全 文 ：上海中医药杂志 2009年第 43卷第 11期 SH.J.TCMNov., 2009;Vol.43No.11
方药揽胜
白花银背藤根和茎中东莨菪内酯的含量测定
邱宏聪　　李　茂　　孟夏临
广西中医药研究院中药药理研究所　(广西　南宁　530022)
【摘　要】　目的　测定白花银背藤根和茎中东莨菪内酯的含量。方法　采用高效液相色谱法 , 以 C18化学键合硅胶柱分离东莨
菪内酯 , 甲醇-0.5%冰醋酸(40∶60)为流动相 ,检测波长为 345 nm进行测定。结果　白花银背藤根和茎中的东莨菪内酯含量差异较
大。结论　根中的东莨菪内酯含量比茎中含量高。
【关键词】　白花银背藤;东莨菪内酯;高效液相色谱法;含量测定
【中图分类号】　R284.2　　【文献标志码】　A　　【文章编号】　1007-1334(2009)11-0081-02
DeterminationofScopoletinintheRootsandStalksofHerbaArgyreiaSeguinii
QIUHong-cong　LIMao　MENGXia-lin
GuangxiInstituteofTraditionalChineseMedicine
Abstract:
Objective　TodeterminethecontentofscopoletinintherootsandstalksofherbaArgyreiaseguinibyHPLC.Methods　Thescopoletinintherootsand
stalksofherbaArgyreiaseguiniwasseparatedonODS-2hypersilcolumnwithmethanol-0.5%glacialaceticacid(40:60)asamobilephaseandtheUVdetection
wavelengthat345nm.Results　TherewasagreatdifferencyinthecontentofscopoletinbetweentherootsandstalksofherbaArgyreiaseguini.Conclusion　The
contentofscopoletininrootsishigherintherootsthaninthestalks.
KeyWords:
Argyreiaseguini;scopoletin;HPLC;contentdetermination
[基金项目 ] 广西科学研究与技术开发计划项目 (桂科基
0639056)
[作者简介 ] 邱宏聪(1982-),男 , 广西柳州人 , 学士 , 主要从事新
药研发及中药质量标准研究工作。
　　白花银背藤 [ 1] Argyreiaseguini(Levl.)Vaniot.ex
vl.系旋花科植物 ,收载于《广西中药材标准 》(1996年
版),有补气血 、止咳 、驳骨 、止血生肌的功效 ,用于治疗
内伤出血 、贫血头晕 、咳嗽 、骨折。目前地方标准中并
未收载该药材的含量测定方法 。据报道[ 2] ,白花银背
藤中含有 β-谷甾醇 ,豆甾醇 、胡萝卜苷 、东莨菪内酯等 ,
其中东莨菪内酯具有一定的镇痛及抗炎作用 ,为本品
的活性成分 。本品药用部位为干燥的根和茎 [ 1] ,在实
验过程中发现其不同药用部位的药效有一定的差异 。
因此 ,本文建立了白花银背藤中东莨菪内酯的 HPLC
含量测定方法 ,并分别测定根和茎中东莨菪内酯的含
量 ,比较两者的差别 ,为更好地利用植物资源提供参考
依据。
1　材料
1.1　药材　经广西中医药研究院农兴旭副研究员鉴
定为旋花科植物 Argyreiaseguini(Levl.)Vaniot.exvl.
的干燥根茎 。
1.2　仪器与试药 　岛津 LC-20AT高效液相色谱仪;
SPD-20A紫外检测器;威玛龙色谱数据工作站 。东莨
菪内酯对照品(批号:768-200103,中国药品生物制品检
定所),甲醇(色谱纯),冰醋酸(分析纯)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件和系统适应性试验　色谱柱:ODS-2 hy-
persil柱 (250 mm×4.6 mm, 5 μm);流动相:甲醇-
0.5%冰醋酸(40:60);检测波长:345 nm;柱温:室温;
流速:1.0ml/min;进样量:10 μl。在此色谱条件下 ,理
论塔板数均不少于 3000。对照品与供试品的 HPLC图
谱见图 1。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取东莨菪内酯对照
品 ,加甲醇制成每 1 ml含 0.2012mg的对照品溶液。
2.3　供试品溶液的制备　取本品不同药用部位的粉
末(过三号筛)0.5 g,精密称定 ,置索氏提取器中 ,加乙
醇适量 ,加热回流 5h,回收溶剂至干 ,残渣加 0.5mol/L
硫酸溶液 40ml,加热回流 2 h,取出 ,放冷 ,转移至分液
漏斗中 ,用三氯甲烷振摇提取 3次 ,每次 30ml,合并三
氯甲烷液 ,挥干 。残渣用甲醇溶解并转移至 10 ml量瓶
中 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,用 0.45 μm微孔滤膜滤
过 ,滤液作为供试品溶液 。
·81·DOI :10.16305/j.1007-1334.2009.11.025
上海中医药杂志 2009年第 43卷第 11期 SH.J.TCMNov., 2009;Vol.43 No.11
图 1　HPLC色谱图(1:东莨菪内酯)
2.4　线性关系的考察 　精密吸取对照品溶液 0.5、
1.0、2.0、5.0、10ml于 25 ml量瓶中 ,分别加甲醇稀释
至刻度 ,摇匀 ,分别精密吸取 10 μl,注入液相色谱仪 ,
以对照品东莨菪内酯进样量(μg)为横坐标 ,相应峰面
积积分值为纵坐标 ,计算回归方程:Y=4 032 587X+
23 205(r=0.999 9)。表明东莨菪内酯在 0.040 2-
0.804 8μg范围内具有良好的线形关系 。
2.5　精密度试验　精精密吸取同一根部样品的供试品
溶液 , 重复进样 5次 , 东莨菪内酯峰面积的 RSD为
0.67%,表明本法具有较好的精密度。
2.6　重复性试验　取同一批根部样品 ,平行取 6份 ,按
供试品溶液的制备方法处理 ,进样分析 ,结果平均含量
为 0.110%, RSD为 1.45%。表明本法具有较好的重复
性 。
2.7　稳定性试验　精密吸取同一根部样品的供试品溶
液 ,分别在 0、2、4、6、8、12 h进行测定 ,东莨菪内酯峰面
积的 RSD为 1.37%。表明样品在 12h内稳定 。
2.8　回收率试验　采用加样回收法 ,取已知含量的根
部样品(东莨菪内酯含量为 0.110%)5份 ,精密称定 ,
分别精密加入一定量的东莨菪内酯对照品溶液 ,照含量
测定方法测定 ,计算平均回收率为 99.48%, RSD为
1.39%,结果表明本法具有较好的回收率(表 1)。
表 1　回收率试验结果
取样量(g) 样品含量(mg) 对照品加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
0.2521 0.2773 0.2686 0.5414 98.32
99.48 1.39
0.2507 0.2758 0.2686 0.5424 99.27
0.2532 0.2785 0.2686 0.5473 100.08
0.2515 0.2767 0.2686 0.5386 97.52
0.2529 0.2782 0.2686 0.5481 100.48
0.2508 0.2759 0.2686 0.5477 101.21
2.9　样品测定　取白花银背藤各部位的干燥粉末 ,按
供试品溶液制备方法操作 ,按照色谱条件测定峰面积 ,
以外标法计算含量。由结果可看出白花银背藤根中的
东莨菪内酯含量比茎中含量高(表 2)。
表 2　白花银背藤不同药用部位东莨菪内酯含量的试
验结果(n=3)
样品 采集日期 编号 东莨菪碱内酯含量(%) RSD(%)
根部 2007.04.20
A1 0.110 0.90
A2 0.119 1.06
A3 0.104 0.79
B1 0.065 1.64
茎部 2007.04.20 B2 0.071 1.32
B3 0.062 1.53
3　讨论东莨菪内酯略溶于水 ,溶于热乙醇或热冰醋酸中 ,
易溶于氯仿 [ 3] ,经酸水解可产生游离东莨菪内酯 。根据
该性质 ,本方法用热乙醇回流提取得总提取物 ,回收干
溶剂后用硫酸水解 ,再用氯仿提取 ,提取较完全 。
在试验过程中 ,曾采用 《中国药典 》[ 4] 测定东莨菪
内酯所用的流动相甲醇-水-冰醋酸(32∶68∶0.16),但峰
型不好 ,经试验考察 ,通过增加流动相中冰醋酸的比例
可得到良好的峰型。最终采用甲醇-0.5%冰醋酸
(40∶60)作为流动相 ,分离良好 。
　　广西中药材标准中规定白花银背藤的药用部位为
干燥根和茎 ,全年可采。从本试验结果可以看出 ,根中
东莨菪内酯的含量远比茎中含量高 ,药用部位可能以根
部为宜 。中草药含量的差异与药用部位 、药物产地 、采
收季节等因素有关。本试验只考察不同药用部位的差
别 ,因此 ,在今后的研究中 ,应对其不同产地及采收季节
来进行比较 ,以确定其最优药用部位 。
参考文献:
[ 1] 广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准 [ S] .南宁:广西科学技术
出版社 , 1996:81.
[ 2] 常小龙 ,李军 ,吴立军 ,等.白花银背藤化学成分的研究 [ J] .中草药 ,
2006, 37(2):178.
[ 3] 陈玉敏 ,曹红 ,周苏萍.高效液相色谱法测定丁公藤中东莨菪内酯的
含量 [ J] .中成药 , 2005, 27(12):1461-1462.
[ 4] 中国药典委员会.中国药典(一部)[ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:3.
编辑:季春来
收稿日期:2009-05-15
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