全 文 ：Original Experimental Research　实验论著
单叶细辛对家兔肾功能的影响
明海霞 ,刘家骏 ,黄世佐
(甘肃中医学院生理学教研室 , 甘肃 兰州 730000)
[ 摘要] 　目的:研究单叶细辛对家兔肾功能的影响。 方法:将家兔随机分为单叶细辛组 、辽细辛对照组和生理盐水对照组
3 组 , 分别测定静脉注射药物前后的每分钟尿量 、尿液 pH 值 、尿蛋白 、尿糖 、尿潜血 、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血栓素 B2
(TXB2)、6-酮-前列腺素 F1α(6-ke to-PGF1α)、TXB2/6-keto-PGF1α的比值 、内皮素(ET)、对氨基马尿酸清除率及酚红排泄率等指
标。结果:单叶细辛在一定剂量下可导致家兔急性肾衰竭 , 各项指标与生理盐水对照组比较有统计学差异;与辽细辛对照组
比较 ,各项指标均较低 , 但除 SCr 外 ,统计学处理无显著性差异。结论:单叶细辛对家兔肾功能有损害作用 , 但其肾毒性小于辽
细辛。
[ 关键词] 　单叶细辛;辽细辛;急性肾衰竭;动物 , 实验
[ 中图分类号] 　R285.5　　[ 文献标识码] 　A　　[ 文章编号] 　1672-1977(2004)03-0199-04
Influence of single leaf Asarum himalaicum on renal function of rabbits
M ING Hai-Xia , L IU Jia-Jun ,HUANG Shi-Zuo
(Department of Physio logy , Gansu College o f T raditional Chinese Medicine , Lanzhou , Gansu P rovince 730000 , China)
ABSTRACT　Objective:To study the influence of sing le leaf Asarum himalaicum on the renal function of rabbits.Methods:Rabbits
w ere divided into three groups.Asarum himalaicum , Asarum heterotropoides and normal saline w ere intravenously administered to
the rabbits of one group respectively.The urine volume per minute , urine pH , urine glucose , pro tein and red blood cells , BUN , SCr ,
TXB2 , 6-keto-PGF 1α, TXB2/6-keto-PGF1α, endothelin , p-aminohippuric acid clearance rate and phenolsulfonphthalein excretion rate
w ere tested before and after the administration.Results:A certain dosage of sing le leaf Asarum himalaicum caused acute renal failure
in rabbits.The indices tested were significantly diffrent between rabbits administered Asarum himalaicum and normal saline.As
compared w ith the rabbits administered Asarum heterotropoides , the results o f indices tested decreased , but without sta tistical signifi-
cance, except for SCr.Conclusion:The single leaf Asarum himalaicum can cause renal damage to rabbits.I ts renal toxicity is low er
that that of Asarum heterotropoides.
KEY WORDS　 Asarum himalaicum ;Asarum heterotropoides;acute renal failure;animal , laboratory
J Chin Integ r Med , 2004 , 2(3):199-202
①　细辛始载于《神农本草经》 ,列为上品 ,其“味辛
温 ,主咳逆 、头痛 、脑动 、百节拘挛 、风湿痹痛 、死肌。
明目 ,利九窍”。因其具有祛风散寒 、通窍止痛 、温肺
化饮的功能 ,临床多用于治疗风寒感冒 、头痛 、牙痛 、
鼻塞 、鼻渊及痰饮 、喘咳等症 。2000年版《中华人民
共和国药典》规定细辛正品为马兜铃科植物北细辛
(又名辽细辛)Asarum heterotropoides F .Schm.
var.mandshuricum(Maxim.)Kitag .,汉城细辛 A.
sieboldi i Miq.var.seoulense Nakai 或华细辛 A.
sieboldi i Miq.的干燥全草 。但目前全国各地尚有一
些代用品种在实际应用 ,甘肃地区临床多以马兜铃
科植物单叶细辛 Asarum himalaicum Hook.f.et
Thoms.exk lotzsch 的带根全草作为代用品使用 ,习
称“甘肃细辛”或“草细辛”。自古以来 ,细辛即被视
为有毒药品[ 1] 。鉴于单叶细辛属马兜铃科植物 ,而
近年来“马兜铃肾病”一说盛行 ,为客观评价其毒性 ,
指导临床安全合理用药 ,我们就单叶细辛对家兔肾
功能的影响进行了研究 ,现报告如下。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　药品　单叶细辛 、辽细辛由甘肃中医学院中
药教研室提供 ,并经该院中药鉴定教研室鉴定 ,由药
学综合实验室采用水提醇沉法各制成浓度相当于生
药量 l g/ml的提取液。
1.1.2　主要仪器　尿液快速分析仪(100/MA-4210
型)、Konelab 60i全自动生化分析仪 ,桂林市医疗电
子仪器厂生产;RDB-3C 微量恒速蠕动泵 ,江苏省张
家港医用电子仪器厂生产;SN-682 放射免疫计数
·199·中西医结合学报 2004年 5月第 2卷第 3期　J Chin Integr Med , May 2004 , Vol.2 , No.3
① [ 基金项目] 　甘肃省教育厅科研项目(No.02B4-04)[ 作者简介] 　明海霞(1976-),女 ,助教,在读硕士研究生.
Correspondence to:MING Hai-Xia.E-mai l:zh h2004222@sina.com
器 ,南京桑力电子设备厂生产;721 型分光光度计 ,
上海第三分析仪器厂生产 。
1.1.3　试剂　乌拉坦(25%氨基甲酸乙酯),上海化
学试剂供应站提供(批号:9902032);0.6%酚磺酞
注射液 ,上海市奉贤县制药厂生产(批号:010722)。
1.1.4　动物　健康家兔 ,体重(2.0±0.2)kg/只 ,雌
雄不拘 ,由中国农业科学院兰州中兽医研究所提供(动
物号:2002-036)。取家兔21只 ,随机分为 3组 ,即单叶
细辛组 、辽细辛对照组和生理盐水对照组 ,每组 7只。
1.2　实验方法
1.2.1 　实验动物的处理 　各组以 25%乌拉坦
4 ml/kg从耳缘静脉注射麻醉后 ,施行双侧输尿管插
管手术 ,自耻骨联合上缘沿正中线向上作一长约
5 cm的皮肤切口 ,将膀胱翻转移出体外。从周围组织
中分离一小段输尿管 ,用线将输尿管近膀胱端结扎 ,
然后在结扎上方的管壁处斜剪一小切口 ,把充满生理
盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管内 ,用线结
扎 、固定好 ,用 Y形管将两侧的细塑料插管连起。手
术完毕后 ,将膀胱送回腹腔 ,用温生理盐水纱布覆盖
在腹部创口上 ,以保持腹腔内温度 。Y形管另一端连
接至记滴器 ,观察并记录 20 min的尿量作为基础尿
量。然后 ,两药物组以 l ml/kg 剂量〔相当于临床成人
细辛常用煎煮剂量(5g)的 50倍〕分别从耳缘静脉注
射单叶细辛和辽细辛提取液;生理盐水对照组静脉注
射等量的生理盐水。注射前和注射药物后5 h测定每
分钟平均尿量 、尿液 pH 、尿蛋白 、尿糖 、尿潜血。血液
采集方法:通过颈静脉取血。将家兔固定后 ,使头朝
下 ,在颈部上 1/3的静脉部位剪去被毛 ,用 75%的酒
精涂擦局部 ,剪开一个小口 ,暴露颈静脉 ,用粗针头注
射器向向心端刺入血管取血 ,注射前和注射药物后
5 h分别取血 l测定 BUN 、SCr 等指标 ,并测定血栓素
B2(TXB2)、6-酮-前列腺素 F1α(6-keto-PGF1α)、TXB2/6-
keto-PGF1α的比值 、内皮素(erdothelin ,ET)。
1.2.2　对氨基马尿酸清除率实验　各组静脉注射
l ml/kg相应药品 ,30 min 后分别静脉注射 150 g/L
对氨基马尿酸 0.5 ml/kg ,然后用 7.5 g/L 对氨基马
尿酸 0.2 m l/min 恒速静脉输注。20 min后开始取
尿 ,记录 20 min内的尿量 ,用以测定对氨基马尿酸
在尿中的含量 。在取尿开始和结束时各取血 1 次
(约 2 ml)用以测定对氨基马尿酸在血浆中的含量 ,
用两次测得的平均值表示。样本采集方法同上 ,将
尿液采集入 20 ml的小烧杯中。对氨基马尿酸肾清
除率计算参考文献[ 2] 。
1.2.3　酚红(PSP)排泄试验[ 3] 　各组静脉注射
l ml/kg相应药品 ,5 h 后由耳缘静脉注射 0.6% PSP
注射液 2.4 mg/kg ,与给药后 5 min 、20 min 、40 min
由颈静脉分别取血 2 ml ,样本采集方法同上 ,离心后
取其血浆稀释 ,用 721型分光光度计于 560 nm 波长
下比色 , 读取其光密度值。配制 PSP 标准液系列
0.5 ～ 0.8 μmol/L ,加稀释液显色后 ,用 721 型分光
光度计于 560 nm 波长下比色 ,将各标准药浓度及其
光密度值输入计算器 ,求得标准液的直线回归方程:
Y=0.002 7+0.84X ,相关系数 r =0.999 9 。把各
血样的光密度值作为 X ,带入上述方程求得血样浓
度C ,再乘以稀释的倍数 ,得血药浓度 C′(mg/L),以
给药 5 min 时血药浓度为初始血药浓度 C0(即
100%),计算 20 min及 40 min时的酚红排泄率 。酚
红排泄率=(C0-C′)/C0×100%。
1.2.4　相关指标的测定方法　血肌酐测定用苦味
酸法 , 血尿素氮测定用尿素酶法 , TXB2 、6-keto-
PGF1α、ET 的测定用解放军总医院科技开发中心放
射免疫研究所提供的放免药盒 ,操作严格按说明书
进行 。对氨基马尿酸浓度用比色法测定 。
1.3　统计学方法　数据以 x ±s表示 ,组间比较采
用 t 检验 。
2　结　果
2.1　各组家兔给药前后肾功能指标的变化　静脉
注射 l m l/kg 单叶细辛 、辽细辛提取液均可导致家兔
急性肾衰竭 ,各项指标在给药前后均有明显差异(P
<0.05或 P <0.01)。单叶细辛组与生理盐水对照
组比较 ,多数指标具有明显差异(P <0.05 或 P <
0.01);与辽细辛对照组比较 ,单叶细辛组各项指标
均低于辽细辛对照组 ,但大多数指标统计学处理显
示无显著性意义 ,仅 SCr一项指标有统计学差异(P
<0.05),可作为单叶细辛对肾功能的损害弱于辽细
辛的佐证 。见表 1。
2.2 　各组家兔对氨基马尿酸清除率及 TXB2 、
6-keto-PGF1α、ET 的变化　静脉注射 lml/kg 单叶细
辛 、辽细辛提取液后 , 对氨基马尿酸清除率显著下
降 ,两药物组与生理盐水对照组比较有明显差异
(P<0.01),而单叶细辛组清除率虽高于辽细辛对
照组 , 但两组间无统计学差异 。血 TXB2 、6-keto-
PGF1α、ET 及 TXB2/6-keto-PGF1α比值 ,两药物组与
生理盐水对照组比较均有明显差异(P <0.05 或
P <0.01);而单叶细辛组 ET 与辽细辛对照组比较
有明显差异(P <0.05),表明辽细辛的缩血管作用
较单叶细辛强 。见表 2。
2.3　各组家兔酚红排泄率的变化　与生理盐水对
照组比较 ,单叶细辛组 、辽细辛对照组家兔酚红排泄
率均明显下降(P <0.05),辽细辛对照组各值比单
叶细辛组更低 ,但统计学处理显示无显著性差异。
·200· 中西医结合学报 2004年 5月第 2卷第 3期　J Chin Integr Med , May 2004 , Vol.2 , No.3
表 1　各组家兔给药前后肾功能指标的比较
Tab 1　Changes of renal function of rabbits
(x ± s)
Group n
Urine
Volume(ml/min) pH G luco se(mmol/ L) Pro tein(g/ L) BLD(mg/L)
BUN
(μmol/L)
SCr
(μmol/L)
Asarum heterotropoides
　Before administra tion 7 0.14±0.04 6.85±1.36 0.09±0.02 0.61±0.18 7.23±1.45 6.86±1.26 120.22±24.01
　After administration 7 0.07±0.02＊＊ 7.93±1.28＊ 3.70±0.42＊＊1.20±0.22＊ 10.03±0.18＊ 11.57±2.13＊ 295.84±58.17＊
Asarum himalaicum
　Before administration 7 0.14±0.04 6.07±1.52 0 0.82±0.22 6.86±1.31 6.78±1.36 115.97±23.91
　After administration 7 0.08±0.20＊＊△7.71±1.43＊ 3.53±0.38＊△△1.37±0.20＊ 10.01±1.88＊△ 9.94±1.99＊△ 220.49±44.10＊■△
Normal saline 7 0.21±0.04 6.04±1.44 0 0.72±0.19 7.05±1.33 6.60±1.38 116.31±31.06
　　＊P <0.05 , ＊＊P <0.01 , v s before administra tion;■P<0.05 , vs Asarum heterotropoides;△P <0.05 , △△P <0.01 , vs normal saline
表 2　各组家兔对氨基马尿酸清除率 、TXB2 、6-keto-PGF1α、TXB2/ 6-keto-PGF1α、ET的比较
Tab 2　Test results of p-aminohippuric acid clearance rate, TXB2 , 6-keto-PGF1α, TXB2/ 6-keto-PGF1αand ET in rabbits
(x ± s)
Group n p-aminohippuric acid
clearance rate(ml/ s) TXB2(g/ L) 6-keto-PGF1α(ng/ L) TXB2/ 6-keto-PGF1α ET (ng/ L)
Asarum hima laicum 7 0.0098±0.0049△△ 198.27±19.01△△ 138.65±23.91△ 1.43±0.37△△ 128.37±20.56△■
Asarum heterotropoides 7 0.0072±0.0005△△ 224.08±22.43△△ 148.96±21.89△ 1.51±0.42△△ 155.28±21.67△△
Normal saline 7 0.0587±0.0298 112.80±20.51 127.18±25.07 0.90±0.27 117.89±19.01
　　■P <0.05 , vs Asarum heterotropoides;△P <0.05 , △△P <0.01 , vs normal saline
表 3　各组家兔酚红排泄率比较
Tab 3　Results of phenolsulfonphthalein excretion test in rabbits
(x ± s)
Group n
5 min
Blood
concent ration(mg/ L)
20 min
Blood concent rat ion(mg/ L) PSP excretion rate(%)
40 min
Blood concentration(mg/ L) PSP excretion rate(%)
A sarum hima laicum 7 18.01±1.36 12.90±1.38 30.6±5.4△ 　8.82±2.04△ 46.8±6.4△
A sarum heterotropoides 7 17.78±1.28 14.03±1.36 22.1±5.0 10.81±2.34 39.6±5.9
Normal saline 7 19.25±2.61 7.89±1.51 57.3±9.4 4.40±1.39 75.9±8.0
　　△P <0.05 , vs normal saline
3　讨　论
随着中草药在世界范围内越来越广泛的应用 ,
国内外对中草药毒性的研究也日趋重视 。自从比利
时学者 Vanherweghem 等 1993 年关于中草药引起
肾衰竭的报道发表以来 ,某些含有马兜铃酸的中草
药引起肾损害的文献报道陆续增多 ,认为中草药毒
性小于化学药品的传统观念正在受到严峻的挑战 。
据有关资料 ,对肾脏有毒性作用的常用中草药已不
下数十种 ,其中个别品种单次使用即可产生肾脏病
理损害[ 4] ,国外学者称其为“中草药肾病” ,国内学
者则更具体地称之为“马兜铃酸肾病”[ 5] 。根据有
关研究报道 , “中草药肾病”一旦发生 ,往往具有“细
胞浆毒性”的特点 ,即长期滞留于肾小管上皮细胞内
不易清除 ,持续刺激和毒害该细胞 。包括单叶细辛
在内的细辛正品和大多数代用品均属马兜铃科 ,停
药后肾脏病变还会继续进展 ,而且绝大部分患者无
特效疗法 ,预后较差[ 6] 。既往研究认为细辛毒性主
要在于其挥发油 ,由于研究证实单叶细辛挥发油含
量约为辽细辛的 1/5[ 7] ,因而临床认为前者毒性小
于后者 ,但无有关研究提供支持 。
基于这一现实 ,笔者就单叶细辛对肾脏功能的
影响进行了初步研究。从实验测得的数据看 ,单叶
细辛与辽细辛对肾脏的损害均很严重 ,但两者比较 ,
单叶细辛轻于辽细辛。
ET 是现阶段所知的人体内活性最强的长效缩
血管多肽 ,能强烈而持久地收缩血管 ,对动静脉均有
很大的致痉挛作用 ,能直接收缩肾血管 ,使肾血流量
减少 ,同时刺激血管平滑肌细胞和系膜细胞增殖使
肾小球滤过率下降 。TXA2与 PG I2是两种生物活性
完全相反的物质 , TXA2是很强的血小板诱聚剂和血
管收缩剂 ,PGI2则是血小板聚集抑制剂和血管扩张
·201·中西医结合学报 2004年 5月第 2卷第 3期　J Chin Integr Med , May 2004 , Vol.2 , No.3
剂 ,二者构成 TXA2-PGI2平衡调节系统 ,参与肾小
球血流动力学和滤过功能的调节 ,并且参与肾小管
水 、电解质 、酸碱平衡的控制 ,TXB2 、6-keto-PGF1α分
别是它们的代谢产物 , TXB2与 ET 通过不同途径加
重肾脏损害 。实验结果中 TXB2 、ET 等缩血管物质
及 TXB2/6-keto-PGF 1α比值的明显升高说明血管发
生了强烈收缩 ,这不但使肾血流量明显减少 ,还可能
引起微血栓形成 ,从而加重肾损伤 。这一点提示单
叶细辛对肾小球和肾小管的毒性均与其间接的缩血
管作用有关 ,前述物质使入球小动脉收缩 、肾小球滤
过率下降 ,出球小动脉的血流量也减少;同时也使出
球小动脉收缩 ,更加剧了这种血流量的减少。正常
情况下 ,肾小管重吸收尿素氮约 30%～ 40%,并排
泌少量的尿素氮 ,当肾血流量减少时 ,血尿素氮浓度
升高 ,BUN 与 SCr 的升高表明肾小球滤过功能下
降 ,出现了氮质血症;大量蛋白尿 、血尿与少尿的出
现标志着肾小球滤过膜机械屏障和电学屏障的损
伤 ,尿糖升高标志着肾小管上皮细胞的损害与重吸
功能的障碍;尿液 pH升高表明肾小管泌 H+排酸功
能的低下和酸中毒的产生 。临床上常用对氨基马尿
酸清除率反映有效肾血浆流量 ,因为对氨基马尿酸
既从肾小球滤过 ,又从肾小管分泌 ,对氨基马尿酸清
除率下降 ,提示单叶细辛除了影响肾小球的滤过外 ,
还影响肾小管的分泌功能 。酚红排泄试验是临床上
测定肾小管排泌功能的指标 ,酚红排泄率与肾血流
量及肾小管细胞功能的完整有关 ,上述各种使肾血
流量减少的因素均对酚红排泄率有影响。以上实验
结果提示单叶细辛不但可对肾小球滤过膜机械屏障
与电学屏障造成伤害 ,更重要的是可损害肾小管的功
能。以往研究认为肾小管是细辛对肾功能损害的主
要部位 ,它可使肾小管上皮细胞变性 、坏死 ,刷状缘脱
落 ,基底膜裸露 ,本实验结果也证明了这一观点。虽
然单叶细辛的肾毒性小于辽细辛 ,但其损害是多环
节 、多方面的 ,这种损害可导致肾小球滤过 、肾小管重
吸收与肾小管分泌功能的严重障碍 ,最终形成急性肾
衰竭。因而我们认为 ,虽然单叶细辛对肾脏的影响小
于辽细辛 ,但绝非安全无虞 ,临床使用时务当控制药
量 ,以免过量而损伤肾功能。
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[ 收稿日期] 　2004-03-18　　[ 本文编辑] 　白玉金
(上接第 162 页)
3　体　会
随着年龄增长 ,成骨细胞的分化增殖能力和生物学功能
降低 ,骨髓基质细胞分化方向出现改变[ 1 , 2] ,因此骨质疏松症
多中年起病。在我国随着老龄化社会的形成 , 发病率日趋增
高。由于其初期临床表现不明显 , 很少引起人们重视。中医
学将其归属“腰痛” 、“骨痿” 、“骨痛”范畴。肾主骨生髓 ,肾能
受五脏六腑所传之精 ,封而藏之 , 充实于骨 , 濡养于骨。肾气
足 ,则轻劲有力。人至老年 , 肾精虚少 , 肾气日衰 , 骨髓化源
不足 ,骨失所养 , 脆弱无力 ,便可出现腰背疼痛 , 胳膊酸软 , 甚
至脚痿不能行动。治疗多以补肾壮骨为主 , 佐以活血通络 ,
益精生髓 ,使骨骼得以滋养 , 疏松的骨质得以改善。 补肾中
药有促进骨形成和抑制骨吸收的双重作用;并具有降低骨转
换 ,提高骨质量和骨重建过程的短路效应作用[ 3] , 尤其是平
补阴阳的补肾药 ,有着对成骨细胞的促进作用[ 1] 。本方以二
仙汤为基础方 ,重用仙灵脾 , 功能补肝肾 、强筋骨 、祛风湿 , 用
于肝肾不足的筋骨痹痛[ 4] , 配仙茅 、巴戟天以温肾阳 、补肾
精 ,知母 、黄柏泻火滋阴 ,当归养血 ,用龟版膏 、鹿角膏等血肉
有形之品填补肾精 , 续断 、寄生 、黄精补肾益气 , 共起补肾壮
骨之功;佐以僵蚕 、延胡索活血通络。 因此本方具有补肾活
血 ,强筋壮骨的功能 , 对症状与体征均有明显改善作用 ,且用
药期间未见毒性反应。
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[ 收稿日期] 　2003-10-27　　[ 本文编辑] 　张金峰　白玉金
·202· 中西医结合学报 2004年 5月第 2卷第 3期　J Chin Integr Med , May 2004 , Vol.2 , No.3