全 文 ：蛇足石杉 Huperzia serrata（Thumb.）Trey.及闽
浙马尾杉 P.minchegensis Ching 同属于石杉科植
物，其含有的石杉碱甲（Huperzine A），在临床上用
于治疗记忆障碍及老年性痴呆 ［1-2 ］。 我们采用
HPLC 法测定蛇足石杉及闽浙马尾杉不同部位的
石杉碱甲含量， 为石杉碱甲药物资源的开发利用
提供实验依据。
1 仪器与材料
LC-20A 高效液相色谱仪、SPD-M20A 二极管
列阵检测器、LC-solution 色谱工作站（日本岛津公
司）；十万分之一电子天平（美国奥豪斯仪器有限
公司）。
石杉碱甲 （上海皇精科技有限公司，纯度≥
98%）；甲醇 （德国默克公司 ，色谱纯 ）；水为超纯
水；其它试剂为分析纯。
蛇足石杉、闽浙马尾杉 2012 年 7 月采自福建
省连城县冠豸山， 经福建中医药大学药学院中药
鉴定教研室杨成梓副教授鉴定为蛇足石杉 Hu-
perzia serrata （Thumb.）Trey. 及 闽 浙 马 尾 杉 P.
minchegensis Ching。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 ：UItimate XB -C18 （4.6
mm×150 mm，5 μm）； 流动相： 甲醇-0.08 mol ／ L
醋酸铵溶液（30∶70）；流速：0.8 mL ／min；检测波长：
309 nm；柱温：30℃；进样量：20 μL。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取石杉碱甲对
照品 1.01 mg， 置于 10 mL 瓶中加 2%酒石酸使之
溶解，稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，内含石杉碱
甲 0.101 mg ／mL。
2.3 供试品溶液的制备 取蛇足石杉及闽浙马
尾杉新鲜植株，按根、茎、叶分离并洗净，50℃烘干
至恒重，精密称取 0.2 g，加入 2%的酒石酸 5 mL，
浸泡过夜，超声提取 1 h，离心取上清液，残渣再加
入 2%的酒石酸 5 mL，超声提取 1 h，离心，合并 2
次滤液， 取滤液 1 mL，17 000 r ／min 离心 15 min，
取上清液既得。
2.4 线性关系考察 精密吸取 0.101 mg ／mL 石
杉碱甲贮备液 0.1、0.6、1.2、1.8、2.4 mL 置 10 mL
瓶中，用 2%酒石酸稀释至刻度，摇匀，按 2.1 项色
谱条件测定，进样量为 20 μL，重复 3 次，测得峰
面积并计算平均值。 以标准品浓度（X）为横坐标，
峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：
Y＝59171X－40514 r＝0.9992
结果表明石杉碱甲在 1～24 μg ／mL 时， 与峰
面积呈良好的线性关系。
2.5 方法学考察
2.5.1 精密度试验 取 6 μg ／mL 石杉碱甲对照
品溶液，重复进样 6 次，进样量 20 μL，按 2.1 项色
谱条件测定，结果石杉碱甲峰面积 RSD 为 0.23%，
表明精密度良好。
2.5.2 稳定性试验 精密量取同一份样品溶液
20 μL，按 2.1 色谱条件测定，分别于制备后 1、2、
4、8、16、24 h 测定石杉碱甲峰面积， 样品在 24 h
内稳定。蛇足石杉、闽浙马尾杉不同部位样品溶液
中石杉碱甲峰面积 RSD 为：蛇足石杉根 0.75%、茎
0.13%、叶 0.67%，闽浙马尾杉根 0.42%、茎 0.83%、
叶 0.62%。
2.5.3 重复性试验 精密称取闽浙马尾杉茎粉末
5 份，按 2.3 项方法制备供试品溶液，按 2.1 项色
谱条件测定， 结果石杉碱甲峰面积 RSD 为 3.9%，
表明方法重现性良好。
2.5.4 加样回收率试验 石杉碱甲对照品溶液用
HPLC法测定蛇足石杉及闽浙马尾杉不同部位的石杉碱甲含量
郑雅媗，刘海元，张方方，吴水生
（福建中医药大学药学院，福建 福州 350122）
关键词：高效液相色谱法；蛇足石杉;马尾杉；石杉碱甲
中图分类号：R284.2 文献标志码：B 文章编号：1004-5627（2013）03-0042－02
收稿日期：2013-03-15
作者简介：郑雅媗（1989—），女，2012 级中药学专业硕士研究生，主要从事中药生物工程的研究。
Journal of Fujian University of TCM June 2013，23 （3）
福建中医药大学学报 2013 年 6 月 第 23 卷 第 3 期
42
DOI:10.13261/j.cnki.jfutcm.002814
2%酒石酸稀释至 1.8 μg ／mL，作为对照品溶液。另
精密称取已知含量的闽浙马尾杉茎粉末 0.1 g，共
6 份，加入对照品溶液，按 2.3 项方法制备供试品
溶液，按 2.1 项色谱条件测定，计算加样回收率。
结果石杉碱甲在闽浙马尾杉茎中的平均加样回收
率为 101.86%，RSD 为 1.41%。
2.6 样品测定结果 见表 1、图 1～图 2。
表 1 石杉碱甲在蛇足石杉及闽浙
马尾杉中不同部位的分布
测定项
蛇 足 石 杉
闽浙马尾杉
测定部位
根
茎
叶
根
茎
叶
石杉碱甲 ／%
0.0209
0.0609
0.0573
0.0075
0.0087
0.0028
图 1 石杉碱甲对照品 HPLC 图
注：1. 叶；2. 茎；3. 根。
图 2 蛇足石杉不同部位供试品 HPLC 图
3 讨 论
本实验采用 UItimate XB-C18色谱柱， 能够较
好的缩短出峰时间，用甲醇-0.08 mol ／ L 醋酸铵溶
液的流动相，使石杉碱甲与其它成分较好的分离。
对于检测波长问题，王峻 ［1］等用 308 nm 波长进行
石杉碱甲含量检测， 我们用二极管列阵检测器对
石杉碱甲进行全波长扫描， 结果表明石杉碱甲在
309 nm 处有更强吸收。 所以，我们用 309 nm 波长
进行检测。
参考文献：
［1］ 王峻，吴伟，潘胜利，等 . HPLC 法测定 6 种石杉科植物中石
杉碱甲的含量［J］. 中草药，2003，34（7）：607-608.
［2］ 刘密，唐利群，李佳，等. 石杉碱甲治疗阿尔茨海默病的疗效
观察［J］. 中国医药导报，2011，8（13）：28-30.
第 3期 郑雅媗等：HPLC 法测定蛇足石杉及闽浙马尾杉不同部位的石杉碱甲含量 43