全 文 ：广西科学院学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　 2006, 22( S): 403～ 405
Journal of Guangx i Academy of Sciences　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Vo l. 22, Supplement　 November 2006
收稿日期: 2006-03-18
作者简介:甄汉深 ( 1956-) ,男 ,教授 ,主要从事中药、药学教学与科研
工作。
* 国家中医药管理局课题民族项目 ( 04-05ZM01) ;广西科技厅攻关
项目 (桂科攻 0235022-4) ;广西教育厅课题 (桂教科研 [2003 ]22号 )。
高效液相色谱法测定苦玄参药材中的苦玄参苷Ⅰ A含
量*
Determination of Piefel tarraeninⅠ A Extracted from
Picria fel-terrae Lour. by HPLC
甄汉深 ,何翠薇 ,陈　勇 ,周吴萍 ,苏春妹 ,陆　晖
ZHEN Han-shen, HE Cui-wei, CHEN Yong, ZHOU Wu-ping, SU Chun-mei, LU
Hui
(广西中医学院 ,广西南宁　 530001)
( Guangxi Tradi tional Chinese Medical Universi ty, Nanning, Guangxi, 530001, China)
摘要: 采用 Agilent ZORBAX Eclipse XDB C8色谱柱 ( 4. 6× 150mm, 5μm) ,以乙腈 -0. 5%醋酸 ( 32∶ 68)为流动
相 ,流速 1ml· min- 1 ,检测波长 264nm,建立高效液相色谱法 ( HPLC) ,测定广西梧州大坡种植基地和龙州县
种植的苦玄参药材的茎、叶中苦玄参苷Ⅰ A的含量。实验结果显示 ,苦玄参苷Ⅰ A在 2. 28～ 11. 4μg范围内线
性良好 ,平均加样回收率为 101. 1% RSD = 2. 4% (n = 5) ,梧州大坡种植基地和龙州县种植的苦玄参药材中
苦玄参苷Ⅰ A在茎、叶中的平均含量分别为 0. 10% , 0. 31% , 0. 11% , 0. 58%。本方法简便、快速 ,重复性好 ,可
实际用于苦玄参药材中苦玄参苷Ⅰ A含量测定。
关键词:高效液相色谱法　苦玄参　苦玄参苷Ⅰ A　含量测定
中图法分类号: O657. 72; R284　　文献标识码: A　　文章编号: 1002-7378( 2006) S0-0403-03
Abstract: Using the Agilent ZORBAX Eclipse XDS C8 column ( 4. 6× 150mm , 5μm) , with the
mobile phase acetoni trile- 0. 5% acid ( 32: 68) , determined by 264nm ult raviolet, 1ml /min f low
rate, to quantify the main constituent Piefeltrraenin Ⅰ A in the stems and leaves of Picria
f el-terrae Lour. , which w ere planted in Wuzhou, Dapo and Long sheng of Guangxi. The result
show ed that linearity of PiefeltarraeninⅠ A was good in the range of 2. 28～ 11. 4μg , the recover-
ies of PiefeltarraeninⅠ A were 101. 1% , respectiv ely wi th corresponding RSD = 2. 4% (n = 5) .
The main consti tuent PiefeltarraeninⅠ A in Picria f el -terrae Lour. in tw o places w ere 0. 10% ,
0. 31% , 0. 11% , 0. 58% . The HPLC method has the characteristics of time saving , convenience,
good repeatabili ty which can be used for quantifying the main constituent PiefeltarraeninⅠ A in
Picria f el-terrae Lour.
Key words: high performance liquid chromatog raphy, Picria f el-terrae Lour. , Piefeltarraenin
Ⅰ A, content determination
　　苦玄参为广西地道药材 ,也是多种中成药的原
料。 来源于玄参科植物苦玄参 (Picria f el-terrae
Lour. )的干燥全草 ,产于我国广东、广西、云南和贵
州南部 ,在广西作药用历史已久。 苦玄参性寒味苦 ,
用于治疗高热、蛇伤及痈疖等 ,具有清热解毒 ,凉血
消肿之功效 [1 ] ,市场需求量大。 2000版中国药典正
文中尚未记载该品种 ,而有些以其为原料的中成药
如妇炎净胶囊 ,已记载于中国药典中 [2 ]。苦玄参作为
一种亚热带植物 ,广泛分布于我国南方各省区 ,是民
间常用草药 ,并为多种广西特产中成药的原料。 目
前 ,对苦玄参的研究主要为苦玄参药材中化学成分
DOI : 10. 13657 /j . cnki . gxkxyxb. 2006. s1. 005
的分离分析 [3, 4 ]及中成药中苦玄参苷Ⅰ A含量的测
定 [5～ 8 ] ,对药材质量的研究较少。本实验采用高效液
相色谱 ( HPLC)法对广西梧州大坡苦玄参种植基地
和广西龙州县种植的苦玄参药材茎和叶中苦玄参苷
Ⅰ A的含量进行研究 ,寻找一个简便、快速、重复性
好的苦玄参苷Ⅰ A含量测定方法。
1　实验部分
1. 1　仪器与试药
　　 Agilent HP1100高效液相色谱仪 , (配置有
G1315B 紫外 检 测器 , G1311A四 元梯 度 泵 ,
G1322A脱气机 ) (美国 Agilent公司 )。
　　苦玄参分别采于广西梧州大坡苦玄参种植基地
和广西龙州县 ,经广西中医学院药学院刘寿养副教
授鉴定为玄参科植物苦玄参 ( Picria f el-terrae
Lour. )干燥的全草 ,分别取茎、叶两部分粉碎 ,过
100目筛备用。苦玄参苷Ⅰ A对照品由广西植物研
究所提供 ,并经鉴定为单体纯品。
　　甲醇为优级纯 ,中国医药集团上海化学试剂公
司出品 ;乙腈为色谱纯 ,天津市四友生物医学技术有
限公司出品 ;其余实验试剂均为分析纯 ;水为超纯
水 ,经过 0. 45μm微孔滤膜滤过后使用。
1. 2　色谱条件
　　 Agilent ZO RBAX Eclipse XDB C8色谱柱 ( 4. 6×
150mm , 5μm);流动相: 乙腈 -0. 5%醋酸 ( 32∶ 68) ;
检测波长 264nm;流速 1ml· min- 1。
1. 3　对照品溶液制备
　　精密称取苦玄参苷Ⅰ A 57. 0mg置 50m l容量
瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀得浓度为
1. 14mg /ml的对照品溶液。对照品的色谱图见图 1。
1. 4　供试品溶液制备
　　采用正交试验所得最佳方法进行提取。精密称
取约 1g苦玄参药材粉末于 100ml锥形瓶中 ,加入
45ml 75%甲醇浸泡 10min,超声 20min,滤过 ,以少
量 75%甲醇洗涤药渣 ,合并滤液定容至 50ml容量
瓶 ,备用。 取该样品溶液 1ml于微型离心管 ,以
10000r /min速度离心 10min,取上清液 10μl,进行
HPLC分析。 供试品的色谱图见图 2。
1. 5　线性关系考察
　　精密吸取上述苦玄参苷Ⅰ A对照品溶液 2ml、
4ml、 6m l、 8ml、 10ml于 10ml量瓶中 ,用甲醇溶解并
稀释至刻度 ,摇匀。分别吸取 10μl进样测定。以峰面
积为纵坐标 ,苦玄参苷Ⅰ A含量为横坐标进行线性
回归 ,得到方程 Y = 612. 872647X - 17. 655185, r
图 1　空白溶剂的 HPLC色谱图
图 2　苦玄参苷Ⅰ A的 HPLC色谱图
= 0. 9995,线性范围为 2. 28～ 11. 4μg。
1. 6　精密度试验
　　取同一供试品溶液 ,连续进样 5次 ,计算得到苦
玄参苷Ⅰ A峰面积的 RSD = 1. 45%。
1. 7　稳定性试验
　　取同一份供试品溶液 ,于配制后 0h、 1h、 2h、 4h、
6h、 12h依法测定苦玄参苷Ⅰ A峰面积。 RSD =
1. 8% ,说明样品溶液在 12h内稳定。
1. 8　回收率试验
　　精密称取已测得苦玄参苷Ⅰ A含量的样品适
量 ,共 5份 ,分别精密加入苦玄参苷Ⅰ A对照品溶液
( 1. 14mg /ml) 3ml,混匀 ,蒸干 ,按样品溶液制备方法
制备待测溶液 ,按上述色谱条件测定 ,得平均加样回
收率为 101. 1% (n = 5) , RSD为 2. 4% 。详见表 1。
表 1　加样回收率 (n= 5)
编号 样品原含量 ( mg) 加入量( mg) 加样后测定值 ( mg) 回收率(% ) 平均回收率 (% ) RSD(% )
1 3. 822 3. 42 7. 25 100. 1 101. 1 2. 4
2 3. 802 3. 42 7. 25 100. 4
3 3. 759 3. 42 7. 04 98. 20
4 3. 791 3. 42 7. 54 104. 6
5 3. 893 3. 42 7. 49 102. 4
2　样品测定
　　分别精密称取梧州苦玄参茎 ( 1)、叶 ( 2) ,龙州苦
玄参茎 ( 3)、叶 ( 4)粉末约 1g ,按上述方法制备成样
品溶液 ,样品的色谱图见图 3,进样测定的结果见表
2。
404 广西科学院学报　第 22卷 增刊　 2006年 11月
　　图 3　苦玄参叶提取液的 HPLC色谱图
表 2　苦玄参苷Ⅰ A含量测定结果 (n= 3)
样品 试验号
峰面积
1 2 3 平均
含量
( mg /
100mg)
R SD
(% )
梧州 茎 1 112. 246 109. 404 106. 292 109. 314 0. 1036 2. 7
叶 2 381. 372 360. 768 364. 142 368. 761 0. 3123 3. 0
龙州 茎 3 116. 642 118. 716 120. 198 120. 519 0. 1111 1. 5
叶 4 700. 352 690. 866 702. 388 697. 869 0. 5837 0. 9
　　表 2结果显示 ,两产地样品中苦玄参苷Ⅰ A含
量均较高 ,龙州县所产苦玄参中苦玄参苷Ⅰ A含量
高于梧州苦玄参中的苦玄参苷Ⅰ A含量。
3　结束语
　　本实验以超声方法提取中药材苦玄参中有效成
分苦玄参苷Ⅰ A,得到含量高 ,样品含量在 16h内稳
定 ,采用 HPLC法作为苦玄参苷Ⅰ A的含量测定方
法的实验结果表明 ,本方法简便、快速、可靠。
　　两种不同产地的样品含量测定显示 ,龙州县所
产苦玄参中苦玄参苷Ⅰ A含量较高 ,但由于两地苦
玄参采收季节不完全相同 ,梧州稍微早于龙州 , (梧
州采收为春天 ,而龙州采收为夏秋成熟季节 ) ,这也
可能是影响其含量的一个因素。今后还需要进一步
对相同产地不同时间采收的苦玄参进行含量测定 ,
以寻求最佳采收时间 ,得到有效成分含量更高的苦
玄参药材。
参考文献:
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[ 7]　陈勇 ,甄汉深 ,黄蘅 .炎肿化毒片的薄层鉴别及苦玄参
苷Ⅰ A的含量测定 [ J].中成药 , 1997, 19( 5): 14.
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参苷Ⅰ A的含量测定 [ J].中成药 , 1997, 19( 12): 12.
　　　 　　　 　　　
检测和评价体系缺位阻碍发展
　　目前 ,各种材料尤其是新材料 ,尽管测试了一些具体的理化数据 ,但如何将这些分散的测试数据加以汇
总、分析、综合 ,建立材料全面评价体系 ,是目前亟待解决的问题。
　　以绿色环保材料为例 ,随着人们环保意识的增强 ,绿色环保材料近年来得到快速发展 ,应用日益广泛。但
在绿色环保材料生态评价方面 ,仍缺乏标准和统一的测试方法及相应的指标体系。目前我国环保材料方面存
在 3种严重问题。一是 ,标准不适用性 ,即绿色环保材料的性能超出现有标准的适用范围 ,评价的结果存在明
显的偏差 ,无法准确反映绿色环保材料的性能指标 ;二是 ,对于同一性能 ,不同行业根据绿色环保材料的不同
应用 ,参考不同的标准进行评价 ,所获结果无法进行有效比较 ,无法评价和分辨出绿色环保材料的优劣 ;三
是 ,对于绿色环保材料而言 ,相应的评价标准是滞后的 ,而且各个评价和检测机构难以获得一致公认的评价
标准。我国绿色环保材料的研究尚处于初级阶段 ,新的功能材料不断涌现 ,而缺乏科学的材料性能评价体系 ,
不仅造成了行业间以及行业内部的紊乱 ,而且造成了巨大的资源浪费。 我国应该尽快建立评价体系 ,加快分
析测试产业发展。
405甄汉深等:高效液相色谱法测定苦玄参药材中的苦玄参苷Ⅰ A含量