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China Pharmaceuticals
2015年 4月 20日 第 24卷第 8期
Vol． 24，No． 8，April 20，2015
＊内蒙古科技厅科技计划项目，项目编号:20080502;内蒙古医科大学科技百万工程项目，项目编号:kjbw2012009。
较短，但分离不太完全，峰形有拖尾现象;而以乙腈－水(46 ∶ 54)
为流动相，比 2010 年版《中国药典(一部)》中的流动相配制简化，
分离度及理论塔板数等色谱参数均符合药典要求。这为吴茱萸及
相关产品的质量分析提供了优化方法。
指标成分选取:柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱为吴茱萸
药材的指标成分，用混合对照品分别测定 3 种成分的含量并以三
者总含量为最终检测指标，简单易行，可为吴茱萸提取物的实际
生产提供参考。
作者简介:许锋(1975 －)，男，汉族，湖北钟祥人，在读博士研究
生，讲师，主要从事中药制剂研究工作，(电话)020 － 28854884(电子
信箱)xfon2002@ 163． com;涂瑶生(1957 －)，男，汉族，江西南昌人，
研究员，博士研究生导师，主要从事中药制剂研究工作，本文通讯作
者，(电话)020 － 83501292(电子信箱)tuyaos@ 21cn． com。
参考文献:
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(收稿日期:2014 － 07 － 02 )
蒙药材山野豌豆总 DNA 提取方法研究＊
高优恒，高俊杰，王海鹏，李 骁
(内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010059)
摘要:目的 寻找快速、简便的山野豌豆总 DNA提取方法。方法 采用 4 种不同方法(CTAB 法、SDS 法及改进 CTAB法、改进 SDS法)提
取山野豌豆总 DNA，通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测其纯度，以筛选出最优提取方法。结果 改进 CTAB法和改进 SDS法
所得的山野豌豆总 DNA纯度都较高，A260 和 A280 分别为 ( 1． 912 8 ± 0． 082 7 )和 ( 1． 876 7 ± 0． 040 8 )。改进 CTAB法提取到的总 DNA电
泳时 DNA条带亮度明显，无拖尾现象。结论 改进 CTAB法是提取山野豌豆中高质量总 DNA的有效方法。
关键词:山野豌豆;DNA提取;蒙药材;CTAB法;SDS法
中图分类号:R282． 5;R282． 71 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2015 )08 － 0045 － 04
Total DNA Extraction Methods of Mengolian Medicinal Material Vicia Amoena
Gao Youheng，Gao Junjie，Wang Haipeng，Li Xiao
(College of Pharmacy，Inner Morgolia Medical University，Huhehaote，Inner Mongolia，China 010059)
Abstract:Objective To develop a quick and convenient method for the extraction of total DNA of Vicia amoena． Methods The total
DNA from Vicia amoena was detected by adopting 4 kinds of method [ cetyltrimethylammonium bromide(CTAB)，sodium dodecyl sulfonate
(SDS)，modified CTAB and modified SDS] and its purity was detected by the agarose gel electrophoresis and the ultraviolet spec-
trophotometer method． The best extraction method was screened out． Results Both the modified CTAB method and the modified SDS
method extracted a high purity of total DNA from Vicia amoena，and the value of A260 and A280 was 1． 912 8 ± 0． 082 7 and 1． 876 7 ±
0． 040 8 respectively． The total DNA extracted by the modified CTAB method showed the bright band without tail phenomenon in elec-
trophoresis． Conclusion The modified CTAB method is an effective method for extracting high quality total DNA from Vicia amoena．
Key words:Vicia amoena;DNA extraction;Mongolian medicinal material;CTAB method;SDS method
野豌豆属 Vicia L． 植物为 1 年生或多年生草本，全世界约
200 种，我国有 43 种 5 变种，广布全国各地 [ 1 ]，内蒙古地区有 16
种 3 变种 [ 2 ]。本属植物山野豌豆 Vicia amoena Fisch． 始载于蒙医
药专著《蒙药正典》[ 3 ]，蒙药名为其都尔 －额布斯，以地上部分入
药，味苦，性平、轻、燥、锐、稀、软，有利尿、消肿、愈伤之功效，主要
用于水肿、创伤 [ 4 ]。杨巧荷等 [5 ]对山野豌豆的化学成分作了定性
分析，确定山野豌豆含有蛋白质、多糖、氨基酸、酚类、皂苷、黄酮
等多种化学成分，值得进一步研究和开发。近年来，DNA 分子鉴
别方法广泛应用于植物类药材的鉴定，较传统的鉴别方法有其独
特优势，故快速、有效地提取高质量的植物 DNA分子已成为植物
类药材分子鉴定的关键。不同植物中含有不同的次生代谢产物，
会对植物 DNA的提取造成一定影响，故需有针对性地对 DNA提
取步骤进行改进。罗焜等 [ 6 ]以麦冬为试验对象，对比 5 种植物
DNA 提取方法，并对不同部位入药的 10 种中药材进行 DNA 提
取，发现 CTAB 法可较好地提取植物类药材的 DNA。杨模华等 [ 7 ]
采用 3 种不同 DNA 提取方法(CTAB 法、SDS 法、试剂盒法)提取
马尾松幼嫩针叶基因组 DNA，通过对提取步骤的改进，发现改良
的 CTAB 法提取 DNA 效果最佳。本研究通过比较 4 种不同 DNA
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
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2015年 4月 20日 第 24卷第 8期
Vol． 24，No． 8，April 20，2015
表 1 供试样品来源
名称
山野豌豆
编号
SY1
SY2
凭证标本
SY20090713
SY20100705
采集地点
呼和浩特市大青山
呼和浩特市大青山
采集时间
2009 － 07 － 13
2010 － 07 － 05
提取方法(CTAB 法、SDS 法、改进 CTAB 法和改进 SDS 法)，筛选
出适合于蒙药山野豌豆总 DNA提取的方法及条件，现报道如下。
1 材料与方法
1．1 材料、仪器与试剂
1． 1． 1 药材
试验用药材山野豌豆植株采自内蒙古呼和浩特市大青山
(见表 1);试验材料为野外采集回的山野豌豆植株，于阴凉通风
处自然干燥后的植株叶片，为保存 1 年的材料，经内蒙古医科大
学药用植物教研室李骁副教授鉴定为豆科野豌豆属植物山野豌
豆 Vicia amoena Fisch． ，凭证标本保存于内蒙古医科大学药用植
物标本室。
1． 1． 2 仪器
CS501A型恒温水浴槽(中国重庆银河实验仪器有限公司)，
SIM － F124 型制冰机(日本 SANYO公司);W3000ii型紫外透射分
析仪(珠江黑马医学仪器有限公司);BS110S 型电子天平(德国
Sartorius 公司); 医用低温保存箱; 电泳仪(北京市六一仪器厂);
Sartorius1 － 15K 型高速冷冻离心机(德国 Sigma 公司);DU － 640
核酸蛋白分析仪(美国 Beckman 公司);Transilluminator 型凝胶成
像系统。
1． 1． 3 试剂
CTAB法试剂:2 × CTAB 为 Tris － HCl(pH = 8． 0)100 mmol /L，
EDTA(pH = 8． 0)50 mmol / L，NaCl 1． 4 mol / L，2%的 β －巯基乙醇
(用前加入)20 mmol / L，CTAB 2%(W / V);10%(W / V)CTAB 提
取液为 CTAB 10%(W / V)，NaCl 0． 7 mol / L;CTAB沉淀缓冲液为
Tris － HCl(pH = 8． 0)50 mmol / L，EDTA(pH = 8． 0)10 mmol / L，
CTAB 1%(W / V)。
SDS 法试剂: 提取液Ⅰ为 Tris － HCl(pH = 8． 0)100 mmol / L，
EDTA(pH =8． 0)50 mmol /L，NaCl 500 mmol /L，20%的 PVP 100 μL;
TE 溶液为 Tris － HCl(pH = 8． 0)10 mmol / L，EDTA(pH = 8． 0)
1 mmol / L。
改进 CTAB 法试剂:TNE 缓冲液为 Tris － HCl(pH = 8． 0)
100 mmol / L，EDTA(pH = 8． 0)20 mmol / L，NaCl 0． 25 mol / L，2%
的 β －巯基乙醇(使用前加入); 高盐TE 为 Tris － HCl(pH = 8． 0)
10 mmol / L，EDTA(pH = 8． 0)1 mmol / L，NaCl 1． 4 mol / L。
改进 SDS法试剂:提取液Ⅰ为 Tris －HCl(pH =8． 0)100mmol /L，
EDTA(pH = 8． 0)50 mmol / L，NaCl 0． 7 mol / L，2%的 β －巯基乙
醇(使用前加入)100 mmol / L，20%的 PVP 100 μL; 高盐TE 为
Tris － HCl(pH = 8． 0)10 mmol / L，EDTA(pH = 8． 0)1 mmol / L，
NaCl 1． 4 mol / L。
1．2 DNA提取方法
CTAB法:称取200 mg干燥叶片，加 600 μL的 CTAB提取液，
研磨呈匀浆状，转入 1． 5 mL离心管;在65 ℃水浴中保温 10 min，间
或轻弹管底，使其充分混匀;加600 μL氯仿 －异戊醇(24 ∶ 1)，倒
管混匀后以 10 000 r / min 的速率离心 2 min，转移上清液至新
的离心管中;用100 μL CTAB 提取液洗上一步的变性蛋白层，以
10 000 r / min 的速率离心 2 min，取上清液并与上一步中上清液
混合;加0． 1 倍体积的 10% CTAB(约 70 μL)混匀，再用氯仿 －异
戊醇(24 ∶ 1)抽提 1 次，取上清液，转入另一离心管中;加入等体
积的 CTAB 沉淀缓冲液混匀，室温下静置 20 min;以2 000 r /min
的速率离心 15 min，若沉淀不明显，再以 8 000 r /min的速率离心
10 min; 沉淀用400 μL 1 mol / L 的 NaCl 溶解，在 37 ℃温度条件
下助溶 30 min; 加2 倍体积的无水乙醇，混匀，－ 20 ℃静置
30 min 或以上; 以12 000 r /min 的速率离心 2 min，用 1 mL 65%
乙醇冲洗 1 min，再用 85%乙醇冲洗 1 min;吹干沉淀，用35 μL无
菌双蒸水溶解，4 ℃保存备用。
SDS 法: 称取200 mg 干燥叶片，加 800 μL 提取液Ⅰ，快速研
磨，转移到 1． 5 mL 的离心管中，冰浴 30 min; 加入20% SDS 溶
液100 μL，再 65 ℃水浴 10 min; 加90 μL 5 mol / L 的 KAc，冰浴
30 min;以12 000 r /min的速率离心 15 min;上清液转入另一离心
管中，室温用等体积的异丙醇沉淀 30 min，可观察到白色沉淀物;
以 12 000 r / min 的速率离心 15 min(4 ℃)，弃上清液，向管中加
入预冷的 75%乙醇 100 μL 洗涤，干燥沉淀;沉淀用500 μL高盐
TE充分溶解;加等体积的氯仿/异戊醇，混匀，静置片刻;4 ℃，以
10 000 r /min 的速率离心 10 min; 转移上清液，加6 μL RNAase
(10 g /L)，65 ℃水浴 15 min，重复抽提;转移上清液，加2． 5 mol /L
的乙酸铵 60 μL混匀，再加 2 倍体积的无水乙醇，轻缓混匀，室温
放置 30 min 后以 12 000 r /min 的速率离心 15 min; 用75%乙醇
洗涤沉淀 2次，吹干沉淀，加 30 μL TE溶解 DNA，4℃保存备用。
改进 CTAB法:称取200 mg干燥叶片，加入液氮，快速研磨成粉
末，转入 1． 5 mL离心管中，加入 700μL TNE缓冲液充分混匀后加入
20μLβ －巯基乙醇，65 ℃水浴 10 min;在4 ℃下以 7 000 r /min的速
率离心 10min，弃上清液; 加入2 × CTAB 提取液 1 000 μL，65 ℃
水浴 1 h，期间轻缓颠倒混摇 4 次，使其充分混匀;取离心管降至
室温后，以 7 000 r /min的速率离心 10 min，取上清液于另一干净
离心管中加入等体积的酚 ∶ 氯仿 ∶ 异戊醇(25 ∶ 24 ∶ 1)，轻缓混匀
后，以 10 000 r / min 的速率离心 10 min，取上清液加入等体积的
氯仿∶异戊醇(24 ∶ 1)抽提 2 次，10 000 r /min 的速率离心 10 min
后，加入 0． 7 倍体积的异丙醇，－ 20 ℃放置 30 min，取出以
12 000 r / min 的速率离心 10 min(4 ℃)，弃上清液，用预冷的
75%乙醇洗涤沉淀 2 次，吹干沉淀，沉淀用 500 μL高盐 TE 充分
溶解;加入等体积的氯仿－异戊醇(24 ∶ 1)，以 10 000 r /min的速
率离心 10 min(4 ℃)，取上清液加入 6 μL RNAase(10 g /L)，37 ℃保
温 20 min，抽提 1 次，上清液转移至另一离心管中，加终浓度为
2． 5 mol /L的乙酸铵 60 μL混匀，加 2 倍体积的无水乙醇，轻缓混
匀，－ 20 ℃放置 30 min以上;以14 000 r /min的速率离心 15 min
后，用 75%乙醇洗涤沉淀 2 ～ 3 次(离心)，吹干沉淀，加 30 μL TE
溶液溶解沉淀，－ 20 ℃保存备用。
改进 SDS 法: 称取200 mg 干燥叶片，加 1 000 μL 提取液Ⅰ，
冰浴研磨，转移到 1． 5 mL 离心管中，冰浴 30 min;加20% SDS 溶
液 120 μL，在 65 ℃水中保温 10 min，加 100 μL 7 mol / L 的 KAc
冰浴 30 min;以12 000 r /min 的速率离心 15 min; 上清液转入另
一离心管中，用异丙醇室温沉淀 30 min，可观察到白色沉淀物;以
12 000 r / min 的速率离心 15 min，弃上清液，管中加入预冷的
75%乙醇 100 μL洗涤沉淀，吹干沉淀后用 500 μL高盐 TE溶解;
加入等体积的氯仿 －异戊醇，混匀，静止片刻，以 10 000 r /min的速
率离心 10 min，转移上清液，加 6 μL的 RNAase(10 g /L)，于 37 ℃
水浴 15 min; 用氯仿－异戊醇(24 ∶ 1)抽提 2 次，转移上清液，加
入终浓度为 2． 5 mol / L的乙酸铵 60 μL，混匀，加 2倍体积的无水
乙醇，混匀，室温放置 30 min 以上; 以12 000 r /min 的速率离心
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2015年 4月 20日 第 24卷第 8期
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15 min;用75%乙醇洗涤沉淀 2 次，吹干沉淀;加30 μL TE溶解，
4 ℃备用。
1．3 基因组 DNA纯度检测
电泳检测: 取5 μL DNA 样品与 1 μL 6 × loding buffer 混合，
点样 1%的琼脂糖凝胶上电泳，经 EB 染色后，在 Transilluminator
型凝胶成像系统下观测、拍照，将 Maker(λ － Hind Ⅲ digest)与提
取的 DNA样品一起电泳，检测基因组 DNA。
产率及纯度测定: 取7 μL DNA 样品稀释至 700 μL，在紫外
分光光度计上测定 230，260，280 nm 波长处的吸光度，根据三者
波长的两两比值判断 DNA 纯度。试验数据用 SPSS 19． 0 统计软
件进行处理和检验。
2 结果
2．1 山野豌豆叶片基因组 DNA的提取
结果见图 1。
可见，与 Maker对照，样品 DNA条带大小在 23 kb左右，说明
所提取的样品 DNA 为基因组 DNA; 常规SDS 法提取的 DNA 条
带非常不清晰，且降解严重;常规CTAB法所提取的干叶 DNA虽
然 DNA 条带较亮，但条带拖尾现象非常明显，说明提取过程中
DNA 降解严重;改进SDS 法提取的 DNA 条带清晰明亮，RNA 消
化完全;改进CTAB法提取的 DNA条带亮度明显增加，拖尾现象
不明显，降解并不严重，纯度和完整性较好。
2．2 基因组 DNA纯度测定
将上述 4种方法提取的样品 DNA在 280，260，230nm波长处
测定吸光度值，并计算 A260 / A280 值及 A260 / A230 值，见表 2。高纯
度 DNA的 A260 / A280 比值应在 1． 8 ～ 2． 0 之间。当 A260 / A280 ＜ 1． 8
时，DNA样品中可能存在蛋白质污染;当A260 / A280 ＞ 2． 0 时，DNA
样品中 RNA的含量较高 [8 ]。由表 2 可见，在 4 种提取方法所得的
DNA 样品中，A260 / A280 和 A260 / A230 的值以改进 CTAB 法和改进
SDS 法最高，A260 / A280 值为改进 CTAB 法、改进 SDS 法 ＞ 常规
CTAB法 ＞常规 SDS法，且差异显著，而改进 CTAB法与改进 SDS
法间无显著性差异，说明用改进 CTAB 法和改进 SDS 法提取的
DNA 纯度较好(A260 / A280 比值在 1． 8 ～ 2． 0)。A260 / A230 值亦为改
进 CTAB 法、改进 SDS 法 ＞常规 CTAB 法 ＞常规 SDS 法，且差异
显著，而改进 CTAB 法与改进 SDS 法间无显著性差异，说明改进
CTAB 法与改进 SDS法除杂质较好，但 A260 / A230 ＜ 2． 0，说明有盐
类污染，因此改进的方法仍然存在不足。而未经改进的 CTAB 法
和 SDS 法的 A260 / A280 和 A260 / A230 值明显过低，主要原因为酚的
氧化使得提取的 DNA褐变，还有蛋白质和多糖杂质未能除尽。
表 2 4 种方法提取的 DNA在 3 种波长紫外线下的吸光度值(X ± s)
注:与SDS法、改进 CTAB法、改进 SDS法比较，＊ P ＜ 0． 05;与改进CTAB法、改进 SDS法比较，# P ＜ 0． 05。
方法
CTAB法
SDS法
改进 CTAB法
改进 SDS法
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
A260
0． 009 4
0． 010 2
0． 010 8
0． 024 9
0． 024 6
0． 024 2
0． 008 0
0． 007 6
0． 006 9
0． 006 4
0． 006 6
0． 006 7
A280
0． 007 4
0． 008 3
0． 008 8
0． 024 1
0． 024 1
0． 024 0
0． 004 4
0． 003 9
0． 003 5
0． 003 4
0． 003 6
0． 003 5
A230
0． 013 6
0． 014 9
0． 015 9
0． 028 8
0． 029 2
0． 029 2
0． 007 0
0． 006 6
0． 006 1
0． 005 7
0． 005 8
0． 0059
A260 / A280
1． 270 3
1． 228 9
1． 227 3
1． 033 2
1． 020 7
1． 008 3
1． 818 2
1． 948 7
1． 971 4
1． 882 4
1． 833 3
1． 914 3
平均值
1． 242 2 ± 0． 024 4＊
1． 020 7 ± 0． 012 5#
1． 912 8 ± 0． 082 7
1． 876 7 ± 0． 040 8
A260 / A230
0． 691 2
0． 684 6
0． 679 2
0． 864 6
0． 842 5
0． 828 8
1． 142 9
1． 151 5
1． 131 1
1． 122 8
1． 137 9
1． 135 6
平均值
0． 685 0 ± 0． 006 0＊
0． 845 3 ± 0． 018 1#
1． 141 8 ± 0． 010 2
1． 132 1 ± 0． 008 1
综上所述，综合凝胶电泳结果和表 2 数值来看，改进 CTAB
法和改进 SDS法要优于常规 CTAB法和 SDS法，而改进 CTAB法
所得电泳条带亮度较改进 SDS法更好，故改进 CTAB法更适合提
取山野豌豆总 DNA。
3 讨论
植物细胞中含有蛋白质、酚、多糖、脂质、色素和其他多种次
生代谢产物，这些都会影响 DNA提取，即使同一种植物药材也可
能由于其加工或储藏方法不一样而导致 DNA 提取方法不同 [ 6 ]。
DNA试剂盒提取植物 DNA虽有操作简便、耗时短等优点，但其操
作步骤固定，无法根据植物本身的特点进行优化，也有提取效果
不理想的现象 [ 8 ]。此外，试剂盒提取价格较昂贵，不适于大量材料
的 DNA提取。因此，本试验中选取最常用的 CTAB法及 SDS法来
提取山野豌豆总 DNA，并在其基础上进行改进，摸索出了适合蒙
药材山野豌豆总 DNA 的提取方法，即改进 CTAB 法和改进 SDS
法。最终选定了改进 CTAB 法作为蒙药材山野豌豆的总 DNA 提
取方法，为其后续研究工作奠定了基础。
作者简介:高优恒(1988 －)，女，蒙古族，在读硕士研究生，研究
方向为中蒙药分子鉴定，(电子信箱)goyhen@ sina． com;李骁，博士
研究生，副教授，硕士研究生导师，研究方向为中蒙药鉴定及蒙药资
源开发，本文通讯作者，(电子信箱)lx_leexiao@ 163． com。
参考文献:
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·药物研究·
Drug Research
0，9． Maker 1，2． 改进 CTAB法 3，4． 改进 SDS法
5，6． CTAB法 7，8． SDS法
1，3，5，7 为样品 SY1 2，4，6，8 为样品 SY2
图 1 4 种方法提取的山野豌豆 DNA样品电泳图
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
23 kb
48
China Pharmaceuticals
2015年 4月 20日 第 24卷第 8期
Vol． 24，No． 8，April 20，2015
＊浙江省科技计划项目，项目编号:2011F20014，2014F10012，20012F10005;浙江省医学重点学科群建设项目，项目编号:XKQ －
010 － 001;浙江省宁波市科技计划项目，项目编号:2014C10026;浙江省遂昌县合作项目，项目编号:HZ － 201303。
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(收稿日期:2014 － 09 － 30 )
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·药物研究·
Drug Research
不同干燥方法对三叶青活性成分含量的影响＊
熊科辉 1，2，吴学谦 1，2，许海顺 2，么春艳 2，徐 娟 2，吴大丰 3，张善华 4，沈正荣 2
(1． 浙江中医药大学，浙江 杭州 310053; 2． 浙江省医学科学院，浙江 杭州 310013; 3． 浙江五养堂药业
有限公司，浙江 丽水 323000; 4． 浙江省遂昌县农业局，浙江 丽水 323300)
摘要:目的 探讨不同干燥方法对三叶青活性成分含量的影响。方法 选取三叶青中总黄酮、总多酚和多糖 3 种主要活性成分作为评价
指标，分析测定三叶青鲜品及冷冻干燥、真空干燥、热风干燥 3种不同干燥方法的三叶青总黄酮、总多酚和多糖含量。结果 三叶青鲜品
和 3 种干燥方法的总黄酮含量分别为 7． 68，7． 73，6． 65，6． 36 mg / g，总多酚含量分别为 8． 69，8． 88，8． 32，6． 51 mg / g，多糖含量分别为
6． 39%，6． 52%，4． 87%，5． 11%;传统的热风干燥方法对总黄酮、总多酚和多糖造成的含量损失分别为 17． 18%，25． 09%，20． 03%，真
空干燥对总黄酮、总多酚和多糖造成的含量损失分别为 13． 41%，4． 25%，23． 79%，冷冻干燥的三叶青活性成分含量与三叶青鲜品相
当，几乎没有损耗。结论 不同的干燥方法对三叶青活性成分含量影响很大，冷冻干燥能最大程度地保留三叶青活性成分，适合作为三
叶青干燥加工方法。
关键词:三叶青;活性成分;冷冻干燥;真空干燥;热风干燥
中图分类号:R282． 4;R282． 71 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2015 )08 － 0048 － 03
Influence of Different Drying Methods on Contents of Active Ingredients in
Tetrastigma Hemsleyanum
Xiong Kehui1，2，Wu Xueqian1，2，Xu Haishun2，Yao Chunyan2，Xu Juan2，Wu Dafeng3，Zhang Shanhua3，Shen Zhengrong3
(1． Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou，Zhejiang，China 310053; 2． Zhejiang Academy of Medical Sciences，Hangzhou，Zhejiang，China
310013; 3． Zhejiang Wuyangtang Pharmaceutical Co． ，Ltd．，Lishui，Zhejiang，China 323000; 4． Zhejiang Suichang County Agriculture Bureau，
Lishui，Zhejiang，China 323300)
Abstract:Objective To investigate the influence of different drying methods on the contents of active ingredients in Tetrastigma
hemsleyanum． Methods The contents of the active ingredients total flavonoids，total polyphenols and polysaccharides in fresh，freeze －
dried，vacuum － dried and hot air － dried Tetrastigma hemsleyanum were analyzed with total flavonoids，total polyphenols and polysaccha-
rides as the evaluation indexes． Results The total flavonoid contents were 7． 68，7． 73，6． 65，6． 36 mg / g respectively;the total polyphe-
nols contents were 8． 69，8． 88，8． 32，6． 51 mg / g respectively;the polysaccharides contents were 6． 39%，6． 52%，4． 87%，5． 11% respec-
tively in the three different drying methods． The loss of total flavonoids，total polyphenols and polysaccharide contents caused by the
conventional hot air － drying method were 17． 18% ，25． 09% and 20． 03% respectively，and the loss caused by the vacuum － drying
method were 13． 41%，4． 25% and 23． 79% respectively，while the total flavonoids，total polyphenols and polysaccharide contents by the
freeze － drying method were similar to those in fresh Tetrastigma hemsleyanum with hardly any loss． Conclusion Different drying meth-
ods have great impact on the active ingredients contents of Tetrastigma hemsleyanum The freeze － drying method is able to preserve the
active ingredients of Tetrastigma hemsleyanum to the maximum extent and is most suitable to serve as the drying method for Tetrastig-
ma hemsleyanum．
Key words:Tetrastigma hemsleyanum;active ingredients;freeze － drying;vacuum － drying;hot air － drying
三叶青为葡萄科植物三叶崖爬藤 Tetrastigma hemsleyanum
Diels et Gilg 的块根，别名金线吊葫芦，可清热解毒、祛风化痰、活
血止痛 [ 1 ]。现代药理学研究表明，三叶青具有抗肿瘤、抗病毒、抗
炎镇痛、保肝等药理作用 [2 － 7 ]。浙江民间一直有服用三叶青的习
惯，传统的服用方法是现采鲜用，虽疗效独到，但因季节、地区和
无保鲜手段等原因而受到限制，三叶青鲜药的临床应用也因此受
到影响。传统方法干燥三叶青大都采用切片后热风干燥，但热风
烘烤过程中会导致三叶青中的活性成分损失;合适的干燥方法既
能保持三叶青的活性成分，确保鲜品的药用效果，又能使三叶青
的药性长期保持。目前，有关三叶青的研究主要集中在组织培养、
人工栽培技术、提取工艺和药理药效 [ 8 － 13 ]等方面，关于三叶青中
药饮片加工工艺的研究相对较少。黄酮、多糖和多酚为三叶青中
主要的生理活性物质 [ 14 － 17 ]。本试验中以三叶青活性成分总黄酮、
总多酚和多糖含量为评价指标，并与三叶青鲜品活性成分含量对