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野甘草和近琴巴豆中的牻牛儿基牻牛儿基二磷酸酯合酶的质体定位及突变



全 文 :太平洋地区的假鹰爪属植物就有 30 个种 ,
其中 D ~ os da 妙加 ac ha lus 为高大乔木
, 传
统医学中其根用 于治疗痢疾 。 本次从该植物
的根中检测到杀锥虫成分 : l 种新的阿朴啡
类生物碱 d a s帅 a e h a li n e 一 a 一N 一 o x id e 和 3 种己
知的化合物 6, 8一二 甲基 一 5一轻基 一 7一甲氧基黄
酮 、 荷 苞 牡 丹 酮 ( id c en mtr o en ) 和
da s y m
a c h a l i n e

该植物的鲜根约 kI g 室温下 甲醇提取 3
次 ( 4 8 h ) , 回收甲醇浓缩至 10 Om L 提取液 ,
用 2 0% 氨溶液碱化至 p H 13 一 14 , 氯仿萃取
3 次 , 每次 15 0m L 。 氯仿提取液洋圈窗, 得棕
色残余物 s o mg 。 该残余物 40 mg 进行硅胶
柱层析 ( 氯仿 一甲醇 , 4 : l) 洗脱得 4 个部
分 : 部分 I 6 8m g 、 部分 11 3 6叱 、 部 分 1 1
一7 2m g 、 部分 VI 3 sm g 。 部分 I 进行硅胶柱层
析 (氯仿 一甲醇 , 4 : l) 得 6, 8一二甲基一 5一轻
基一 7一甲氧基黄酮 ( 38 gm ) , 部分 H和m 进行
硅胶柱层析 ( 乙酸乙酷 一甲酸 , 4 : 1 ) , 得荷
苞牡丹酮 ( sm g ) 、 da s y m a e h a l in e ( 10 2m g )
和 d a s帅 a c c h a lin e 一 a 一N 一 o x id e ( l s m g ) 。
G r 培养基 ( 10 林L ) 中的克鲁氏锥虫在
样 品 的 乙 醇 ( 5林L ) 和 高压 灭 菌的盐 水
( 1 8 5林L ) 溶液中培育 , 2 4h 后显微镜下 ( 1 0 0
倍 ) 观察克鲁氏锥虫的运动能力 。 经检测 ,
上述 4 个化合物对克鲁氏锥虫的最小致死浓
度依次为 : 17 0 、 15 0 、 3 5 、 4 . 2 “ M , 其 中尤
以 das y m a e e h a lin e

a

N

o x id e 的杀虫活性最
强 。
( 张贵峰摘译 巢志茂校 )
S袱州由va 旧m w … / C为a 刀 Ph 劝m a 山勺一 0 1 , 4 9
(2 )
一 1卯~ 202
应 用 同 源 基 础 上 的 聚 合 酶 链 反 应
( P C R ) 法 , 从野甘草 (义op a iar du lc 台 ) 和
近琴巴豆 ( Cm ot n su b妙ar ust ) 中分离出编码
拢牛儿基拢牛儿基二磷酸酷合酶 ( 6 C PP s)
的 c D N A s 。 富含天冬氨酸基元 【D D X X ( X X )
D ] 的克隆品及其 N 一末端残余物均表现叶绿
体导向序列的特征 。 在大肠杆菌中表达时 ,
删去假定导向序列的全长蛋白质和截短蛋白
质均能催化法尼基二磷酸酷和异戊烯基二磷
酸酷缩合产 生优牛儿基拢牛儿基二磷酸酷
( C G P P )
。 在与植物的法尼基二磷酸醋合酶
中第一个富含天冬氨酸基元 ( FA又M ) 序列
比较的基础上 , 构成野甘草 G C P P S 突变体 ,
以其研究决定植物 G G P P S 产物长度的结构
因素 。 结果表明植物中 G G P P S 的小氨基酸
— 甲硫氨酸 ( M et ) 和赖氨酸 ( L y s ) 位于
E A又M 前的第 4 、 5 位和 f A R M 中蛋白质和
半肤氨酸 ( C ys ) 的插入对产物长度起决定
作用 。 将野甘草 G G P P S 基因中的假定转移
肤和绿色荧光蛋白质组成的嵌合基因 , 通过
基因枪轰击 , 引入拟南芥 〔A ar b i d o p s is ) 叶
中 , 嵌合蛋白质被定位在叶绿体中 , 提示克
隆的野甘草 G G P P S 是一种叶绿体蛋白质 。
(龚苏晓摘译 江纪武校 )
2 12 野甘草和近琴巴豆中的拢牛儿基拢牛儿基
二 磷酸醋合酶的质体定位及 突变 〔英 〕 /
2 1 3 北沙参果实的水溶成分 〔英 〕 / sI h议 a w a
T … / C h e m P h a n n B u l l一2 0 0 1 , 4 9 ( 5 ) 一5 8 4 ~
5 8 8
曾报道从北沙参 ( 6 2` hn l’a l it t o ar ils ) 根
茎中分离出 12 种香豆素昔和 7 种单菇昔类 。
本次对其果实中的水溶成分进行了分离和结