免费文献传递   相关文献

闽浙马尾杉内生真菌分离纯化及产石杉碱甲菌株LC-MS/MS筛选



全 文 :即停止输液、口服盐酸异丙嗪,约 4h后症状开始缓解,第二天
完全消失。
分析与建议:注射用藻酸双酯钠说明书〔用法与用量〕:
静脉滴注。成人,按体重 1 次 1 ~ 3mg·kg -1,临用前溶于 250
~ 500mL 生理盐水中,缓慢滴注(滴速不大于 0. 75mg /(kg·
h) ,每日 1 次,10 ~ 14 天为 1 个疗程。每日最大用量不能超
过 150mg。本例患者用药剂量超说明,藻酸双酯钠属类肝素
药,用药过量易产生不良反应,而此类不良反应也容易引发医
疗纠纷。为保障患者用药安全,应按说明书剂量及滴注速度
要求合理用药。
2. 2. 7 无指征用药:案例:患者男性、52 岁,原患疾病:左侧
桥小脑角区占位性病变,静脉滴注中长链脂肪乳(C8-24)注
射液 250mL过程及结束后,出现全身发热、燥热难耐,卧水泥
地方可稍缓解,症状持续至 5 ~ 6h好转。
分析与建议:该患者有尿毒症、丙肝病史。生化检查结果
示:患者用药前甘油三酯 0. 54mmol · L -1、总胆固醇
6. 05mmol·L -1↑、高密度脂蛋白 1. 85mmol·L -1↑、低密度
脂蛋白 3. 63mmol·L -1↑。患者用药后甘油三酯 1. 75mmol
·L -1↑、总胆固醇 4. 89mmol·L -1、高密度脂蛋白 0. 89mmol
·L -1、低密度脂蛋白 2. 90mmol·L -1。以上说明该患者出现
全身燥热及甘油三酯升高与静滴中长链脂肪乳(C8-24)注射
液相关。值得一提的是,该患者静滴中长链脂肪乳(C8-24)
注射液前一组输液为 5%葡萄糖 250mL +注射用门冬氨酸鸟
氨酸 10g +氯化钾注射液 5mL,其中所含的氯化钾为电解质
可能破坏乳剂而使凝聚脂肪进入血液。因此,临床上如果上
述两药需同时应用,应避免前后静滴,必要时宜冲管,以确保
用药安全。另一方面该患者无使用中长链脂肪乳(C8-24)注
射液指征,脂肪乳属全胃肠外营养,美国医疗安全协会
(ISMP)将全胃肠外营养列入高危药品目录〔3〕。所以使用脂
肪乳,必须有明确用药指征,用药时有生化监测,控制滴注速
度。避免与电解质溶液配伍。
3 小结
不合理使用药物,不仅加大药物的使用风险。也可能影
响药物的治疗作用,为了控制与不合理用药相关的不该发生
的不良反应,建议国家出台严格安全用药管理制度,对于可能
引起危重不良反应的药品,或联合用药可能引发严重不良反
应的情况等,要求相关医务人员必须接受药物使用知识与技
能的培训与考核,保障正确、合理使用上述药品,或选择合理
的联合用药方案;从而使药物治疗的疗效最大化,风险最小
化;保障患者用药安全。
参考文献
〔1〕李玮,张俊,乔燕舞,等 . 高浓度胺碘酮静脉泵入与静脉炎关系的
临床研究〔J〕. 心血管康复医学杂志,2004,13(6) :594-595.
〔2〕王思平 . 盐酸胺碘酮注射液与 4 种输液的配伍稳定性考察〔J〕.
中国药师,2006,9(12) :1130-1131.
〔3〕Institute for Safe Medication Practices. ISMPs List of High-Alert Medi-
cations〔EB /OL〕.〔2012-12-01〕. http:/ /www. ismp. org /Tools /hi-
ghalertmedications. pdf.
·实验研究·
闽浙马尾杉内生真菌分离纯化及产石杉碱甲菌株 LC-MS /MS筛选
范瑜珊(福建生物工程职业技术学院 福州 350002)
摘要:目的 通过组织块分离法从闽浙马尾杉中分离内生真菌,利用 LC-MS /MS筛选产石杉碱甲的内生真菌。方法 将采集到的新鲜植物闽
浙马尾杉进行表面灭菌消毒及将植物的根际土壤稀释,接种于含有 3%的链霉素的 PDA平板培养基上,挑取尖端菌丝进行分离、纯化和保藏; 通
过石杉碱甲菌株 LC-MS /MS法对分离到的内生真菌进行快速的筛选,筛选出产石杉碱甲的内生真菌。结论 通过组织块及稀释平板法从闽浙
马尾杉植物中分离到 306 株内生真菌,其中根( G) 8 株,茎( J) 65 株,叶( Y) 173 株,茎尖( M) 60 株。通过 LC-MS /MS筛选法共筛选到产石杉碱甲
菌株 15 株,其中根( G) 0 株,茎( J) 2 株,叶( Y) 11 株,茎尖( M) 2 株。
关键词:闽浙马尾杉;石杉碱甲; 内生真菌; LC-MS /MS筛选
中图分类号:R969. 4 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2014)-10-0914-0141-05
作者简介:范瑜珊,女(1986. 10 -)。毕业于福建中医学院,助理实验
师,从事中药教学与实验。联系电话:13960820498,E-mail:113175327
@ qq. com
石杉碱甲为我国科学家刘嘉森〔1〕于 1986 年从植物蛇足
石杉中分离到的一种新型石松类生物碱有效单体,具有较强
的乙酰胆碱酯酶抑制作用。在随后的大量药理研究〔2〕中发
现石杉碱甲具有易通过血脑屏障,有效时间长,胃肠道吸收良
好,安全指数大,稳定性好,未见致畸、诱变作用;兼具有中枢
及外周治疗作用;适用于良性记忆障碍及各型痴呆、记忆认知
功能及情绪行为障碍,也可用于重症肌无力。与 FDA批准的
同类药物相比,石杉碱甲的化学结构独特,极高地选择性抑制
脑内乙酰胆碱脂酶,可增强脑内胆碱能神经元的功能,优于其
他同类药物如加兰他敏、多奈哌齐和他克林等。近 20 多年
·141·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 10 2014
来,由于石杉碱甲对老年痴呆症的高效低毒等特点,以及又恰
逢人类社会逐渐步入老龄化的背景,蛇足石杉一跃成为重要
的提取原料。但是,蛇足石杉属于蕨类植物,该类植物生长缓
慢,野生状态下蛇足石杉主要以孢子繁殖为主,孢子萌发周期
长,萌发后属地下生配子体,需 6 ~ 15 年才能成熟,而且该植
物生长条件苛刻,只有在特定的条件下才能生长。因此极大
地限制了蛇足石杉野生资源的再生,资源的短缺引起该药材
资源价格暴涨。近年来中科院上海药物所又成功以石杉碱甲
为母核开发出了希普林,2006 年在欧洲完成了 3 期临床研
究,被评价为目前抗老年痴呆症疗效最好药物,有望两年内上
市。希普林一旦上市,势必更为加剧蛇足石杉资源危机,使蛇
足石杉成为石杉碱甲制剂和希普林制剂产业链的最大瓶颈,
将严重制约希普林全方位造福千千万万的全球老年痴呆患
者,资源量严重短缺的问题令人担忧。同时,由于石杉碱甲的
价格高居不下,造成蛇足石杉资源大量开发,对于本来就稀缺
的蛇足石杉植物处于频临灭绝的地步,使得石杉碱甲的需求
与蛇足石杉资源短缺问题成为不可调和的矛盾。
因而,寻找其他资源或途径来生产石杉碱甲就显得极其
的重要和有意义。天然石杉碱甲主要来源于石杉科植物,一
般认为石杉科石杉属植物中蛇足石杉石杉碱甲含量最高,但
最近研究〔3〕发现,某些石杉科马尾杉属植物中石杉碱甲的含
量也很高均达到 0. 2%左右,如柳杉叶马尾杉 P. crutomerianus
(Maxim.)Ching中石杉碱甲(0. 1961%)远高于石杉属植物。
植物内生真菌是寄生于健康植物组织内而不产生外在感
染症状,并与宿主植物协同进化的一类微生物。内生真菌的
代谢产物有很多是应用前景广阔的新型生物活性产物;自从
1993 年 Strobel〔4〕等从短叶红豆杉中分离出一株能够合成抗
癌成分紫杉醇的内生真菌以来,人们希望通过利用内生真菌
发酵合成药用成分。目前已有报道,从蛇足石杉植物中分离
到产石杉碱甲及其类似物的内生真菌,如专利 CN
101195804A〔5〕(黎万奎,专利申请号:200610119149. 7,内生枝
顶孢 霉)、CN101240304A〔6〕 (吴 东 才,专 利 申 请 号:
200710003519. 5,枝孢霉菌)、CN101265451A〔7〕(张晶等,专利
申请号:200710086540. 6,木霉菌)、CN 101942393 A〔8〕(朱笃
等,专利申请号:200910186852. 3 竹黄菌)等;以上所有研究
都表明,可以利用蛇足石杉内生真菌发酵生产石杉碱甲。但
目前所分离到的产石杉碱甲菌株,都因产量太低,只有 ng级,
远远达不到 mg级,而且存在菌种产量退化等问题,以至于无
法实现大规模生产石杉碱甲,使得石杉碱甲的短缺问题仍然
无法解决。
到目前为止,仍然未发现关于从石杉科植物分离内生真
菌的文献,因此选择从石杉科植物闽浙马尾杉中分离内生真
菌,通过 LC-MS /MS筛选,获得产石杉碱甲菌株,为微生物发
酵生产石杉碱甲奠定基础,也为从其他石杉科植物寻找产石
杉碱甲菌株提供思路。
1 闽浙马尾杉内生真菌的分离纯化与菌种保藏
1. 1 实验材料
1. 1. 1 植物样品:实验所用的闽浙马尾杉成年植株采自福建
龙岩市连城县冠豸山,经福建中医药大学杨成梓教授鉴定。
1. 1. 2 仪器和试剂:①仪器:超高效液相色谱串联三重四极
杆质谱仪(美国 waters 公司) ;酶标仪(美国 Bio-Rad 公司
ELX808) ;超纯水机(美国 Millipore 公司 Milli-Q) ;超净工作
台(北京东联哈尔仪器制造有限公司 BSC-1360ⅡA2) ;酶菌
培养箱(上海精宏实验设备有限公司 MJP-250) ;高速冷冻离
心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司 H205OR-1) ;电子
分析天平(上海精密科学仪器有限公司 VP202) ;循环水式多
用真空泵(郑州长城科工员有限公司 SHB-Ⅲ) ;低温冷却液
循环泵(郑州长城科工员有限公司 DLSB-5 /20) ;超声波清洗
器(昆山市超声仪器有限公司 RQ-500E) ;自动蒸汽灭菌锅
(北京发恩科贸有限公司 D-1) ;电热恒温鼓风干燥箱(上海
精宏实验设备有限公司 DHG-9240) ;微波炉(佛山市顺德区
美的微波电器制造有限公司 EG720EAU-SS) ;旋转蒸发仪(上
海亚荣生化仪器厂 RE-3000) ;恒温摇瓶柜(太仓实验设备厂
HYG-A)。②试剂:葡萄糖(AR) (天津市福晨化学试剂厂
20110412) ;95% 乙醇(AR) (上海联试化工试剂有限公司
20110120) ;氯化汞(AR) (姜堰市环球试剂厂 2011108) ;液体
石蜡(CP) (广东光华化学有限公司 20101014) ;琼脂(福建泉
州市泉巷化工厂) ;石杉碱甲 > 99%(万邦药业有限公司) ;甲
酸(AR) (天津市科惠欧化学试剂开发中心 20090912) ;二氯
甲烷(AR) (天津市福晨化学试剂厂 20130412) ;酒石酸(AR)
(天津市福晨化学试剂厂 20121027) ;无水乙醇(上海联试化
工试剂有限公司 20110120)。
1. 1. 3 培养基:马铃薯葡萄糖培养基(PDA)配方:马铃薯
20%,葡萄糖 2%,琼脂 1. 5 ~ 2%,pH自然〔9〕。
平板培养基:称取 200g 马铃薯,洗净去皮切碎,加水适
量,煮沸 30min 至马铃薯煮烂,纱布过滤,再加 20g 葡萄糖和
13g琼脂,补水至 1000mL,充分溶解后分装于 500mL三角瓶,
与包好的培养皿等需要高温灭菌的器材一并于 121℃下灭菌
20min。倒平板待用。
纯化平板培养基:同平板 PDA培养基。
斜面保存培养基:马铃薯过滤液与葡萄糖混匀加入琼脂
后,微波炉中加热融化,定容后分装于试管中,121℃灭菌
20min,摆斜面待用。
马铃薯液体培养基(PDL) :马铃薯 200g、葡萄糖 20g、蒸
馏水 1000mL、pH自然。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 内生真菌的分离与纯化:①闽浙马尾杉内生真菌的分
离纯化:依照石纬等〔10〕的分离方法分离闽浙马尾杉内生真
菌。对采来的新鲜闽浙马尾杉活体植物用自来水冲洗干净,
浸入 75%乙醇(5min) ,用无菌水冲洗 5 次;用无菌滤纸吸干
后再将其浸入 0. 1%升汞(约 1min) ,再次用无菌水冲洗,无菌
滤纸吸干,最后用 75%乙醇浸泡 30s,无菌滤纸吸干。用灭菌
后的剪刀将不同植物组织材料(即根,茎,叶)分割成约 5mm
长的大小。然后每种样品分别转入含有 3%链霉素的 PDA平
板上,用于内生真菌的分离。于 28℃恒温培养箱中培养数
天。定期观察内生真菌菌落形成情况,3 ~ 5d 后观察到样品
边缘部分有菌丝长出,挑取尖端菌丝转接于新鲜 PDA 平板,
纯化 2 ~ 3 次,将纯化到的纯菌株进行菌种保藏。
·241·
海峡药学 2014 年 第 26 卷 第 10 期
1. 2. 2 菌种保藏:内生真菌由于生存在宿主体内,环境较为
特殊,某些内生真菌在离开宿主环境后很容易出现退化或者
死亡,因此必须尽快保藏。目前我们采取以下 3 种方法进行
保藏菌种〔11,12〕。①试管斜面保藏法:选择 18mm × 180mm 的
试管,每管装 10mL PDA 固体培养基,常规灭菌(121℃,
20min)制成斜面。把要保藏的内生真菌菌种接种于斜面上,
编号,置 28℃温箱培养 5 ~ 10d。待菌丝覆盖整个斜面后,放
入 4℃冷藏柜中保藏。用于常用菌种的保存,以方便转接,但
保藏时间较短,一般仅保藏半年。②液体石蜡常温保藏法:用
灭菌的移液枪向无菌的 2mL 冷冻管中加入熔化并冷却至
60℃的 PDA培养基 1mL,制成斜面,把要保藏的内生真菌菌
种接种于斜面上,编号,置 28℃恒温箱培养 5 ~ 10d。待菌丝
覆盖整个斜面后,加入 1mL 无菌石蜡并拧紧管盖,置于阴暗
干燥处室温保藏。用于菌株的长期保存,一般可保藏 3 年。
③冷冻保藏法:用灭菌的移液枪向无菌的 1mL冷冻管中加入
0. 8mL的 20%无菌甘油水。菌株在 PDA 上培养 5 ~ 10d,挑
取少量孢子(不产孢子的挑取一块带培养基的菌块)转入含
20%无菌甘油水的冷冻管中并编号。先将其在 4℃冷藏柜中
放置 2h,再转至 - 20℃冷冻柜保存。用于菌种的长期保存,
一般可保藏 5 年以上。
2 发酵液的制备
2. 1 种子液的制备 用接种针将上述分离到的菌株挑取少
量尖端菌丝到含有 50mL PDL的 250mL摇瓶中,以 28℃,180r
·min -1,发酵 36h。
将上述制备好的种子培养液接种于含有 100mL 上述培
养基的 250mL摇瓶中,以 28℃,140r·min -1发酵 10d,每株菌
发酵五瓶。在发酵好的培养液中加入 50mL 酒石酸摇匀,静
置过夜,超声两次每次各 40min,过滤。合并滤液,加入等体
积的二氯甲烷萃取 3 次,合并有机相,减压浓缩至干,用 10mL
无水甲醇分 3 次加入回收瓶中,溶解,取出吹干,加甲醇
200μL,12000r·min -1离心 10min,取上清液,用于 LC-MS /MS
筛选。
2. 2 LC-MS /MS筛选条件
2. 2. 1 色谱条件:色谱柱:XTerraMS C18(2. 1 × 50mm,5μm)
流动相:甲醇︰ 0. 1%甲酸(30∶ 70) ;流速:0. 15mL·min -1;柱
温:30℃;进样量:5μL;
2. 2. 2 质谱条件:离子源:ESI;检测方式:正离子检测;采集
方式:MS MRM;检测对象:石杉碱甲,m/z(243. 2→209. 1) ;毛
细管电压:3. 0kV,锥孔电压:35V,离子源温度:110℃,脱溶剂
温度:350℃,脱溶剂气流量:654L /hr。
3 结果
3. 1 内生真菌的初步分离与纯化 将采至福建龙岩市连城
县冠豸山的蛇足石杉的根,茎,叶等样品经灭菌消毒后,接种
在含有 3%链霉素的 PDA 平板上,培养 3 ~ 5d 后将平板在超
净工作台内观察,挑取新长出内生真菌的尖端,接种在新鲜的
PDA培养基平板上继续纯化,继续观察,挑取新长出的内生
真菌。经过 2 ~ 3 次纯化培养,最后共分离到 306 株内生真
菌,种类较多,形态多样。将这些分离得到的内生真菌进行命
名,由于是从闽浙马尾杉中分离出的内生真菌,则以的拼音首
字母 M作为前缀,而根、茎、叶、茎尖则分别为 G、J、Y、M,其中
根(G)8 株,茎(J)65 株,叶(Y)173 株,茎尖(M)60 株,总共
分离纯化得到 306 株(见图 1 部分内生真菌菌落形态)。
图 1 部分内生真菌菌落形态
3. 2 LC-MS /MS筛选 利用 LC-MS /MS 筛选方法对上述分
离到的 306 株内生真菌发酵粗提物样品进行分析。其中检测
到 15 株内生真菌发酵粗提物样品的 LC-MS /MS 色谱图中有
相应保留时间的色谱峰,其标号分别为:MY135、MY177、
MY183、MY237、MY269、MY311、MY337、MY351、MY352、
MY376、MY377、MJ259、MJ441、M57、M129(见表 1)。
表 1 产石杉碱甲菌株标号
Y(叶) J(茎) M(茎尖) G(根)
MY135 MY337 MJ259 M57 0
MY177 MY351 MJ441 M129
MY183 MY352 MY237 MY376
MY269 MY377 MY311
分别在其发酵粗提物样品中加入一定量石杉碱甲标准
品,发现发酵粗提物样品和发酵粗提物 +石杉碱甲标准品样
品的 LC-MS /MS色谱图中具有相同保留时间的色谱峰,同时
在发酵粗提物 +石杉碱甲标准品样品的 LC-MS /MS色谱图中
相应保留时间的色谱峰峰面积有增加,说明在以上 15 株闽浙
马尾杉发酵粗提物样品中含有石杉碱甲。部分菌株发酵粗提
物样品与发酵物 +石杉碱甲标准品样品的 LC-MS /MS色谱图
(见图 2 ~ 7)。
图 2 产石杉碱甲内生真菌 MJ441 发酵物 LC-MS /MS分析
·341·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 10 2014
图 3 产石杉碱甲内生真菌 MJ441 发酵物 +
石杉碱甲标准品 LC-MS /MS分析
图 4 产石杉碱甲内生真菌 M183 发酵物
LC-MS /MS分析
图 5 产石杉碱甲内生真菌 MY183 +石杉碱甲标准品
发酵物 LC-MS /MS分析
4 结论及讨论
通过对新鲜植物闽浙马尾杉的根、茎、叶和茎尖各部分的
内生真菌培养,初步分离纯化得到 306 株内生真菌菌株,根、
茎、叶、茎尖则分别为 G、J、Y、M,其中根(G)8 株,茎(J)65
株,叶(Y)173 株,茎尖(M)60 株,其中通过 LC-MS /MS 筛选
得到总共 15 株产石杉碱甲的菌株,其中根(G)0 株,茎(J)2
株,叶(Y)11 株,茎尖(M)2 株。
图 6 产石杉碱甲内生真菌 M129 发酵物
LC-MS /MS分析
图 7 产石杉碱甲内生真菌 M129 发酵物 +
石杉碱甲标准品 LC-MS /MS分析
石杉碱甲的野生产量极低,但是随着人类社会的发展进
步,对石杉碱甲的需求量会越来越大,通过高新技术合成的石
杉碱甲成本高,产量低,不可能用于大批量生产,所以现今很
多的专家学者从分离植物的内生真菌的方法,找出产石杉碱
甲的菌株,然后再通过菌株的大量培养希望能产出大量的石
杉碱甲,降低成本,运用于大批量生产,为人类健康做出贡献。
参考文献
〔1〕刘嘉森,俞超美,周有作等 . 石杉碱甲和石杉碱乙的化学研究〔J〕
. 化学学报,1986,(10).
〔2〕杨跃新,田海林,时锡金等 . 石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶活性的抑
制作用〔J〕. 工业卫生与职业病,2008,(1).
〔3〕杨明,姚志伟,赵毅民 . HPLC法测定石杉科植物中石杉碱甲(Hu-
perzine A)的含量〔J〕. 军事医学科学院院刊,2000,2(24) :123.
〔4〕Herbert J. Strobel. Pentose utilization and transport by the ruminal bac-
terium Prevotella ruminicola〔J〕. 1993,(5).
〔5〕黎万奎,胡之璧,周吉燕,王峥涛 . 蛇足石杉内生真菌及其应用
〔Z〕. CN101195804,2008.
〔6〕吴东才 . 一种利用真菌生产石杉碱甲的方法〔Z〕. CN101240304:,
2008.
〔7〕张晶,郭丽燕 . 蛇足石杉(Huperzia Serrata (Thunb. )Trev)的一种
内生真菌〔Z〕. CN101265451,2008.
〔8〕朱笃,张志斌,曾庆桂,颜明,王吉祥 . 一株产石杉碱甲的蛇足石
·441·
海峡药学 2014 年 第 26 卷 第 10 期
杉内生真菌竹黄菌株〔Z〕. CN101942393A,2011.
〔9〕刘国生 . 微生物学实验技术〔M〕. 北京:科学出版社,2007:72-
74.
〔10〕石玮,罗建平,等 . 千层塔内生真菌分离鉴定的初步研究〔J〕. 中
草药,2005,36(002) :281-283.
〔11〕阮吉清 . 浅谈微生物检验室中菌种保存与管理〔J〕. 现代医药卫
生,2006,22(2) :256.
〔12〕陈秀英 . 菌种保存方法的比较〔J〕. 中国卫生检验杂志,2002,12
(2) :231.
·教学探讨·
高职高专药学类专业分析化学实验教学改革与实践
王瑞娜,郭幼红* (泉州医学高等专科学校药学系 泉州 362000)
摘要:实验教学改革是高职高专教学改革的重要内容,分析化学实验教学改革应根据其教学特点,通过提升师资素质,严格实验要求,改革教学
策略,整合教学内容,完善实验评价考核体系等方面对分析化学实验进行改革,使学生能够加深对分析化学理论课程有关内容的理解,掌握规范
的实验操作技能,有效地实现实验技能和职业素质的全面提高。
关键词:分析化学实验;教学改革;能力培养
中图分类号:R95 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2014)-10-0786-0145-02
作者简介:王瑞娜,女。毕业于福州大学化学化工学院,助教、药师,药
物分析检验技术、分析化学。电话:15880866737
通讯作者:郭幼红,女。毕业于福建师范大学。副教授。Email:
93864575@ qq. com
高职高专以培养面向生产、建设、管理、服务第一线需要
的具有良好职业素质的技能型应用型人才为目标。而事实
上,高职院校毕业生能否顺利就业并取得成绩,在很大程度上
取决于其本人的职业素质〔1〕。实验是培养技术型,应用型人
才的重要途径,在培养学生理论联系实际、创新精神和实践能
力方面有着不可替代的作用。分析化学是药学系所有专业学
生的重要的专业基础课程,实验课时占据整门课时的三分之
一或一半课时,通过实验课,可以使学生加深对分析化学基础
理论、基础知识的理解,正确和熟练掌握分析化学实验技能和
基本操作,提高观察、分析和解决问题的能力,培养学生严谨
的工作作风和实事求是的科学态度,树立严格的“量”的概
念,为学习药物分析等后续课程和未来的实际工作打下良好
基础。我校是医学类国家示范性建设高职院校,现对我校分
析化学实验课程的教学改革综述如下。
1 优化师资队伍,提升师资素质
首先转变教师思想观念,彻底根除重理论轻实践重技能
轻素质的观念。分析化是一门技术性要求很强的学科,而目
前很多高校忽视学生的动手能力,“重理论、轻实践”,“重结
果、轻过程”的现现象普遍存在〔2〕。教师要充分认识到实验
实训等实践性教学环节在培养学生职业素质、专业技能、创新
能力等方面有着不可替代的意义。因此应积极改革传统教育
模式下实践性教学处于从属地位的现状〔3〕,加强分析化学师
资力量培训和指导,积极创造条件,让实验教师有机会参加相
关的学习和培训,甚至有机会深入职业岗位工作第一线进行
锻炼。
2 严格实验要求,增强过程监督
专业基础课程分析化学实验操作是否规范直接影响后期
专业课药物分析实验的进行。分析化学课程中的的化学分析
实验以容量分析为重,我们就强调学生要规范分析化学实验
基本操作,比如移液管的用法,滴定管的用法。在第一次滴定
分析基本操作练习实验课上,就必须反复示范移液管,滴定管
的洗涤方法、使用方法,并且反复纠正学生操作中的不规范之
处。从基础实验加以规范,培养学生的基本操作,养成良好的
操作习惯。并且必须强调学生实验过程中指导教师一定要进
行巡视和督查,及时发现不规范过程及时纠正,也要引导学生
之间相互帮助、相互监督、相互进步。
3 改革教学策略,整合教学内容
3. 1 首先侧重对学生进行基本实验技能培养的内容。在组
织实验教学内容时,将定量分析化学实验的基木知识、基木操
作和基木实验作为一个很重要基础部分来抓〔4〕。包括向学
生介绍分析化学实验室中实验室用水的规格、制备与检验,玻
璃器皿的洗涤,化学试剂的规格,标准溶液及其配制方法,实
验室安全知识,实验记录和数据处理等。
3. 2 对分析化学实验来说滴定分析基本操作练习非常重要,
包括滴定管、移液管及容量瓶的洗涤方法和操作技术,滴定操
作规范、滴定终点的判断等。很多老师由于实验课时紧张,把
滴定操作练习实验省略,直接去做滴定分析实验、滴定液标定
实验。这样的安排势必造成学生只注重结果而忽略了规范的
操作过程。
3. 3 注重化学分析实验和仪器分析实验的连贯性和一致性。
必须强调仪器分析实验只是借助于仪器完成分析过程的某些
·541·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 10 2014