全 文 ：［收稿日期］ 20120822(001)
［通讯作者］ * 王姿媛，硕士，副主任药师，从事医院药学研究，
Tel: 020-33398088， E-mail: wzyuan2004 @
163． com
HPLC测定了哥王药材中的槲皮苷含量
王姿媛1* ，胡惠兰2
( 1. 广州中医药大学第一附属医院，广州 510405; 2. 广州市中医医院，广州 510130)
［摘要］ 目的:建立高效液相色谱测定了哥王药材中槲皮苷含量的方法。方法:Kromasil C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5
μm) ，流动相乙腈-0. 5%磷酸水溶液(25∶ 75) ，流速 1. 0 mL·min －1，柱温为室温，检测波长 254 nm。结果:槲皮苷在 0. 112 ～
1. 008 μg与峰面积呈现良好的线性关系(r = 0. 999 1) ，回收率为 101. 38%，RSD 2. 78%;样品溶液在 24 h内稳定。结论:该测
定方法快速、简便、准确。
［关键词］ 了哥王;槲皮苷;HPLC
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)07-0127-03
［doi］ 10． 11653 /zgsyfjxzz2013070127
Determination of Quercitrin in Radix Wikstroemia indicae by HPLC
WANG Zi-yuan1* ，HU Hui-lan2
(1. The First Affiliated Hospital，Guangzhou University of Traditional
Chinese Medicine，Guangzhou 510405，China;
2. Guangzhou Chinese Medicine Hospital，Guangzhou 510130，China)
［Abstract］ Objective:To establish a method for the determination of quercitrin in Radix Wikstroemia
indicae． Method:HPLC was performed on Kromasil C18 column (4. 6 mm ×250 mm，5 μm)at room temperature;
the mobile phase consisted of acetonitrile-0. 5% phosphoric acid solution (25∶ 75)at a flow rate of 1. 0 mL·min －1，
and the detection wavelength was set at 254 nm． Result:The calibration curves of quercitrin were linear in the
range of 0. 112-1. 008 μg (r = 0. 999 1)． The average recovery of quercitrin was 101. 38% (RSD 2. 78%) ，and
the properties of sample solution kept steady within 24 hours． Conclusion:This method is simple，rapid，
accurate．
［Key words］ Radix Wikstroemia indicae;quercitrin;HPLC
了哥王又名南岭荛花、山雁皮、雀仔麻、地棉皮、
狗信药、九信菜［1］、毒除根、鱼胆根、红赤七［2］，来源
于瑞香科植物了哥王 Wikstroemia indica(Linnaeus)
C． A． Meyer的干燥根或根皮，功能清热解毒、散结逐
水，用于肺热咳嗽、痄腮、瘰疬、风湿痹痛、疮疖肿毒、
水肿腹胀等症［1］。有研究报道指出其含有黄酮、皂
苷、树脂酸、甾醇等化学成分，其中黄酮类化学物槲
皮苷为其主要有效成分之一［3-6］。现代药理研究表
明，槲皮苷具有抗氧化［7］、抗炎［8］、护肝［9］等作用。
然而，目前关于了哥王的质量标准研究的报道较少，
国内仅有少量关于对了哥王中西瑞香素［10-13］、芫花
素［14］的含量测定的报道。因此本文建立了哥王药
材中槲皮苷含量的 HPLC 测定方法，旨在为进一步
完善了哥王的质量评价体系提供参考。
1 材料
LC2000 高效液相色谱仪(上海天美科技仪器有
限公司) ，LC2030 紫外检测器，HITACHI L-2200 自
动进样器，HITACHI L-2130 PUMP，N2010 色谱工作
站，Kromasil C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，
LIBROR AEG-220 型电子分析天平，CQ-200 型超声
波清洗器(上海音波声电科技有限公司) ，DF-20 型
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2013 年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 7
Apr．，2013
流水式高速中药粉碎机(温岭市大德中药机械有限
公司)。
槲皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批
号为 111538-201110) ，了哥王样品(市场上收集的 3
批流通药材饮片) ，高效液相色谱用乙腈为色谱纯，
水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液制备 精密称取槲皮苷对照品
10. 00 mg，置于 25 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至
刻度，摇匀，即得 400mg·L －1的槲皮苷对照品储备
液。精密吸取槲皮苷对照品储备液 1. 4 mL，置于 10
mL棕色容量瓶中，加甲醇稀释并定容至刻度，摇
匀，即得 56 mg·L －1的槲皮苷对照品溶液。
2. 2 供试品溶液制备 取了哥王粉末(过 60 目
筛)0. 5 g，精密称定。置 50 mL具塞锥形瓶中，精密
加入 25 mL甲醇，称定质量，超声处理 30 min，取出，
放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，用
0. 45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
2. 3 色谱条件与系统适应性试验 Kromasil C18色
谱柱(4. 6 mm ×250 mm，5 μm) ，流动相乙腈-0. 5%
磷酸水溶液(25∶ 75) ，流速 1. 0 mL·min －1，柱温为室
温，检测波长 254 nm，进样量 10 μL。理论塔板数按
槲皮苷计应不低于 3 000。结果表明，在上述色谱条
件下，槲皮苷对照品溶液的色谱峰分离度良好。槲
皮苷对照品及供试品色谱图见图 1。
A. 对照品;B. 了哥王;1. 槲皮苷
图 1 槲皮苷对照品及了哥王 HPLC
2. 4 线性关系考察 分别精密吸取槲皮苷对照品
溶液 2，6，10，14，18 μL 进样，按上述色谱条件测定
峰面积，以测得峰面积为纵坐标，对照品进样量为横
坐标，绘制标准曲线，得回归方程 Y = 2 206 641. 518X
－ 96 614. 25(r = 0. 999 1) ，表明槲皮苷对照品在进
样量为 0. 112 ～ 1. 008 μg 与峰面积有良好的线性
关系。
2. 5 精密度试验 精密吸取槲皮苷对照品溶液
10 μL，按上述色谱条件重复进样 5 次，结果槲皮苷
峰面积的 RSD 0. 78%，表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于 0，
4，8，12，24 h 精密吸取 10 μL 进样测定，记录峰面
积，结果槲皮苷峰面积的 RSD 1. 05%，表明供试品
溶液在 24 h内稳定。
2. 7 重复性试验 称取同一了哥王药材粉末 5 份，
各 0. 5 g，精密称定。按 2. 2 项下方法制备供试品溶
液，分别精密吸取 10 μL，按上述色谱条件测定槲皮
苷含量。结果槲皮苷的平均含量为 1. 524 4 mg·
g －1，RSD 1. 33% (n = 5) ，表 明 该 方 法 重 现
性良好。
2. 8 加样回收率试验 取同一了哥王药材粉末 6
份，各 0. 125 g，精密称定。分别加入 400 mg·L －1槲
皮苷对照品 0. 49 mL，挥干溶剂，精密加入 25 mL甲
醇，称定质量，超声处理 30 min，取出，放冷，再称定
质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，用 0. 45 μm 微
孔滤膜过滤，分别精密吸取续滤液 10 μL 按上述色
谱条件测定，计算加样回收率，见表 1。
表 1 槲皮苷加样回收率试验
取样量
/ g
样品
含量
/mg
加入量
/mg
测得
总量
/mg
回收率
/%
平均
回收率
/%
RSD
/%
0. 125 3 0. 191 0 0. 196 0. 388 5 100. 77
0. 124 7 0. 190 0 0. 196 0. 389 5 101. 75
0. 124 9 0. 190 3 0. 196 0. 394 5 104. 14
101. 38 2. 78
0. 124 5 0. 189 7 0. 196 0. 382 1 98. 13
0. 124 8 0. 190 2 0. 196 0. 388 3 98. 55
0. 125 2 0. 190 8 0. 196 0. 396 5 104. 94
2. 9 样品含量测定 取 3 批不同产地的了哥王市
售药材粉末(过 60 目筛)各 0. 5 g，精密称定。按
2. 2 项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取对照
品溶液和供试品溶液各 10 μL 进样，按上述色谱条
件测定，计算，结果见表 2。
3 讨论
考察超声提取和加热回流提取槲皮苷的 2 种方
法，所测得的含量基本一致，故选用了操作简便的超
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表 2 样品槲皮素含量测定
No． 产地 来源 批号 槲皮苷含量 /mg·g － 1 RSD /%
1 广东广州 广州南北行中药饮片有限公司 090302E112 1. 524 4 1. 33
2 广东霞山 广东众康中药饮片有限公司 20110811 1. 280 7 1. 51
3 广西玉林 广西玉林华济中药厂 11010078 1. 391 7 1. 84
声提取法;同时也考察了超声处理 10，20，30，40，50
min的槲皮苷提取效果，发现超声 30 min 已能将了
哥王药材中的槲皮苷提取完全。综上分析，最后确
定供试品溶液的制备方法为甲醇超声处理 30 min。
实验中考察槲皮苷的最佳检测波长和最佳流动
相。取槲皮苷对照品溶液在 200 ～ 400 nm 进行扫
描，结果显示槲皮苷在 254 nm 处有最大吸收，故确
定检测波长为 254 nm。参照《中国药典》2010 年
版一部里有关槲皮苷含量测定方法，以乙腈-0. 5%
磷酸水溶液为流动相，考察多个比例，最后确定乙
腈-0. 5%磷酸 (25∶ 75)的比例最为为适合。
共考察了广东广州、广东霞山以及广西玉林 3
个不同产地的了哥王市售药材样品的槲皮苷含量，
结果显示了哥王药材的槲皮苷含量在 1. 28 ～
1. 52%，不同产地的了哥王药材中所含的槲皮苷含
量差异不大。本实验所建立的 HPLC含量测定方法
快速、简便、准确，可为日后制定了哥王药材的质量
标准，进一步完善了哥王的质量评价体系提供参考。
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［责任编辑 顾雪竹］
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