全 文 ：为6.3 ,水杨酸峰及苯酚的保留时间分别为 3.98 、
5.98 min 。
1.2.4　线性关系的考察　精密量取水杨酸及苯酚
对照品溶液各 1 、2 、3 、4 、5 、6 ml置 50 ml量瓶中 ,加
流动相定容 ,取 20 μl进样 。以峰面积为纵坐标 、浓
度为横坐标进行回归 ,结果水杨酸及苯酚的直线方
程分别为:Y水杨酸=1.0484X +0.9702(r =0.9990)及
Y苯酚=1.9164X +1.327(r =0.9991)。水杨酸在
0.01 ～ 0.06 mg·ml-1 ,苯酚在0.004 ～ 0.024 mg·ml-1
浓度范围内的线性关系良好。
1.2.5　仪器精密度试验　取对照品溶液 ,用流动相
稀释 , 使水杨酸与苯酚的含量分别为 50 、20 μg·
ml-1 ,进样 20 μl ,重复 6次 ,水杨酸与苯酚峰面积的
RSD 分别为 0.72 %、0.67%,表明仪器精密度良好。
1.2.6　加样回收率试验　精取已知水杨酸与苯酚
含量的供试品 9 g ,共 9份 ,3份为一组 ,每组分别精
密加入水杨酸与苯酚的对照品适量 ,使每组水杨酸
的含量分别为 60 、24 、50 mg·g-1;苯酚的含量分别为
20 、40 、16 mg·g-1。按“1.2.2”项方法制备供试液 ,并
测定含量计算。3个浓度组水杨酸的平均回收率分
别为99.41%(RSD =1.0 %)、98.54 %(RSD =1.2 %)
和98.81 %(RSD=0.93 %);苯酚的平均回收率分别
为98.31 %(RSD=1.3 %)、98.68 %(RSD=0.48 %)
和 99.61 %(RSD=0.85 %)。
1.2.7　样品的测定及分析方法精密度　取 3批样
品 ,按“1.2.2”项下方法 ,测定结果见表 1。
表 1　样品测定结果(n=5)
Table 1　Determination results of samples(n=5)
Batch No. Labeled amount/ %
salicylic acid(X) phenol(X)
040210-1 101.3 100.9
040210-2 99.25 98.32
040210-3 98.93 99.12
2　讨论
被测物的保留时间随流动相酸性增强而延长 ,
其中水杨酸变化较大 ,苯酚变化较小 ,这是由于离子
抑制产生的效果。
萃取液的 pH 对回收率的影响很大 ,回收率随
pH 升高而增大 ,但当 pH 升高至 14时 ,萃取液呈轻
微混浊 ,有轻微乳化现象 ,而萃取液 pH 为 13时 ,萃
取液澄清 ,测得的回收率完全满足要求。
参考文献:
[ 1] 　 中华人民共和国卫生部药政局.中国医院制剂规范[ S] .第 2
版.北京:中国医药科技出版社 , 1995.86
收稿日期:2004-07
作者简介:苏健 ,男 ,云南 ,硕士 ,从事中药检验及中药 、民族药质量标准的研究
HPLC测定滇黄芩中黄芩苷的含量
苏　健 ,向　东 ,张斌贝华 ,张雯洁
(云南省药品检验所 , 云南 昆明 650011)
摘要:目的　建立高效液相色谱法测定滇黄芩药材中黄芩苷的含量。方法　色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150
mm , 5μm), 甲醇-0.2%磷酸(45∶55)为流动相 , 柱温 25℃, 流速 1 ml·min-1 , 紫外检测波长 280 nm。结果　线性范围 0.2336 ～
1.1680 μg(r=0.9999),平均回收率为99.13%, RSD=1.13%(n=9)。结论　所用方法简便 、准确 、重复性好 ,可作为滇黄芩药
材质量控制的有效方法。
关键词:高效液相色谱法;滇黄芩;黄芩苷
中图分类号:R927.2　 文献标识码:A 　 文章编号:1006-0103(2005)04-0356-03
Determination of baicalin content in Scutellaria amoena C.H.Wright by HPLC
SU Jian , XIANG Dong , ZHANG Yun-hua , ZHANG Wen-jie
(Yunnan Institute for Drug Control , Kunming 650011 , China)
Abstract:OBJECTIVE　To determine baicalin content in Scutellaria amoena C.H.Wright.METHODS　An HPLC method was adopted.
The separation was performed on Zorbax SB-C18 column(4.6 mm×150 mm , 5μm)with a mobile phase of methanol-0.2% phosphoric acid
(45∶55).The flow rate was 1.0 ml·min-1 and the detective wavelength was 280 nm.RESULTS　The linearity of the method was well within
the range of 0.2336 to 1.1680 μg , and the average recovery of baicalin was 99.13%with RSD of 1.13%(n=9).CONCLUSION　The
method is simple , accurate and reliable.It can be used for quality control of Scutellaria amoena C.H.Wright.
Key words:HPLC;Scutellaria amoena C.H.Wright;Baicalin
CLC number:R927.2 Document code:A Article ID:1006-0103(2005)04-0356-03
华西药学杂志
W C J · P S 　2005 , 20(4):356～ 358　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2005.04.033
　　黄芩是常用中药 ,始载于《神农本草经》 ,列为中
品。正品黄芩为唇形科(Labiatae)黄芩属植物贝加
尔黄芩(Scutellaria baicalensis Geoergi)的干燥根[ 1] ,亦
被中国 、日本 、朝鲜国药典所收载 。除正品黄芩外 ,
各地习惯用品种和代用品种较为复杂 ,均为黄芩属
植物 ,如滇黄芩(S .amoena)、粘毛黄芩(S.viscidu-
la)、甘肃黄芩(S.rehderiana)、薄叶黄芩(S.ikon-
nikovii)和韧黄芩(S.Tenax)等。其中滇黄芩(Scutel-
laria amoena C.H.Wright)是西南地区药用黄芩的主
流品种 ,现收载于《云南省药品标准》[ 2] ,分布于云南
南部 、西北部 、中部 、北部山区 、贵州等省 ,资源丰富 。
最早记载于《滇南本草》 ,称其“味苦 ,性寒。上行泻
肺火 ,下降泻膀胱火 ,归肺 、胆 、脾 、大肠 、小肠经 ,有
清热燥湿 、泻火解毒 、止血 、安胎等功效” 。
关于黄芩及其复方制剂的质量分析大都采用高
效液相色谱法 、薄层扫描法和紫外分光光度法[ 3～ 7] ,
但对于滇黄芩的含量测定研究尚无报道 。为此 ,采
用高效液相色谱法测定了滇黄芩药材中黄芩苷的含
量 ,方法简便 、准确 、重复性好 、精密度高 ,可作为滇
黄芩药材质量控制的有效方法 。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
Agilent 1100型高液相色谱仪(美国惠普);Shi-
madzu Libror AEG -45SM 型百万分之一分析天平和
Mettler AE240 型十万分之一分析天平;Branson
B3200S超声清洗器(上海必能信超声有限公司)。
黄芩苷(中国药品生物制品检定所 , 批号:715 -
200111 ,含量测定用);甲醇为色谱纯;水为重蒸水;
其余试剂为分析纯。
1.2　方法与结果
1.2.1　色谱条件　Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6
mm×150 mm ,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液
(45∶55);柱温 25℃;流速 1 ml·min-1;检测波长 280
nm;对照品溶液和供试品溶液各进样 5μl;理论板数
以黄芩苷峰计算应不低于 5×103;色谱图见图 1。
t/min
图 1　对照品(A)和样品(B)的 HPLC色谱图
Fig 1　HPLC chromatograms of chemical reference substance(A)and
sample(B)
1.2.2　检测波长的选择　黄芩苷对照品用流动相
制备溶液 ,在 200 ～ 500 nm 范围内扫描 ,在 280 nm处
有最大吸收 ,故以此波长进行含量测定。
1.2.3　溶液的制备　取滇黄芩药材粉末约 0.15 g ,
精密称定 ,置 250 ml具塞瓶中 ,精密加入甲醇 100
ml ,称定重量 。超声处理 20 min ,再冷浸 12 h后 ,用
甲醇补足减失重量 ,滤过 ,弃去初滤液 ,取续滤液用
0.45μm 的微孔滤膜过滤 ,滤液作为供试品溶液。
精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的黄芩
苷对照品 2.92 mg ,置 25 ml量瓶中 ,加甲醇溶解并
稀释至刻度 ,摇匀 ,即得黄芩苷 0.1168 mg·ml-1的对
照品溶液。
1.2.4　线性关系考察　分别精密量取对照品溶液
1 、2 、4 、6 、8 、10 、12 μl ,按“1.2.1”项的色谱条件测定 ,
以峰面积和进样量进行线性回归 ,以进样量(μl)为
横坐标 ,对照品峰面积积分值为纵坐标 ,绘制标准曲
线 ,黄芩苷的回归方程为:Y =461.13X +35.08(r =
0.9999)。黄芩苷进样量在 0.2336 ～ 1.1680 μg(n=
5)范围内与峰面积有良好的线性关系。
1.2.5 　精密度试验 　精密吸取对照品溶液 , 按
“1.2.1”项的色谱条件 ,连续进样 9次 ,根据测得的
峰面积积分值计算 , RSD =0.53%(n =9)。结果表
明精密度良好。
1.2.6　稳定性试验　取滇黄芩药材粉末 0.15 g ,按
“1.2.3”项下制备供试品溶液 ,按“1.2.1”项色谱条
件 ,测定 8次 ,每次间隔 4 h ,根据测得峰面积积分值
计算 , RSD=0.12%(n =8)。结果表明供试品溶液
在 28 h内稳定性良好。
1.2.7　重复性试验　按“1.2.3”项下的方法平行处理
同一批供试品8份 ,按“1.2.1”项色谱条件 ,外标法测
定黄芩苷的含量 ,样品中黄芩苷含量的 RSD=2.19%
(n=8)。证明方法重复性良好 。
1.2.8　加样回收试验　取已知含量的同一批供试
品 9份 ,每份 0.1 g ,精密称定 ,分别加入黄芩苷对照
品适量 ,按“1.2.3”项下方法制备 、测定 ,计算 。结果
平均回收率为99.13%, RSD=1.13%(n=9)。
1.2.9　样品的测定　对云南省大理 、楚雄 、丽江 、文
山 、禄劝 、富民产的 12批药材 ,按“1.2.3”项下方法
制备供试品溶液 ,照“1.2.1”项的色谱条件测定 ,计
算各供试品中黄芩苷的含量。结果分别为 5.99%,
9.32%, 8.57%, 8.38%, 7.05%, 5.17%, 5.95%,
6.78%,7.83%,5.69%,8.34%,5.59%。
2　讨论
滇黄芩中以黄芩苷及其苷元黄芩素的含量为
高 ,还含有丰富的黄酮类化合物 ,因此 ,极性较大。
357第 4期 苏　健 , 等。HPLC 测定滇黄芩中黄芩苷的含量 　　　
曾对几种不同流动相进行考察 ,发现以甲醇-水为
流动相 ,黄芩苷保留时间短 ,不能和其他物质很好地
分离。在水中加入少量磷酸后 ,各成分能较好地分
离 ,色谱峰对称性好 ,分离度高 ,理论板数也较高 。
所以采用甲醇-0.2%磷酸溶液(45∶55)作为流动
相。
以甲醇作为提取溶剂 ,考察了超声 、回流 、索氏
和冷浸 4种方式 ,结果黄芩苷含量分别为 5.97%、
5.66%、5.70%、5.43%。超声提取操作简单 , 故选
用超声提取方式 。
曾选用甲醇 、水以及 70%乙醇为提取溶剂 ,超
声提取 20 min ,结果黄芩苷含量分别为 5.52%、
5.16%、5.38%。用甲醇提取所得色谱峰数目最多 、
峰强度也最大 ,故选用甲醇作为提取溶剂。
以甲醇为溶剂 , 分别超声提取 10 、20 、30 、40
min ,以及超声处理 20 min并静置 12 h。结果表明 ,
随超声提取时间的增加 ,黄芩苷的含量不断增加 ,超
声处理20 min后再冷浸12 h ,所测黄芩苷含量最高 。
因此 ,采用超声 20 min并静置 12 h的提取方法 。
文中方法样品处理简单 ,色谱峰之间有较好的
分离度 ,结果准确可靠 。可作为滇黄芩药材质量控
制的有效方法。
参考文献:
[ 1] 　 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典[ S] .一部.北京:
化学工业出版社 , 2000.248
[ 2] 　云南省卫生厅.云南省药品标准[ S] .1996.96
[ 3] 　毛素芳 ,龚莉 ,晁若冰.HPLC测定天麻钩藤颗粒中黄芩苷的含
量[ J] .华西药学杂志 , 2003 , 18(2):127
[ 4] 　 何道惠 ,吴懋芳.HPLC 测定小柴胡胶囊中黄芩苷的含量[ J] .
华西药学杂志 , 2001, 16(4):380
[ 5] 　周晓英.HPLC测定小儿咳嗽宁糖浆中牛蒡子苷和黄芩苷的含
量[ J] .华西药学杂志 , 2001 , 16(4):303
[ 6] 　 曾立威 ,甄汉深.TLCS测定普济解毒片中盐酸小檗碱和黄芩
苷的含量[ J] .华西药学杂志 , 1999 , 14(3):189
[ 7] 　 黄启华.紫外分光光度法测定双黄连注射液中黄芩苷的含量
[ J] .中成药 , 2000, 22(12):836
收稿日期:2004-12
作者简介:庄晓洪 ,男 ,工程师 ,从事药物分析工作。
HPLC测定秦皮胶囊的主要成分
庄晓洪 ,凌学青
(成都市药品检验所 , 四川 成都 610021)
摘要:目的　建立同时测定秦皮胶囊中秦皮甲素 、秦皮苷 、秦皮乙素和秦皮亭含量的方法。方法　采用 HPLC 法 , 样品经甲醇
溶解 ,超声处理后 , 采用Shimpack CLC-ODS(6.0 mm ×150 mm , 5 μm)色谱柱 ,溶剂 A [ 甲醇-乙腈(2∶1)] -溶剂 B [ 0.1%三
乙胺溶液(磷酸调 pH 3.0)] (23∶77)为流动相 , 流速 1.0 ml·min-1 ,检测波长 348 nm , 柱温 30℃。结果　秦皮甲素在 0.145 ～
0.726μg、秦皮苷在0.112 ～ 0.560μg、秦皮乙素在0.082 ～ 0.412μg、秦皮亭在 0.110 ～ 0.552μg范围内均呈良好的线性关系 ,
秦皮甲素 、秦皮苷 、秦皮乙素和秦皮亭的加样回收率分为 99.77%(RSD =0.48%)、99.67%(RSD=0.75%)、98.80 %(RSD =
1.02%)、98.83 %(RSD=1.10%), n=9。结论　所用方法操作简便 、重复性好 , 结果准确可靠 ,可满足其质量控制要求。
关键词:高效液相色谱法;秦皮胶囊;秦皮甲素;秦皮苷;秦皮乙素;秦皮亭
中图分类号:R917　 文献标识码:A 　 文章编号:1006-0103(2005)04-0358-03
Determination of four constituents in Cortex Fraxini capsule by HPLC
ZHUANG Xiao-hong ,LING Xue-qing
(Chengdu Institute for Drug Control , Chengdu 610027 , China )
Abstract:OBJECTIVE　To establish a method for simultaneous determination of aesculin , fratin , aesculetin and fraxetin in Cortex Fraxini
capsule.METHODS　Samples were dissolved in methanol with ultrasonic process.The HPLC sy stem consisted of Shimpack CLC-ODS col-
umn(6.0 mm×150 mm , 5 μm).Solution A[ methanol-acetonitrile(2∶1)] -Solution B(0.1%triethylamine with phosphoric acid adjust to
pH 3.0)(23∶77)as mobile phase , flow rate of 1.0 ml·min-1 and column tempreture of 30℃.The eluate was detected at 348 nm.RESULTS
　The separation and determination of four constituents could be accomplished simultaneously.The calibration curves were linear within the
range of 0.145-0.726μg for aesculin , 0.112-0.560 μg for fratin , 0.082-0.41μg for aesculetin and 0.110-0.552 μg for fraxetin.The
average recoveries of aesculin , fratin , aesculetin and fraxetin were 99.86% with RSD of 0.34%, 99.69%with RSD of 0.61%, 98.95%
RSD of 1.43%, 98.82%with RSD of 1.18%(n =9), respectively.CONCLUSION　The established method can be used for quality con-
trol of Cortex fraxini capsule.It is simlpe , rapid and accurate for simultaneous determination of four constituents in Cortex fraxini capsule.
Key words:HPLC;Cortex Fraxini capsule;Aesculin;Fratin;Aesculetin;Fraxetin
华西药学杂志
W C J · P S 　2005 , 20(4):358～ 360