全 文 : 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2009, 44 (9): 987−993 · 987 ·
蕨麻多糖组分抑制过氧化氢诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的作用
帅学宏 1, 2, 胡庭俊 2*, 张 霞 1, 程富胜 3, 陈炅然 3
(1. 甘肃农业大学动物医学院, 甘肃 兰州 730070; 2. 广西大学动物科学技术学院, 广西 南宁 530005;
3. 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所, 甘肃 兰州 730050)
摘要: 分离提取蕨麻多糖组分 (Potentilla anserine polysaccharide fraction, PAPF), 进行理化性质检测、红外
光谱和气相色谱分析。用过氧化氢 (H2O2) 建立小鼠体外淋巴细胞凋亡模型, 通过形态学、琼脂糖凝胶电泳、流
式细胞术等方法研究不同浓度的 PAPF 对 H2O2介导的小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响。结果表明 PAPF 得率为 6.22%,
不含淀粉、氨基酸和蛋白质, 该多糖组分由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成, 红外光谱扫描呈现多糖类
物质的特征吸收峰。形态学、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析结果表明, 200 µmol·L–1 H2O2 可诱导脾淋巴细胞
出现典型凋亡。PAPF (50、100、200 和 400 µg·mL–1) 能拮抗过氧化氢所诱导的细胞凋亡, 抑制作用随多糖组分
浓度的增加而增强。提示 PAPF 对过氧化氢介导的淋巴细胞凋亡具有显著的抑制作用, 且呈浓度依赖关系。
关键词: 蕨麻多糖组分; 淋巴细胞; 细胞凋亡
中图分类号: R963 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (2009) 09-0987-07
Inhibitory action of Potentilla anserine polysaccharide fraction on
H2O2-induced apoptosis of murine splenic lymphocytes
SHUAI Xue-hong1, 2, HU Ting-jun2*, ZHANG Xia1, CHENG Fu-sheng3, CHEN Jiong-ran3
(1. College of Veterinary Medicine, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China;
2. College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530005, China;
3. Lanzhou Institute of Animal and Veterinary Pharmaceutics, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730050, China)
Abstract: A water-soluble polysaccharide fraction from root of Potentilla anserine was obtained. Gas
chromatogram, FT-IR, physical and chemical characteristics of the Potentilla anserine polysaccharide fraction
(PAPF) were analyzed. The protective effects of PAPF against the H2O2 induced process of apoptosis of murine
splenic lymphocytes were investigated in vitro. Morphological assessment of apoptosis was performed with
light microscope and laser scanning confocal microscope. DNA fragmentation was visualized by agarose gel
electrophoresis. The amount of apoptotic cells was measured by flow cytometry. The results showed that
PAPF is composed of rhamnose, arabinose glucose and galactose. H2O2 (200 μmol·L–1) induced apoptosis of
murine splenic lymphocytes with the cell volume reduced, cytoplasm and nuclear shrunk and DNA stained
non-uniformly. Condensed chromatin and formation of apoptotic body were observed in the apoptotic cells.
Apoptotic bodies in the cells treated with PAPF and H2O2 were less than those in H2O2 treatment alone. DNA
fragmentation assay showed that PAPF (50, 100, 200, and 400 μg·mL–1) obviously reduced H2O2-induced ladder
bands. Flow cytometry analysis showed that H2O2 increased the populations of apoptotic sub-G1 cells from
5.60% (control) to 45.40%, and PAPF decreased H2O2-induced apoptosis to 37.80%, 22.70%, 17.70%, and 8.50%,
respectively. In conclusion, PAPF reduced H2O2-induced oxidative damage in a dose dependent manner.
收稿日期: 2009-03-30.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (30371056).
*通讯作者 Tel: 86-771-3239150, Fax: 86-771-3235650, E-mail: tingjunhu@126.com
DOI:10.16438/j.0513-4870.2009.09.008
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Key words: Potentilla anserine polysaccharide fraction; lymphocyte; apoptosis
蕨麻 (Potentilla anserine) 为鹅绒委陵菜的根 ,
具有健胃补脾、生津止渴、益气补血的功能, 还可用
来收敛止血、止咳利痰, 故藏医常以其入药, 称其为
卓老沙僧 [1]。蕨麻多糖组分 (Potentilla anserine
polysaccharide fraction, PAPF) 是从蕨麻 (鹅绒委陵
菜根) 中提取的。前期的研究表明, PAPF 能明显提高
正常小鼠脾脏指数、胸腺指数及免疫抑制小鼠脾脏指
数, 增强小鼠血清溶菌酶活力, 尤其在免疫抑制状态
下, 增强作用更明显[2], 该多糖组分在体外能显著清
除羟自由基、超氧阴离子及过氧化氢[3], 体内能拮抗
地塞米松引起的免疫抑制[4], 增强小鼠脾淋巴细胞的
免疫功能[5]。文献报道多糖对一些损伤所引起的细胞
凋亡有一定的抑制作用[6–8], 过氧化氢作为一种活性
氧, 其浓度过高时对机体具有损伤作用, 可诱导细胞
凋亡[9]。本文中应用细胞形态学、凝胶电泳、流式细
胞技术等方法, 研究 PAPF 对过氧化氢诱导的小鼠脾
淋巴细胞凋亡的影响。
材料与方法
动物 雄性昆明系小鼠, 体重 18~22 g, 由甘肃
省肿瘤医院实验动物中心提供。
药物与试剂 蕨麻产自青海省玉树藏族自治州,
购自青海玉树藏族自治州名贵中药材贸易公司, 经
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工 程
研究室梁纪兰研究员鉴定为鹅绒委陵菜根 (蕨麻)。
RPMI 1640 粉剂 (Gibco); Hepes 和姬姆萨 (Giemsa)
染料 (上海生工生物工程有限公司 ); 二巯基乙醇
(Fluka); 蛋白酶 K、RNase A 及碘化丙锭 (Sigma)。
主要仪器 CO2 细胞培养箱 (日本); 普通显微
镜 (Olympus), 相差倒置显微镜 (德国); 激光共聚焦
扫描仪及软件分析系统 Multisync FE1250 (Leica); 电
泳仪 (北京市六一仪器厂); 紫外分析仪 (北京市六
一仪器厂); COULTEREPICSXL 流式细胞仪 (美国);
紫外凝胶成像分析系统 (英国)等。
蕨麻多糖组分的提取方法及检测 称取干燥的
蕨麻 500 g, 置索氏蒸馏器中, 用石油醚 (60~90 ℃)
90 ℃回流脱脂 12 h 后挥干溶剂, 加入 80%甲醇, 90 ℃
回流 3 h, 用 12 倍量的水浸泡过夜, 煮 1.5 h 后过滤,
收集滤液, 残渣继续煮沸 1.5 h, 重复 3 次, 合并浓缩
滤液至 1 g·mL–1, 加 5 倍量 95%乙醇, 4 ℃静置 12 h
后 3 000 r·min–1离心 10 min, 沉淀溶于少量蒸馏水中,
醇沉 2 次, 直至上清液透明无色, 然后在沉淀中加适
量 95%乙醇充分搅拌, 3 000 r·min–1离心 10 min, 依次
分别用无水乙醇、丙酮、乙醚充分洗涤, 将所得沉淀
置平皿中自然挥干, 所得粉末即为 PAPF。PAPF 的理
化性质、还原性总糖含量、红外光谱及气相色谱分析
参照文献[10, 11]测定。
小鼠脾脏淋巴细胞分离培养、处理及光学显微镜
观察 将小鼠颈椎脱臼处死, 常规方法在无菌条件
下摘取脾脏并分离脾淋巴细胞。用台盼蓝拒染法检测
细胞的活性大于 95%, 调节细胞数为 2×106/mL。根
据预实验确定H2O2的最适浓度为200 µmol·L–1, 总的
培养时间为 12 h。将实验分为对照组; 过氧化氢组
(脾淋巴细胞 + H2O2); 过氧化氢酶组 (脾淋巴细胞 +
H2O2 + Catalase, CAT); 多糖组分组 (脾淋巴细胞+
H2O2 + PAPF, PAPF 浓度分别为 50、100、200 及 400
µg·mL–1) 等共 7 个组。每瓶加入脾淋巴细胞悬液 3
mL, 多糖组加入不同浓度的 PAPF, 在 5% CO2 培养
箱中, 37 ℃培养 8 h, 分别加入 H2O2、Catalase, 每瓶
分别用 RPMI 1640 培养液补充至终体积相等, 继续
培养 4 h 后观察脾淋巴细胞凋亡情况。将已培养好的
细胞悬液 1 000 r·min–1 离心 10 min, 弃去上清液后,
细胞重悬于 PBS 中 (细胞数为 1×106/mL), 取细胞悬
液 100 μL 均匀涂布于载玻片上, 干后用甲醇固定 1
min, 晾干, Giemsa 染色, 透明后封片。用普通光学显
微镜观察。
细胞凋亡的倒置相差显微镜观察 小鼠脾淋巴
细胞的提取和分组培养方法同“小鼠脾脏淋巴细胞
分离培养、处理及光学显微镜观察”。将培养好的细
胞悬液各吸取 150 μL, 分别加入 96 孔培养板, 置相
差倒置显微镜下观察经过诱导和未诱导的细胞形态、
大小。
细胞凋亡的激光共聚焦扫描显微镜观察 细胞
的分离提取及分组培养同“小鼠脾脏淋巴细胞分离
培养、处理及光学显微镜观察”。收集已培养好的脾
细胞悬液, 1 000 r·min–1 离心 10 min, 去上清液, 加入
吖啶橙, 重新悬浮细胞, 作用 15~30 min, 用 RMPI
1640 培养液洗涤 3 次, 沉淀 4 ℃保存, 用激光共聚焦
技术软件进行照相分析。
细胞凋亡的 DNA 凝胶电泳 将小鼠颈椎脱臼处
死, 依照常规方法无菌提取脾淋巴细胞, 调节细胞数
至 2×106/mL。按照“小鼠脾脏淋巴细胞分离培养、
处理及光学显微镜观察”方法进行分组培养细胞后
离心收集细胞, 重悬于预冷的 70%乙醇 10 mL, –20 ℃
帅学宏等: 蕨麻多糖组分抑制过氧化氢诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的作用 · 989 ·
固定 4 h, 1 000 r·min–1 离心 5 min, 去除固定液, 用
PBS 0.5 mL 重悬细胞, 加到 Eppendorf 管中, 离心去
上清液。将细胞重悬于 PC 缓冲液 40 μL 中, 置室温
30~60 min, 间歇摇动。1 000 r·min–1 离心 5 min, 吸
上清液于新的 Eppendorf 管中, 真空浓缩 15 min。加
入 0.25% CA-630 溶液 3 μL 和 1.0 mg·mL–1 RNaseA
溶液 3.0 μL, 混匀, 37 ℃保温 30 min。加入蛋白酶 K
溶液 3 μL, 37 ℃保温 30 min。再加入样品稀释液 12.0
μL混匀, 于含EB的 1.5%琼脂糖凝胶中电泳, 紫外分
析仪下观察结果, 照相。
细胞凋亡的流式细胞技术分析 按照常规方法
无菌分离小鼠脾淋巴细胞, 调节细胞数至 5×106/mL
备用。并按“小鼠脾脏淋巴细胞分离培养、处理及光
学显微镜观察”方法分组培养细胞后 1 000 r·min–1离
心 10 min, 弃上清液, PBS 洗 2 次, 加入预冷的 70%
乙醇固定, 充分混匀, 4 ℃固定 24 h, 1 000 r·min–1 离
心 10 min, 弃固定液, 用 PBS 3 mL 重悬 5 min, 1 500
r·min–1离心 5 min 弃去 PBS, 加入 1% Triton X-100 摇
匀后静置 10 min, 离心去上清液, 400目筛网过滤, 用
PI 染料 (1 mL) 4 ℃避光染色 30 min。在流式细胞仪
上以激发光波长 488 nm、发射光波长 630 nm 进行检
测, 用 Muticycle 软件对实验数据进行分析。
统计学分析 实验数据以 x ± s 表示, 细胞凋亡
率的比较采用 t 检验。
结果
1 蕨麻多糖组分的理化性质、红外光谱及气相色谱
获得 PAPF 31.1 g, 为灰白色粉末, 易溶于水, 不
溶于乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂, 得率为 6.22%。
Molish 反应表明该多糖组分含有糖成分。碘-碘化钾
反应表明该多糖组分不含淀粉。茚三酮反应表明该多
糖组分不含蛋白质和氨基酸。采用苯酚-硫酸法测定
该多糖组分还原性总糖含量为 49.45%。红外光谱扫
描表现出多糖的特征吸收峰, 可以看出 3 437.36 cm–1
为多糖的 O-H 的伸缩振动, 2 937.00 cm–1 吸收峰为糖
样的C-H伸缩振动峰, 在1 747.40 cm–1有强的吸收峰
是 C=O 伸缩振动, 1 621.57cm–1 的强吸收为 N-H 边角
振动, 829.59 和 760.18 cm–1 两个吸收说明 PAPF 组成
单糖为吡喃糖, 主要为 α-构型, 见图 1。根据 PAPF
样品的气相色谱图谱和各种单糖标准品的气相色谱
图谱比较, 可以确定在 PAPF 中含有 4 种单糖组分:
鼠李糖 (8.920 min)、阿拉伯糖 (12.240 min)、葡萄糖
(26.210 min) 和半乳糖 (31.157 min), 见图 2。
Figure 1 Infrared spectrum of Potentilla anserine polysaccharide
fraction (PAPF). The absorption peaks of 3 437.36, 2 937.00
and 1 747.40 cm–1 represented that PAPF had O-H, C-H and
C=O stretching vibration, respectively. The absorption peaks of
829.59 and 760.18 cm–1 indicated that PAPF was pyranose, it had
α-configuration mainly
Figure 2 The gas chromatogram of PAPF. The figure showed
that PAPF was consisted of four kinds of monosaccharides:
rhamnose, arabinose, glucose and galactose
2 Giemsa 染色普通光学显微镜观察结果
对照组的脾淋巴细胞核染成蓝色或蓝紫色, 染
色质色泽均一。单纯 H2O2 处理的脾淋巴细胞出现典
型凋亡, 可见核固缩、边集或碎裂, 染色变深, 但细
胞膜完整, 染色质固缩成块, 位于核周边, 可见明显
凋亡小体。H2O2 与不同浓度 PAPF 处理的细胞大部分
细胞染色质分布较均匀, 细胞结构基本接近正常。随
着 PAPF 浓度的升高, 细胞受损的程度减小。CAT 组
细胞的形态同多糖组分处理组。
3 倒置相差显微镜观察结果
对照组的脾淋巴细胞为圆形, 边缘整齐。过氧化
氢组的脾淋巴细胞体积变小或膨大, 细胞变形, 细胞
有发泡现象, 细胞凋亡的晚期可见凋亡小体。CAT 组
和多糖组分组凋亡的淋巴细胞数减少, 且随着 PAPF
浓度的升高, 脾淋巴细胞的形态越接近于正常 (图3)。
4 激光共聚焦扫描显微镜观察结果
对照组脾淋巴细胞的细胞核染色均匀, 细胞核
DNA 为均匀的黄绿色荧光, 细胞质和核仁的 RNA 为
橘红色荧光, 均匀着色; 过氧化氢组的细胞核 DNA
· 990 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2009, 44 (9): 987−993
和 RNA 着色分布不均, 核固缩、边集, 细胞卷曲和
出泡, 有明显的凋亡小体。而 CAT 组和多糖组分组
的细胞吖啶橙荧光染色显示其核形态介于凋亡细胞
与正常细胞之间, 且随着 PAPF 浓度的升高, 细胞的
形态越接近正常 (图 4)。
5 DNA 琼脂糖凝胶电泳实验结果
DNA 琼脂糖凝胶电泳的结果表明, 单纯 H2O2 诱
导组, 细胞凋亡后 DNA 条带明显呈均匀的梯度状,
随着 PAPF 浓度的增加, DNA 条带明显减少直至几乎
看不到, 并与 CAT 处理组相当, 对照组则未见条带
(图 5)。
6 流式细胞仪检测结果
表 1为各组细胞在培养 12 h后的凋亡率, 对照组
细胞存在着基础凋亡, CAT 组脾淋巴细胞的凋亡率接
近培养对照组, 过氧化氢组细胞凋亡明显。由流式细
胞仪检测的 DNA 直方图可知对照组和 CAT 组 M1 峰
较弱, 过氧化氢组出现典型的 M1 峰, PAPF 组 M1 峰
均比过氧化氢组弱 (图 6)。
Figure 3 The morphological changes in splenic lymphocyte through inverted phase contrast microscope (200×). A: Normal control;
B: H2O2 (200 µmol·L–1); C: H2O2 (200 µmol·L–1) + CAT (100 U·mL–1); D: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (50 μg·mL–1); E: H2O2 (200
µmol·L–1) + PAPF (100 μg·mL–1); F: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (200 μg·mL–1); G: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (400 μg·mL–1)
Figure 4 The morphological change in splenic lymphocyte through LCSM. A: Normal control; B: H2O2 (200 µmol·L–1); C: H2O2 (200
µmol·L–1) + CAT (100 U·mL–1); D: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (50 μg·mL–1); E: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (100 μg·mL–1); F: H2O2
(200 µmol·L–1) + PAPF (200 μg·mL–1); G: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (400 μg·mL–1); H: Nucleus of control; I: Nucleus of apoptosis; J:
Nucleus of apoptosis; K: Apoptotic body
帅学宏等: 蕨麻多糖组分抑制过氧化氢诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的作用 · 991 ·
Figure 5 DNA electrophoresis analysis. 1: Marker; 2: Normal
control; 3: H2O2 (200 µmol·L–1); 4: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF
(50 μg·mL–1); 5: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (100 μg·mL–1);
6: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (200 μg·mL–1); 7: H2O2 (200
µmol·L–1) + PAPF (400 μg·mL–1); 8: H2O2 (200 µmol·L–1) + CAT
(100 U·mL–1)
Table 1 The apoptosis rate of splenic lymphocytes in mice
Group
Apoptosis rate of lymphocytes
/%
Normal control 5.60 ± 0.70
H2O2 (200 µmol·L–1) 45.40 ± 4.30**
H2O2 (200 µmol·L–1) +
CAT (100 U·mL–1)
5.90 ± 0.30##
H2O2 (200 µmol·L–1) +
PAPF (50 μg·mL–1)
37.80 ± 4.90#
H2O2 (200 µmol·L–1) +
PAPF (100 μg·mL–1)
22.70 ± 2.60##
H2O2 (200 µmol·L–1) +
PAPF (200 μg·mL–1)
17.70 ± 2.50##
H2O2 (200 µmol·L–1) +
PAPF (400 μg·mL–1)
8.50 ± 2.10##
n = 3, x ± s. **P < 0.01 vs normal control group; #P < 0.05,
##P < 0.01 vs H2O2 (200 µmol·L–1) group
Figure 6 Effects of PAPF on splenic lymphocyte apoptosis by flow cytometry detection. A: Normal control; B: H2O2 (200 µmol·L–1);
C: H2O2 (200 µmol·L–1) + CAT (100 U·mL–1); D: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (50 μg·mL–1); E: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (100
μg·mL–1); F: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (200 μg·mL–1); G: H2O2 (200 µmol·L–1) + PAPF (400 μg·mL–1)
讨论
诸多研究表明多糖不但能诱导肿瘤细胞凋亡[12–14],
还可以抑制病理性细胞凋亡, 增强机体抗辐射功能,
延缓衰老[15]。但是对于多糖通过对抗活性氧, 保护机
体正常细胞免受活性氧诱导的凋亡鲜见报道。已有大
量文献报道, 细胞凋亡的发生均与细胞内活性氧水
平有一定关系[16], 活性氧可以从多个途径对细胞凋
亡产生诱导作用[17]。据报道枸杞子多糖能够通过抗
氧化而阻止细胞凋亡[18]。本研究采用 H2O2 为诱导剂,
作用于小鼠脾脏淋巴细胞, 成功地建立了脾脏淋巴
细胞凋亡模型, 与高颖等[19]的研究结果一致。光学显
微镜观察显示 PAPF 可拮抗 H2O2 所诱导的脾脏淋巴
细胞凋亡, 多糖组分组的细胞大部分细胞染色质分
布较均匀, 细胞结构基本接近正常。随着 PAPF 浓度
的升高, 细胞受损的程度减小。本结果与刘晓梅等[20]
观察的形态学结果相似。用倒置相差显微镜观察细胞
的形态时, 过氧化氢组细胞明显变小, 并呈现不规则
形状, CAT 组细胞几乎接近对照组形态, 随着 PAPF
浓度的递增, 培养的细胞也逐渐恢复正常, 但与对照
组相比仍存在一些凋亡细胞。
· 992 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2009, 44 (9): 987−993
本实验对培养的细胞进行了荧光染色, 在激光
共聚焦扫描显微镜下可观察到黄绿色的细胞核, 对
照组和 CAT 组中细胞核均匀, 呈现圆形, 核膜圆滑。
过氧化氢组中核极不规则, 严重变形。多糖组分组中
随着 PAPF浓度的增高, 细胞核形状逐渐过渡到正常,
在 50 μg·mL–1 PAPF 组中还可见较小的凋亡小体, 而
在 400 μg·mL–1 PAPF 组中几乎见不到凋亡小体, 从
该结果可以看出, PAPF 能改善和拮抗 H2O2 诱导的小
鼠脾脏淋巴细胞凋亡, 并呈一定的量效关系。本研究
结果与禹彬等[21]观察的结果相似。
DNA 琼脂糖凝胶电泳的结果表明, 单纯 H2O2 诱
导组, 细胞凋亡后 DNA 条带明显呈均匀的梯度状,
随着 PAPF 浓度的增加, DNA 条带逐渐减少直至几乎
看不到, 说明培养细胞中发生凋亡的细胞数目在减
少。这与吴洁等[22]研究一致。该结果为 PAPF 能清除
H2O2 对抗细胞凋亡提供了一个有力的证据。
目前, 流式细胞仪检测凋亡应既可定性又可定
量, 这种方法普遍应用于细胞凋亡的研究[23, 24]。本实
验中用 H2O2 诱导后, 细胞凋亡率显著上升, 应用
PAPF 后细胞凋亡率随着其浓度的增大而降低。以上
结果说明, PAPF具有拮抗H2O2诱导细胞凋亡的功能,
H2O2 引起凋亡主要是通过它所产生的氧自由基发挥
作用的, 因此 PAPF 可对抗活性氧介导的淋巴细胞的
凋亡。
ROS 量的变化在决定细胞对同一种信号的不同
反应中起作用。胞内 ROS 水平可决定某些细胞对特
定信号的敏感性。接受信号后 ROS 的不同水平决定
细胞凋亡、坏死、或凋亡向坏死的转变[17]。本研究
表明应用 H2O2 后 , 小鼠脾脏淋巴细胞凋亡明显 ,
PAPF 能够改善和恢复细胞在普通显微镜、相差倒置
显微镜及激光共聚焦显微镜下由 H2O2 引起的形态学
的异常 , 从 DNA 琼脂糖凝胶电泳图谱分析可知 ,
PAPF能够抑制DNA的降解等生化反应, 通过流式细
胞仪定量分析, PAPF 能明显减少细胞凋亡数目, 使
细胞恢复正常周期。本研究表明 PAPF 能够拮抗过氧
化氢诱导的小鼠脾脏淋巴细胞凋亡, 可通过抗氧化
机制发挥免疫调节作用, 其机制有待进一步研究。
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作者更改声明:
《药学学报》第 44 卷第 6 期的研究论文“半枝莲多糖 B3-PS2 分离纯化及抗补体活性研究”一文系第
一作者吴彦在复旦大学陈道峰教授实验室所作研究, 但没有征得陈教授的同意擅自发表了。向陈教授深表
歉意, 以及给贵刊和编辑带来的麻烦道歉。特更改如下:
论文题目: 半枝莲多糖 B3-PS2 分离纯化及抗补体活性研究
作者: 吴 彦 1, 2, 陈道峰 1*
作者单位: 1. 复旦大学药学院, 上海 201203; 2. 安庆师范学院生命科学系, 安徽 安庆 246011
基金项目: 科技部“重大新药创制”专项课题 (2009ZX09502-013); 安徽省教育厅自然科学重点研究
项目 (KJ2007A123ZC); 安徽省高等学校青年教师科研资助项目 (2005jq1115).
*通讯作者: Tel: 86-21-51980135, Fax: 86-21-51980017, E-mail: dfchen@shmu.edu.cn
WU Yan1, 2, CHEN Dao-feng1*
1. School of Pharmacy, Fudan University, Shanghai 201203, China;
2. Department of Life Science, Anqing Normol College, Anqing 246011, China
安庆师范学院生命科学系 吴彦