全 文 :ting ethanol-induced oxidative stress and lipid accumu-
lation[J].Toxicology and Applied Pharmacology,
2012,262(3):321-329.
[6] 肖 湘,薛日海,张小芬.杨桃提取物体外清除氧自由
基作用[J].天然产物研究与开发,2012,24(7):963-
968.
[7] 年国侠,黄正明,杨新波,等.水芹总酚酸对小鼠CCl4肝
损伤的保护作用[J].解放军药学学报,2008,6(24):
501-504.
[8] 杨亚军,李庆耀,梁生林,等.车前草总三萜对四氯化碳
致小鼠肝损伤的保护作用[J].中成药,2012,34(1):
140-142.
[9] 蒙明瑜,郭又嘉,文 坎,等.剑叶耳草水提物对急性肝
损伤小鼠的保护作用[J].中国实验方剂学杂志,2012,
18(11):185-188.
[10]许贞爱,张红英,朴惠顺,等.桃仁提取物对小鼠急性肝
损伤的保护作用[J].中国医院药学杂志,2011,31(2):
120-123.
[11]林久茂,王瑞国.卷柏对实验性肝损伤小鼠保护作用的
实验研究[J].福建中医学院学报,2006,16(2):28-30.
[12]陈祝英,何 萍,黄仁彬,等.乙肝转阴散保护小鼠CCl4
急性肝损伤的生化机制[J].中药材,2007,30(2):208-
210.
广西医科大学学报 2015Apr;32(2)
*基金项目:广西自然科学基金资助项目(No.2011GXSFA0181192)
△通信作者,E-mail:81960722@qq.com
1广西中医药大学 南宁 530023
收稿日期:2015-01-20
广西产石韦和柔软石韦抗炎镇痛作用研究*
阮公梁 王柳萍1 钟霞军1 黄瑀莘 杨 斌△
(广西医科大学药学院 南宁 530021)
摘要 目的:比较广西产石韦和柔软石韦的抗炎镇痛疗效。方法:雄性昆明种小鼠80只,随机分为8组:模型组(蒸馏水),阳
性对照组(地塞米松0.01mg/kg),石韦及柔软石韦给药高(40g生药/kg)、中(20g生药/kg)、低(10g生药/kg)剂量组,每组
10只,各组小鼠灌胃给药,每天1次,连续7d,于末次给药后30min,采用巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀及对角叉菜胶致足趾
肿胀方法,观察石韦和柔软石韦对小鼠耳廓肿胀及对角叉菜胶致足趾肿胀的影响;雌性及雌雄并用昆明种小鼠80只,随机分
为8组:空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(阿司匹林0.2g/kg),石韦及柔软石韦给药高、中、低剂量组,给药方法同上,于末次
给药后30min,采用小鼠热板试验和醋酸扭体试验方法,观察石韦和柔软石韦对小鼠热板痛阈和扭体次数的影响。结果:与模
型组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组均可明显减轻小鼠耳廓肿胀度和足趾肿胀度(P<0.01或P<0.05)。石韦和柔软石
韦比较,石韦高、中剂量组明显减轻足趾肿胀度(P<0.01),石韦中剂量组明显减轻小鼠耳廓肿胀度(P<0.05);与空白对照
组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组的痛阈值和痛阈提高百分率均有明显的提高(P<0.01或P<0.05),石韦和柔软石韦
高、中、低剂量组明显减少小鼠扭体次数(P<0.01或P<0.05)。石韦和柔软石韦比较,石韦高、中剂量组明显提高小鼠热板
痛阈值(P<0.01),石韦和柔软石韦对小鼠扭体次数无明显差异(P>0.05)。结论:石韦和柔软石韦均有明显的抗炎镇痛作
用,石韦的抗炎镇痛作用强于柔软石韦。
关键词 石韦;柔软石韦;抗炎;镇痛
中图分类号:R-332 文献标志码:A 文章编号:1005-930X(2015)02-0182-04
ANALGESIC AND ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OF PYRROSIA LINGUA AND PYR-
ROSIA MOLLIS OF GUANGXI
Ruan Gongliang,Wang Liuping,Zhong Xiajun,Huang Yushen,Yang Bin.(Colege of Pharmaceutical
Seience,Guangxi Medical University,Nanning 530021,China)
Abstract Objective:To compare and evaluate the anti-inflammatory and analgesic effects of pyrrosia lin-
gua and pyrrosia mollis of Guangxi.Methods:80Kunming male mice were randomly divided into 8groups:
model group,dexamethasone group,different doses
of pyrrosia lingua and pyrrosia mollis(high doses,
middledoses,low doses)groups.And then,these
drugs were administrated by intragastric gavage once
·281· 广西医科大学学报 2015Apr;32(2)
DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2015.02.006
daily respectively,after 7days treatment.Finaly,the experiments of mice auricular sweling and paw ede-
ma were respectively induced by croton oil mixture and carrageenan so that observing the effect of pyrrosia
linguaand pyrrosia mollis on the mice’s auricular sweling and paw edema.On the other hand,80Kun-
ming female mice were randomly divided into 8groups:control group,aspirin group,pyrrosia lingua and
pyrrosia mollis(high doses,middle doses,low doses)groups.The drugs were administrated by intragas-
tric gavage once daily respectively,after 7days treatment.And the hot plate tests and acetic acid writhing
tests were perfomed in these mice so that,to explore the effct of pyrrosia linguaand pyrrosia mollis on the
pain threshold and twister number.Results:1.Compared to the normal control group,the middle dose
group and high dose group of pyrrosia lingua and pyrrosia mollis can coninstantaneously and significantly
reduce the mice auricle sweling degree and paw edema degree.(P<0.01or P<0.05).Moreover,the re-
sults of animals also showed that the medium dose and high dose of pyrrosia linguacan significantly reduce
the paw edema degree(P<0.01),Furthermore,medium dose of parrosia lingua can relief the mice auricle
sweling degeree(P<0.01).For the other hand,the results of Analgesic experiment showed that the pain
threshold in the pyrrosia lingua and pyrrosia mollis groups with high doses and middle doses were in-
creased compared with the normal control’s(P<0.01or P<0.05),and the writhing times of mice in the
pyrrosia lingua and pyrrosia mollis groups with high doses and middle doses and low doses groups were
more less than the normal control’s(P<0.01or P <0.05).To further analyze the effect of pyrrosina
molis and pyrrosina lingua,the datas demonstrated the pain threshold in the pyrrosia lingua with high do-
ses and middle doses were significant higher than the opposite pyrrosia mollis group’s(P<0.01),but it’
s no difference on the writhing times in the pyrrosina molis groups and pyrrosina lingua groups(P >
0.05).Conclusion:Though pyrrosia lingua and pyrrosia mollis both have significant anti-inflammatory
and analgesic effects,the anti-inflammatory and analgesic effects of pyrrosia linguastronger than the pyr-
rosia mollis.
Key words pyrrosia lingua;pyrrosia mollis;anti-inflammatory;analgesic
石韦属(Pyrrosia)植物是蕨类植物水龙骨科(Polypodi-
aceae)多年生常绿附生草本植物,2010年版《中国药典》收载
的石韦药材为水龙骨科植物庐山石韦 Pyrrosio,sheareri
(Bak.)Ching、石韦Pyrrosia lingua (Thunb.)Farwel、有柄
石韦Pyrrosia petiolosa(Christ)Ching昀干燥叶。在广西药
材市场上常售的有石韦和柔软石韦,其中柔软石韦药典中并
无收载,但两者在临床上常混用,用于治疗尿路感染,热淋,
血淋,石淋,小便不通,淋沥涩痛,尿血,崩漏,肺热喘咳,尿路
结石,颈淋巴结核,咳嗽及外伤出血等症[1,2]。因此,比较广
西产石韦和柔软石韦的药理作用,对指导临床合理使用这两
种药材具有重要的现实意义。
1 材料与方法
1.1 动物:昆明种小鼠,雌雄兼用,体重(20±2)g,广西医科
大学实验动物中心提供,合格证号:2009-0002。实验过程中
依照动物伦理学要求进行,实验结束后,所有动物采用脊椎
脱臼法处死。
1.2 药材:石韦和柔软石韦药材均采购于广西玉林市中药
材专业市场,经广西中医药大学廖月葵高级实验师鉴定,样
品1为水龙骨科植物石韦Pyrrosia lingua(Thunb.)Farwel,
样品2为水龙骨科植物柔软石韦Pyrrosia mollis(Kune)Ch-
ing)。
1.3 仪器:鼠耳打孔器,微量天平,SI-93自动双重纯水蒸馏
器,数控超声波清洗器KQ-500DB,水浴锅,智能热板仪等。
1.4 实验方法
1.4.1 受试物的制备:石韦及柔软石韦,每份称500g药材
粉末,用10倍量蒸馏水浸渍过夜,超声30min后过滤,滤渣
用10倍量蒸馏水浸渍,超声30min,过滤,滤渣用5倍量蒸馏
水浸渍,超声30min,过滤,合并3次滤液。于水浴锅浓缩,
温度维持在80℃,浓缩至250mL,即2g生药/mL,置冰箱
储存。
1.4.2 抗炎实验
1.4.2.1 受试物对巴豆油混合液致小鼠耳廓肿胀的影
响[3]:体重为18~22g雄性昆明小鼠80只,随机分为8组,
模型组(蒸馏水),阳性对照组(地塞米松0.01g/kg),石韦及
柔软石韦给药高(40g生药/kg)、中(20g生药/kg)、低(10g
生药/kg)剂量组,每组10只。各组小鼠灌胃给药,每天1次,
连续7d,于末次给药后30min,右耳正反两面均匀涂予
50μL巴豆油混合液致炎,左耳不做任何处理,4h后处死小
鼠,剪下双耳用8mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳
片,天平称重。每鼠右耳重减去左耳重即为肿胀度。
1.4.2.2 受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响[3]:体
·381·阮公梁,等 .广西产石韦和柔软石韦抗炎镇痛作用研究
重为18~22g雄性昆明小鼠80只,给药及分组同上,连续灌
胃7d,于末次给药30min后,在每鼠右足注射1%角叉菜胶
30μL,左足不做任何处理。6h后处死小鼠,沿踝关节剪下
左右足,天平称重,每鼠右足重减去左足重即为肿胀度。
1.4.3 镇痛实验
1.4.3.1 受试物对小鼠热板痛阈的影响[4]:将智能热板仪
加热至(50.0±0.5)℃。选用雌性小鼠,依次将小鼠放在热
板仪上,测定每鼠的痛阈(即痛反应潜伏期,指小鼠从足接触
热板到舔足所用的时间)。选择痛反应潜伏期在5~30s的
小鼠为合格鼠,剔除过敏(<5s)或反应迟钝(>30s)的个体。
24h后进行实验,取合格小鼠80只,随机分为8组,即空白
对照组(蒸馏水)、阳性对照组(阿司匹林0.2g/kg)、石韦及
柔软石韦给药高、中、低剂量组,每组10只小鼠。将小鼠置
于(50.0±0.5)℃的热板上,首先测定各组的基础痛阈,给药
前测两次(间隔10min),取其平均值,连续灌胃给药7d,每
天1次,末次给药后30,60,90min测定各鼠出现舔后足的潜
伏期。超过60s无反应者,痛阈按60s计。痛阈提高的百分
率=(给药后的痛阈-基础痛阈)/基础痛阈×100%。
1.4.3.2 受试物对醋酸致小鼠扭体反应的影响[4]:取80只
小鼠,雌雄兼用,随机分为8个组,即空白对照组(蒸馏水)、
阳性对照组(阿司匹林0.2g/kg)、石韦及柔软石韦给药高、
中、低剂量组,每组10只小鼠。连续灌胃7d,于末次给药后
30min,进行实验,每组小鼠均腹腔注射 0.6% 的醋酸
0.2mL,记录各组小鼠的扭体潜伏期(即从注射醋酸至扭体
的时间)及在15min内扭体的次数,若15min内未扭体,潜
伏期按15min记录。抑制率=(蒸馏水组扭体均数-给药组
扭体均数)/蒸馏水组扭体均数×100%。
1.4.4 统计学方法:采用SPSS16.0软件对数据进行统计学
处理。检测结果以均数±标准差(珚x±s)表示,多个样本均
数比较采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学
意义。
2 结 果
2.1 两种受试物的抗炎作用
2.1.1 石韦和柔软石韦受试物对巴豆油混合液致小鼠耳廓
肿胀的影响:与模型组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组均
有显著差异(P<0.01或P<0.05);石韦和柔软石韦各剂
量组比较,石韦中剂量组与柔软石韦中剂量组有显著差异
(P<0.05),结果表明两种受试物对巴豆油混合液致小鼠耳
廓肿胀均有明显的抑制作用,尤以石韦受试物明显,见表1。
2.1.2 石韦和柔软石韦受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀
的影响:与模型组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组均有显
著差异(P<0.01);石韦和柔软石韦各剂量组比较,石韦高、
中剂量组与柔软石韦高、中剂量组有显著差异(P<0.01),
结果表明两种受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀有明显的
抑制作用,石韦受试物比柔软石韦受试物作用更强,见表2。
2.2 两种受试物的镇痛作用
2.2.1 石韦和柔软石韦受试物对热板法小鼠痛阈的影响:
与空白对照组相比,给药后30,60,90min,两种受试物各剂
量给药组的痛阈值和痛阈提高百分率均有不同程度的提高。
给药后30min除柔软石韦低剂量组痛阈值没有提高外,其余
各组均有提高,小鼠的舔足时间均延长,差异有统计学意义
(P<0.01);给药后60min除柔软石韦中、低剂量组外,其余
各剂量组小鼠的舔足时间均延长,差异有统计学意义(P<
0.01或P<0.05)。给药后90min除低剂量组外,其余各组
小鼠的舔足时间均延长,差异有统计学意义(P<0.01)。石
韦和柔软石韦各剂量组比较,石韦高、中剂量组与柔软石韦
高、中剂量组有显著差异(P<0.01)。结果表明两种受试物
有明显的镇痛作用,而且石韦镇痛作用比柔软石韦强,见表
3。
2.2.2 石韦和柔软石韦受试物对醋酸致小鼠扭体反应的影
响:与空白对照组比较,石韦和柔软石韦受试物高、中、低剂
量组差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);石韦和
柔软石韦受试物比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结果
表明石韦和柔软石韦受试物均可抑制醋酸所致小鼠扭体反
应,具有明显的镇痛作用,见表4。
表1 两种受试物对巴豆油混合液致小鼠耳廓肿胀的影响
(珚x±s)
组别 n
剂量
(g/kg)
肿胀度
(m/mg)
模型组 10 蒸馏水 15.17±0.57
阳性对照组 10 0.01 7.25±0.76*
石韦高剂量组 10 40 10.94±0.72*
石韦中剂量组 10 20 12.96±1.15*
石韦低剂量组 10 10 14.92±0.53
柔软石韦高剂量组 10 40 11.82±0.75*
柔软石韦中剂量组 10 20 14.62±0.58**△
柔软石韦低剂量组 10 10 15.48±0.90
注:与模型组比较,*P<0.01,**P<0.05;与石韦中剂
量组比较,△P<0.05
表2 两种受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响
(珚x±s)
组别 n
剂量
(g/kg)
肿胀度
(m/mg)
模型组 10 蒸馏水 57.33±5.83
阳性对照组 10 0.01 13.48±3.71*
石韦高剂量组 10 40 20.67±2.06*
石韦中剂量组 10 20 37.45±5.47*
石韦低剂量组 10 10 53.11±3.90
柔软石韦高剂量组 10 40 31.72±4.27*△
柔软石韦中剂量组 10 20 48.68±4.01*△
柔软石韦低剂量组 10 10 53.64±3.96
注:与模型组比较,*P <0.01,与石韦高、中剂量组比
较,△P<0.01
·481· 广西医科大学学报 2015Apr;32(2)
表3 两种受试物对小鼠热板痛阈的影响(珚x±s,n=10)
组别
剂量
(g/kg)
给药前基础
痛阈值(t/s)
给药后痛阈值(t/s)及痛阈提高百分率(%)
30min 60min 90min
空白对照组 蒸馏水 10.74±1.83
11.97±2.25
(11.45)
14.57±1.86
(35.66)
16.20±2.09
(50.84)
阳性对照组 0.2 11.13±0.77 26.80±6.43
**
(140.79)
28.81±5.63**
(158.85)
27.65±2.81**
(148.43)
石韦高剂量组 40 11.45±0.81 25.15±1.13
**
(119.65)
27.21±0.30**
(137.64)
30.71±1.37**
(168.21)
石韦中剂量组 20 10.44±0.65 21.38±0.94
**
(104.79)
22.71±1.96**
(117.53)
23.59±1.37**
(125.96)
石韦低剂量组 10 10.53±0.68 16.31±2.03
**
(54.89)
18.97±1.45**
(80.15)
16.70±1.56
(58.59)
柔软石韦高剂量组 40 10.34±0.70 16.63±1.11
**△△
(60.83)
17.60±3.45*△△
(70.21)
19.43±1.41**△△
(87.91)
柔软石韦中剂量组 20 10.21±0.62 17.61±1.12
**△△
(72.47)
16.27±3.98△△
(59.35)
18.82±1.46**△△
(84.32)
柔软石韦低剂量组 10 10.41±0.65 11.40±1.58
△△
(9.51)
14.79±2.41△
(42.07)
16.48±2.88
(58.12)
注:与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与石韦相应剂量组比较,△P<0.05,△△P<0.01
表4 两种受试物对醋酸致小鼠扭体反应的影响(珚x±s)
组别 n
剂量
(g/kg)
扭体次数
(次)
抑制率
(%)
空白对照组 10 蒸馏水 29.70±7.82 —
阳性对照组 10 0.2 19.62±2.92** 33.94
石韦高剂量组 10 40 18.88±2.58** 36.43
石韦中剂量组 10 20 19.12±2.47** 35.62
石韦低剂量组 10 10 21.70±5.77* 26.94
柔软石韦高剂量组 10 40 19.33±3.08** 34.92
柔软石韦中剂量组 10 20 23.78±3.15* 19.93
柔软石韦低剂量组 10 10 22.14±4.22* 25.45
注:与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
3 讨 论
炎症是常见的临床症状。在药理研究中,常通过对实验
动物人为地实施某种干扰(如给予物理性、化学性或生物性
等刺激)来模拟人类性疾病的发生、发展和处理。但炎症过
程是一个相当复杂的病理、生理过程,要制备比较完善的动
物模型是相当困难的。目前对某个药物的抗炎药理研究,主
要是依据该药物在多种炎症模型中所表现的功效来综合地
加用观察、分析和评价。本实验采用的巴豆油混合物致小鼠
耳廓肿胀及角叉菜胶诱发小鼠足肿胀是最常用的急性炎症
模型,主要表现为局部的充血水肿及渗出等病理反应过程。
巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀法,不需特殊仪器,简便易行,
对两大类抗炎药物均敏感,适用于抗炎药物的筛选;角叉菜
胶诱发小鼠足肿胀法是应用最广泛的炎症水肿模型,具有差
异小、敏感和重复率高等特点,但特异性较低,不少非抗炎药
也有效。该实验结果表明,除了石韦和柔软石韦受试物低剂
量组与模型组相比差异无统计学意义外,其余高、中剂量组
对巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶诱发小鼠足肿
胀均表现出较强的抑制作用,且石韦受试物的抑制作用比柔
软石韦受试物强。
疼痛是一个极为复杂的动态过程,涉及多靶标相互作用
的神经传导、神经调节系统,痛觉模型可根据致痛原因分为:
物理性疼痛模型(热、机械、电、冷、光)、化学性疼痛模型(酸
碱、有毒气体、药物或生物毒素)。本实验采用的热刺激法是
通过热刺激足部的感觉神经末梢致痛,类似于急性锐痛;醋
酸扭体法是通过化学刺激致痛,类似于炎性疼痛[5]。镇痛实
验表明,石韦和柔软石韦受试物均对热板致痛和化学致痛有
一定的镇痛效果,石韦和柔软石韦各剂量组均能减少醋酸所
致扭体反应次数及提高小鼠对热刺激的痛阈值,与空白对照
组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),体现其
较好的止痛功效,且石韦受试物镇痛作用较柔软石韦强。
广西产的水龙骨科植物石韦Pyrrosia lingua(Thunb.)
Farwel 和水龙骨科植物柔软石韦Pyrrosia mollis(Kune)
Ching)是广西药材市场上常售的石韦药材,实验表明,在抗
炎止痛方面广西产石韦比柔软石韦更具优势,至于两者化学
成分及其他药效方面是否存在差别,有待于进一步的研究。
参考文献:
[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(2005年版一
部)[M].北京:化工出版社,2005:68.
[2] 包文芳,孟宪纡,周荣汉.中国石韦属化学成分与分类
学的研究[J].沈阳药学院学报,1982,(15):62-71.
[3] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[M].北京:人
民卫生出版社,2001:882-888.
[4] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版
社,1996:361.
[5] 陈 超,郑卫红,熊素兵,等.细辛与 Verapamil镇痛作
用的实验研究[J].中国药理学通报,2003,19(3):337-
339.
·581·阮公梁,等 .广西产石韦和柔软石韦抗炎镇痛作用研究