全 文 :收稿日期:2012 - 01 - 08
基金项目:国家自然科学基金(编号:30460031) ;贵州省优秀科技教育人才省长专项资金(黔省专合字[2008]26 号) ;贵州省科学技术厅贵州师范大
学联合基金(黔科合 J字 LKS[2010]18 号)。
作者简介:江富成(1987 -) ,男,贵州师范大学 2009 级生物技术专业学生。
通讯作者:乙 引;E-mail:yiyin@ gznu. edu. cn。
外源 Ca2 + 对土人参(Talinum paniculatum)
种子萌发和幼苗生长的影响
江富成, 王 希, 杨 柳, 张习敏, 乙 引
(贵州师范大学 贵州省植物生理与发育重点实验室, 贵阳 550001)
摘要:将无菌土人参种子接种在含 0. 001、0. 01、0. 1、1. 0、10、30 mmol /L Ca2 +的 MS固体培养基中,光照恒温培养,测定种
子发芽率、发芽时间,以及幼苗形态、生理指标。结果表明,当培养基 Ca2 +浓度为 0. 1 mmol /L 时,种子萌发时间最短,平
均叶片数最多,平均株高最高,分别为 9 d、11. 82 片和 4. 28 cm;当培养基 Ca2 +浓度为 1. 0 mmol /L时,种子发芽率、Chl a
含量、Chl b含量最高,依次为 74%、1. 00 mg /g和 0. 14 mg /g;当培养基 Ca2 +浓度为 30 mmol /L时,水势急剧下降;随着培
养基中 Ca2 +浓度的增加,土人参根系活力呈曾加趋势,培养基中的 Ca2 +浓度为 1. 0 mmol /L 时,根系活力为 1. 67 mg /
(g·h)。土人参生长的最佳钙离子浓度范围为 0. 01 ~ 1. 0 mmol /L。
关键词: 外源 Ca2 +;土人参;种子萌发;幼苗生长
中图分类号: S 567. 5 文献标志码: A 文章编号: 1001 - 4705(2012)05-0019-04
Effect of Exogenous Ca2 + on Seeds Germination and
Seedling Growth of Talinum paniculatum
JIANG Fu-cheng,WANG Xi,YANG Liu,ZHANG Xi-min,YI Yin
(Key Laboratory of Plant Hysiology and Evelopment Egulation,Guizhou Province,
Guizhou Normal University,Guiyang 550001,P. R. China)
Abstract:Effect of exogenous Ca2 + on seed germination and seedling growth of Talinum paniculatum were
studied. The seeds of Talinum paniculatum were planted in the medium containing 0. 001 mmol /L,0. 01 mmol /
L,0. 1 mmol /L,1. 0 mmol /L,10 mmol /L,30 mmol /L Ca2 +,respectively. The germination rate,germination
time,physiological and morphological index were measured respectively. The results showed that the
germination rate,content of chlorophyll a,content of chlorophyll b were the highest at 9 th day,11. 82 piece of
leaves and 4. 28 cm height in the medium containing 1. 0 mmol /L Ca2 + . The germination time was the shortest
and the numbers of leaves was the most when the medium contained 0. 1 mmol /L Ca2 + . The water potential
decreased at 30 mmol /L Ca2 + in the medium. The roots activity increased with the increasing of Ca2 +
concentration. The roots activity was 1. 67 mg /(g·h)at 1. 0 mmol /L in the medium. The optimum Ca2 +
concentration was 0. 01 - 1. 0 mmol /L.
Key words: exogenous Ca2 +;Talinum paniculatum;seeds germination;seedlings growth
贵州是我国裸露型喀斯特集中连片分布最广的地
区,全省喀斯特面积占国土总面积的 73%[1]。由于乱
砍滥伐、滥垦滥耕等掠夺式土地经营,导致水土流失和
石漠化面积不断扩大,石漠化等级不断加剧,严重制约
了贵州经济和社会的发展。目前,种植抗逆性强的经
济植物是解决石漠化问题的有效途径之一[2]。但是,
长期以来对本土植物生理特征的研究有限,难以筛选
到有效的喀斯特适生经济植物,严重影响到石漠化治
理进程。
土人参(Talinum paniculatum)为一年或多年生马
齿苋科肉质草本植物[3],原产于热带美洲,适应性强,
耐寒、耐旱、耐热,基本无病虫害发生。其根可入药,滋
补强壮[4],嫩茎、叶可作蔬菜食用,味道鲜嫩,口感清
脆[5],是理想的药食两用植物,其潜在的商业价值越
来越受到重视。有关土人参的研究已有一些报道,主
要涉及生药性状[6]、化学成分[7]、多糖含量、微量元素
·91·
研究报告 江富成 等:外源 Ca2 +对土人参(Talinum paniculatum)种子萌发和幼苗生长的影响
DOI:10.16590/j.cnki.1001-4705.2012.05.045
分析[8]。但是,迄今尚未见有关土人参生长与喀斯特
Ca2 +环境关系的研究报道。鉴于此,本试实验拟开展
外源 Ca2 +对土人参种子萌发和幼苗生长影响的研究,
旨在为土人参在喀斯特地区的种植和推广提供基础理
论依据。
1 材料与方法
1. 1 材 料
土人参种子收集于贵州毕节。
1. 2 方 法
挑选籽粒饱满、大小一致的土人参种子,用 0. 5%
KMnO4 溶液消毒 30 min,双蒸水漂洗 3 次,密封放入
4 ℃冰箱春化处理 4 d。接种前,种子先用土温和双蒸
水按 1∶ 10 的比例清洗 10 min,再用双蒸水洗涤 2 ~ 3
次,分别接种到含 0. 001、0. 01、0. 1、1. 0、10、30 mmol /L
CaCl2 的 MS 固体培养基中。每个浓度接种 50 瓶,每
瓶 2 粒种子。置于温室内培养,温度(25 ± 1)℃,光照
强度 1 000 lx,光照时间 16 h /d。每 2 d观察 1 次,并记
录种子发芽情况。
种子萌发测定:发芽速率系数(CRG) (%)=
[∑(nxt)/∑n]× 100%;式中:t 为自接种开始时的
天数,n 为在 t 天内萌芽的种子数[9]。发芽率(G)
(%)=(发芽种子数 /供试种子数)× 100% [10]。发芽
时间 =发芽数达到 5 株时的时间。
幼苗生长测定:株高 =茎基部至幼苗叶片顶端的
高度;叶片数 =每株植株的叶片总数。
幼苗生理特征测定:相对含水量(%)=(鲜重 -
干重)/鲜重 × 100%;生物量测定、叶绿素含量测定、
根系活力的测定参考李合生等[11]方法。水势用水势
仪测定(WP 4-T,北京力高泰科技有限公司)。
2 结果与分析
2. 1 土人参种子萌发对外源 Ca2 +的依赖
图 1 不同 Ca2 +浓度培养下土人参种子
萌发时间和萌发率
外源 Ca2 +浓度影响土人参种子萌发进程。在 0. 1
mmol /L Ca2 + 培养下,萌芽所需时间最短,为 10 d,
30 mmol /L Ca2 +培养下,其萌发天数最长,为 48 d,2 种
外源 Ca2 +浓度条件下培养的土人参后者比前者萌芽
所需时间多 38 d。发芽率随着 Ca2 +浓度的递增呈先
增后减的趋势,在 1 mmol /L Ca2 +培养基中,发芽率最
高,为 74%;在 30 mmol /L Ca2 + 培养基中,发芽率最
低,为 11%(图 1)。
2. 2 外源 Ca2 +对土人参幼苗形态的影响
当培养基中 Ca2 +浓度为 0. 1 mmol /L 时,平均株
高达到最大值,为 4. 28 cm;在 30 mmol /L时,平均株高
最低,为 1. 79 cm。当培养基中的 Ca2 +为 0. 01 mmol /L
时,幼苗的平均叶片数最多,为 12. 09 片;在 10
mmol /L时,平均叶片数却只有 2 片。不同外源 Ca2 +浓
度培养条件下的土人参平均株高和叶片数的最大差值
分别为 2. 49 cm和 10. 09 片(图 2、图 3)。
图 2 不同 Ca2 +浓度培养下土人参株高和叶片数
图 3 不同外源 Ca2 +浓度下土人参的长势,白线 = 1. 5 cm
2. 3 外源 Ca2 +对土人参生理代谢的影响
图 4 不同 Ca2 +浓度培养下土人参种子叶片叶绿素 a
和叶绿素 b含量
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第 31 卷 第 5 期 2012 年 5 月 种 子 (Seed) Vol. 31 No. 5 May. 2012
(A:鲜重;B:干重)
图 5 不同 Ca2 +浓度培养下土人参生物量
(A:水势;B:含水量)
图 6 不同 Ca2 +培养下土人参水势和含水量
叶绿素是光合作用的主要色
素,其含量的高低可能影响叶绿体
的光能利用率。不同 Ca2 + 浓度培
养下,叶绿素 a 和叶绿素 b 的含量
在 1 mmol /L时均最高,分别为 1. 00
mg /g 和 0. 15 mg /g。而 Ca2 + 浓度
高于或低于 1 mmol /L 时,叶绿素 b
含量逐渐降低。Ca2 +浓度在 0. 001
~0. 01 mmol /L 和 1. 0 ~ 30 mmol /L
时,叶绿素 a含量依次递减,在0. 01
~ 1. 0 mmol /L 时有微小的增加。
当培养基中的 Ca2 + 浓度为 30
mmol /L时,叶绿素 a和叶绿素 b 含
量均最低,分别为 0. 43 mg /g 和
0. 07 mg /g(图 4)。
2. 4 外源 Ca2 +对土人参生物量的
影响
随着培养基中 Ca2 + 浓度的增
加,土人参根、叶鲜重总体呈下降趋
势,但 Ca2 +浓度为 1. 0 ~ 10 mmol /L
时,叶的鲜重在 10 mmol /L 出现了
一个小波峰,而茎的变化不明显。
当 Ca2 +浓度为 10 ~ 30 mmol /L 时,根、茎和叶干、鲜重
的变化趋势相同,干鲜重均达到最低值,分别为
0. 000 6、0. 000 7、0. 001 9 g 和 0. 007 3、0. 000 7、
0. 001 9 g(图 5)。
2. 5 外源 Ca2 +对土人参水势和含水量的影响
当 Ca2 +浓度在 0. 001 ~ 10 mmol /L之间时,土人参
根、茎、叶的水势变化不显著。当 Ca2 + 浓度从 10
mmol /L增加到 30 mmol /L 时,根水势由 - 2 MPa 变为
- 19. 23 MPa,茎由 - 2. 7 MPa 变为 - 12. 42 MPa,叶由
-1. 1 MPa变为 - 4. 83 MPa(图 6)。随着 Ca2 +浓度增
加含水量变化有增加的趋势,Ca2 + 浓度由 0. 001
mmol /L 增加到 30 mmol /L 过程中,叶片含水量由
93. 58%变到最大 95. 50%,增加 1. 92 个百分点。根
的含水量由 91. 63%变到 97. 74%,增加 4. 11 个百分
点。茎的含水量由 89. 73%变到 95. 44%,增加 5. 71
个百分点(图 6)。
2. 6 外源 Ca2 +对土人参根系活力的影响
随着培养基中 Ca2 +浓度的增加,土人参根系活力
呈增加趋势,培养基中的 Ca2 +浓度为 0. 001 mmol /L
时,根系活力为 0. 42 mg /(g·h) ,当培养基中 Ca2 +浓度
为 30 mmol /L时,根系活力为 2. 31 mg /(g·h) (图 7)。
差值为 1. 89 mg /(g·h)。
图 7 不同 Ca2 +浓度培养下土人参根系活力
3 讨 论
土人参(Talinum paniculatum)是理想的药食两用
植物,也是喀斯特石漠化治理的备选植物。研究土人
参生理过程与外源 Ca2 +的相关性,对该植物在喀斯特
地区的种植和推广具有重要意义。
本研究结果表明,土人参的生长发育过程强烈依
赖外源 Ca2 + 的参与,但是,不同的生理过程对外源
Ca2 +的需求存在显著差异。种子萌发、株高和叶片数
所需的最适 Ca2 +浓度为 0. 00 1 ~ 10 mmol /L。与 10
mmol /L Ca2 +浓度时相比,种子萌发时间提早了38 d,
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研究报告 江富成 等:外源 Ca2 +对土人参(Talinum paniculatum)种子萌发和幼苗生长的影响
叶片数增加了 10 片;与 30 mmol /L Ca2 +浓度时相比,
种子发芽率提高了 63%,平均株高增加了 2. 49 cm。
植物体内叶绿素含量的多少,在很大程度上决定
着光合作用的强弱,并与植物生长和生理状况紧密相
关[12]。有研究表明,高浓度 Ca2 +降低叶绿素含量和
光合强度,对水稻幼苗生长产生抑制作用,推测高浓度
Ca2 +可能抑制了叶绿素合成相关基因的表达,从而导
致叶绿素含量明显减少[13]。本实验结果表明,在低浓
度(≤1 mmol /L)条件下,土人参叶绿素含量与外源
Ca2 +浓度呈正相关;当 Ca2 +浓度继续增加,叶绿素含
量明显减少(图 4) ,与前述结果一致。
在 0. 001 ~ 10 mmol /L Ca2 +浓度范围内,土人参的
水势保持相对稳定。但当 Ca2 +浓度继续升高后,水势
急剧下降,表明高浓度 CaCl2 导致培养基渗透势下降,
对土人参产生了渗透胁迫,造成植物体失水。
根系活力泛指根系整个代谢的强弱。是一种客观
反映根系生命活动的生理指标[14,15]。植物根系是活
跃的吸收器官和合成器官,根系活力的大小直接影响
整个植株生命活动及产量。本实验结果表明,外源
Ca2 +的加入可有效提高土人参根系活力(图 7)。
综上所述,外源 Ca2 +对土人参种子的萌发、光合
生理、幼苗生长及形态建成均具有很大影响。由于
Ca2 +在细胞中的作用较为复杂,它既是一种重要的营
养元素,也可作为钙信使参与植物的代谢调节,因此,
不可能以现有研究结果阐明外源 Ca2 +的作用机制。
大量的问题有待于进一步深入研究。
参考文献:
[1]李兴中.晚新生代贵州高原喀斯特地貌演进及其影响因素
[J].贵州地质,2001,1(18) :29 - 36.
[2]蔡道雄,卢立华. 浅谈石漠化治理的对策及造林技术措施
[J].世界林业研究,2002,15(2) :77 - 80.
[3]马明正,马三梅.土人参的栽培与利用[J].北方园艺,2006
(5) :176.
[4]徐文友,严西林,粟军昌.土人参的生药学研究[J].中医药
学报,1995(3) :15 - 16.
[5]李品汉.土人参及其丰产栽培技术[J]. 农村百事通,2007
(6) :30,31,84.
[6]饶光厚.好个土人参[J].中国花卉盆景,2011(9) :29.
[7]沈笑媛,杨小生,杨波,等.苗药土人参的化学成分研究[J].
中国中药杂志,2007,32(10) :980 - 981.
[8]熊汉洲,张俊巍. 苗药土人参中的几种微量元素含量分析
[J].微量元素与健康研究,2008,25(6) :57 - 58.
[9]闫兴富,曹敏. 光照对绒毛番龙眼种子萌发的影响[J]. 种
子,2008,27(2) :183 - 189.
[10]陈忠林,张学勇,张绵,等.碱胁迫对结缕草、高羊茅种子萌
发及其胚生长的影响[J].种子,2010,29(12) :27 - 30.
[11]李合生,孙群.植物生理生化实验原理和技术[M].北京:
高等教育出版社,2000:164 - 193.
[12]刘雪琴,仝瑞建,施佳妮.外源 Ca2 +对盐胁迫下玉米萌发
与幼苗生长的影响[J]. 中国农学通报,2010,26(17) :
197 - 200.
[13]周焱. Ca2 +对水稻幼苗生长的影响[J]. 贵州师范大学学
报,2002,20(3) :12 - 14.
[14]魏道智,宁书菊,林文雄.小麦根系活力变化与叶片衰老的
研究[J].应用生态学报,2004,15(9) :1 565 - 1 569.
[15]王素平,郭世荣,李琼,等.盐胁迫对黄瓜幼苗根系生长和
水分利用的影响[J]. 应用生态学报,2006,17(10) :
1 883 - 1 888.
(上接第 18 页)
[8]程伟,曾杰,赵志刚,等.两种生境条件下西南桦的生殖构件及
其空间格局[J].热带亚热带植物学报,2010,18(1):75 -81.
[9]翁启杰,曾杰,郑海水.西南桦育苗技术研究[J].林业实用
技术,2004(5) :20 - 22.
[10]Peterson A,Bartish I V,Peterson J. Effects of population size
on genetic diversity,fitness and pollinator community composi-
tion in fragmented populations of Anthericum liliago L[J].
Plant Ecology,2008,198:101 - 111.
[11]Winter C,Lehmann S,Diekmann M. Determinants of repro-
ductive success:A comparative study of five endangered river
corridor plants in fragmented habitats[J]. Biological Conser-
vation,2008,141:1 095 - 1 104.
[12]Oostermeijer J G B,van Eijck M W,den Nijs J C M. Offspring
fitness in relation to population size and genetic variation in
the rare perennial plant species Gentiana pneumonanthe
(Gentianaceae) [J]. Oecologia,1994,97:289 - 296.
[13]Elam D R,Ridley C E,Goodell K,et al. Population size and
relatedness affect fitness of a self-incompatible invasive plant
[J]. PNAS,2007,104(2) :549 - 552.
[14]Leimu R,Mutikainen P,Koricheva J,et al. How general are
positive relationships between plant population size,fitness
and genetic variation.[J]Journal of Ecology,2006,94:942 -
952.
[15]Hensen I & Wesche K. Relationships between population size,
genetic diversity and fitness components in the rare plant Dict-
amnus albus in Central Germany[J]. Biodiversity and Conser-
vation,2006,15:2 249 - 2 261.
[16]Neel M C. Patch connectivity and genetic diversity conserva-
tion in the federally endangered and narrowly endemic plant
species Astragalus albens (Fabaceae).[J]Biological Conser-
vation,2008,141:938 - 955.
·22·
第 31 卷 第 5 期 2012 年 5 月 种 子 (Seed) Vol. 31 No. 5 May. 2012