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三种抗生素对盐桦组织培养初代外植体内生菌的抑制作用



全 文 :农村科技 2010( 9)


 









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组织培养无菌操作要在接种前用酒精、 次氯酸
钠等进行体外消毒, 但是各种消毒剂对外植体都会
产生一定的影响, 消毒时间过长或消毒剂浓度过高
会使植物死亡, 而消毒时间过短或者消毒剂使用浓
度过低,又不能有效地杀死污染菌。 所以对外植物,
尤其是对比较珍贵的外植体的消毒, 是组织培养是
否成功的关键。
在建立盐桦快繁体系时, 体系中经常会有污染
出现。为了提高盐桦组织培养成活率,同时提高驯化
苗的质量商品率,减少真菌和细菌的污染,本试验在
初代培养基中分别加入头孢拉定、 庆大霉素和青霉
素,研究 3 种抗生素对真菌和细菌的抑制作用,并探
讨抗生素是否会对植物生长产生影响。
一、材料与方法
1.材料
以已移栽驯化成活, 在田间生长 1 年的盐桦树
苗的次年春天即将发芽的新梢茎段为外植体。
2.方法
新梢茎段采集后, 当日在实验室剪成 1~2 厘米
的单芽茎段。 先用多菌灵(1∶750)的溶液消毒 15 分
钟,自来水洗净,再用 75%酒精溶液消毒 1 分钟,无
菌水清洗 2~3 次, 最后用 2%~3%次氯酸钠消毒 20
分钟,无菌水清洗 4~5 次,分别接种到培养基上。 每
个组织培养瓶接种 3~4 个茎段, 每个处理接种数量
根据材料多少重复接种 30 个茎段。每 7天统计 1次
培养瓶中真菌和细菌污染情况,每 14 天统计 1 次盐
桦芽的萌发率, 以确定 3 种抗生素及其不同浓度对
污染真菌和细菌的抑制作用和对盐桦植物体生长的
影响。
3.培养基
培养基以 MS 培养基为基础, 使用 B5的有机质
浓度, 激素浓度为 BA 0.20 毫克/升培养基, 头孢拉
定、庆大霉素和青霉素浓度分别为 15 毫克/升、30 毫
克/升,以不加抗生素的处理为对照。
二、结果与分析
在试验过程中分别将 3 种抗生素对真菌和细菌
的抑制效果进行统计。
1.对组培中细菌的抑制作用
根据对盐桦新梢茎段在分别添加头孢拉定、庆
大霉素和青霉素的培养基上细菌污染率的统计结
果,3种抗生素对组培过程中污染细菌有一定的抑菌
效果。 培养基中添加青霉素素 30 毫克/升对细菌的
抑制作用较好。
2.对真菌的抑制作用
由表 2 可知:在接种初期 3 种抗生素对真菌的
抑制都比较好,但是随着时间的推移,2 种抗生素对
污染菌的抑制作用均有降低, 一方面是由于抗生素
的消耗, 另一方面可能是由于真菌对抗生素产生了
耐药性,致使在试验后期污染率升高。 整体上看,培
养基中添加庆大霉素 30 毫克/升对真菌抑制作用较
好。所以,下一步可以探究把其中 2种抗生素结合起
表 1 抗生素对盐桦组培中细菌的抑制作用
表 2 抗生素对盐桦组培中真菌的抑制作用
三种抗生素对盐桦组织培养初代
外植体内生菌的抑制作用
新疆农业职业技术学院 卢跃敏 郭 刚 付习科
Nong Cun Ke JiZhiWuBaoHu
植物保护
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农村科技 2010(9)
1.呼图壁县苗圃 白 伟
2.昌吉市林业技术推广中心 刘新旺
桃园梨小食心虫综合防治
Nong Cun Ke Ji ZhiWuBaoHu
植物保护


 









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来使用,以提高灭菌效果。
三、讨论
抗生素在较高浓度下会对植物生长产生不利影
响,过高浓度的抗生素同样会杀死植物。 不同植物对
不同抗生素具有不同耐受浓度, 研究 2 种常见抗生
素对盐桦组培中污染菌的抑制, 以及是否会对盐桦
外植体的萌芽与生长产生影响, 有助于提高盐桦组
培效率。
试验结果表明: 将青霉素和庆大霉素以 30 毫
克/升或 15 毫克/升的浓度加入盐桦培养基中, 对抑
制污染菌的生长有一定作用, 同时可促进盐桦萌芽
和生长。
近几年, 日益加剧的食心虫危害已成为桃园发展的一个
制约因素。 2008 年在昌吉市个别桃园里梨小食心虫危害率已
达 70%。通过对昌吉市 533 公顷桃园调查,发现梨小食心虫是
仅次于白星花金龟的又一大食果害虫。
一、 形态特征
成虫体长 4.6~6.2 毫米, 翅展 10.4~14.7 毫米, 全身灰褐
色,无光泽。 前翅深灰褐色,前缘色深,上有 10 组银白色短斜
纹,翅面中部有一明显小白点,近外缘处有 10 个黑斑,后翅浅
灰褐色。
卵扁椭圆形,初孵化的幼虫体白色,头及前胸背板黑色,
老熟幼虫体长 10~14 毫米,桃红色;蛹长 7~8 毫米,黄褐色。
二、发生规律
梨小食心虫在昌吉桃园 1 年发生 3~4 代, 均以老熟幼虫
在树干基部、翘皮裂缝中结茧越冬。 经观察,每代成虫发生时
间:越冬代 5 月上旬~6 月中旬;第 1 代 6 月上旬~7 月上中旬;
第 2 代 7 月上旬~8 月中旬。 成虫白天在枝叶杂草上静伏,日
落前后活动交尾;夜间产卵,卵散产于叶背面,新梢中部叶片
卵粒较多。 第 1 代、第 2 代幼虫主要危害桃树嫩梢。 幼虫从桃
梢前端 2~3 片叶基部蛀入, 在髓中危害蛀食长度达 25~37 毫
米,被害梢端萎蔫下垂,幼虫又转蛀别的新梢。 每个幼虫可蛀
食 3~4 个新梢,蛀孔处可见到虫粪并流出胶状树液,最后被害
梢前端干枯;第 3、第 4 代幼虫主要蛀食桃果,被害果易腐烂
脱落。
三、综合防治
1.加强虫情监测
在园龄长的桃园中,梨小食心虫均会经历从无到有、从有
到多的过程,在田间抚育管理中要做好物候观测和虫情调查。
以昌吉地区为例,这几年早春气候变化影响了虫情发育进度,
每年防治时间有提前和推后现象。 不能拘于 5 月 26 日、6 月
10 日、6 月 25 日这 3 个时间防治, 要根据当年虫情测报信息
适时调整到最佳防治时间。
2.诱捕成虫
①黑光灯诱捕 在 4 月下旬安装使用至 7 月底。 在桃园
中每 300 米布设 1 个黑光灯, 利用黑光灯高压电网及诱捕袋
捕捉成虫。使用黑光灯每晚开启时间不少于 4 小时,并及时收
集、记载虫情信息。
②糖醋液诱捕 糖醋液中糖、醋、酒、水配比为 5∶20∶2∶80,
配好后掺入少量敌百虫,放在玻璃罐头瓶或瓷盆内,每瓶装到
1/3 即可。 注意在干燥多风季节每隔 4~5 天添加 1 次,大雨过
后要及时换掉。
③性息素诱捕 在桃园内可将梨小食心虫性息素诱芯悬
挂于水碗表面,诱杀成虫。
3.清园
在早春桃树出土后, 刮除树干老皮与修剪的枝干一并运
出烧毁,并在树干上喷涂 3°~5°石硫合剂。发现虫梢虫果时,及
时剪下,并装入随身携带的布袋内,拿出深埋或焚毁。 及时捡
出被风刮落的伤果、落果和带有虫眼的桃子,保持园内清洁,
减少害虫寄生场所。
4.药品防治
统一药剂、统一时间、集中防治。 要求每次防治采用一个
品种、一种剂型,再次防治可调换另一剂型,交替使用农药品
种。 每种农药连续使用不能超过 2 次,以减轻害虫抗药性;防
治时要在桃园产区集中连片进行,做好防效检查,杜绝漏防情
况发生,影响防治效果。
首次喷药时间要以成虫发生数量变化为参照, 当诱捕成
虫连续几天突然增加,且卵枝(果)率达到 1%时,及时喷施农
药。 目前采用速灭杀丁、功夫、卓击等菊酯药物防效较好。
由于桃是核果类果树, 在化学防治中应尽量不使用有机
磷农药。
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