全 文 ：作用是在溶液中加入无机盐可改变挥发物的分配系数 K;因
为 K是与活度系数(γ)成反比关系，活度系数是描述溶质与
溶剂分子间的相互作用，所以增加活度系数可提高顶空浓
度，一般在水样中加入无极盐电解质，从而达到盐析作用［7］。
本试验考察了不同浓度盐水和不加盐水样品的峰面积情况，
结果表明样品在相同条件下加盐与不加盐对峰面积的影响
至少有 30%，可见盐析作用对结果影响较大。考察比较加
入 20%与 30%的盐水，结果差异不大，但加入 30%盐水容易
盐析，所以本试验采用 20%盐水作为稀释液，同时也是间接
地利用了稀释法消除了基质的影响。
3． 4 小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中薄荷脑的标示含量应为
0． 150 mg·ml －1，但是结果测出的含量偏低，这可能与薄荷脑
易挥发的特性有关，在存贮和运输过中挥发后导致结果偏低。
本试验采取顶空进样方法，可以避免复杂的样品前处理，而且
样品用量少，使用试剂简单低毒，方法简单方便，结果准确可
靠，为糖浆剂中的薄荷脑含量测定提供另一便捷途径。
参 考 文 献
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2 许菊，赵卫国．气相色谱法测定咳舒糖浆中薄荷脑的含量［J］．中
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3 咏梅，李红，苏玉枝． GC法测定市售川贝楷把搪浆中薄荷脑含量
［J］．中药新药与临床药理，2009，20(4):361-363
4 颜栋林，陈学松．顶空气相色谱法测定川贝枇杷糖浆中薄荷脑的
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6 王永华．分配常数及气液相比对顶空气相色谱分析灵敏度的影响
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7 柴欣生，付时雨，莫淑欢，等．静态顶空气相色谱技术［J］．化学进
展，2008，20(5):762-765
(2014-01-21 收稿)
通讯作者:郭迎霞 Tel:(0310)7052668 E-mail:410816835@ qq． com
HPLC法测定肾石消胶囊中杯苋甾酮的含量
郭迎霞1 何栋梁2 宋静莉1 栗娟1 (1．邯郸市食品药品检验中心 河北邯郸 056001;2．河北大名县人民医院)
摘 要 目的:建立肾石消胶囊中杯苋甾酮的含量测定方法。方法:采用 HPLC法，色谱柱为 Agilent C18 ( 250 mm ×4． 6 mm，5
μm) ，以甲醇-水为流动相梯度洗脱，检测波长: 243 nm，流速: 1． 0 ml·min －1，柱温: 室温。结果:杯苋甾酮进样量在0． 025 ～
0． 247 μg的浓度范围内线性关系良好，r = 0． 999 6，平均回收率为99． 4%，ＲSD为0． 76% ( n = 9) 。结论:该方法快速、简单、结
果准确、可用于该制剂质量控制的一项重要指标。
关键词 杯苋甾酮; 高效液相色谱法;肾石消胶囊
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)09-1594-03
Determination of Cyasterone in Shenshixiao Capsules by HPLC
Guo Yingxia1，He Dongliang2，Song Jingli1，Li Juan1(1． Handan Institute for Food and Drug Control，Hebei Handan 056001，China;
2． People’s Hospital of Daming)
ABSTＲACT Objective:To establish a method for the determination of cyasterone in Shenshixiao capsules． Methods:Using an
HPLC method，the column was an Agilent C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)column，the mobile phase was methanol-water with gradient
elution． The detection wavelength was 243nm，the flow rate was 1． 0 ml·min －1，and the temperature of column was room temperature．
Ｒesults:The linear relationship of cyasterone was good within the concentration range of 0． 025-0． 247 μg(r = 0． 999 6)，the average
recovery was 99． 4%，and ＲSD was 0． 76% ． Conclusion:The method is rapid，simple and accurate，and can be used in the quality
control of the preparation．
KEY WOＲDS Cyasterone;HPLC;Shenshixiao capsules
肾石消胶囊是邯郸市中医院的自制制剂(许可证号:
20100066Z)，由川牛膝、石苇、瞿麦、鸡内金、金钱草、夏枯草、
鱼脑石、甘草、延胡索组成的复方制剂。具有化石排石、利湿
止痛的功效，常用于泌尿系结石及泌尿系感染的治疗。在前
期研究中制定了该制剂中石韦［1］、瞿麦［2］中有效成分的含
量测定。为进一步控制该药质量，保证临床用药安全有效，
本文建立了 HPLC法测定川牛膝中有效成分杯苋甾酮的含
量方法。
1 仪器与试药
LC-2010A高效液相色谱仪(日本岛津)，检测器:UV-
VIS;T1901 型紫外可见分光光度计(北京普析通用);
AUW120D电子天平(日本岛津);KQ-400KDE型数控超声波
清洗器(上海昆山市超声仪器有限公司，400 W，40 kHz);杯
苋甾酮对照品(批号:111804-201303，中国食品药品检定研
究院);肾石消胶囊(邯郸市中医院自制，规格:每粒重
0． 5 g);甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。
4951
www． zgys． org 研究简报
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱:Agilent C18(250 mm × 4． 6 mm，5 μm);以甲醇-
水为流动相，按表 1 进行梯度洗脱;检测波长:243 nm;流速:
1． 0 ml·min －1;进样量:10 μl，柱温:室温;理论塔板数按杯
苋甾酮峰计算不低于 3 000。
表 1 梯度洗脱程序
时间(min) 甲醇(%) 水(%)
0 ～ 20 25→43 75→57
20 ～ 32 43 57
32 ～ 35 43→100 57→0
2． 2 对照品溶液的制备
精密称取杯苋甾酮对照品0． 012 34 g，置 100 ml 量瓶
中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分取 10 ml，置 100 ml
量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0． 45 μm微孔滤膜滤
过，即得(每 1 ml含杯苋甾酮12． 34 μg)。
2． 3 供试品溶液的制备
取本品 10 粒的内容物，混匀，取约 3 g，精密称定，置具
塞三角瓶中，精密加入甲醇 25 ml，称定重量，超声处理 30
min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，
精密吸取续滤液 20 ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至 5 ml
量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。作为供
试品溶液。
2． 4 线性关系考察
分别精密吸取杯苋甾酮对照品溶液 2，5，10，15，20 μl，
注入液相色谱仪，照上述色谱条件测定杯苋甾酮的峰面积。
以对照品的进样量(X，μg)对峰面积(Y)进行线性回归，得
回归方程:Y = 1． 187 × 104 + 8． 035 × 106X，r = 0． 999 6，结果
表明杯苋甾酮进样浓度在0． 025 ～ 0． 247 μg之间呈良好的线
性关系。
2． 5 精密度试验
精密吸取对照品溶液(浓度:11． 34 μg·ml －1)10 μl，重
复进样 5 次，分别测定峰面积，结果峰面积的 ＲSD 为0． 75%
(n = 5)。
2． 6 重复性试验
按上述测定方法，对同一批(批号:130504)的样品分别
进行 5 次测定，结果杯苋甾酮含量平均值为11． 2 μg /粒，ＲSD
为0． 94%(n = 5)。
2． 7 稳定性试验
精密吸取同一批供试品(批号:130504)溶液 10 μl，照上
述色谱条件，每隔 3 h 进样测定，连续测定 5 次，其 ＲSD 为
0． 91%(n = 5)。结果表明供试品溶液在 12 h内稳定。
2． 8 干扰试验
按处方比例及工艺制备不含川牛膝的阴性样品适量，按
供试品溶液的制备方法制得阴性样品溶液。按上述色谱条
件进样 10 μl，与供试品溶液和对照品溶液色谱对照，结果
见图 1，阴性样品溶液在杯苋甾酮峰(保留时间 28 min)处无
干扰。
A．对照品 B．供试品 C．阴性样品 1．杯苋甾酮
图 1 HPLC色谱图
2． 9 加样回收率试验
取批号为 130504 的样品 9 份，每份约1． 5 g，精密称定，
每 3 份为一组，置具塞三角瓶中，精密加入对照品储备液 25
ml(分别精密吸取“2． 2”项下的对照品溶液 8，10，12 ml，置
100 ml 量瓶中，制得浓度分别为0． 987 2，1． 234，1． 480 8 μg
·ml －1的对照品储备液)，按“2． 3”项下制备供试品溶液，并
照上述色谱条件测定含量，结果平均回收率为99． 4%(ＲSD
= 0． 76%，n = 9)。
2． 10 样品测定
按正文“2． 1”、“2． 3”项下方法，测定 3 批样品含量，结
果见表 2。
表 2 样品测定结果(μg /粒，n =3)
批 号 杯苋甾酮
130504 11． 2
130505 11． 4
130601 11． 6
3 讨论
3． 1 检测波长的选择［3］
取杯苋甾酮对照品溶液进行紫外吸收扫描，结果杯苋甾
酮对照品在 243 处有最大吸收，参考《中国药典》2010 年版
一部川牛膝含量测定的方法，选择检测波长为 243 nm。
3． 2 供试品溶液制备方法的选择
试验中比较了超声处理和加热回流、不同的溶剂(50%
甲醇、50%乙醇、甲醇)、不同的超声提取时间(20，25，30，35
min)，最后选用本文的提取方法。
3． 3 流动相的选择［4 ～ 6］
试验中比较了甲醇-水(等度 40 ∶ 60 和梯度参考文
献［3］)、乙腈-水(17∶ 83)和乙腈-1． 5%磷酸二氢钠水溶液(20
∶ 80)流动相体系，结果显示在甲醇-水梯度洗脱流动相体系
下分离度高，但保留时间较长。故对参考文献的梯度洗脱进
5951
中国药师 2014 年第 17 卷第 9 期 China Pharmacist 2014，Vol． 17 No． 9
通讯作者:郭均平 Tel:13986125032 E-mail:
櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊
guojunping33@ 163． com
行调整为正文所述，指标成分色谱峰峰形好，阴性无干扰，专
属性较强。
3． 4 色谱柱的选择
试验中考察了方法的耐用性，比较了不同的色谱柱(SHI-
MADZU VP-ODS、Kromasil C18、Agilent ZOＲBAX SB-C18)，不同
的仪器(岛津和沃特斯)，结果本方法的耐用性良好。
参 考 文 献
1 吴海霞，郭迎霞，曹宇峰． HPLC法测定肾石消胶囊中绿原酸的含
量［J］ ． 解放军药学学报，2013，29(3):242-243
2 吴海霞，郭迎霞，曹宇峰． HPLC法测定肾石消胶囊中大黄素的含
量［J］．中国药业，2013，22(5):49-50
3 中国药典［S］． 2010 年版．一部． 35-36
4 马英，毕开顺，王玺，等． HPLC 法测定川牛膝中杯苋甾酮的含量
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5 陈丹丹，王书林，赵磊，等．川牛膝的 HPLC 指纹图谱研究［J］． 亚
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(2014-03-19 收稿 2014-05-20 修回)
HPLC法同时测定氯甲醑中氯霉素和甲硝唑的含量
张金安 郭均平 胡占芳 马晓琴 胡敏芳 (武警湖北总队医院药剂科 武汉 430061)
摘 要 目的:建立 HPLC 法同时测定氯甲醑中氯霉素及甲硝唑的含量。方法:采用 HPLC 法，色谱柱为 Nov-pak C18 ( 150
mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇∶水( 75∶ 25) ，流速为1． 0 ml·min －1，检测波长为 297 nm，柱温: 30℃，进样量 20 μl。结果:
甲硝唑和氯霉素线性范围分别为 5 ～ 80 μg·ml －1 ( r = 0． 999 7 ) 和 50 ～ 800 μg·ml －1 ( r = 0． 999 8 ) ; 平均回收率分别为
100． 83% ( ＲSD = 1． 82%，n = 6) 和100． 20% ( ＲSD = 0． 55%，n = 6) 。结论:本法快速方便、精密度高、重复性和稳定性好，可用
于同时测定氯甲醑中氯霉素和甲硝唑的含量。
关键词 氯甲醑;氯霉素;甲硝唑; 高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)09-1596-03
Simultaneous Determination of Chloromycetin and Metronidazole in Chlortalidone and Metronidazole Spir-
its by HPLC
Zhang Jin’an，Guo Junping，Hu Zhanfang，Ma Xiaoqin，Hu Minfang (Pharmacy Department，Hubei Provincial Corps Hospital，Chi-
nese People’s Armed Police Forces，Wuhan 430061，China)
ABSTＲACT Objective:To establish an HPLC method for the simultaneous determination of chloromycetin and metronidazole in
chlortalidone and metronidazole spirits． Method:The HPLC method was performed on an NOV-pak C18(150 mm × 4． 6 mm，5 μm)
column and the mobile phase consisted of methanol and water (75∶ 25)． The flow rate was 1． 0 ml·ml －1，the detection wavelength
was 297nm，the temperature of column was 30℃ and the sample size was 20 μl． Ｒesult:The calibration curve of metronidazole was
linear within the range of 5-80μg·ml －1(r = 0． 999 7)，and the average recovery was 100． 83% with ＲSD of 1． 82%(n = 6)． The cal-
ibration curve of chlortalidone was linear within the range of 50-800μg·ml －1(r = 0． 999 7)，and the average recovery was 100． 2%
with ＲSD of 0． 55%(n = 6)． Conclusion:The method is simple，rapid，accurate and reproducible，and can be used in the quality
control of chlortalidone and metronidazole spirits．
KEY WOＲDS Chlortalidone and metronidazole spirits;Chloromycetin;Metronidazole;HPLC;Determination
氯甲醑为我院制剂［武制字(2012)F100025］，是以氯霉
素和甲硝唑为主要成分的乙醇溶液，具有杀菌、消炎、止痒的
功效，主要用于脂溢性皮炎、毛囊炎、头皮糠疹、酒渣鼻、寻常
痤疮等症［1］，多年使用未见明显不良反应发生。文献中对于
甲硝唑和氯霉素的测定方法分别采用高效液相色谱法和紫
外分光光度法进行［2］。为了更好地控制该制剂的质量，提高
工作效率，本文建立 HPLC法同时对氯甲醑中两种主要成分
进行含量测定，现报道如下。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
Waters高效液相色谱系统:600 四元梯度压力泵，2487
紫外检测器，MILLNAME12 数据处理系统(美国 Waters 公
司)，BP211D 型电子分析天平(德国赛多利斯公司)，UV-
1700 分光光度计(日本岛津)。
1． 2 试药
氯霉素对照品(中国食品药品检定研究院，批号:
6951
www． zgys． org 研究简报