全 文 ：　　第３６卷　第３期　 吉首大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．３６　Ｎｏ．３　　
　　２０１５年５月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｊｉｓｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｙ　２０１５　　
文章编号：１００７－２９８５（２０１５）０３－００８２－０８
多花勾儿茶中儿茶素的提取分离与ＨＰＬＣ测定
＊
姚姝凤，唐克华，刘小攀，成　江，董爱文
（吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室，湖南 张家界４２７０００）
　　摘　要：以多花勾儿茶果实、叶及自制绿茶为原料，采用水浴法提取儿茶素，研究其最佳提取工艺．提取液经石油醚脱脂
溶性色素后，采用大孔吸附树脂Ｄ９４１进行吸附分离，静态吸附和解析条件研究得出纯净水洗脱效果较好．多花勾儿茶果
实、叶及自制绿茶吸附分离的纯化液，用色谱柱：Ｂｏｓｔｏｎ　Ｇｒｅｅｎ　ＯＤＳ　ＰＣ１８（４．６×２５０ｍｍ，５μｍ），检测波长２７９ｎｍ，流动相乙
腈－０．４％磷酸（ｗ（乙腈）∶ｗ（０．４％磷酸）＝１３∶８７），柱温３５℃，流速１ｍＬ／ｍｉｎ，一次进样１０μＬ来进行高效液相色谱
（ＨＰＬＣ）检测，其结果显示，多花勾儿茶果实中儿茶素含量最低，自制绿茶中的儿茶素含量最高．
关键词：多花勾儿茶；儿茶素；大孔吸附树脂；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ２８６．０２　　　　　　　文献标志码：Ａ　 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－２９８５．２０１５．０３．０１８
多花勾儿茶（Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ　ｆｌｏｒｉｂｕｎｄａ　Ｂｒｏｎｇｎ）为鼠李科勾儿茶属植物，本属一些种类的根茎叶可供药
用．迄今为止，从该属植物中获得的天然活性成分有黄酮类、苷类、木脂素类、醌类、萜类等［１］．在武陵山区
民间用其叶及果实制茶，是良好的保健品，有“观音茶”的美誉．茶多酚（Ｔｅａ－Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ＴＰ）是茶叶中３
大功效成分之一［２］，主要由儿茶素类、黄酮醇及黄酮类等组成［３］，具有抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由
基，降低血糖、血脂、血压，以及抑制突变等药理功能［４］，儿茶素是其特征性成分［５］，具有清除人体自由基，
抗辐射［６］、预防癌症等多种功能［７］，其提取及分离纯化参考文献［９－１４］．多花勾儿茶作为武陵山区民间保
健茶，未见儿茶素等功效成分的报道，因此本文以儿茶素这一茶叶功效成分为目标，探究多花勾儿茶果实、
叶中儿茶素提取分离纯化工艺，用高效液相色谱法检测其儿茶素的含量与自制绿茶的相比较，为多花勾儿
茶合理开发提供科学依据．
１　实验材料与方法
１．１材料、试剂及仪器
１．１．１实验材料　多花勾儿茶材料采自张家界市永定区崇山，５０℃烘干，粉碎过３０目筛，密封备用．
１．１．２试剂与药品　（１）标准品．儿茶素（质量分数９７．２％）中国食品药品鉴定研究院（ＩＤ：７ＡＭＡ－ＲＵＱＳ）．
（２）试剂．纤维素果胶复合酶、浓盐酸、甲醇、无水乙醇、氢氧化钠、磷酸（以上试剂为国产分析纯）；甲醇、乙
腈（为色谱纯）．（３）大孔树脂．Ｄ９４１，ＬＸ－２８，ＬＳＡ－７，ＬＸ－１７，ＸＤＡ－８（西安蓝晓树脂科技有限公司）；Ｄ１０１，
＊ 收稿日期：２０１５－０３－２３
基金项目：湖南省科技计划资助项目（２０１３ＪＴ２０１２）；张家界市科技计划资助项目（２０１４ＺＫ０１）；生态
旅游湖南省重点实验室开放基金资助项目（ＪＤＳＴＬＹ１４０３）；林产化工工程湖南省重点实验室开放
基金资助项目（ＪＤＺ２０１４０４）
作者简介：姚姝凤（１９９１—），女，山西大同人，吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室硕士研究
生，主要从事林产化学与加工研究
通信作者：董爱文（１９６７—），男，湖南桃源人，吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室研究员，主
要从事植物活性成分研究．
ＡＢ－８（安徽三星树脂科技有限公司）
１．１．３仪器　ＡＥＧ－２２０电子分析天平ＳＨＩＭＡＤＺＵ（日本），ＫＱ－２５０Ｅ超声波清洗器（超声仪器有限公司），
ＰＥ－５２ＡＡ旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），Ｕ－３９００紫外分光光度计（日本日立），ＤＦ４２恒温干燥箱（日
本雅马拓），ＬＣ－２０Ａ高效液相色谱仪（日本岛津公司）．
１．２标准溶液与标准曲线
１．２．１儿茶素标准溶液配制　精密称取儿茶素标准品２．００ｍｇ，用乙醇－水（ｖ（乙醇）∶ｖ（水）＝１∶１，下同）
溶解定容于１００ｍＬ容量瓶中，制成质量浓度为２０ｍｇ／Ｌ标准溶液．
１．２．２儿茶素紫外吸收波长测定　取儿茶素标准溶液５ｍＬ，在８００～２００ｎｍ范围内扫描，得儿茶素的吸
收图谱，由于儿茶素在２７９ｎｍ处有最大紫外吸收，因此确定儿茶素的紫外检测波长为２７９ｎｍ．
１．２．３儿茶素紫外检测标准曲线的绘制　取２，４，６，８，１０ｍＬ质量浓度为２０ｍｇ／Ｌ的儿茶素标准溶液加乙
醇－水（１∶１）定容至２０ｍＬ，测定２７９ｎｍ的下吸光值．以紫外吸光值为纵坐标，溶液质量分数为横坐标，绘
制回归曲线．
１．２．４儿茶素ＨＰＬＣ标准曲线及检测图谱　色谱柱：Ｂｏｓｔｏｎ　Ｇｒｅｅｎ　ＯＤＳ　ＰＣ１８（４．６×２５０ｍｍ，５μｍ），检测
波长２７９ｎｍ，流动相乙腈－０．４％磷酸（ｗ（乙腈）∶ｗ（０．４％磷酸）＝１３∶８７），柱温３５℃，流速１ｍＬ／ｍｉｎ，一
次进样１０μＬ．按１．２．３节方法梯度稀释标准品液，依次进样，每个样测定３次，取峰面积的平均值，以质量
分数为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线．
１．３提取条件优化
１．３．１儿茶素提取溶剂体积分数的选择　绿茶中儿茶素用一定体积分数的乙醇水浴加热提取．称取多花
勾儿茶果实、叶０．５００ｇ（各６份）于三角瓶中，分别加入体育分数３０％，４０％，５０％，６０％，７０％，８０％，９５％
的乙醇－水溶液，液料比２　０∶１（ｍＬ／ｇ，下同），于４０℃下恒温水浴提取６０ｍｉｎ，抽滤，得果实和叶子儿茶素
提取液．
１．３．２单因素试验　准确称取多花勾儿茶果实与叶１．００ｇ，置５０ｍＬ锥形瓶中（平行３份），以乙醇体积分
数、温度、液料比和水浴时间作为考察因素．乙醇体积分数３０％，４０％，５０％，６０％，７０％，８０％，９５％，温度
３０，４０，５０，６０，７０，８０，９０℃，液料比１０∶１，１５∶１，２０∶１，２５∶１，３０∶１，３５∶１，水浴提取时间２０，４０，６０，８０，
１００，１２０ｍｉｎ．
１．３．３正交试验　结合单因素试验，以溶剂体积分数、温度、料液比、提取时间为影响因素，以儿茶素紫外
吸光值为指标，采用Ｌ１６（４４）正交试验确定各因素对儿茶素提取率的影响，优化提取工艺条件．
１．３．４供试液制备　称取多花勾儿茶果实、叶及自制绿茶各１５．００ｇ，置２５０ｍＬ具塞锥形瓶中，用正交优
化的条件（绿茶按叶优化条件提取）制备，过滤，减压浓缩，乙醇定容至５００ｍＬ，制成儿茶素供试液，避光、
冷藏．
１．４儿茶素的大孔吸附树脂分离纯化
１．４．１大孔吸附树脂预处理　使用前将７种大孔吸附树脂以体积分数９５％乙醇浸泡２４ｈ，充分溶胀后再
用蒸馏水洗涤至无白色浑浊现象，再用蒸馏水洗至无醇．然后依次用质量分数４％ＮａＯＨ，４％ＨＣｌ浸泡４
ｈ，用蒸馏水洗至中性备用．
１．４．２静态吸附及解吸　称取预处理的７种大孔树脂各０．５００ｇ（湿树脂）于三角瓶中，加入儿茶素标液４
０ｍＬ（儿茶素含量对树脂过量），密封并置空气浴摇床上振荡，温度３０℃，转速１００ｒ／ｍｉｎ，振荡２４ｈ充分
吸附后过滤，取５ｍＬ滤液测其紫外吸光值，按下式计算各树脂的吸附量及吸附率．饱和吸附的树脂滤干吸
附液后，加体积分数７０％乙醇５０ｍＬ洗脱，选出最优吸附树脂，解吸率计算方法如下：
解吸率＝ Ｃ解吸液×Ｖ解吸液（Ｃ原液－Ｃ吸附液）×Ｖ吸附液×１００％．
在充分吸附儿茶素标准溶液的Ｄ９４１等大孔树脂，分别加入５０ｍＬ纯净水，体积分数１０％，２０％，
３０％，４０％，５０％，６０％，７０％，８０％，９５％ 的乙醇溶液，在３０℃的振荡水浴锅中振荡２４ｈ，过滤，各取５ｍＬ
滤液测儿茶素的紫外吸光值，计算各树脂的解吸率．
１．４．３儿茶素的大孔吸附树脂分离与纯化　用１．３．４节制备的供试液，以１ＢＶ／ｈ的流速过Ｄ９４１大孔吸
附树脂柱，吸附床体积为５０ｍＬ．相同的１ＢＶ／ｈ流速解吸，收集洗脱液用于 ＨＰＬＣ检测．
２　结果与讨论
３８
２．１紫外可见光吸收波长的确定及标准曲线绘制
儿茶素紫外可见光吸收光谱如图１所示．由图１可知，儿茶素在２７９ｎｍ处具有最大紫外吸收峰，故选
择２　７９ｎｍ作为儿茶素提取液的紫外检测波长．计算得到回归方程ｙ＝９７．００９ｘ＋０．００５　８，该方程线性良
好（ｒ＝０．９９９　９），表明儿茶素在２～２０ｍｇ／Ｌ范围内呈良好线性关系．
图１　儿茶素紫外吸收光谱
２．２单因素试验结果
将不同体积分数提取的果实液稀释１０倍，叶子提取液稀释５０倍，取５ｍＬ溶液测定其提取液中儿茶
素的吸光值，测定结果如图２，３所示．
图２　乙醇体积分数对果实中儿茶素提取率的影响 图３　乙醇体积分数对叶子中儿茶素提取率的影响
由图２，３可知，６个乙醇体积分数５０％～６０％提取果实中儿茶素较好，乙醇体积分数５０％～７０％提
取叶子中儿茶素效果较好，故选择体积分数６０％乙醇提取材料中儿茶素．
２．２．１液料比对儿茶素提取的影响　取不同料液比的提取液，抽滤，将果实提取液稀释１０倍、叶子提取液
稀释５０倍后各取５ｍＬ，在２７９ｎｍ处测其紫外吸光值，测定结果见图４，５．
图４　液料比对果实中儿茶素提取率的影响 图５　液料比对叶子中儿茶素提取率的影响
从图４，５看出，果实在液料比达到１０∶１时提取率趋于稳定，叶子在２０∶１时提取率趋于稳定，故正
交试验选用液料比１０∶１，１５∶１，２０∶１，２５∶１作为４个因素水平．
２．２．２提取时间对儿茶素提取的影响　取不同提取时间下的提取液，抽滤，在２７９ｎｍ处测其紫外吸光值，
结果见图６，７．
４８
图６　提取时间对果实中儿茶素提取率的影响 图７　提取时间对叶子中儿茶素提取率的影响
　　由图６，７可知，果实和叶中儿茶素提取率在６０ｍｉｎ后趋于稳定，因此选用５０，６０，７０，８０ｍｉｎ作为正交
试验提取时间的４个因素水平．
２．２．３提取温度对儿茶素提取的影响　取不同温度下的提取液，抽滤，在２７９ｎｍ处测其提取液的吸光值，
结果见图８，９．
图８　提取温度对果实中儿茶素提取率的影响 图９　提取温度对叶中儿茶素提取率的影响
由图８，９可知，果实和叶中儿茶素在５０℃后提取率上升趋势有所变缓．文献［８］表明，儿茶素由于自
身的酚性羟基结构，受高温影响极易发生氧化与聚合，９０℃的高温可能改变儿茶素的结构．未见文献报道
儿茶素提取中温度用９０℃的．实验结果显示９０℃时在２７９ｎｍ处紫外吸光值骤然上升，是否改变了儿茶
素的结构有待进一步研究．因此，选用５０，６０，７０，８０℃作为正交试验的４个因素水平．
２．３正交试验
根据单因素试验所选乙醇体积分数、液料比、水浴提取时间、提取温度等４个因素水平，进行Ｌ１６（４４）
的正交实验，实验结果见表１—３．
表１　正交实验因素水平
水平 乙醇体积分数（Ａ）／％ 温度（Ｂ）／℃ 液料比（Ｃ）／（ｍＬ·ｇ－１）提取时间（Ｄ）／ｍｉｎ
１　 ３０　 ５０　 １０∶１　 ５０
２　 ４０　 ６０　 １５∶１　 ６０
３　 ５０　 ７０　 ２０∶１　 ７０
４　 ６０　 ８０　 ２５∶１　 ８０
表２　正交试验方差分析（果实）
方差来源 平方和 自由度 方差 Ｆ值 显著性（Ｓｉｇ．）
乙醇体积分数（Ａ） ８９．８９７　 ３　 ２９．９６６　 ０．６３６　 ０．６４１
温度（Ｂ） ３０９．６７７　 ３　 １０３．２２６　 ２．１９０　 ０．２６８
液料比（Ｃ） ３５８．５８６　 ３　 １１９．５２９　 ２．５３６　 ０．２３２
提取时间（Ｄ） ２６８．６１１　 ３　 ８９．５３７　 １．９００　 ０．３０６
误差（Ｅ） １４１．３８９　 ３　 ４７．５３０
总和 １　１６８．１５９　 １５
５８
表３　正交试验方差分析（叶）
方差来源 平方和 自由度 方差 Ｆ值 显著性（Ｓｉｇ．）
乙醇体积分数（Ａ） ０．００３　 ３　 ０．００１　 ０．８４０　 ０．５５５
温度（Ｂ） ０．００１　 ３　 ０．０００　 ０．３０９　 ０．８２０
料液比（Ｃ） ０．０５２　 ３　 ０．０１７　 １６．２２７　 ０．０２３
提取时间（Ｄ） ０．００４　 ３　 ０．００１　 １．１２３　 ０．４６３
误差（Ｅ） ０．００３　 ３　 ０．００１
总和 ０．０６２　 １５
　　通过正交实验因素表和方差分析发现：各因素对果实中儿茶素提取的影响由大到小依次为料液比、温
度、提取时间、乙醇体积分数；对叶中儿茶素提取率的影响由大到小依次为料液比、提取时间、乙醇体积分
数、温度，即果实中儿茶素最优条件为Ａ３Ｂ４Ｃ３Ｄ２（溶剂体积分数５０％、温度８０℃、提取时间６０ｍｉｎ和料液
比１∶２０），叶中儿茶素最优条件为Ａ３Ｂ１Ｃ４Ｄ３（溶剂体积分数５０％、温度５０℃、提取时间７０ｍｉｎ和料液比
１∶２５）．根据方差分析表明，只有料液比对叶中儿茶素提取影响显著．
２．４精密度检测
精密量取儿茶素标准溶液５ｍＬ，分置５０ｍＬ容量瓶中用乙醇－水定容．取５ｍＬ在２７９ｎｍ处测儿茶素
标液的吸光值，重复６次，计算得到相对标准偏差（ＲＳＤ）为０．０８％，结果表明精密度良好．
２．５稳定性试验
取标准溶液２ｍＬ，用体积分数５０％乙醇在４０ｍＬ容量瓶中定容，分别在０，１，２，４，６，８ｈ，取５ｍＬ在２
７９ｎｍ处测紫外吸光值，计算得到相对标准偏差（ＲＳＤ）为０．２１％，说明儿茶素在溶液中８ｈ内是稳定的．
２．６加样回收试验
称取同一批果实和叶样品０．５００ｇ各９份，其中６份分别加入１０ｍＬ儿茶素质量浓为５０ｍｇ／Ｌ的标
准溶液，另３份加入１０ｍＬ质量分数５０％乙醇溶液在８０℃下水浴提取５０ｍｉｎ，抽滤得到提取液，取５ｍＬ
在２７９ｎｍ处测紫外吸光值，计算回收率，果实的平均回收率９２．４％（ｎ＝６），相对标准偏差为０．７８％，叶
的平均回收率９１．９％（ｎ＝６），相对标准偏差为０．５６％．
２．７大孔吸附树脂分离纯化
２．７．１大孔吸附树脂筛选试验结果　从树脂筛选结
果（表４）可看出，７种大孔吸附树脂只有Ｄ９４１吸附
较好．综合考虑吸附率和解吸率，选择Ｄ９４１为本实
验分离纯化的大孔吸附树脂，它对儿茶素的吸附率
和解吸率分别为８４．４６％和４０．０９％．故选择Ｄ９４１
进行多花勾儿茶果实中儿茶素的分离纯化工作，而
使用体积分数７０％乙醇为洗脱剂时洗脱率太低，还
须进一步选择．
表４　不同大孔吸附树脂对儿茶素的纯化效果对比
树脂型号 性质 吸附率／％ 解吸率／％
ＬＸ－１７ 极性　 ３６．２３　 ２０．８７
ＬｓＡ－７ 极性　 ３９．６７　 １２．０８
ＸＤＡ－８ 中极性 １３．９８　 ８．０９
ＡＢ－８ 弱极性 ３４．５６　 １２．９０
Ｄ１０１ 非极性 ４２．８７　 ２９．７８
Ｄ９４１ 极性　 ８４．４６　 ４０．０９
ＬＸ－２８ 极性　 ４５．５７　 ２６．０７
２．７．２洗脱液体积分数的试验结果　选取不同体积分数的乙醇及纯净水对已饱和吸附儿茶素的Ｄ９４１大
孔树脂进行解吸，解吸率与乙醇体积分数的关系见图１０．由图１０可知，随着乙醇体积分数升高，解吸效果
明显减小，但当乙醇体积分数超过６０％时，解吸率有上升趋势．因此，从解吸效果及经济角度考虑，选用纯
净水进行解吸．
２．８　ＨＰＬＣ标准曲线及３种供试液儿茶素的检测
儿茶素标准溶液的 ＨＰＬＣ标准曲线见图１１，儿茶素标准溶液的 ＨＰＬＣ色谱图见图１２，叶子和果实纯
化液的 ＨＰＬＣ色谱图见图１３，１４，自制绿茶纯化液 ＨＰＬＣ色谱图见图１５．
６８
图１０　洗脱剂体积分数对提取率的影响 图１１　儿茶素ＨＰＬＣ标准曲线
图１２　儿茶素标准溶液的ＨＰＬＣ色谱图
图１３　叶子纯化液的ＨＰＬＣ色谱图
图１４　果实纯化液的ＨＰＬＣ色谱图
７８
图１５　自制绿茶纯化液的ＨＰＬＣ色谱图
３　结语
以多花勾儿茶果、叶及同山自采自制的绿茶为材料，通过单因素及正交试验探索提取多花勾儿茶果实
与叶中儿茶素的最佳工艺．结果发现，果实儿茶素提取最佳工艺参数是提取溶剂体积分数５０％、温度
８０℃、提取时间６０ｍｉｎ和料液比１∶２０；叶的儿茶素提取最佳工艺参数是提取溶剂体积分数为５０％，温度
５０℃、提取时间７０ｍｉｎ和料液比１∶２５．从７种大孔吸附树脂中筛选出Ｄ９４１树脂对儿茶素提取液进行分
离纯化，通过静态吸附和解析研究得出纯净水为最适洗脱液．用 ＨＰＬＣ分别对儿茶素的标准液、果实、叶
及自制绿茶经纯化的儿茶素制备液进行检测，发现多花勾儿茶的叶片儿茶素含量明显高于果实的，但低于
自制绿茶的．儿茶素作为茶多酚的主体成分，是茶的３大功效成分之一，多花勾儿茶果实和叶中均已检测
出来且含量适中，为武陵山区民间将其制作成“观音茶”提供科学依据，有必要对其果实、叶中其有效成分
做进一步分析与检测．
参考文献：
［１］陈　立，董俊兴．勾儿茶属植物化学成分及其生物活性研究进展［Ｊ］．中草药，２００６，３７（４）：６２７－６３０．
［２］原征彦．茶多酚类的功能和食品中应用［Ｊ］．新食品工业，１９９０，３２（２）：３３－３８．
［３］杨贤强，曹明富，沈生荣，等．茶多酚生物活性的研究［Ｊ］．茶叶科学，１９９３，１３（１）：５１－５９．
［４］王　杰．普洱茶提取茶多酚及其脱咖啡碱的研究［Ｄ］．广州：华南理工大学，２０１２．
［５］朱　斌，陈晓光，宋　航，等．茶多酚制备高纯度ＥＧＣＧ的工艺研究［Ｊ］．食品研究与开发，２００９，３０（４）：７－９．
［６］王　慧，蒋莲芬，唐　超，等．高山绿茶茶多酚提取工艺研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１２，４０（７）：４　００７－４　００９．
［７］陈宗懋．茶多酚类化合物抗癌的生物化学和分子生物学基础［Ｊ］．茶叶科学，２００３，２３（２）：８３－９３．
［８］刘丽霞．茶叶中６种主要儿茶素的高效液相色谱方法建立及应用［Ｄ］．南京：南京理工大学，２０１３．
［９］ＤＯＮＧ　Ａｉｗｅｎ，ＺＨＯＵ　Ｑｉ，ＢＵ　Ｘｉａｏｙｉｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｆｏｒ　Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｐｉｇｅｎｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｖｉｏｌａ　Ｙｅｄｏｅｎｓｉｓ　ｏｎ
ＬＳＡ－１０Ｒｅｓｉｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，２０１４，６（１）：６０－６６．
［１０］干　宁，李榕生，陈亚东，等．分子印迹固相萃取和电喷雾质谱法联用测定茶叶中四种儿茶素［Ｊ］．茶叶科学，２００９，２
９（３）：２３１－２３５．
［１１］沈晓玲，龚正礼．大孔树脂在茶叶功能成分分离中的应用进展［Ｊ］．食品工业科技，２０１３，３４（１６）：３９６－３９９．
［１２］张　盛，刘仲华，黄建安，等．吸附树脂法制备高纯儿茶素的研究［Ｊ］．茶叶科学，２００２，２２（２）：１２５－１３０．
［１３］徐仲溪，刘仲华，王坤波，等．绿茶多酚和儿茶素提取与原料品质关系的研究［Ｊ］．湖南农业大学学报：自然科学版，
２００４，３０（３）：２５７－２６０．
［１４］贾智若，李　兵，李耀华，等．反相高效液相色谱法测定杜仲中儿茶素的含量［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１３，１９（５）：
１１７－１１９．
８８
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ｏｆ　ｗａｔｅｒｂａｔｈ．Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｆａｔ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｉｇｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｒｅｍｏｖｅｄ　ｂｙ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ　ｆｒｏｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅ
ｃａｔｅｃｈｉｎｓ　ｗａｓ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｓｔａｔｉｃ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｔｅｓｔｓ　ｏｆ
ｃａｔｅｃｈｉｎ　ｗｉｔｈ　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ｄ９４１ｗａｓ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｒｅｓｉｎ　ｆｏｒ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｕｒｅ
ｗａｔｅｒ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｌｕａｎｔ．Ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｌｉｑｕｉｄ　ｏｆ　ｆｒｕｉｔ，ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｈｏｍｅ－ｍａｄｅ　ｇｒｅｅｎ　ｔｅａ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅ－
ｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｔｈｅ　ｃａｔｅｃｈｉｎｓ　ｗａｓ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｏｎ　ＰＣ１８ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ（４．６×２５０ｍｍ，５μｍ）ａｔ
３５℃，ｗｉｔｈ　ｎｉｔｒｉｌｅ－０．４％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ（１３∶８７）ａｓ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１ｍＬ／ｍｉｎ，ａｎｄ　ｄｅｔｅｃ－
ｔｅｄ　ａｔ　ｔｈｅ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　２７９ｎｍ （ＵＶ　ｓｃａｎ）．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｃａｔｅｃｈｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｆｒｕｉｔ　ｗａｓ
ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｍａｎ－ｍａｄｅ　ｇｒｅｅｎ　ｔｅａ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｂｏｔｈ　ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔ
ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ　ｆｌｏｒｉｂｕｎｄａ；ｃａｔｅｃｈｉｎ；ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ；ＨＰＬＣ （责任编辑　陈炳权）
（上接第４４页）
Ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ＤＣ　Ｄｒｉｖｅ　Ｍｉｃｒｏｍｏｕｓｅ　Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＳＴＭ３２Ｆ１０３
ＺＨＡＮ　Ｊｉｅ，ＬＩＵ　Ｘｕｅｂｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｈａｏ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｃｓ　ａｎｄ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｈｕｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉａｎｇｔａｎ　４１１２０１，Ｈｕｎａｎ　Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｍｉｃｒｏ－ｍｏｕｓｅ　ｉｓ　ａ　ｍｉｃｒｏｐｒｏｃｅｓｓｏｒ　ｃｏｎｔｒｏｌｅｄ　ｍｉｃｒｏ　ｒｏｂｏｔ　ｔｈａｔ　ｉｎｔｅｇｒａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ
ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎ，ｄｙｎａｍｉｃ　ｄｅｃｉｓｉｏｎ－ｍａｋｉｎｇ　ａｎｄ　ｐｌａｎｎｉｎｇ，ｂｅｈａｖｉｏｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ．
Ｔｈｅ　ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏ－ｍｏｕｓｅ　ｕｓｅｓ　ａ　ｓｔｅｐｐｉｎｇ　ｍｏｔｏｒ　ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｅａｓｙ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｂｕｔ　ｈａｓ　ｌｏｗ　ｒｏｔａｔｅ
ｓｐｅｅｄ．Ｔｈｅ　ｐａｐｅｒ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｓ　ｔｈｅ　ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ＤＣ－ｄｒｉｖｅ　ｍｉｃｒｏ－ｍｏｕｓｅ　ｗｉｔｈ　ｌｏｗ　ｃｏｓｔ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ　ｗｈｉｃｈ
ｆｕｌｙ　ｃｏｎｓｉｄｅｒｓ　ｔｈｅ　ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ．Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｔｅｓｔｓ　ｓｈｏｗｓ　ｔｈａｔ　ｔｈｉｓ　ｓｙｓｔｅｍ　ｃａｎ　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｔｈｅ
ｔａｓｋ　ｏｆ　ｍａｚｅ　ｃｏｎｔｅｓｔ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｍｉｃｒｏｍｏｕｓｅ；ｄｒｉｖｅ；ＤＣ　ｍｏｔｏｒ
（责任编辑　陈炳权）
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