全 文 ：华西药学杂志WCJ· PS　2008, 23(6)：727 ～ 728 　　
作者简介:郑虹(1964-),女 ,山东临清 ,副主任药师 ,从事药品检验工作。
HPLC测定罗布白麻叶中的芦丁和槲皮素
郑　虹
(青海省药品检验所 ,青海 西宁 810000)
摘要:目的　建立测定罗布白麻叶中芦丁和槲皮素含量的方法。方法　采用 HPLC法 , 色谱柱为 ZorbaxSB-C18(250 mm ×
4.6mm, 5 μm),流动相为甲醇 -0.04%磷酸(40：60),流速为 1.0 ml·min-1 , 检测波长为 360nm, 柱温为 35℃。结果　芦丁
和槲皮素的线性范围分别为 0.01 ～ 0.20 μg和 0.007 ～ 0.099 μg;r分别为 0.9999和 0.9998;平均回收率分别为 102.1%
(RSD=2.0%, n=6)和 99.5%(RSD=1.4%, n=6)。结论　所建方法快速 、简便 、准确 、重复性好 ,可作为罗布白麻叶药材质
量控制的有效方法。
关键词:高效液相色谱法;罗布白麻叶;芦丁;槲皮素
中图分类号:R917　 文献标识码:A　 　文章编号:1006-0103(2008)06-0727-02
DeterminationofrutinandquercetininA.hendersoniHookf.byHPLC
ZHENGHong
(QinghaiProvincialInstituteforDrugControl, Xining810000, China)
Abstract:OBJECTIVE　TodevelopamethodfordeterminingrutinandquercetininA.hendersoniHookf.METHODS　HPLC
methodwasadopted.AgilentZorbaxSB-C18(250mm ×4.6 mm, 5 μm)columnandmethanol– 0.04% phosphoricacid(40：60)
asmobilephasewereused.Theflowratewas1.0 ml·min-1 andthedetectionwavelengthwas360 nm.Thecolumntemperaturewas
35℃.RESULTS　Thepeakareasvstheconcentrationsofrutinandquercetinshowedgoodcorrelationintherangesof0.01– 0.20
μgand0.007– 0.099 μg(r=0.9999and0.9998), respectively.Theaveragerecoverieswas102.1% forquercetin(RSD=2.0%,
n=6)and99.5% forrutin(RSD=1.4%, n=6), respectively.CONCLUSION　Themethodissimple, rapidandaccurate.Itcan
beusedforthequalitycontrolofA.hendersoniiHookf..
Keywords:HPLC;A.hendersoniiHookf.;Rutin;Quercetin
CLCnumber:R917　　　 Documentcode:A　 　ArticleID:1006-0103(2008)06-0727-02
　　罗布麻属夹竹桃科植物 ,中国有罗布红麻 Apoc-
ynumvenetumLine和罗布白麻 A.hendersoniHook
f.两种 。罗布麻叶在中国做茶饮和药用有着悠久的
历史。现代药理学研究表明 ,罗布麻叶有明显的降
压 、降脂作用 [ 1, 2] ,此作用与其含有的黄酮类成分有
关 。罗布红麻叶为《中国药典 》收载品种 ,而罗布白
麻叶常常作为罗布红麻叶的一种代用品使用。为研
究其质量 ,参考文献[ 3] ,采用 HPLC法测定了罗布白
麻叶中的黄酮类成分芦丁和槲皮素。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
1100高效液相色谱仪系统(美国安捷伦)。罗
布白麻叶于 2007年 8月采自青海格尔木市 ,经高原
生物研究所胡凤祖副研究员鉴定;槲皮素 、芦丁对照
品(中国药品生物制品检定所);甲醇为色谱纯;磷
酸和石油醚为分析纯;水为三蒸水。
1.2方法与结果
1.2.1　色谱条件　色谱柱采用 ZorbaxSB-C18柱
(250 mm × 4.6 mm, 5 μm);流动相为甲醇 -
0.04%磷酸(40：60);检测波长为 360 nm;流速为
1.0 ml·min-1;进样量为 10 μl;柱温 35℃。在此条
件下 ,对照品溶液 、供试品溶液的色谱图见图 1。
图 1　对照品(A)和罗布白麻叶样品(B)溶液的色谱图
Fig1　Chromatogramsofcontrolsolution(A)andsamplesolution
(B)
1.2.2　溶液的制备　分别精密称取 11.2 mg芦丁
对照品和 8.6 mg槲皮素对照品 ,置 10 ml的量瓶
中 ,用甲醇定容 ,作为混合对照品溶液备用。精密称
取 2.0 g罗布白麻叶粗粉(100目),置索式提取器
中 ,加 60 ml石油醚回流提取至无色 ,冷却后 ,倾出
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2008.06.006
并弃去石油醚提取液。于药渣中加入 60 ml甲醇 ,
回流提取至无色 ,放冷 ,过滤;将提取液转入 50 ml
量瓶中 ,用甲醇定容 ,作为供试品溶液 。
1.2.3　线性关系的考察　精密量取一定量的混合
对照品溶液 ,用流动相稀释成梯度浓度。取各浓度
的溶液分别进样 10 μl。以进样量为横坐标 、峰面积
为纵坐标进行线性回归。其回归方程为:Y芦丁 =
92.580X-9.486, 线性范围为 10 ～ 200 ng(r=
0.9999);Y槲皮素 =79.150X+5.508,线性范围为 7 ～
99 ng(r=0.9998)。
1.2.4　精密度试验　按 “1.2.1”项的色谱条件 ,分
别取 10 μl5 μg·ml-1芦丁和槲皮素的对照品溶液 ,
进样。每种溶液测定 6次 ,记录峰面积。芦丁的
RSD=0.78%、槲皮素的 RSD=1.12%,表明进样精
密度良好。
1.2.5　稳定性试验　按 “1.2.1”项的色谱条件 ,分
别于当日 、次日及第 3日进样分析。以峰面积计算
芦丁的 RSD=1.31%、槲皮素的 RSD=1.25%,表明
供试品溶液 3 d内稳定。
1.2.6　重复性试验 　精密称取罗布白麻叶粗粉
(100目)6份 ,按 “1.2.2”项的方法制备成供试品溶
液 。按 “1.2.1”项下条件 ,进样分析 , 记录峰面积 。
按回归方程计算两组分的含量 ,得芦丁的 RSD=
0.87%(n=6),槲皮素的 RSD=1.11%(n=6)。
1.2.7　回收率试验　精密称取已知含量的罗布白
麻叶粗粉 , 分别加入一定量的对照品溶液 , 照
“ 1.2.2”项的方法制备供试品溶液;按 “1.2.1”项的
色谱条件 进行测定 。芦丁的平 均回收率为
102.1%, RSD=2.0%(n=6);槲皮素的平均回收率
为 99.5%, RSD=1.4%(n=6)。
1.2.8　样品的测定　照 “ 1.2.1”项下的色谱条件 ,
分别取 10 μl供试品溶液和混合对照品溶液进样。
以峰面积按外标法计算含量。芦丁的含量为
0.11% (n=6);槲皮素的含量为 0.15% (n=6)。
2　讨论
槲皮素和芦丁的甲醇溶液在 254 nm处有较大
吸收 ,但此处样品中的杂质峰较大 ,影响测定 , 而
360 nm处的杂质峰较小 ,且槲皮素和芦丁有较大吸
收值 ,故测定波长为 360nm。
分离黄酮类化合物使用的流动相大多采用
0.4%的磷酸 ,但磷酸影响色谱柱的稳定性。为延长
色谱柱的使用寿命 ,在保证分离度的前提下将磷酸
的浓度降至 0.04%。适当增加流动相中甲醇的比
例 ,可使色谱峰尖锐 、减少拖尾 、分析时间缩短 ,并可
保证一定的分离度 。
采用文中方法能快速 、简便 、准确地测定罗布白
麻叶中芦丁和槲皮素的含量 ,方法的精密度和回收
率都较好 。
参考文献:
[ 1] 　 李观海 ,刘发 ,张新 , 等.罗布麻叶的药理作用研究 [ J] .药学
学报 , 1979, 14(2):86-88.
[ 2] 　 杨守业 ,包建华 ,谢利明, 等.罗布麻叶水浸膏降血脂作用的
研究 [ J] .中药通报, 1986, 11(6):370-372.
[ 3] 　 卢永昌 ,闫红.HPLC测定雪莲中芦丁和槲皮素的含量 [ J] .华
西药学杂志 , 2007, 22(1):79-80.
收稿日期:2007-12
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728 　 华 西 药 学 杂 志　　　 第 23卷