全 文 ：乙酰丁香酮对组培芦竹不定芽诱导和生长的影响
周莉凡，吴茜茜，张丽娜，汤慧琴，韩志萍，杨志红* (湖州师范学院，浙江湖州 313000)
摘要 ［目的］研究组培条件下乙酰丁香酮(AS)对芦竹不定芽诱导和生长的影响，为芦竹农杆菌介导转基因过程中 AS的使用提供依
据。［方法］将芦竹外植体预培养 3 d后接种到添加 100、250、500、1 000、2 500、5 000 μmol /L AS的培养基中培养，以不添加 AS为对照，
观察芦竹的不定芽诱导数及不定芽的高度。［结果］AS在一定的浓度下对芦竹外植体不定芽的诱导和生长都有影响。培养基中添加
1 000 ～ 2 500 μmol /L AS，对芦竹的生长有显著的促进作用;添加 AS对芦竹不定芽的诱导有抑制作用，浓度范围 1 000 ～5 000 μmol /L与
100 ～500 μmol /L相比，对芦竹不定芽诱导的抑制作用显著增强。［结论］AS浓度为 100 ～500 μmol /L为芦竹转基因过程中可以使用的
合适浓度。
关键词 芦竹;乙酰丁香酮;不定芽
中图分类号 Q949． 71 + 4． 2 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)07 －03865 －02
Effect of Acetosyringone on Adventitious Buds Induction and Growth of Arundo donax Linn．
ZHOU Li-fan et al (Huzhou Teachers College，Huzhou，Zhejiang 313000)
Abstract ［Objective］To study the effect of acetosyringone (AS)on the adventitious buds induction and growth of Arundo donax linn．，so
as to provide references for the application of AS to Agrobacterium-mediated genetic transformation． ［Method］Explants of Arundo donax linn．
were pre-cultured for 3 days and then transferred to the media added with 100，250，500，1 000，2 500 and 5 000 of acetosyringone，the me-
dium without adding AS was taken as control to observe the different number and height of induced adventitious buds． ［Result］AS had impact
on the adventitious buds induction and growth of Arundo donax linn． In 1 000 － 2 500 μmol /L acetosyringone containing medium，the growth
of adventitious bud was accelerated． For adventitious buds，AS had inhibiting effect． Compared with 100 － 500 μmol /L，1 000 － 5 000
μmol /L had stronger inhibiting influence． ［Conclusion］100 － 500 μmol /L AS was suitable for Arundo donax linn． in transformation．
Key words Arundo donax Linn．;Acetosyringone;Adventitious buds
基金项目 浙江省钱江人才计划项目(2009R10016) ;浙江省自然科学
基金项目(Y5110067) ;国家自然科学基金项目(31070451)。
作者简介 周莉凡(1990 －) ，女，浙江诸暨人，本科生，专业:生物技术。
* 通讯作者，讲师，E-mail:yangzhihong@ hutc． zj． cn。
收稿日期 2011-11-03
芦竹(Arundo donax Linn．) ，又称荻芦竹、江苇，是禾本科
(Poaceae)芦竹属(Arundo)的一种多年生常绿高大丛生的草
本植物，外形既像芦苇又似竹，既耐寒耐热又耐涝耐旱，在贫
瘠土壤或受污染的湿地中也可生根发芽并长成高大植株。
芦竹在我国分布广泛，北起辽宁，南至广西均有芦竹生长，主
要分布于江苏、浙江、湖南、华南、西南等地区［1 －2］。种植芦
竹能起到固土护堤，改善、美化和保护湿地生态环境的
作用［3］。
水体富营养化是我国近年来面临的一个比较严重的环
境问题。污染水体的植物修复技术作为一项绿色污染治理
措施，经过多年的研究已经取得很大进展，为污染水体的修
复做出了重要的贡献，但该技术仍有许多不完善的地方［4］。
若能利用现代生物技术将芦竹改造成为一种超级污染修复
植物，将对污染治理起到更好的效果。在农杆菌介导的植物
基因工程中乙酰丁香酮(Acetosyringone，AS)是一种经常使用
的化学物质［5 －6］。AS 是一种酚类化合物，可诱发农杆菌内
Ti或 Ri质粒 DNA上 Vir区基因的活化和高效表达，现已被
广泛应用于农杆菌介导的遗传转化中［7］。因此笔者研究了
培养基中添加不同浓度的 AS对芦竹组培苗不定芽诱导和生
长的影响，试图找到最适合于芦竹转基因使用的 AS浓度，以
期为芦竹基因工程的顺利开展提供前期理论和数据支撑。
1 材料与方法
1． 1 材料 芦竹外植体来源于南太湖实生芦竹建立的组培
体系;AS，Solarbio公司。不定芽诱导培养基:MS + 6 － BA 5
mg /L + IBA 0． 5 mg /L +30 g /L蔗糖 +6 g /L琼脂，pH 5． 8。
1． 2 试验设计 浓度梯度设置为:称取 AS固体粉末用二甲
基亚砜溶解，在操净台上用滤膜过滤后，配置成 100、250、
500、1 000、2 500、5 000 μmol /L的 AS溶液。挑取大小，质地、
生长状况相近的芦竹组培无菌芽体为外植体，分别接种入添
加不同浓度 AS的培养基中进行培养。每个浓度接种 6个外
植体，设 4次重复，以不添加 AS为对照。培养温度 25 ℃，光
照强度 2 500 lx，光照时间 16 h /d。观察 AS浓度对外植体生
长的影响，30 d后统计不定芽的数目，长度及其生长状况。
1． 3 数据分析 使用 SPSS 11． 5 软件对数据进行单因素方
差分析。
2 结果与分析
2． 1 乙酰丁香酮对芦竹外植体不定芽诱导的影响 由图 1
中可以看出试验浓度范围内 AS 对芦竹外植体没有致死作
用，外植体呈现正常组培植株颜色，但培养基中添加不同浓
度的 AS对芦竹外植体不定芽的诱导有一定的影响。由表 2
可知，芦竹外植体在不添加 AS的培养基中，不定芽诱导数最
高，并与其他处理之间存在显著差异;AS 浓度在 100 ～ 500
μmol /L和 1 000 ～5 000 μmol /L这 2 个浓度范围之间比较，
不定芽的诱导数有显著差异，浓度范围 1 000 ～5 000 μmol /L
比浓度范围100 ～500 μmol /L对芦竹不定芽的诱导抑制作用
显著。但是，在这 2 组浓度范围之内相比，组内芦竹不定芽
诱导数差异不显著。由此可见，AS 对芦竹不定芽的诱导表
现为一定的抑制作用，随着浓度增高至一定范围，外植体不
定芽的诱导表现为抑制作用的增强。
2． 2 乙酰丁香酮对芦竹外植体不定芽生长的影响 由图 1
可以看出，芦竹不定芽在所有培养基中的生长情况整体表现
正常。由表 1可知，在浓度为 0 ～ 500 μmol /L范围内，AS对
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(7):3865 － 3866 责任编辑 刘赟 责任校对 李岩
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.07.213
芦竹不定芽高度的影响差异不显著;浓度达到 1 000 ～ 2 500
μmol /L时，与 0 ～500 μmol /L相比，芦竹不定芽高度显著增
加;1 000 μmol /L 与 2 500 μmol /L 2 个浓度相比，浓度在
2 500 μmol /L时，芽高显著增加;当浓度增加到5 000 μmol /L
时，AS对株高的影响和 0 ～ 500 μmol /L 浓度对比无显著差
异，但与 1 000 ～2 500 μmol /L相比有显著差异。由此可见，
AS对芦竹不定芽的生长影响表现为在一定浓度范围内
(1 000 μmol /L与 2 500 μmol /L)有一定的促进作用。
注:A．对照;B． 100 μmol /L AS;C． 250 μmol /L AS;D． 500 μmol /L AS;E． 1 000 μmol /L AS;F． 2 500 μmol /L AS;G． 5 000 μmol /L AS。
图 1 不同浓度乙酰丁香酮培养基中芦竹外植体生长状态
表 1 乙酰丁香酮对芦竹外植体不定芽诱导及生长的影响
AS浓度
μmol /L
不定芽
诱导数∥个
不定芽的生长
高度∥cm
一个月后的
生长状况
0(CK) 105． 8 a 25． 7 a 生长良好
100 90． 3 b 27． 2 a 生长良好
250 85． 0 b 26． 8 a 生长良好
500 80． 5 b 27． 1 a 生长良好
1 000 69． 8 c 34． 4 b 生长良好
2 500 65． 0 c 29． 7 c 生长良好
5 000 60． 0 c 25． 2 a 生长良好
注:数据后同列不同小写字母表示在 0． 05 水平上有显著差异(P ＜
0． 05)。
3 结论与讨论
农杆菌介导的植物基因工程是外源基因导入植物常用
的方法之一，乙酰丁香酮在转化中起着重要作用。该次研究
通过研究添加不同浓度 AS 的培养基中芦竹外植体培养情
况，得出芦竹对 AS在试验范围内有较强的耐受性。试验浓
度范围内，没有观察到芦竹受乙酰丁香酮影响出现死亡的现
象，且一定浓度的 AS对芦竹不定芽的诱导和生长有一定的
影响。综合比较认为，在芦竹转基因过程中，100 和 500
μmol /L的浓度可以作为芦竹转基因过程中 AS使用的候选
浓度。这个浓度范围和其他植物转基因研究报道中使用的
60 ～400 μmol /L AS 接近［8］。在芦竹转基因过程中，结合研
究农杆菌对芦竹生长的影响在候选浓度范围中进一步进行
筛选，最终得到最合适的芦竹转基因使用的 AS浓度，还有待
进一步研究。
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6683 安徽农业科学 2012 年