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不同生育期白羊草的瘤胃降解特性及其对瘤胃内环境的影响



全 文 :不同生育期白羊草的瘤胃降解特性及其
对瘤胃内环境的影响
姬奇武,韩汝旦,董宽虎
(山西农业大学 动物科技学院,山西 太谷 030801)
  摘要:以安装永久性瘘管的本地绵羊15只为试验动物,采用尼龙袋法对不同生育期白羊草的绵羊
瘤胃降解特性及其对瘤胃内环境的影响进行研究。结果表明:干物质(DM)和粗蛋白质(CP)的有效降
解率均在拔节期为最高,且拔节期DM的有效降解率显著高于其他3个生育期(P<0.05)。DM的有效
降解率随着生育期的推进不断降低,而CP的有效降解率无一定变化规律;加入不同生育期白羊草后,
瘤胃液铵态氮浓度和总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸和异丁酸浓度均呈现先上升后下降的趋
势,并在4h时达到峰值,且4h时,拔节期的铵态氮浓度和总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸浓度显著高于开
花期(P<0.05),其中以拔节期白羊草的增加幅度最大,开花期的最低,表明拔节期白羊草具有较高的
瘤胃降解特性,最利于瘤胃发酵,由此可见,添加装有不同生育期白羊草的尼龙袋后均会对绵羊的瘤胃
内环境产生影响,其原因主要与不同生育期白羊草的蛋白质含量和结构有关。
  关键词:白羊草;生育期;瘤胃降解率;瘤胃内环境
  中图分类号:S 543;S 815.4  文献标识码:A  文章编号:1009-5500(2015)05-0017-06
  收稿日期:2015-04-14;修回日期:2015-05-04
  基金项目:山西省科技攻关项目(20120311011-1);山西省
科技基础条件平台建设项目(2012091004-0101)
资助
  作者简介:姬奇武(1989-),男,山西运城人,在读研究生。
E-mail:qiwu_ji@126.com
董宽虎为通讯作者。
  反刍动物的瘤胃是反刍动物的重要消化器官,占
全胃的80%,饲料营养物质在瘤胃中的降解率及其对
瘤胃内环境的影响反映着饲料的营养价值,体现着饲
料的优劣水平。目前,对反刍动物饲料营养价值的评
价的方法很多,其中,尼龙袋法能系统的研究饲料在瘤
胃中的降解规律及有效降解率等,具有简单方便,试验
期短等优点[1]。白羊草(Bothriochloa ischaemum)为
禾本科孔颖草属,喜温,中旱生,具有产量高、耐践踏、
适口性好等特点,是优良牧草[2],其作为山西暖性灌草
丛草地的建群种,在山西中南部地区,分布较广[3]。有
关山西白羊草的研究,许多学者先后从白羊草草地的
产量[4]、草地群落[3]、种群繁殖[2]、营养[5]、抗旱性[6]等
方面进行报道,但较多地集中于对白羊草草地的研究,
而培育适应山西省生长的白羊草品种的研究仍较少,
武路广等[7,8]2011年对山西不同居群白羊草进行人工
栽培选育,并对不同居群白羊草的农艺性状、生产性能
等进行了研究报道,而有关人工栽培不同居群白羊草
的瘤胃降解特性及其对瘤胃内环境的影响还未见报
道,因此,试验以此为出发点,利用尼龙袋法对不同生
育期白羊草的瘤胃降解率及其对瘤胃内环境的影响进
行研究,并探究其变化规律,以期为不同生育期白羊草
的合理利用及白羊草的育种工作提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 样品的准备
样品取自山西农业大学动物科技学院牧草站试验
田2011年栽培的白羊草(野生种源于太谷)。2013年
按白羊草的生育期进行采样,分别于拔节期、孕穗期、
抽穗期和开花期进行刈割,留茬高度为5cm,然后
105℃下杀青30min,65℃下烘干至恒重。烘干后的样
品用植物粉碎机进行粉碎,过40目筛后于干燥阴凉处
密封保存。
1.2 试验动物及饲养管理
选择12只生长健康的装有永久性瘤胃瘘管的肉
71第35卷 第5期           草 原 与 草 坪2015年
DOI:10.13817/j.cnki.cyycp.2015.05.005
用绵羊,体重为34.6±0.57kg,单圈饲养,随机分为4
组,每组3只,试验羊于每天8∶00和20∶00饲喂2次,
自由饮水,试验羊日粮供给量为1.3倍维持需要的饲
喂量,精粗比为4∶6,预饲期为15d。日粮组成及营养
水平(表1)。
表1 基础日粮组成及营养水平(干物质基础)
Table 1 The composition and nutrient level of diet
for the tested sheep(DM basis)
原料 含量/% 营养水平 含量/%
玉米 22.0 干物质 93.14
豆粕 17.0 粗蛋白质 13.84
苜蓿 59.0 中性洗涤纤维 36.82
碳酸氢钠 0.2 酸性洗涤纤维 21.47
食盐 0.6 钙 0.53
石粉 0.2 磷 0.26
预混料 1.0 粗脂肪 1.3
合计 100.0 灰分 8.63
  注:预混料为每公斤日粮提供:碳酸钠250g,矿物质250
g,VA20 000IU,VD3 500IU,VE500IU
1.3 试验设计
每个待测样品准确称取3.000 0g,放入已知重量
的尼龙袋底部,袋口用尼龙线系紧,设置3个重复,每
个重复的每个待测时间点设置2个平行,将平行样系
紧后固定于一长约20cm的半软塑料管上。投放尼龙
袋时,将塑料管的另一端系绳并固定在瘘管盖上,于饲
喂前2h将尼龙袋放入瘤胃腹囊食糜中,瘤胃中培养
时间点设定为4,8,12,24,48,72h,即每个样品称装
42个尼龙袋,除3组0h的尼龙袋外,其余的分别放入
3只羊的瘤胃中,每只羊放入12个尼龙袋,按时间点
取出后用水冲洗直至水清为止,然后65℃下烘干至恒
重后称重置于干燥阴凉处保存。
1.4 测定项目和方法
1.4.1 常规营养成分的测定 待测样品降解前及瘤
胃降解后残渣DM 和CP的测定方法均参照文献[9]
的方法进行。
1.4.2 DM 和CP的降解率的计算 待测样品DM
和CP的瘤胃降解率(%)=100%×(待测样品某成分
的量-残留物中某成分的量)/待测样品某成分的量。
1.4.3 DM和CP降解参数及有效降解率的计算 参
照文献[10]的公式计算DM和CP降解参数及有效降
解率。
p=a+b(1-e-ct)
式中:p为t时刻的瘤胃降解率;a为快速降解部分;b
为慢速降解部分;c为b部分的降解速率;t为样品在
瘤胃内停留的时间h。
利用各培养时间点的瘤胃降解率(p)和时间(t),
采用最小二乘法,计算a,b和c值。
待测样品DM和CP的瘤胃有效降解率:
ED=a+b×c/(c+k)
式中:ED为样品的瘤胃有效降解率;k为瘤胃食糜的
外流速率,试验中k值取0.031/h。
1.4.4 瘤胃液的采集与测定 0,4和8h分别通过瘤
胃瘘管取25mL瘤胃液,用尼龙袋过滤后加6mol/L
的盐酸5mL作为保护剂,然后4℃下以3 500r/min
离心15min,取上清液后于-20℃保存,用于铵态氮
(NH3-N)和挥发性脂肪酸(VFA)的测定。铵态氮采
用苯酚—次氯酸钠比色法进行测定[11]。挥发性脂肪
酸采用GC102AF型气相色谱仪进行测定[12]。
1.5 数据处理
采用Excel 2007进行数据整理,SAS 8.0软件中
的非线性回归程序计算瘤胃降解模型参数a,b和c
值,方差分析采用单因素方差分析,并用duncan法进
行多重比较。
2 结果与分析
2.1 不同生育期白羊草DM和CP瘤胃降解特性
2.1.1 不同生育期白羊草DM 降解特性 不同生育
期白羊草的DM降解率除了8、12h之外,均差异显著
(P<0.05)。从时间分析0、24、48h和72h时,拔节
期的DM 降解率显著高于其他3个时期(P<0.05)。
在第72h时的拔节期的DM 降解率为最高,可达到
78.57%。整体分析,白羊草的DM在绵羊瘤胃的降解
能力随着生育期不断降低(表2)。
不同生育期白羊草DM 的降解模型中降解速率c
差异不显著(P>0.05)。其中,快速降解部分a以拔
节期最高,与抽穗期差异不显著(P>0.05),而与孕穗
期和开花期差异显著(P<0.05)。拔节期白羊草的
DM有效降解率显著高于其他3个时期(P<0.05),为
54.30%。
2.1.2 不同生育期白羊草CP降解特性 不同生育
期白羊草的CP降解率随着在瘤胃中停留的时间越
长,降解率不断增加。在0,4和8h时,CP降解率存
在显著差异(P<0.05),其中,4h时,拔节期的降解率
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为最高,达到34.03%,显著高于孕穗期的21.36%和
抽穗期的25.89%(P<0.05)。从12~72h,各生育期
的降解率均差异不显著(P>0.05),在72h时,拔节期
的降解率为最高,达到69.47%(表3)。
不同生育期白羊草的CP的降解模型中除了快速
降解部分a之外均差异不显著(P>0.05)。其中快速
降解部分a在拔节期为最大,慢速降解部分b在孕穗
期为最大,有效降解率在拔节期为最高。
表2 不同生育期白羊草DM降解动态和降解模型参数
Table 2 DM dynamic degradation rate and characteristics for B.ischaemumin different growth periods %
项目 拔节期 孕穗期 抽穗期 开花期
0h 26.00±0.082a 21.51±0.08bc  22.68±0.43b  19.88±1.00c
4h 33.10±1.05a 28.22±0.44b  30.28±0.15ab  27.23±2.42b
8h 34.41±1.60a 31.8±1.06ab  34.42±1.11a 30.99±0.77b
12h 41.29±2.40a 37.02±1.64a 35.73±2.39a 35.19±3.48a
24h 56.74±0.39a 45.84±0.05b  46.25±2.80b  46.43±1.84b
48h 71.80±0.91a 62.04±0.50b  61.42±3.10b  55.89±1.90c
72h 78.57±1.14a 71.48±2.07b  65.14±2.66c  63.62±0.20c
a 25.13±1.33a 22.44±0.02bc  23.59±0.49ab  20.61±1.13c
b  64.01±3.22a 64.67±5.00a 49.54±0.70b  47.35±3.21b
c  0.026 7±0.004 7a 0.019 8±0.00 20a 0.027 3±0.004 9a 0.031 7±0.005 8a
ED  54.30±0.01a 47.36±0.41b  46.55±2.08b 44.23±1.69b
  注:同行不同字母表示差异显著(P<0.05),下同
表3 不同生育期白羊草CP降解动态和降解模型参数
Table 3 CP dynamic degradation rate and characteristics for B.ischaemumin different growth periods %
项目 拔节期 孕穗期 抽穗期 开花期
0h 19.08±0.46a 14.28±0.57b  14.82±0.28b  17.93±0.67a
4h 34.03±1.43a 21.36±2.10c  25.89±2.85bc  29.56±2.02ab
8h 39.74±0.95a 32.97±1.40b  38.87±2.41a 39.59±0.64a
12h 44.14±0.59ab  37.86±3.42b  46.87±4.23a 44.00±0.91ab
24h 52.45±0.07a 51.31±6.48a 53.98±0.76a 52.07±3.18a
48h 64.03±7.34a 62.81±2.56a 60.70±5.58a 60.28±0.45a
72h 69.47±3.70a 69.14±2.18a 66.69±3.69a 63.14±0.10a
a 21.96±1.31a 13.81±0.28b  14.40±0.12b  18.71±0.47ab
b  46.98±5.50a 56.84±2.09a 50.01±6.16a 43.42±0.68a
c  0.053 6±0.011 7a 0.046 0±0.010 3a 0.082 0±0.029 8a 0.071 9±0.008 0a
ED  51.26±2.34a 47.33±2.15a 49.83±0.50a 48.89±1.02a
2.2 不同生育期白羊草对瘤胃内环境的影响
2.2.1 不同生育期白羊草对瘤胃液铵态氮浓度的影
响 放入装有不同生育期白羊草的尼龙袋后,瘤胃液
铵态氮浓度在4h时达到峰值,其中,拔节期为最高,
为19.94mg/(100mL),开花期最低为,13.70mg/
(100mL),两者差异显著(P<0.05),随着时间的延
长,铵态氮浓度降低,在8h时,各生育期的铵态氮浓
度均低于0h的浓度(表4)。试验表明,拔节期对瘤胃
液铵态氮浓度的影响最大,开花期为最低。
2.2.2 不同生育期白羊草对瘤胃液挥发性脂肪酸的
影响 不同生育期白羊草在瘤胃内产生的 VFA浓度
不同,加入草粉后,4h时的总挥发性脂肪酸,乙酸,丙
酸,丁酸,戊酸和异丁酸的浓度达到最高,其中,总挥发
性脂肪酸、乙酸、丙酸、丁酸和异丁酸均是在拔节期时
最高,开花期最低,且总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸在两
个生育期间差异显著(P<0.05),丁酸和异丁酸在2
个生育期之间差异不显著(P>0.05)。戊酸在抽穗期
达到最高,开花期最低,在整个生育期内差异不显著
(P>0.05)。异戊酸在白羊草整个生育期内均差异不
显著(P>0.05)。乙酸与丙酸的比值在各生育期内均
随时间呈现先降低后升高的趋势,而且,0和4h时均
差异不显著(P>0.05),8h时孕穗期显著大于其他3
个生育期(P<0.05)。说明不同生育期白羊草的瘤胃
发酵类型随着时间的推移不断变化的趋势是相同的,
其发酵类型偏向于乙酸—丙酸型(表5)。
91第35卷 第5期           草 原 与 草 坪2015年
表4 不同生育期白羊草在瘤胃液中不同时间点的铵态氮浓度
Table 4 Variation of NH3-N concentration in the rumen by adding B.ischaemumin different growth periods
mg/(100mL)
时间点 拔节期 孕穗期 抽穗期 开花期
0h 15.88±0.66a 12.47±1.08b  11.26±0.46b  11.23±1.21b
4h 19.94±2.61a 16.35±1.17ab  14.36±1.14b  13.70±2.13b
8h 10.77±1.70a 8.50±0.19a 10.83±1.93a 9.95±0.15a
表5 不同生育期白羊草在瘤胃液中不同时间点的挥发性脂肪酸浓度
Table 5 Variation of VFA concentration in the rumen by adding B.ischaemumin different growth periods  mmol/L
VFA 时间点/h 拔节期 孕穗期 抽穗期 开花期
总挥发性脂肪酸 0  28.11±4.30b  35.29±2.06a 31.86±2.48ab  34.92±6.34a
4  68.65±9.46a 60.07±0.12ab  62.43±9.05ab  50.55±4.56b
8  51.76±4.88a 58.59±6.15a 49.72±6.60a 46.05±2.19a
乙酸 0  16.91±2.48b  21.82±0.57a 19.70±2.14ab  21.71±3.30a
4  42.21±5.73a 39.09±4.90ab  37.96±6.51ab  31.06±2.48b
8  31.56±3.25b  38.99±4.29a 33.72±6.59ab  28.18±1.80b
丙酸 0  6.00±0.88a 6.90±0.78a 6.51±0.15a 7.26±1.60a
4  16.14±2.50a 13.30±2.95ab  14.26±1.80ab  11.78±1.44b
8  11.36±1.08a 11.91±1.82a 10.99±3.60a 9.92±0.41a
丁酸 0  3.49±0.76b  4.63±0.52a 3.71±0.23ab  4.13±0.85ab
4  7.81±1.29a 7.77±1.75a 7.75±0.66a 5.99±0.51a
8  6.53±0.76a 7.45±0.59a 6.18±2.06a 5.97±0.33a
戊酸 0  0.27±0.11a 0.29±0.09a 0.28±0.02a 0.28±0.13a
4  0.71±0.13a 0.70±0.30a 0.74±0.10a 0.51±0.10a
8  0.58±0.05ab  0.64±0.12a 0.55±0.18ab  0.45±0.05b
异丁酸 0  0.62±0.08a 0.71±0.11a 0.70±0.03a 0.60±0.16a
4  0.88±0.01a 0.78±0.27a 0.85±0.05a 0.65±0.01a
8  0.77±0.05ab  0.76±0.17ab  0.82±0.13a 0.61±0.02b
异戊酸 0  0.82±0.07a 0.95±0.15a 0.96±0.06a 0.88±0.31a
4  0.89±0.15a 0.81±0.46a 0.86±0.01a 0.60±0.07a
8  0.96±0.13a 0.98±0.28a 0.96±0.11a 0.84±0.15a
乙酸/丙酸 0  2.82±0.07a 3.19±0.31a 3.02±0.29a 3.03±0.22a
4  2.62±0.10a 2.79±0.17a 2.65±0.15a 2.65±0.14a
8  2.78±0.03a 3.16±0.30b  2.74±0.05a 2.84±0.13a
3 讨论与结论
3.1 不同生育期白羊草DM和CP的降解特性
牧草DM的降解率是影响干物质采食量的主要因
素,其受牧草品种、产地、生育期、采样方式、动物种类
等多因素的影响。试验中,白羊草DM 降解动态随生
育期的推进不断降低,而随瘤胃培养时间的延长逐渐
升高,但不同生育期的升高幅度不同。这与聂芙蓉
等[13]、夏科等[14]、陈晓琳等[15]的研究结果一致。黄锋
华等[5]的研究结果表明,拔节期白羊草各时间点的
DM降解率均高于其他生育期,与本试验的研究结果
一致,可能与拔节期白羊草的CP含量较高,而 NDF、
ADF含量较低有关。在DM降解模型中,慢速降解部
分b和有效降解率均随生育期的推进不断降低,其中
拔节期的有效降解率显著高于其他3个生育期,与黄
秀声等[16]、弓剑等[17]的研究结果一致。试验中白羊草
拔节期的DM 有效降解率为54.30%,比余苗等[1]对
虎尾草拔节期的DM 有效降解率高15.97%,表明白
羊草具有较高的DM瘤胃降解特性。
牧草CP降解率是评价牧草营养价值重要指标,
02       GRASSLAND AND TURF(2015)            Vol.35No.5
其受牧草CP与纤维的含量、结构的影响[15]。本试验
中,白羊草的CP降解动态随生育期的推进呈不断下
降的趋势,这与聂芙蓉等[13]的研究结果一致。试验中
不同生育期白羊草72h的CP降解率在63.14%~
69.47%,与弓剑等[17]对不同生育期柠条的72h的CP
降解率相近,表明白羊草的CP降解特性与柠条的降
解特性相近,具有利用价值。CP降解模型中参数a和
b分别在13.81%~21.96%和43.42%~56.84%,与
余苗等[1]对虎尾草的研究结果相比,本试验的结果变
化幅度较大,这与牧草品种、试验动物及日粮组成不同
有关。陈晓琳等[15]研究报道中盛花期苜蓿的CP有效
降解率为72.22%,远高于本试验的开花期白羊草的
CP有效降解率,而本试验中抽穗期的白羊草的CP有
效降解率为49.83%,高于陈晓琳等[15]对抽穗期象草
和狗尾草的测定结果,表明白羊草的CP降解率低于
苜蓿而高于象草和狗尾草。
3.2 不同生育期白羊草对瘤胃内环境的影响
铵态氮浓度是影响微生物蛋白合成的一个重要指
标,在加入不同生育期白羊草样品4h后,瘤胃液铵态
氮浓度均达到最大,试验表明在加入白羊草样品初期,
微生物的利用率,瘤胃上皮对氨氮的吸收量均低于蛋
白质的降解率,其中,拔节期增加了4.06mg/100mL,
孕穗期增加了3.88mg/(100mL),抽穗期增加了3.10
mg/(100mL),开花期增加了2.47mg/(100mL),拔
节期的增加幅度大于其他3个生育期,这可能与拔节
期白羊草的CP含量和4h时的降解率较高有关,与李
国祥等[18]、格根图等[19]、吴仙等[20]的研究结果一致。
同时,研究中各生育期白羊草在0~8h的铵态氮浓度
在8.50~19.94mg/(100mL),符合Preston[21]提出
的最适合微生物生长的瘤胃铵态氮浓度的临界范围
6.0~30.0mg/(100mL),表明不同生育期的白羊草
均适合微生物的生长。
挥发性脂肪酸是碳水化合物消化后的终产物,是
反刍动物维持生命活动和瘤胃微生物合成菌体蛋白的
主要能量来源,挥发性脂肪酸的产量和比例情况可以
显著的影响反刍动物的营养吸收状况和生产水平[22]。
加入不同生育期白羊草样品4h后,总挥发性脂肪酸,
乙酸,丙酸,丁酸,戊酸和异丁酸均达到最大值,其中拔
节期的总挥发性脂肪酸,乙酸,丙酸,丁酸和异丁酸产
量最高,开花期的产量最低,孕穗期和抽穗期居中,表
明装有白羊草样品的尼龙袋在瘤胃中迅速发酵,产生
大量的挥发性脂肪酸,随着时间推移,尼龙袋数量减
少,微生物对其的利用以及瘤胃壁的吸收导致其浓度
下降,同时也表明随着白羊草生育期的推进,牧草中的
纤维素和半纤维素含量不断增加,而碳水化合物含量
不断降低。吴仙[20]的研究结果表明,添加装有不同种
类牧草的尼龙袋均会对山羊瘤胃挥发性脂肪酸含量产
生影响,本研究的结果与其一致。
不同生育期白羊草的DM 和CP的瘤胃降解特性
及其对瘤胃内环境的影响均有较大差异,其中拔节期
白羊草的DM 和CP有效降解率均为最高,且瘤胃液
的铵态氮浓度为最高,表现出较高的降解特性,表明拔
节期白羊草最有利于瘤胃发酵,但关于白羊草的最佳
利用时期还需结合草产量、其他营养成分等做进一步
的研究。
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Ruminal degradabilityand influence on ruminal
environment of Bothriochloa ischaemum
duringdifferent growth periods
JI Qi-wu,HAN Ru-dan,DONG Kuan-hu
(College of Animal Science and Veterinary Medicine,Shanxi Agricultural
University,Taigu030801,China)
  Abstract:Fifteen local sheep fitted with permanent rumen fistula were selected to study the rumen degrada-
tion dynamics and the influence on ruminal environment of Bothriochloa ischaemumduring different growth pe-
riods by using the nylon bag technique.Results showed that the degradability of dry matter(DM)and crude
protein(CP)were highest in jointing stage,and the degradability of DM in jointing stage was significantly high-
er than other stages(P<0.05).The degradability of DM declined along with the growth and the degradability
of CP did not show a regular pattern.The concentration of NH3-N and total volatile fatty acid,acetate,propio-
nate,butyrate,valerate and isobutyrate showed a downward trend after the peak value(occurred after 4hours).
The concentration of NH3-N and total volatile fatty acid,acetate,propionate in jointing stage were significantly
higher than that in flowering period(P<0.05).The highest increment was in jointing stage,and the lowest in-
crement was in flowering period,which indicated that the jointing stage had the highest ruminal degradation
characteristics.It suggested that nylon bags filed with B.ischaemumin different growth periods could affect the
ruminal environment,and it was caused by the protein content and structure of B.ischaemumin different growth
periods.
  Key words:Bothriochloa ischaemum;growth stage;ruminal degradability;ruminal environment
22       GRASSLAND AND TURF(2015)            Vol.35No.5