H38 26.870 77836 0.81
22 1, E-11, Z-13-Octadecatriene 1, E-11, Z-13-十八碳三烯 248 C18H32 27.555 159782 1.68
23 OleicAcid 油酸 ,十八烯酸 282 C18H34O2 27.639 349453 3.65
24 Octadecanoicacid 十八酸 284 C18H36O2 28.043 112395 1.18
25 Diisooctylphthalate 邻苯二甲酸异辛酯 390 C24H38O4 34.448 457268 4.79
26 Spinacene 鲨烯 , 鱼肝油萜 410 C30H50 38.433 1747416 18.28
由表 1可见 ,大叶秦艽的脂溶性成分为烷烃类 、
不饱和脂酸 、饱和脂酸 、醇 、酮。其中共鉴定出 11种
烷烃类 ,占总量的 1.4%;5种饱和脂肪酸 ,占总量的
9.69%;4种烯酸主要为油酸 ,占总量的 28.22%;一
种二烯酸 ,为亚油酸 ,其含量最多占总量的 59.87%;
脂肪酸共占总量的 97.78%。一种醇类为 1, 6-环己基
己醇;一种酚为 2, 2′-亚甲基双二烷基氧膦 [ 6-(1, 1-二
甲基乙烷基)] -4-甲基苯酚;一种羧酸为邻苯二羧酸;
一种酮为 2, 2, 5-三甲基-3, 4己酮。
由表 2可知 ,从大叶秦艽中共鉴定了 26种挥发
油 ,其中含烃类 、烯 、炔 、醇 、酮 、酯 、羧酸 、芳香族化合
物和萜类化合物等。其中三种醇占总量的 1.21%;
一种醛占总量的 1.35%;烷 、烯 、炔烃类共有五种 ,
占总量的 3.87%;四种羧酸占总量的 15.7%;七种
酯占总量 16.61%及占总量 18.55%的两种萜;还有
占总量的 41.89%的两种芳香族化合物以及少量的
酮 、糖等化合物 。在已鉴定成分中 ,有棕榈酸 、十四
烷酸 、邻苯二甲酸二异丁酯 、油酸四种化合物与文
献 〔6, 7〕报道相同 ,其他 22中成分未见关于秦艽研究
的文献中报道。
在这些化合物中含量最高的是羟甲香豆素 ,为
39.52%,其次鲨烯含量为 18.28%。此外 ,大叶秦艽
挥发油中还含有多种具有生理功能的成分 ,如邻苯二
甲酸二异丁酯(4.96%)、邻苯二甲酸异辛酯(4.76%)
等邻-苯二甲酸二酯类的化合物。这些都表明大叶秦
艽挥发油可能具有一定的药物活性 。
本文通过对大叶秦艽中脂肪性成分及挥发油成
分的分析和评价 ,共分离和鉴定出 27种脂肪酸成分
和 26种挥发油成分 ,为其中药制剂 、药理 、创造开发
中成药新品种及综合开发利用等方面提供科学依
据。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 [ S] .一部 .北
京:化学工业出版社 , 2005:190-191.
[ 2] 权宜淑 .中药秦艽的草本学研究 [ J] .西北药学杂志 ,
1997, 12(3)∶113-114.
[ 3] 刘艳红 , 李兴从 .秦艽中的环烯醚萜甙成分 [ J] .云南
植物研究 , 1994, 16(1):85-89.
[ 4] TANRX, WOLFENDERJL, ZHANGLXetal.Acylsec-
oiridoidsandantifungalconstituentsfromGentianamacro-
phylla[ J] .Phytochemistry, 1996, 42(5):1305-1313.
[ 5] 杨永昌 .藏药志 [ M] .西宁:青海人民出版社 , 1991:9-
10.
[ 6] 霍昕 , 杨迺嘉 ,刘文炜 , 等 .秦艽挥发性成分研究 [ J] .
生物技术 , 2008, 18(1):58-59.
[ 7] 高咏莉 , 余振喜 ,林瑞超 , 等.藏药萝卜秦艽挥发油成分
的 GC-MS分析研究 [ J] .中国现代药物应用 , 2009, 3
(4):25-26.
·562· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 34卷第 4期 2011年 4月