全 文 ：单叶细辛对家兔心肌的急性毒性作用
明海霞 陈彦文1 王 强1 黄世佐2
(甘肃中医学院生理教研室 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室，甘肃 兰州 730000)
〔摘 要〕 目的 观察单叶细辛对家兔心肌急性毒性作用的影响。方法 将家兔随机分为单叶细辛组、辽细辛组和生理盐水组。每组 10 只，
分别按 1 ml /kg静注 1 g /ml的单叶细辛、辽细辛提取液和等量生理盐水。常规静脉麻醉，经左侧颈总动脉插管至左心室，以压力换能器连接 Biolap-
420E生物信号系统的血流动力学通道，心电导联线连接心电通道。全部血样均经颈静脉取血，观察并比较注射药物前后各组平均动脉压(MAP)、心
输出量(CO)、心指数(CI)、左室收缩压(LVSP)、左心射血功能(LVSW)和心肌耗氧量(MVO2)、心率(HR)、心电图 P-R间期、Q-T 间期、缺血性 T 波
和损伤电流，以及血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CPK)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌红蛋白(Mb)和肌钙蛋白 I(CTnI)等指标的变化。结
果 除 CI外，其余各血流动力学指标单叶细辛与辽细辛均有显著差异(P ＜ 0. 05) ，单叶细辛对 ECG中 ST-T的改变以及对心肌 AST、CPK、CTnI等酶
学指标升高的影响均高于辽细辛(P ＜ 0. 05)。结论 单叶细辛水溶性成分对心肌细胞的毒性高于辽细辛。
〔关键词〕 单叶细辛;辽细辛;心肌损害
〔中图分类号〕 R992 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2015)05-1337-03;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2015. 05. 087
基金项目:甘肃省教育厅科研项目(No. 02B4-04)
1 甘肃中医学院解剖教研室 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室
2 甘肃中医学院中药教研室
第一作者:明海霞(1975-) ，女，副教授，在读博士，硕士生导师，主要从
事人体生理功能的中西医治疗与辨证研究。
细辛为解表散寒、祛风止痛和温肺化饮的常用中药，《中国
药典》规定其正品为马兜玲科植物北细辛 Asarum heterotropoides
Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim. )Kitag.、汉城细辛
A. sieboldii Miq . Var. Seoulense Nakai(二者统称辽细辛)、华细辛
A. sieboldii Miq．的干燥全草〔1〕。本品味辛温，有小毒，归肺、肾、
心经，常用煎剂量为 2 ～ 5 g /剂、散剂 0. 5 ～ 1g /次。目前我国西
部广大地区临床上多以单叶细辛 Asarum himalaicum HooK. f. et
Theoms. ex Klotgsch的全草作为细辛代用品使用，由于临床人
员一般认为该品种毒性较小，通常用量较大，汤剂动辄 7 ～ 8 g，
甚至达到 10 g以上。迄今对单叶细辛的心肌毒性研究报道缺
如，临床用法缺乏科学根据。为客观评价其安全性，本文就单
叶细辛对家兔心肌急性毒性作用的影响进行了初步研究。
1 材料与仪器
1. 1 动物 SPF健康家兔，体重约为(2. 0 ± 0. 2)kg，雌雄不
拘，由中国农业科学院兰州中兽医研究所提供。
1. 2 主要药品和试剂 辽细辛 Asarum heteropoides Fr. Var.
mandshuricum(maxim. )Kitag、单叶细辛 Asarum himalaicum
Hook. f et Theoms . ex Klotgsch ，由甘肃中医学院附属医院中药
房 提供，经本院中药鉴定教研室鉴定，由药化教研室采用水提
醇沉法模拟临床用药剂型制备成浓度为 1 g(含生药)/ml的提
取液，同时以水蒸气蒸馏法收集挥发油备用。25%氨基甲酸乙
酯，上海化学试剂供应站提供(批号:0902032) ;生理盐水:甘肃
扶正药业科技股份有限公司;肝素钠注射液，江苏常州制药厂
生产，批号 090902-2。
1. 3 主要仪器 Biolap-420E生物信号分析系统、压力换能器:
成都泰盟生物科技公司生产。导管:英国 Smiths Medical公司;
可调式微量移液器:上海求精生化试剂仪器有限公司生产。
XYJ80-2 电动离心机:金坛市恒丰仪器厂生产。XK96-A型快速
混匀器:上海手术器械厂生产 。以上仪器由甘肃中医学院基
础医学实验教学中心和中药药理与毒理学重点实验室提供。
1. 4 方法 家兔 30 只，随机分为单叶细辛组、辽细辛组与生
理盐水组，每组 10 只，25%氨基甲酸乙酯按 4 ml /kg 耳缘静脉
麻醉后，颈部正中切口，经左侧颈静脉插入“Y”型导管(PE-50，
id 0. 58 mm)进入上腔静脉，插管两外端分别连接给药注射器
和盛有生理盐水的恒速自动注射器。
1. 4. 1 血流动力学测定 钝性分离左侧颈总动脉，插入心导
管(PE-90，id 0. 86 mm) ，并将其经主动脉缓慢送至左心室，另
一端经压力换能器连接 Biolap-420E生物信号分析系统的血流
动力学通道，切入心血管血流动力学功能实验的采样和分析程
序，300 Hz 高频滤波，灵敏度 10 mm/10 mmHg，速度10 mm/s。
待基线平稳后先记录基础血流动力学指标，按 1 ml /kg(相当于
临床成人常用煎服剂量的50 倍) ，颈静脉注射相应药物后连续
观察并比较各组平均动脉压(MAP)、心输出量(CO)、心指数
(CI)、左室收缩压(LVSP)、左心射血功能(LVSW)、心肌耗氧量
(MVO2)等指标的变化。
1. 4. 2 ECG描记 家兔麻醉后分别从四肢安置针状电极，通
过心电图肢体导联连线连接 Biolap-420E 系统心电通道，灵敏
度 10 mm/1 mv，速度 25 mm/s。待基线平稳后记录Ⅱ导联常规
ECG，计算并比较各组用药后 P-R间期，P-P间期、Q-T间期、ST-
T异常持续时间等指标的变化。
1. 4. 3 心肌酶学检测 各组动物于药物注射后第 4 小时从
颈静脉取血 2 ～ 3 ml沿管壁缓慢注入加有 0. 1%肝素钠 2 滴的
试管中，检测血清乳酸脱氧酶(LDH)、门冬氨酸氨基转移酶
(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白(CT-
nI)等指标，并比较各组相关指标的变化。
1. 5 统计学方法 计量资料以 x ± s表示。采用 SPSS13. 0 软
件进行 t检验。
·7331·明海霞等 单叶细辛对家兔心肌的急性毒性作用 第 5 期
2 结 果
2. 1 单叶细辛对家兔血流动力学指标的影响 药物组在给
药后在 30 ～ 40 s血压等血流动力学指标开始上升，约 2 min 左
右达到峰值，给药后约 3 min各项指标逐渐回落，第 7 ～ 9 分钟
基本恢复正常。各组均计算给药后第 2 分钟时的血流动力学
指标。除心指数 CI 外，其余各项指标单叶细辛组与辽细辛组
均有显著差异(P ＜ 0. 05) ，见表 1。
2. 2 单叶细辛对家兔心电活动的影响 单叶细辛组在用药
后 30 s出现 P-R间期延长、Q-T 间期延长，约 1 min 左右出现
ST-T改变:T波由圆钝变为高尖对称，形成“缺血性 T 波”，3 ～
5 min时 ST 段明显抬高与 T 波融合成单向曲线，形成“损伤电
流”，持续约 20 min 后逐渐恢复正常，而辽细辛组心电变化相
对较轻微，见表 2。单叶细辛与辽细辛对家兔心率均无明显影
响，与生理盐水组比较无统计学意义(P ＞ 0. 05)。尽管两种细
辛对 P-R间期均有不同程度的延长，但无统计学意义。而 Q-T
间期、“缺血性 T”持续时间与“单向曲线”持续时间，单叶细辛
组均明显长于辽细辛组(P ＜ 0. 05)。见表 2。
2. 3 单叶细辛对家兔心肌酶学的影响 给药后单叶细辛除
对 LDH和 Mb无明显影响外，其他心肌酶学和相关生化指标均
较高，且与辽细辛组有统计学意义(P ＜ 0. 05)。见表 3。
表 1 用药前后血流动力学指标变化的组间比较(x ± s，n =10)
组别 MAP(kPa) CO(L /min) CI(L·min －1·m －2) LVSP(kPa) LVSW(kg /m)MVO2(ml·g － 1·min －1)
单叶细辛组 用药前 11. 86 ± 1. 26 0. 21 ± 0. 03 0. 11 ± 0. 01 24. 3 ± 2. 6 3. 84 ± 0. 2 4 090 ± 702
用药后 14. 78 ± 1. 28 0. 28 ± 0. 05 0. 14 ± 0. 01 25. 6 ± 2. 8 4. 05 ± 0. 30 5 208 ± 876
差值 2. 92 ± 0. 441)3) 0. 07 ± 0. 011)3) 0. 03 ± 0. 0042) 1. 3 ± 0. 31)3) 0. 19 ± 0. 071)3) 118 ± 2661)3)
辽细辛组 用药前 11. 50 ± 1. 20 0. 22 ± 0. 02 0. 11 ± 0. 01 24. 5 ± 2. 7 3. 82 ± 0. 23 4 070 ± 696
用药后 12. 77 ± 1. 25 0. 25 ± 0. 04 0. 13 ± 0. 01 25. 1 ± 2. 8 3. 92 ± 0. 24 4 649 ± 752
差值 1. 27 ± 0. 25 0. 03 ± 0. 005 0. 02 ± 0. 003 0. 6 ± 0. 07 0. 10 ± 0. 04 579 ± 143
生理盐水组 用药前 11. 55 ± 1. 18 0. 22 ± 0. 03 0. 13 ± 0. 01 24. 2 ± 2. 5 3. 83 ± 0. 22 4 088 ± 660
用药后 11. 90 ± 1. 25 0. 23 ± 0. 04 0. 12 ± 0. 01 24. 5 ± 2. 6 3. 88 ± 0. 28 4 334 ± 707
差值 0. 45 ± 0. 09 0. 01 ± 0. 003 0. 01 ± 0. 004 0. 3 ± 0. 04 0. 05 ± 0. 002 246 ± 104
与辽细辛组比较:1)P ＜ 0. 05;与生理盐水组比较:2)P ＜ 0. 05，3)P ＜ 0. 01
表 2 用药后心电指标变化的组间比较(x ± s，n =10)
组别 心率(次 /min) P-R(s) Q-T(s) 缺血性 T(s) 单向曲线(s)
单叶细辛组 265 ± 42 0. 24 ± 0. 05 0. 26 ± 0. 063) 186 ± 641)4) 914 ± 2262)4)
辽细辛组 256 ± 50 0. 22 ± 0. 03 0. 20 ± 0. 04 122 ± 40 266 ± 55
生理盐水组 248 ± 48 0. 20 ± 0. 02 0. 14 ± 0. 03 0 0
与辽细辛组比较:1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与生理盐水组比较:3)P ＜ 0. 05，4)P ＜ 0. 01
表 3 给药后家兔心肌酶学指标的组间比较(x ± s，n =10)
组别 LDH(U /L) AST(U /L) CPK(U /dl) Mb(μg /L) CTnT(μg /L)
单叶细辛组 390. 2 ± 76. 6 67. 5 ± 18. 81)2) 81. 6 ± 16. 01)2) 60. 6 ± 9. 1 0. 15 ± 0. 031)2)
辽细辛组 366 ± 73. 0 38. 2 ± 9. 6 50. 6 ± 10. 1 54. 4 ± 8. 8 0. 07 ± 0. 003
生理盐水组 326 ± 64. 2 28. 3 ± 5. 6 41. 4 ± 6. 9 48. 3 ± 8. 0 0. 06 ± 0. 002
与辽细辛组比较:1)P ＜ 0. 05;与生理盐水组比较:2)P ＜ 0. 01
3 讨 论
细辛首载于《神农本草经》，列为上品，属“无毒，多服，久服不
伤人”的品种〔2〕，但南北朝时期的《雷公炮炙论》已初步认识到细辛
有毒:“凡使，……拣去双叶，服之害人”。宋代的陈承在其《重广补
注神农本草及图经》(李时珍称之为《本草别说》)最早指出:“细辛
单用末，不过半钱匕，多则气闷塞不通者死，虽死无伤〔3〕”。
细辛挥发油对麻醉犬和猫有降压作用，而煎剂则可明显升
压〔4〕，和其增强心肌收缩力，提高左心射血速度和每搏射血量，
最终使 CO增大有关。而其正性肌力作用增强了心肌氧耗量，
使 ATP分解增多，心肌细胞膜上的钠泵由于缺乏 ATP而运转失
常，使心肌细胞内的钠离子(Na +)不能及时主动转运出细胞
外，从而导致细胞水肿和损伤〔5〕。钠泵运转障碍也必然要影响
心肌 Na + -Ca2 +交换，同时 ATP缺乏时 Ca2 +泵运转同样失调，使
心室肌细胞 2 期平台期内流的 Ca2 +不能及时转运出细胞，造成
Ca2 +超载和平台期延长，导致心肌细胞严重损伤。动物实验证
实细辛可通过降低细胞内钙浓度，松弛动物血管张力〔6〕。
本实验中 QT延长、ST-T 异常，出现严重的心肌损伤电流，
都是单叶细辛对心脏毒性作用的有力证据。心肌细胞损伤后，
细胞中的一些酶或结构蛋白质可释放入血液，造成血清酶活力
不同程度的增高。本实验除 LDH与 Mb 外，其余各项生化指标
单叶细辛组都明显高于辽细辛组。LDH 是心肌损伤最重要的
检测指标之一，在心肌损伤 48 h 后开始升高〔7〕，可持续 10 ～
14 d，药物组 LDH无明显升高，可能与采血时间较早(损伤后第
4 小时采血) ，LDH尚未明显升高有关。CPK 主要参与 ATP 的
·8331· 中国老年学杂志 2015 年 3 月第 35 卷
再生，维持细胞内 ATP浓度，在心肌损伤 4 h后即可升高〔7〕，但
持续时间较短，约 3 ～ 4 d 后恢复正常。Mb 是一种低分子含血
红素的蛋白质，在心肌损伤 2 h后开始升高，15 h达到峰值。本
实验药物组 Mb变化不大，可能与该指标变化较快，且细辛仅导
致心肌缺血的损伤并未造成心肌坏死有关。CTnI 是心肌细胞
肌钙蛋白的一种亚基，可通过变构效应参与肌肉收缩，当心肌
损伤时 2 h即能升高〔7〕，对微小的心肌损伤亦有反应，是一个很
敏感的指标。
细辛的毒性成分主要为挥发油中所含的黄樟醚，虽然单叶
细辛的挥发油含量(1. 68%)远低于辽细辛 3. 18%〔1〕，但根据本
实验结果，单叶细辛水溶性成分对心肌细胞的毒性作用则明显
强于辽细辛。由于以往研究认为细辛毒性主要在于其挥发油，
于是某些文献根据挥发油含量的测定数值，提出单叶细辛的临
床建议用量，如《甘肃省中药资源普查资料汇编》提出甘肃细辛
(单叶细辛)用量可比北细辛加大 3 ～ 5 倍;罗文蓉等〔8〕认为可
增至北细辛的 5 倍。因此，单叶细辛作为煎剂使用于临床时，
其用量仍有审慎处置的必要。
4 参考文献
1 中华人民共和国药典〔S〕． 第一部． 北京:化学工业出版社，2010:
159．
2 黄世佐．单叶细辛及相关细辛品种的古今研究考述〔J〕．甘肃中医学
院学报，2004;21(2) :50-3．
3 王 磊，汪付田 . 甘肃细辛的急性毒性研究〔J〕．甘肃中医，2005;18
(12) :43-4．
4 陈 超，郑卫红，熊素兵，等．细辛与 Verapamil 镇痛协同作用的实验
研究〔J〕．中国药理学通报，2003;19(3) :337．
5 姬春好 . 细辛用法用量古今考辨〔J〕．辽宁中医药大学学报，2008;10
(2) :140-2．
6 郭 婷，黎元元．灯盏细辛注射液药理和毒理作用研究进展〔J〕． 中
国中药杂志，2012;37(17) :2820-3．
7 陈文彬．诊断学〔M〕．第 7 版．北京:人民卫生出版社，2009;232-3．
8 罗文蓉，牛永红．甘肃细辛的生药鉴定〔J〕． 甘肃中医，1999;12(1) :
36-7．
〔2013-08-01 修回〕
(编辑 赵慧玲 /曹梦园)
何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺 p16 /Rb细胞转导通路相关蛋白的影响
葛志华 崔宙开1 杨 宁 李俊玫 王春艳2 柴淑慧3 杨佳宁
(承德医学院附属医院科研处，河北 承德 067000)
〔摘 要〕 目的 观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺 p16 /Rb细胞信号转导通路相关蛋白的影响。方法 选用 8 周龄 SD雌性大鼠 50 只，随机
分为何首乌饮干预预防和治疗性实验两大部分，分为五组，每组 5 只，用 D-半乳糖制造衰老大鼠模型，Western印迹法检测 p16、非磷酸化 Rb 蛋白含
量。结果 预防各组间 p16 和非磷酸化 Rb 蛋白表达均以模型组最高，正常组最低，各预防组处于中间水平，其中以预防中剂量组(Pm)最低(P ＜
0. 01)。治疗各组间 p16 和非磷酸化 Rb蛋白表达均以自然恢复组(S-R)最高，阴性对照组最低，各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最低(P ＜ 0. 01)。
结论 何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与激活 Rb /p16 通路有关。
〔关键词〕 何首乌饮;衰老大鼠;下颌下腺;p16;Rb
〔中图分类号〕 R289. 5 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2015)05-1339-03;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2015. 05. 088
基金项目:河北省引进留学人员资助项目(2012001056)
1 平泉县医院 2 承德医学院组胚教研室 3 承德市中医院
通讯作者:王春艳(1960-) ，女，教授，硕士生导师，主要从事组织胚胎学
研究。
第一作者:葛志华(1956-) ，女，教授，博士，硕士生导师，主要从事口腔
组织病理学研究。
p16 基因是一种重要的抑癌基因，是细胞周期的负调节因
子，通过抑制 CDK的活性使 Rb正常地行使 G1 期阻滞功能，使
细胞周期停止，阻断细胞增殖〔1 ～ 3〕。近年研究发现它与细胞衰
老过程关系密切。Krishnamurthy 等〔4〕提出 p16 的表达能够作
为生理上的衰老的一个标志物。本文观察何首乌饮对衰老大
鼠下颌下腺 p16、非磷酸化 Rb蛋白表达的影响。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试剂 Gel3000 电泳图像定量分析系统(中国北
京) ;DYY-6B型稳压稳流电泳仪(德国 Leica公司)。p16 和非
磷酸化 Rb单克隆抗体(北京中杉金桥生物有限公司) ;BCA 蛋
白质定量检测试剂盒、细胞裂解试剂盒(上海生工生物工程技
术服务有限公司) ;ECL检测试剂盒(上海吉泰新绎生物科技有
限公司)。
1. 2 药物配方及用法 何首乌饮由炙何首乌、怀牛膝、肉苁
蓉、淫羊藿、丹参、茯苓组成(本院贾春华教授提供) ;何首乌饮
给药方法:高、中、低剂量何首乌饮分别为 3. 872、1. 936 及
0. 968 g·100 g －1·d －1，分别水煎浓缩成 0. 6 ml·100 g －1·
d －1，灌胃，1 次 /d。
1. 3 实验动物的选择及分组 选用 8 周龄清洁级 SD 雌性大
鼠 50 只，体重 180 ～ 220 g，实验大鼠购自河北省实验动物中心
合格证编号:605106，随机分为预防性和治疗性两大实验部分，
每部分 5 组，每组 5 只。
1. 4 模型的建立及各组动物的处理方法 模型组大鼠腹腔注
射 6% D-半乳糖 300 mg· kg －1· d －1(0. 5 ml·100 mg －1·
d －1) ，连续 60 d。预防性实验部分:正常组(NC 组)正常喂养
60 d;模型组腹腔注射 D-半乳糖，1 次 /d，连续 60 d;其余 3 组大
·9331·葛志华等 何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺 p16 /Rb细胞转导通路相关蛋白的影响 第 5 期