全 文 ：2009 年 5 月第 16 卷第 5 期 中国中医药信息杂志 ·23·
·实验研究·
单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠
肺通气功能相关指标的影响
明海霞,黄世佐,刘喜平,李海龙,金 戈,李 杨
(甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000)
摘要：目的 复制寒饮射肺证动物模型,观察单叶细辛对该模型大鼠肺通气功能相关指标的影响。方法 将 30
只 Wistar 大鼠随机分为单叶细辛组(单叶细辛水提液灌胃 1 mL/kg)、辽细辛组(辽细辛水提液灌胃 1 mL/kg)、盐水
组(0.9%NaCl 溶液灌胃 1 mL/kg)。各组给药均为每日 1次,连续 6 d。在给药第 6日灌胃后用 7 ℃冷生理盐水做整肺
灌洗,灌洗量 2.5 mL/kg,保留 30 s 后抽出,5 min 后重复灌洗 1 次,连续 5 次,造成寒饮射肺模型,合并 5 次灌洗液备
用。比较肺灌洗前后各组血栓素 B2(TXB2)、内皮素(ET)、灌洗液磷脂与蛋白质含量的变化。结果 整肺灌洗后盐水
组 TXB2、ET、蛋白质含量均明显升高,而磷脂含量较低。单叶细辛组、辽细辛组 TXB2、ET、蛋白质含量较低而磷脂含
量较高,与盐水组比较差异有统计学意义(P＜0.05),而单叶细辛组和辽细辛组比较差异无统计学意义。结论 单叶
细辛可抑制寒饮射肺证大鼠 TXB2、ET 的产生,减少灌洗液中蛋白质含量,有效改善肺通气。
关键词：单叶细辛；辽细辛；血栓素 B2 ；内皮素；磷脂；动物模型
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2009)05-0023-03
Effects of Single Leaf Asarum on Pulmonary Ventilation Function in Rats with Experimental
Syndrome of Cold Fluid Shooting Lung MING Hai-xia, HUANG Shi-zuo, LIU Xi-ping, et al (Gansu College of
TCM, Lanzhou 730000, China)
Abstract：Objective To study the effects of single leaf Asarum on pulmonary ventilation in
experimental rats with syndrome of cold fluid shooting lung. Methods Wistar rats were randomly
divided into three groups including singe leaf Asarum group [fed with water extracts of singe leaf
Asarum 1 mL/(kg·d)], singe leaf Asarumi Miq group [fed with water extracts of singe leaf Asarumi
Miq 1 mL/(kg·d)] and normal saline group [fed with 0.9% normal saline 1 mL/(kg·d)]. After fed
continually for 6 days, whole lung of rats were washed with normal saline [7 ℃, 2.5 mL/(kg·d)] and then
were perfused for 30 seconds. This treatment was repeated 5 times every 5 minutes to make the model of
cold fluid shooting lung. The fluid of perfusion was collected and detected. The changes of TXB2, ET,
protein and phospholipids of the fluid were measured before and after lavage. Results TXB2, ET and protein
in the perfusing fluid ascended obviously, while phospholipids were low in normal saline group. TXB2 and
ET in singe leaf Asarum group and single leaf Asarumi Miq group were less than that in normal saline
group (P＜0.05), but no statistical significance was found between single leaf Asarum group and single leaf
Asarumi Miq group. Conclusions Single leaf Asarum can reduce TXB2, ET and protein in perfusing fluid
enhance pulmonary ventilation in experimental rats with syndrome of cold fluid shooting lung.
Key words：single leaf Asarum；single leaf Asarumi Miq；thromboxane B2；endothelin；phospholipid；
animal model
《中华人民共和国药典》规定细辛正品为马兜铃科植物北
细辛、汉城细辛或华细辛的干燥全草[1],其中华细辛与汉城细
辛临床又统称为辽细辛。但由于以上品种生长缓慢、货源紧缺,
临床广泛以马兜铃科植物单叶细辛的带根全草作为代用品使
用,习称“甘肃细辛”或“草细辛”。笔者根据中医理论复制了
寒饮射肺证动物模型,就单叶细辛对该动物模型肺通气功能相
基金项目：甘肃省教育厅基金(02B4-04)
关指标的影响进行了研究,现报道如下。
1 实验材料
1.1 仪器
SN-682 放射免疫计数器,南京桑力电子设备厂生产；
BECKMAN DU-65 型自动分光光度计,SHIMADIV 公司生产；可调
式微量移液器,上海求精生化试剂仪器有限公司生产；XYJ80-2
电动离心机：金坛市恒丰仪器厂；XK96-A 型快速混匀器,上海
手术器械厂生产；CS930 型薄层扫描仪,SHIMADIV 公司生产。
·24· Chinese Journal of Information on TCM May 2009 Vol.16 No.5
1.2 药物与试剂
单叶细辛与辽细辛由甘肃中医学院附属医院中药房提供,
经本院中药教研室鉴定,药化教研室用水提法模拟临床用药剂
型制备成浓度为 1 g 原药材/mL 的溶液备用。乌拉坦(25%氨基
甲酸乙酯),上海化学试剂供应站提供,批号 0402032。血清内
皮素(ET)、血栓素(TXB2)放射免疫分析药盒均由北京科美东雅
生物技术有限公司提供。
1.3 动物
7～8 周龄 Wistar 大鼠,体重(200±20)g,雌雄兼用,兰州
生物制品研究所提供。
2 实验方法
2.1 分组及给药
Wistar 大鼠 30 只,随机分为 3组：单叶细辛组,以单叶细
辛水提液 1 mL/kg 灌胃；辽细辛组,以辽细辛水提取液 1 mL/kg
灌胃；盐水组,以 0.9%NaCl 溶液 1 mL/kg 灌胃。各组给药均为
每日 1次,连续给药 6 d。
2.2 整肺灌洗复制寒饮射肺模型
各组动物于第 6 日灌药后以 25%氨基甲酸乙脂(4 mL/kg)
腹腔注射麻醉,背位固定,颈部正中切口,分离右侧颈总动脉备
用,用 20 号套管针穿刺置管并结扎固定,备采血以监测血气。
钝性分离暴露气管,于甲状软骨下方做纵行切口,插入“Y”型
气管插管,固定后,吸净血液,左侧管经张力换能器与 BioLap410
生物信号监测系统呼吸通道相连,30 Hz 滤波,时间常数 0.1 s,
速度 1 mm/s,待呼吸平稳后读取相关指标；右侧管插入软塑料
内套管,固定后按 2.5 mL/kg 灌注 7 ℃冷生理盐水入肺内,保
留 30 s 后抽出,5 min 后重复灌洗 1次,连续 5次,合并 5次灌
洗液备用。按上述方法,寒饮射肺动物模型复制成功,按要求取
标本并进行检测。
2.3 血栓素、内皮素的检测
TXB2、ET 采用放射免疫分析法,操作严格按说明书进行。
所需血样均由颈总动脉采集。
2.4 磷脂与蛋白质的检测
分别取各组 5 次灌洗液的混合液各 2 管,低速离心去除细
胞杂物后,一管以氯仿-甲醇(2∶1)萃取,定磷法,用自动分光光
度计测定总磷酯含量；薄层层析法展开,钼酸法染色,用薄层扫
描仪分析磷脂成分。另一管用自动分光光度计比色测定蛋白含
量。观察并比较各组混合灌洗液中磷脂与蛋白质含量的变化。
3 统计学方法
应用 SPSS10.0统计软件包处理,各组实验数据以—x±s表示,
组间差异采用 LSD 检验。
4 结果
4.1 一般情况
盐水组大鼠出现闭眼,毛发竖直,精神萎靡,呈蜷缩状,懒
动,头藏于腹下,呼吸急促,爪趾、口唇黏膜紫绀,活动减少,捕
捉时不逃窜或挣扎不强烈。单叶细辛组、辽细辛组上述症状明
显改善,一般状况良好,呼吸较平稳,精神状况和活动表现与平常
无异。毛发顺滑,反应敏感,捕捉时逃窜并强烈挣扎。无死亡大鼠。
4.2 单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠血栓素与内皮素的影响
(见表 1)
表 1 单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠 TXB2与 ET 的影响(
—
x±s,pg/mL)
组别 时间 n TXB2 ET
盐水组 灌洗前 10 32.6±15.4 12.6±3.3
灌洗后 10 78.5±31.5 36.6±6.8
单叶细辛组 灌洗前 10 33.3±16.6 11.8±3.4
灌洗后 10 42.4±26.2* 20.5±5.0*
辽细辛组 灌洗前 10 32.1±14.3 12.2±3.8
灌洗后 10 46.6±25.0** 24.0±6.6**
注：与盐水组比较,*P＜0.05,**P＜0.01(下同)
4.3 单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠肺灌洗液中磷脂与蛋白
质含量的影响(见表 2)
表 2 单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠肺灌洗液中磷脂与蛋白质含量的影响(—x±s)
组别 n 蛋白质(μg/mL) 总磷脂(μg/mL) 卵磷脂(%) 磷脂酰甘油(%)
盐水组 10 391.88±68.43 91.09±26.63 41.33±2.71 2.43±0.46
单叶细辛组 10 237.57±52.36* 266.28±62.55** 84.55±4.05* 6.88±1.02**
辽细辛组 10 303.06±60.25* 280.06±60.57** 85.26±4.04* 6.21±0.90**
5 讨论
寒饮射肺证属中医肺系常见病证,常见咳喘气急、痰多稀
白以及舌苔水滑、脉滑等。细辛可温化寒饮,为治疗寒饮射肺
证常用药物。由于寒冷因素可导致各种炎性介质和细胞因子的
释放,促使气管平滑肌收缩、气道反应性增高、肺通气阻力增
大。近年来发现,呼吸道上皮细胞和血管内皮细胞产生的 ET
是引起平滑肌收缩、痉挛和气道重建的重要介质,也是现阶段
所知的人体内最强活性的长效缩血管多肽,能强烈而持久地收
缩血管,对动静脉均有很大的致挛作用,能直接收缩肺血管,使
肺血流量减少,同时刺激血管平滑肌细胞,加重肺损害,其收缩
强度是白三烯的 100 倍和乙酰胆碱的 1 000 倍。ET 除可以直接
作用于呼吸道平滑肌,也可以促进介质的释放间接作用于呼吸
道,还能作用于呼吸道的神经导致呼吸道收缩[2]。这些因素不
仅加剧平滑肌的收缩程度,还使小气道平滑肌自身的收缩反应
性异常增高,最终导致气道高反应性和通气功能低下[3]。
TXA2可使血小板内环磷酸腺苷减少,游离Ca2+增多,以致血
小板脱粒释放内源性 ADP,因此,它是很强的血小板诱聚剂和
血管收缩剂。TXB2是其代谢产物,TXB2与 ET 通过不同途径加重
肺脏损害。所以,实验结果中盐水组 TXB2、ET 等缩血管物质的
明显升高说明血管发生了强烈收缩,这不但使肺血流量明显减
少,还可能引起微血栓形成,从而加重肺损伤。盐水组 TXB2、ET
在灌洗前后变化非常明显,两者均明显升高。但单叶细辛组、
辽细辛组各指标在灌洗前后变化相对较小,提示单叶细辛可能
通过抑制 TXA2、ET 合成或分泌的某一环节从而改善有效肺泡
通气量,稳定肺泡血-气屏障,减少肺血管渗出。
肺泡表面张力是形成肺通气阻力的主要原因之一[4]。肺表
2009 年 5 月第 16 卷第 5 期 中国中医药信息杂志 ·25·
面活性物质(PS)可降低肺泡表面张力,Ⅱ型上皮细胞是 PS 合
成和储存的场所。PS 是由磷脂、中性脂肪和特异蛋白组成的
复合物,其中磷脂占 80%～85%,以二棕榈卵磷脂(DPPC)及磷脂
酰甘油(PG)为主,8%～10%是一些表面活性蛋白质(surfactant
protein,SP),特异性蛋白质是 PS 中重要的免疫物质。SP 包括
亲水性 SP-A、SP-D 和疏水性的 SP-B、SP-C,以 SP-A 的含量最
高。二棕榈卵磷脂是降低肺泡表面张力的主要成分,但必须通
过 SP 才能起作用[5]。
众所周知,血中蛋白漏入肺泡是引起肺损伤的原因之一,
因而人们猜测在疾病时 PS 相关蛋白也可漏入血管内,故血清
SP-A 水平可能是一个判断肺功能疾病时所致肺毛细支气管膜
损伤的有用指标。有人认为,肺损伤时血浆蛋白渗入肺泡,有抑
制 PS 功能的作用[6]。
本研究采用 7 ℃冷生理盐水做整肺灌洗的方法复制了寒
饮射肺的动物模型。结果表明,盐水组蛋白质含量高,而磷脂含
量则较低；单叶细辛组、辽细辛组灌洗液中蛋白质含量较低,
而磷脂含量较高,且单叶细辛与辽细辛组间无明显差异。其中
占总磷脂绝大部分比例的卵磷脂和磷脂酰甘油是 PS 的主要成
分,表明单叶细辛具有良好的保护Ⅱ型肺泡上皮细胞合成、分
泌 PS 的作用。灌洗液中的蛋白质成分主要来源于小气道与肺
泡表面毛细血管血液,单叶细辛组蛋白质含量明显少于盐水组,
表明单叶细辛尚具有保护肺毛细血管内皮细胞,降低对寒冷、
化学物质和肺水肿的血管不良反应,减少蛋白质渗出的作用。
综上所述,单叶细辛对寒饮射肺模型大鼠肺通气功能的改
善有可能通过减少炎性介质的释放、降低气道反应性和舒张支
气管平滑肌、降低气道阻力等途径来实现。初步表明单叶细辛
在治疗寒饮射肺,气逆喘咳方面具有优势。至于单叶细辛在治
疗过程中对其他炎性介质和细胞因子的影响,有待今后进一步
研究。
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(收稿日期：2008-09-05,编辑：华强)
(上接第 6 页) 时常因为立法上的缺陷以及法律法规之间
甚至部门之间利益的不一致而遭遇尴尬的局面。对我国而言,
传统药物知识属于一种特殊的知识存量,它不是知识增量所能
代替的。我国目前在国际知识(增量)生产分工中处于明显的劣
势,而传统药物知识是有可能使我国在国际竞争中保持一席之
地的少数底牌之一。如果我们自己不注意传统知识的开发和保
护,就将丧失宝贵的资源。因此,为了国家的整体利益,我国应该
摒弃一些学究式的争论,避免部门之间集团利益的纷扰,以有效
保护为核心,以国家利益为最高原则,统一各相关部门的优势资
源,积极为我国传统药物知识的相关立法和司法保驾护航。
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