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地笋的组织培养和植株再生研究



全 文 :地笋的组织培养和植株再生研究
申 健,刘德江* ,谢友实,昌继伟,姜 丽 (佳木斯大学生命科学学院,黑龙江佳木斯 154007)
摘要 [目的]得到长势一致的地笋幼苗。[方法]采用组织培养的方法进行快速繁殖。[结果]培养基 MS + KT 1. 0 mg /L + NAA 0. 5
mg /L适合愈伤组织的诱导;培养基 3 /4MS +6-BA 1. 5 mg /L + NAA 1. 0 mg /L适合芽的诱导;培养基 1 /2MS + IAA 0. 5 mg /L适合再生植
株生根。田园土∶腐殖土∶细沙 =5∶3∶2对组培苗的生长最有利。[结论]建立了地笋的快速繁殖方法。
关键词 地笋;组织培养;试管苗
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2011)34 -20959 -01
Study on Tissue Culture and Plant Regeneration of Shiny Bugleweed
SHEN Jian et al (College of Life Science,Jiamusi University,Jiamusi,Heilongjiang 154007)
Abstract [Objective]The study aimed to obtain the shiny bugleweed seedlings which come out evenly. [Method]The tissue culture tech-
nology was used to make the rapid propagation. [Result]The medium of MS + KT 1. 0 mg /L + NAA 0. 5 mg /L was suitable to the induction
of the callus;the medium of 3 /4MS + 6-BA 1. 5 mg /L + NAA 1. 0 mg /L was the suitable to the induction of the buds;the medium of 1 /2 MS
+ IAA 0. 5 mg /L was the suitable to the rooting of the regeneration plants. It was most advantageous to the growth of seedlings of tissue culture
when the ratio of glebe soil to mold to sand was 5∶3∶2. [Conclusion]The rapid propagation method for shiny bugleweed was established.
Key words Shiny bugleweed;Tissue culture;Test-tube seedlings
作者简介 申健(1979 -) ,女,吉林辉南人,讲师,在读博士,从事植物
栽培生理研究,E-mail:mysj1234@ yahoo. com. cn。* 通讯作
者,实验师,硕士,从事寒地植物资源、生态、栽培及其提取
物的应用研究,E-mail:liudejiang2004@ 163. com。
收稿日期 2011-09-13
地笋(Lycopus lucidus Turcz.),又名地瓜儿苗,俗称地参、穿
地龙[1],为唇形科(Labiatae)地笋属(Lycopus L.)多年生草本植
物。其地下根状茎横走,先端肥大,近纺锤形,于茎节处生芽、
根(须根),生于湿草地、林下、河沟等地。春、夏季可采摘其嫩
茎叶凉拌、炒食、做汤,口味堪称野菜珍品。地笋还可全草入
药,具有降血脂、通九窍、利关节、养气血等功能[2]。笔者以地
笋根茎萌生的芽尖为外植体,通过对激素的组合及其用量的研
究,获得了诱导愈伤组织、芽分化和生根的最佳培养基,为地笋
的快速繁殖技术提供了可靠的试验依据。
1 材料与方法
1. 1 材料的获得与无菌处理 将 2010年 10月收获于佳木
斯大学试验田内的地笋根茎分段清洗干净,并经 70%乙醇和
0. 1% HgCl2 分别灭菌 30 s和 3 min,无菌水冲洗 5 次,置于
无菌的三角烧瓶中 25 ℃催芽,利用根茎内储存的营养,室内
自然培养 10 d,取萌生的芽尖为试材。通过多次试验证明,
此方法培养的试验材料,大大减少了无菌操作中的污染率。
取萌生的芽尖,经无菌水冲洗后,在超净工作台上用
70%乙醇和 0. 1% HgCl2 溶液分别消毒 10 s和 3 min,无菌水
冲洗 3 ~5次,接种到愈伤组织诱导培养基中。
1. 2 培养条件 愈伤组织诱导培养基:MS +KT 1. 0 mg /L +
NAA 0. 5 mg /L;芽分化培养基:3 /4MS + 6-BA 1. 5 mg /L +NAA
1. 0 mg /L;生根培养基:1 /2MS + IAA 0. 5 mg /L。上述培养基均
添加 5. 0%蔗糖、0. 8%琼脂,pH 6. 0。培养温度(25 ±1)℃,光
照时间 18 h /d,光照强度 2 000 lx。
2 结果与分析
2. 1 丛生芽的诱导 接种在愈伤组织诱导培养基中的芽尖
20 d后形成直径约 1. 5 cm的愈伤组织块(图 1) ,将其切成均
匀的小块接种到芽分化培养基上,培养 15 d后分化出大量的
丛生芽。
图 1 地笋茎尖诱导出的愈伤组织
Fig. 1 Callus induced from stem tip of L. lucidus
2. 2 生根与移栽 将丛生芽分株接种到生根培养基上,10
d后,不定芽上产生 3 ~ 8 条 1 ~ 5 cm长的不定根,形成幼苗
(图 2) ;并且,在幼苗的叶腋处分生出新的腋芽,而这些腋芽
可直接生根形成幼苗,生根率达 100%。选取健壮的试管苗
炼苗 7 d后,直接移栽到田园土、腐殖土、细沙比例为5∶3∶2的
基质中,浇透水,成活率可达 90%以上。
图 2 地笋生根及其叶腋处分生出的新腋芽
Fig. 2 Roots and new axillary buds growing from buds of L. lu-
cidus
(下转第 20995页)
安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2011,39(34):20959,20995 责任编辑 郑丹丹 责任校对 傅真治
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.34.214
化、抗衰老和防治心脏病等药理作用[29]。陈晓蓉用超临界
CO2 萃取技术提取翅果油
[30]。翅果仁蛋白是一种优质植物
蛋白,可作高档蛋白饮料和功能性食品的添加剂。翅果油树
种仁中亚油酸含量较高,是治疗动脉硬化的有效成分,并且
是制做亚油酸丸的主要原料[31]。
5 小结与前景
目前翅果油树相关成分、药理以及临床研究均不深入;
其资源的管理与保护也未引起足够重视。今后应加强对其
的研究,以扩大资源,并研发出技术含量高、剂型先进、安全、
有效、价格低廉且质量易控的相关药物和保健品,以期取得
明显的社会效益和经济效益。
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2 -5.
(上接第 20959页)
3 讨论
通过对地笋的组织培养研究,发现其有旺盛的再生和生
根能力,证明了地笋不但有很强的繁殖能力,而且还具有容
易适应外界环境的特性。在佳木斯地区对地笋进行田间试
验,证明了其易于管理和优良的生产性能。由于地笋与地面
平行走势的根状茎,生长期可以在地下延长 1 ~ 3 m,且可在
地下顺利越冬,次年将在其各个节间长出新的植株,说明地
笋有强入侵适应性,引种或规模栽培必须设立 2 ~ 3 m的宽
沟,作为隔离带。
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5990239 卷 34 期 党 璇等 翅果油树药学研究概况