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王瓜的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 35 卷 第 2 期 , 1望哭) 年 4 月
王瓜的组织培养和快速繁殖
丁如贤 李博华 张汉明 (第二军医大学药学院 , 上海 :似3 )
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Z HAN C H。 死gn ( 5 兜。dn 蒯改门产 月` 以化创 U成比咫勿 , 夕四堵枷 2以科33 )
1 植 物 名 称 王 瓜 ( 乃元肠sa r材触 3 。配 -
~
比倪3 ) ,采 自浙江天 目山 。
材料类别 顶芽 、带腋芽的茎段 。
培养条件 诱导 分化培养 基 : ( l) M S +
23
6

B A 0
.
5叱 · L 一 ` (单位 下同 ) ; ( 2 ) M s + 6一 B A
l ; ( 3 )MS
+ 6

BA Z
+ 2
,
4

D I
。 诱导生根与生
长培养基 : ( 4 ) M S ; ( 5 ) M S + 认A Z ; ( 6 ) M S + 6 -
BA I
+ 2
,
4

D l
。 每种 培养 基均 附加 3% 蔗
糖 , 0 , 7 % 琼 脂 , p H 5 . 8 。 培 养 温 度 ( 25 士
l) ℃ ,光照每天 12 h ,光照度 2 (XX) h 左右 。
4 生长与分化情况
4
.
1 无菌材料的获得 将王瓜种子用 70 %
乙醇浸泡 30 5 , 取出水洗 , 然后用 0 . 7% 次氯
酸钠灭菌 20 而 n , 再用无 菌水冲洗 3 一 4 次 ,
种植于 M S 培养基上 。 待苗长至高 s cm 、具 6
片真叶时 , 剪其顶芽 、 带腋芽的茎段作外植
体 。
4
.
2 丛生芽的诱导 将外植体种植于分化
培养基上 , s d 左 右 , 在茎的两端和顶芽 的基
部开始愈伤化 ,颜色有点土黄色 。 or d 左右 ,
在 ( 1 ) 、 ( 2 )培养基上 的叶腋 和茎顶开始生出
小芽 ,但生长缓慢 。 20 d 左右 , ( l) 培养基上
每个外植体产生 12 个左右的丛生芽与小苗 ,
小苗叶片非常细小 , 显生长不 良态势 ;在 ( 2 )
上一般仅 1 一 2 个芽 , 生长较 ( l) 上的差 ;而在
( 3 )上仅愈伤化 ,没有芽形成 。 我们 同时还做
了更高浓度的 6一 BA 培养 , 发现外植体愈伤化
更严重 , 而且粘稠 ,无芽形成 。 由此说明只有
低浓度的 6一B A 才能促进芽的形成 。
.4 3 生根与 生长情况 分化培养基上形成
的丛生 芽切下移 至生根 与生 长培养基 。 在
( 5) 上 s d 可看到叶片明显增大 , 7 d 左右开始
生根 ,根较粗也较多 ;在 ( 4 )上要 or d 左右才
看到 叶的增大与生根 , 且根较细数 目少 ,根上
的细分枝较多 ;芽在 ( 5 )上的生长速度明显快
于 ( 4 ) ;而 ( 6) 上 的小芽在靠近培养基 的基部
开始愈伤 , 小芽生长缓慢 , 几乎停止生长 。 所
以 认 A 不仅能促进 王瓜 的生根 , 而且能进一
步促进它的生长 , 而 2 , 4一 D 则促进愈伤化 ,不
利于生根 。
.4 4 试管苗的移栽 将培养有试管苗 的三
角烧瓶打开 , 在温室中炼苗 3 d , 然后取 出洗
去根部的琼脂 , 移至盛有蛙石与泥炭 ( 1 : l) 的
花钵中 , 每天 浇含 MS 大量元素的稀释培养
液 ,移栽成活率研% 。
5 意义与进展 王瓜为葫芦科括楼属植物 ,
其根作为堕胎药已有近千年的历史 。 王瓜根
中含有抗早孕蛋白 , 其抗早孕和引产方面的
功效大大优 于天花粉 。 王瓜根 中还含葫芦素
B

E
, 药理实验证明其对鼻咽癌细胞具有较
强的杀伤作用 , 同时能促进正常淋 巴细胞 的
转化功能 , 因而具有较 好 的临床应用 价值 。
故对王瓜的开发和应用研究是重要的 。 王瓜
主要分布于两广及长江流域 , 其资源主要靠
采挖野生 , 未见人工栽培 。 本文 的研究 可为
人工栽培王瓜所需种苗提供一条途径 。
收稿 19 8伪 一28 修定 1卯 8一 12一 8
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1999. 02. 013