全 文 ：改为朱砂(水飞) ，这就意味着处方是使用水飞过的朱砂，不
论是用量还是有毒成分都可以得到控制，既避免了同一处方
不同企业生产带来的差异，也有利于提高磁朱丸的质量。
2 临床使用过程中的辨证使用
临床上心神不安、心悸、失眠多梦、癫痫等病常用安神药，
安神药分为重镇安神和滋养安神两类。磁朱丸属安神药中的
重镇安神药。方中磁石辛寒入肾，益阴潜阳，重镇安神;朱砂
甘寒入心，清心降火，重镇安神;两药相伍，益阴潜阳，镇心，安
神，明目。用于心肾阴虚，心阳偏亢，心悸失眠，耳鸣耳聋，视
物昏花。临床使用磁朱丸要辨清症状，如心神不安者有心肝
阳亢，火热扰心，耳鸣耳聋症状时，多属实证，就可用磁朱丸;
如心神不安因阴血不足，心神失养所致，多属虚证，就不能用
磁朱丸，要用滋养安神药。
3 与碘化物，溴化物的配伍禁忌
临床上失眠患者，神经衰弱及一部分单纯性甲状腺肿会
存在使用碘化物，溴化物治疗，磁朱丸不宜与碘化物、溴化物
配伍同用。因两者同时服用磁朱丸中含的朱砂可在肠道内与
碘化物、溴化物生成碘化汞或溴化汞，毒性大大增强，可导致
药物性肠炎。因此，患者服用磁朱丸时，禁止配伍服用三溴合
剂之类含溴化物的西药。另外服用磁朱丸的患者饮食要注
意，不得食用海带及其制品，因其含较多的碘。
4 用药时间及特殊用药人禁忌
经过长期临床观察，磁朱丸如对症下药，疗效很快，但此
药性寒，长期使用会对消化道功能产生一定的影响，而且方中
含矿石类药材，易导致体内重金属超标，故不宜长期使用。建
议使用该药一疗程后就要停药，肝肾功能不全者及儿童、孕妇
不要用。
5 与鞣质，酶类的配伍禁忌
经临床观察，磁朱丸中含磁石，磁石主要含四氧化三铁，
可与鞣质生成难溶性的物质，疗效下降，且酶分子结构中的巯
基与朱砂有特殊的亲和力，使酶活性受到抑制，临床应禁止与
含鞣质药物(如大黄、五倍子、地榆、茵陈蒿汤、如意金黄散
等)及酶类药物同用
6 与抗生素的配伍禁忌
经临床观察，磁朱丸与氯霉素及四环素族抗生素不得合
用，因氯霉素及四环素族抗生素会和磁石反应、降低疗效。
7 结论
综上所述，对磁朱丸质量控制及临床使用进行了相关研
究，为磁朱丸临床安全合理用药提供参考。对磁朱丸 处方，
工艺，质量控制及说明书中未标明而临床配伍用药中出现的
有关配伍及适应症进行讨论，并提出建议。从而达到磁朱丸
的安全控制及合理应用。
参考文献
〔1〕魏少阳，朱胤龙，粱馨月，力荔，陈萍 . 朱砂在不同消化液中溶出
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·实验研究·
棘托竹荪锰过氧化酶酶学特性及其分布特征研究
黄志鸿1，檀东飞2* (1. 福建医科大学基础医学院 福州 350108;2. 福建师范大学生命科学学院 福州 350117)
摘要:以愈创木酚为底物，采用分光光度法，对棘托竹荪锰过氧化物酶酶学特性及不同生长期不同组织中锰过氧化物酶的分布进行研究。结果
表明:棘托竹荪锰过氧化酶最适反应 pH为 4. 5，最适反应温度为 50℃ ;棘托竹荪菌盖中锰过氧化物酶含量最高，菌托中最低;棘托竹荪菌盖锰过
氧化物酶提取液的最适 pH为 6. 0。
关键词:棘托竹荪;锰过氧化物酶;酶学特性;分布
中图分类号:Q554. 6 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2013)-08-0176-05
作者简介:黄志鸿，男(1985 －)。职称:助理实验师，主要从事生物化学与分子生物学研究。联系电话:13605944175，E-mail:hzh8512@ 163. com
通讯作者:檀东飞，女。E-mail:dftan@ fjnu． edu． cn
基金项目:福建省自然科学基金计划项目(X0650045)
The studies of the enzymatic properties of manganese peroxidase from
Dictyophora echinovolvata and Its distribution
·671·
海峡药学 2013 年 第 25 卷 第 8 期
HUANG Zhi-hong1，TAN Dong-fei2* (1. School of basic medical sciences，Fujian medical University Fuzhou
350108，China;2. College of Life Sciences，Fujian Normal University，Fuzhou 350117，China)
ABSTＲACT:The enzymatic properties of manganese peroxidase(MnP)from Dictyophora echinovolvat and its distri-
bution of different parts at different growth periods were studied by using guaiacol as the substrate and the spectropho-
tometry as method. The results showed that the optimum pH for D. echinovolvata MnP activity was 4. 5，and the opti-
mum temperature was 50℃. The part that owned the highest amount of MnP was the pileus of D. echinovolvata，and
the lowest was the volva. The optimum pH for the extraction of MnP from the pileus of D. echinovolvata was 6. 0.
KEY WOＲDS:Dictyophora echinovolvata;Manganese peroxidase;Enzymatic properties;Distribution
棘托竹荪(Dictyophora echinovolvata Zang，Zheng et Hu)是
一种名贵的食用真菌，隶属于真菌门、担子菌亚门、腹菌纲、鬼
笔目、鬼笔科、竹荪属〔1〕，是我国科技工作者于湖南省会同县
进行野外调查时首次发现的新种，于 1988 年正式定名〔2〕。
竹荪属高等真菌，喜生长于半腐基质中。树木的枯枝落
叶或遭砍伐后的残留物经微生物分解后，剩余难以分解的木
质素和纤维素等残余物，可被一些高等真菌所利用，竹荪就是
其中的一种。竹荪能分解林下残落物中的木质素和纤维素，
而棘托竹荪是竹荪中分解能力最强的一种，对不易腐朽的针
叶树凋落物也能有效进行分解〔3〕，野外调查中，可在半腐的
松杉凋落物上发现棘托竹荪。棘托竹荪主要分布于竹林、针
阔混交林下、缓坡的疏残林、竹木加工厂废墟等地方，其子实
体能直接生长于腐朽的竹木屑、树皮及草本植物的半分解的
残体上〔4〕，有很强的分解木质素的能力。木质素主要存在于
细胞壁中，占细胞化学成分的 15% ～ 30%，由于其疏水性及
复杂的立方体结构，不像其它绝大多数聚合体可被水解酶所
水解，在自然条件下木质素的降解率很低，属较难生物降解的
物质〔5〕，只有少数可通过自身产生木质素分解酶类的物种，
可对木质素进行分解。研究发现，迄今已知所有可降解木质
素真菌的胞外酶液中均可检出锰过氧化物酶(Manganese per-
oxidase，MnP) ，由此可知锰过氧化物酶对木质素的降解起着
关键性作用〔6〕。研究表明，棘托竹荪有强于其它品种竹荪的
木质素降解能力〔7〕，本文以棘托竹荪为研究材料，探讨其不
同生长阶段棘托竹荪不同部位锰过氧化物酶含量，并对其部
分酶学特性进行研究，旨在对棘托竹荪降解木质素进行研究
及对其进行利用提供参考。
1 材料与方法
1. 1 材料、试剂及仪器
1. 1. 1 材料:新鲜棘托竹荪 购于福建省古田县，品种为棘
托-89 。
1. 1. 2 主要试剂:愈创木酚(C7H8O2) ，过氧化氢(H2O2) ，硫
酸锰(MnSO4) ，Tris-HCl，乳酸-乳酸钠，邻苯二甲酸氢钾标准
液(pH 4. 01)、四硼酸钠标准液(pH 9. 18) (以上均为 A. Ｒ 试
剂;所用缓冲液均参照标准 pH 配置表进行配置，并用精准
pH计校准。)
1. 1. 3 主要仪器:CＲ22GⅡ高速冷冻离心机(日本，日立)、
HANNA pH211 酸度计(北京哈纳科仪科技有限公司)、AL-
204 电子分析天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)、
752 N-紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)。
1. 2 方法
1. 2. 1 不同生长期菌柄、菌托、菌盖的分离及保存:铺一层润
湿的毛巾，放上棘托竹荪菌球后适量撒水，盖上防水油纸，保
证菌球的生长温度和湿度。棘托竹荪只需几小时便可破球抽
柄，出现白色子实体，此时应及时采收并冷冻保存，以保证酶
的活性。将棘托竹荪各部位按其不同生长期进行分类:第一
期:菌球未打开，用刀片将其切开，对菌柄、菌托、菌盖逐部进
行分离，标记后放入冰箱冷冻保存。该生长期的菌柄、菌托、
菌盖标注为菌柄 1、菌托 1、菌盖 1。第二期:菌球已打开，但开
伞不完全，仍需用刀片将其切开，对其各个部位进行分离标记
后放入冰箱冷冻保存。该生长期的菌柄、菌托、菌盖标注为菌
柄 2、菌托 2、菌盖 2。第三期:菌球完全打开，撒下白色网状菌
裙，呈现完整子实体，菌托及菌盖分居子实体的上下两侧，对
各部分进行分离标记后放入冰箱冷冻保存。该生长期的菌
柄、菌托、菌盖标注为菌柄 3、菌托 3、菌盖 3。第四期:菌球完
全开伞后继续在相同的培养条件下放置过夜，菌体没有褐变，
对各部分进行分离标记后放入冰箱冷冻保存。该生长期的菌
柄、菌托、菌盖标注为菌柄 4、菌托 4、菌盖 4。
由于菌盖外表面的粘稠物可能为含有酶物质，因此取不
同生长时期菌盖上的粘稠物冷冻保存，标注为分泌物 1，分泌
物 2，分泌物 3，分泌物 4。
1. 2. 2 锰过氧化物酶(MnP)粗酶液的制备:取等量不同生长
期的菌柄、菌托、菌盖、分泌物置于研钵中，加适量石英砂及少
量预冷的蒸馏水，冰浴研磨匀浆，匀浆于 18000r·min －1、4℃，
离心 15min，取上清液，即为粗酶液，定容至相同体积，置于 －
18℃冰箱中保存备用。
1. 2. 3 锰过氧化物酶活性的测定:取 40mmol·L －1 MnSO4
19μL，10mmol·L －1 C7H8O2 0. 3mL，酶液 0. 5mL，0. 1mol·L
－1
乳酸-乳酸钠缓冲液(pH 4. 5)2. 2mL，室温下加入 40mmol·
L －1 H2O2 溶液 19μL启动反应后立即测定 465nm波长下的吸
光值 OD465，从 0min开始，测反应最初 5min内的吸光值变化，
每隔 1min记录一次数据，以缓冲液代替 MnSO4 做空白对照，
每个实验管均设置一个重复。定义吸光值每分钟增加 0. 001
为一个酶活力单位(U)〔7，8〕。
1. 2. 4 酶反应进程曲线测定:取 40mmol·L －1 MnSO4 19μL，
10mmol·L －1 C7H8O2 0. 3mL，酶液 0. 5mL，0. 1mol·L
－1乳酸-
乳酸钠缓冲液(pH 4. 5)2. 2mL，室温下加入 40mmol·L －1
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 8 2013
H2O2 19μL 启动反应后立即测定 465nm 波长下的吸光值
OD465，连续测 10min，每隔 1min 记录一次数据。相同条件下
以缓冲液代替 MnSO4 做空白对照，每个实验管均设置一个重
复。以反应时间为横坐标，酶反应后产物的吸光值为纵坐标
作反应进程曲线。以反应进程曲线最高点对应的时间作为后
续实验的反应时间。
1. 2. 5 锰过氧化物酶最适反应 pH 的测定:根据 1. 2. 3 的酶
活测定方法，分别于 pH 3. 0、3. 5、4. 0、4. 5、5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、
7. 0、7. 5 的缓冲液中，加入酶液、底物及 MnSO4，以 H2O2 启动
反应 5min后立即测定 OD465。以 pH 为横坐标，产物的 OD465
为纵坐标作图，OD465最高处所对应的 pH 即为酶的最适反应
pH。
1. 2. 6 锰过氧化物酶最适反应温度的测定:根据 1. 2. 3 的酶
活测定方法，采用 1. 2. 5 测定所得的最适反应 pH，配置反应
体系，分别将酶液置 30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、
65℃、70℃水浴锅中保温到酶液温度与水浴锅水温一致，将酶
液加入反应体系进行反应，测定 OD465。以温度为横坐标，产
物的 OD465为纵坐标作图，OD465最高处所对应的温度即为酶
的最适反应温度。
1. 2. 7 各个部位不同时期锰过氧化物酶含量的测定:按
1. 2. 2 步骤制备不同生长时期各个部位的锰过氧化物酶粗酶
液，在 1. 2. 5 及 1. 2. 6 测得的最适反应条件下，根据 1. 2. 3 的
酶活测定方法，记录反应 5min 吸光值的变化量 OD465，OD465
的大小即反映锰过氧化物酶含量的高低。
1. 2. 8 锰过氧化物酶最适提取液 pH 的测定:取酶含量最高
部位用 pH = 4. 0、4. 5、5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、7. 0、7. 5、8. 0 的缓冲
液分别对酶进行提取，以最适反应 pH 中，根据 1. 2. 3 的酶活
测定方法，测定反应 5min后吸光度的变化量 OD465，变化量最
大的提取液 pH即为该酶的最适提取 pH。
2 结果与分析
2. 1 锰过氧化物酶反应进程 酶促反应时间与产物生成量
在前 1min内基本呈直线关系，之后趋势渐缓，至 5min时反应
达到顶峰，5min后曲线趋于平坦，因此选择 5min 作为后续实
验的反应时间(见图 1)。
图 1 锰过氧化物酶反应进程曲线
2. 2 pH对锰过氧化物酶活性的影响 锰过氧化物酶对 pH
的变化较敏感。当 pH 从 4. 0 上升至 4. 5 时，酶活性迅速上
升，而当 pH大于 5. 0 时，酶活性则急剧下降。在 pH 4. 0 ～
5. 0 范围内，酶活性相对较高，当 pH 为 4. 5 时，酶活性最高
(见图 2)。
图 2 pH对锰过氧化物酶活性的影响
2. 3 温度对锰过氧化物酶活性的影响 从 35℃开始，锰过
氧化物酶的活性随着温度的升高而升高，在 50℃时达到最高
点，50 ～ 55℃急剧下降，温度继续升高，酶的活性也随之呈下
降趋势，可见是 35 ～ 55℃的温度范围内，锰过氧化物酶具有
较强的活性，其最适温度为 50℃(见图 3)。
图 3 温度对锰过氧化物酶活性的影响
2. 4 不同生长期棘托竹荪各个部位锰过氧化物酶含量测定
2. 4. 1 不同生长期菌盖中锰过氧化物酶含量:菌盖中第三生
长期的酶含量最高，其次是第二生长期，第一和第四生长期的
含量相差不大(见图 4)。
图 4 不同生长期菌盖中锰过氧化物酶含量
2. 4. 2 不同生长期菌柄中锰过氧化物酶含量:各个生长期菌
柄中 MnP的含量相差不是很明显，其中以菌柄 1 酶的含量最
高，其次是第三生长期，第二和第四基本持平，各个生长期菌
柄中锰过氧化物酶的含量变化不太显著(见图 5)。
图 5 不同生长期菌柄中锰过氧化物酶的含量
·871·
海峡药学 2013 年 第 25 卷 第 8 期
2. 4. 3 不同生长期菌托中锰过氧化物酶含量 菌托 2 中所
含酶量最高，明显高于 1、3、4 3 个生长期，但菌托中锰过氧化
物酶含量整体处于较低水平(见图 6)。
图 6 不同生长期菌托中锰过氧化物酶含量
2. 4. 4 不同生长期菌盖分泌物中锰过氧化物酶含量:第三生
长期的菌盖外分泌物酶含量最高，远高于 1、2、4 这 3 个生长
期的菌盖分泌物酶含量，特别是第四生长期，只含有极其微量
的锰过氧化物酶(见图 7)。
图 7 不同生长期菌盖分泌物锰过氧化物酶的含量
2. 4. 5 不同部位锰过氧化物酶含量比较:把菌盖分泌物、菌
盖、菌柄、菌托的锰过氧化物酶含量最高值进行比较，即比较
棘托竹荪的菌盖分泌物 3、菌盖 3、菌柄 1、菌托 2 中的锰过氧
化物酶含量(见图 8)。
图 8 不同部位锰过氧化物酶含量
由图 8 可知，菌盖 3 的锰过氧化物酶含量最高，且与其它
部位的差异极明显，其次是菌柄 1，再次为分泌物 3，但两者差
别不明显，菌托 2 的含量最低，即处于第三生长期的菌盖中的
锰过氧化物酶的含量最高，处于第二生长期的菌托中的锰过
氧化物酶含量最低，由此也可以得知，棘托竹荪菌盖中锰过氧
化物酶的含量最高，菌托中最低。
2. 5 锰过氧化物酶最佳提取 pH 的测定 取锰过氧化物酶
含量最高的部位菌盖 3，以 pH = 4. 0、4. 5、5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、
7. 0、7. 5、8. 0 的缓冲液对该酶进行提取后，根据 1. 2. 3 的酶活
性测定方法，采用 1. 2. 5、1. 2. 6 所测得的最佳反应条件，对锰
过氧化物酶进行测定(见图 9)。
由图可知，在提取缓冲液 pH 为 4. 0 时，酶活几乎接近于
0，而后随着 pH 的升高，酶活性逐步上升，当 pH5. 5 ～ 6. 0 之
间，酶活性急剧上升至最高点，超过 6. 0 之后，酶活性呈逐步
下降趋势。由此可知，棘托竹荪菌盖中锰过氧化物酶提取液
的最适 pH为 6. 0。
图 9 提取锰过氧化物酶缓冲液最适 pH
3 讨论
木质素是第二大类天然聚合物，数量上仅次于纤维素，是
潜在的可再生资源，由于其疏水性和复杂的结构，木质素的生
物降解性比较低，降解木质素的主要是一些白腐真菌，它们能
分泌胞外过氧化物酶，锰过氧化物酶(MnP)就是其中关键的
一种〔9〕。棘托竹荪是白腐菌的一种，具有很强的分解木质
素、纤维素的能力，因此对处于不同生长阶段的棘托竹荪中锰
过氧化物酶含量变化进行研究，可更好地揭示锰过氧化物酶
的作用。
本文以愈创木酚为底物，对棘托竹荪锰过氧化物酶进行
研究。由实验结果可知，棘托竹荪锰过氧化物酶在 pH 4. 0 ～
5. 0 范围内，表现出较强的酶活性，且对 pH 变化较敏感。这
是因为锰过氧化物酶是一种锰离子依赖的酶，不同的 pH 环
境，会导致锰离子呈现不同的形式，Mn2 +或是 Mn3 +，而这会
直接影响到锰过氧化物酶的氧化活性，故而 pH 环境的变化
对酶活性的影响较为显著。
棘托竹荪锰过氧化物酶在 35℃ ～ 55℃的温度范围内活
性较高，温度的适应范围较宽，这大致与棘托竹荪的生长习性
相对应。棘托竹荪喜热、怕冷，自然界每年七八月份气温最高
时子实体出现最多〔7〕，气温在 30℃ ～ 35℃时生长最快。棘托
竹荪从菌球的开裂、开伞，直至完整子实体的呈现，均与锰过
氧化物酶有关，此时锰过氧化物酶处于活跃阶段。
不同生长期棘托竹荪锰过氧化物酶含量差异显著，其中
第 3 生长期棘托竹荪锰过氧化物酶处于高峰水平，此时菌球
完全打开，正处于释放菌裙，出现完整子实体的过程中，处于
生长的旺盛期;而第四生长期棘托竹荪锰过氧化物酶处于最
低水平，此时棘托竹荪已经完成了开裂、开伞呈现出完整的子
实体的整个过程，已处于生长期末期。各个部位中以菌盖中
锰过氧化物酶含量最高，菌盖分泌物次之，说明菌盖是棘托竹
荪锰过氧化物酶含量最高的部位，因为分沁物中所含的酶是
由菌盖产生分泌至胞外，可作用于其它部位，以完成棘托竹荪
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 8 2013
的生长过程。
以不同 pH缓冲液从棘托竹荪菌盖提取锰过氧化物酶，
当提取缓冲液 pH为 6. 0 时，锰过氧化酶受破坏率最低，可较
好保护酶的活性。棘托竹荪是名贵的食药两用真菌，目前的
研究主要集中于营养成分与药效，化学成分分析与分离等方
面〔10 ～ 12〕，通常用于食用的为棘托竹荪子实体菌裙菌柄部分，
经测算，该部分占棘托竹荪菌体 30%左右。菌盖部分约占菌
体 15%左右，该部分在加工时均被丢弃，鉴于菌盖部分所含
有的锰过氧化物酶，可考虑将其综合开发利用。木质素是仅
次于纤维素的第二可再生资源，利用白腐真菌对其进行降解
已成为研究的热点，鉴于棘托竹荪拥有很强的分解木质素的
能力，且目前棘托竹荪已可进行大规模人工栽培，生产加工会
产生大量废弃物，将其进行开发利用有较为广阔的前景。
4 结论
4. 1 以愈创木酚为底物，棘托竹荪锰过氧化物酶反应时间在
5min时达到顶峰，该酶的最适反应 pH 为 4. 5，最适反应温度
为 50℃。
4. 2 棘托竹荪不同时期不同部位锰过氧化物酶含量存在差
异，第三生长期锰过氧化物酶处于高峰水平，菌盖为主要产酶
部位，锰过氧化物酶含量最高，不同部位的顺序为:菌盖 ＞菌
柄 ＞分泌物 ＞菌托。
4. 3 棘托竹荪菌盖及其分泌物中含有丰富的锰过氧化物酶，
可以考虑对其综合开发利用，经测定，从菌盖中提取锰过氧化
酶的最适 pH为 6. 0。
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NO介导黄芩苷抑制血管平滑肌细胞增殖的作用
陈曜曜，纪相福，牛培广，史道华* (福建省妇幼保健院药剂科 福州 350001)
摘要:目的 探讨黄芩苷( Ba) 对高糖高胰岛素模拟胰岛素抵抗( IＲ) 状态下人胸主动脉平滑肌细胞( HASMCs) 增殖的影响及其与 NO 的关系。
方法 组织贴块法培养 HASMCs，以高糖高胰岛素培养基模拟胰岛素抵抗。分别设对照组、L-NAME 组、不同剂量的 Ba 组和不同剂量 Ba 合用
L-NAME组。MTT法测定细胞增殖;硝酸还原酶法测定 NO 含量; NOS 试剂盒测定 T-NOS 活性。结果 高糖高胰岛素促进 HASMCs 的增殖。
10 －5mol·L －1 Ba促进正常培养细胞的增殖，而 10 －4mol·L －1 Ba明显抑制细胞的增殖; 高、低剂量的 Ba 均可抑制模拟 IＲ 培养的 HASMCs 增
殖，且高剂量 Ba作用更强。HASMCs经模拟 IＲ培养，其培养液中 NO含量和总 NOS活性均下降，高、低剂量 Ba能够增加 NO含量、增强总 NOS
活性，而加用 L-NAME可减弱该作用。结论 Ba抑制正常及 IＲ培养的 HASMCs增殖，可能与调节 NOS活性及 NO含量有关。
关键词:黄芩苷;血管平滑肌细胞;胰岛素抵抗;增殖;一氧化氮
中图分类号:Ｒ972 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2013)-08-0180-05
作者简介:陈曜曜，女(1967 －)。毕业于福建省卫生学校。职称:主管药师。主要从事医院药学研究。联系电话:0591-87556124
通讯作者:史道华。职称:教授，主任药师。研究方向:临床药学。联系电话:0591-88312079，E-mail:shidh@ yeah. net
The proliferative inhibition of NO mediate baicalin on the vascular smooth
muscle cells
CHEN Yao-yao，JI Xiang-fu，NIU Pei-guang，SHI Dao-hua* (Department of Pharmacy，Fujian Provincial
Maternal and Child Health Hospital，Fuzhou 350001，China)
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海峡药学 2013 年 第 25 卷 第 8 期