全 文 ：China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 19 中国药房 2011年第22卷第19期
藤黄科金丝桃属植物黄海棠（Hypericum ascyron L.）又名
红旱莲、湖南连翘等，为多年生草本植物，分布于我国东北地
区及黄河、长江和珠江流域。民间将其广泛用于止痛、抗菌消
炎、治疗创伤等[1]。黄海棠的化学成分和药理研究不是很多，
已有的研究证明其有良好的抗炎镇痛效果[2]；从中分离得到了
黄酮、口山酮和间苯三酚衍生物等化合物 [3～7]。山柰酚（kaem-
pferol）和槲皮素（quercetin）为黄海棠中黄酮类主要成分，具有
降压、降血脂及抗肿瘤等作用[8～11]。有研究用分光光度法对黄
海棠总黄酮含量进行了测定[12]，该方法操作复杂且只能测定总
黄酮含量。笔者在对该植物系统化学和药理作用的研究中，首
次采用高效液相色谱（HPLC）法同时测定了黄海棠中山柰酚和
槲皮素的含量，可为评价该药材质量及合理用药提供依据。
1 仪器与试药
LC-2010A型HPLC仪，包括 CLAS-VP色谱工作站、UV-
2010A检测器、自动进样器、柱温箱、四元低压梯度泵（日本岛
津公司）；KQ-500 DB型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限
公司）。
甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯；山柰
酚、槲皮素标准品（河南大学中药研究所自制，质量分数：
98％）；黄海棠全草于 2006年 6月采集于河南省栾川县，由河
南大学中药研究所生药教研室李昌勤副教授鉴定为藤黄科植
物黄海棠 H. ascyron L.，标本存放于河南大学中药研究所
（No. 06070103）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：Purospher Star RP-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流
动相：甲醇-0.025 mol·L-1磷酸水溶液（60 ∶ 40）；流速：1.0 mL·
min-1；柱温：25℃；检测波长：370 nm；进样量：10 μL。在此条
件下，槲皮素、山柰酚与其他成分的分离度R＞1.5，保留时间
适中，理论板数按山柰酚峰计算应不低于3 000。色谱见图1。
2.2 混合标准品溶液的制备
精密称取山柰酚标准品2.3 mg和槲皮素标准品1.0 mg，加
HPLC法同时测定黄海棠中山柰酚和槲皮素的含量Δ
张 伟 1，2＊，于海林 2，宋艳丽 2，康文艺 2 #（1.黄河科技学院，郑州市 450063；2河南大学中药研究所，开封市
475004）
中图分类号 R284.1；R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）19-1790-03
摘 要 目的：建立同时测定黄海棠中山柰酚和槲皮素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Purospher Star RP-C18（250
mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.025 mol·L-1磷酸水溶液（60 ∶ 40），流速为 1.0 mL·min-1，柱温为 25℃，检测波长为 370 nm。
结果：山柰酚、槲皮素进样量的线性范围分别为0.018 4～0.128 8 μg（r＝0.999 8）、0.008～0.064 μg（r＝0.999 9）；二者的平均加样回
收率分别为97.12％（RSD＝1.03％，n＝6）、96.51％（RSD＝1.32％，n＝6）。结论：本方法灵敏、准确、重复性好，可用于黄海棠的质
量控制。
关键词 黄海棠；高效液相色谱法；山柰酚；槲皮素；含量测定
Content Determination of Kaempferol and Quercetin in Hypericum ascyron by HPLC
ZHANG Wei（Huanghe College of Science and Technology，Zhengzhou 450063，China）
ZHANG Wei，YU Hai-lin，SONG Yan-li，KANG Wen-yi（Institute of Chinese Materia Medica，Henan Universi-
ty，Kaifeng 475004，China）
ABSTRACT OBJECITVE：To establish the method for the content determination of kaempferol and quercetin in Hypericum as-
cyron. METHODS：HPLC method was adopted. The separation was performed on Purospher Star RP-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）
column with mobile phase consisted of methanol-0.025 mol·L-1 phosphate（60 ∶ 40）at flow rate of 1.0 mL·min-1. The column tem-
perature was 25℃ and determination wavelength was set at 370 nm. RESULTS：The linear ranges of kaempferol and quercetin was
0.018 4～0.128 8 μg（r＝0.999 8）and 0.008～0.064 μg（r＝0.999 9）. The average recoveries were 97.12％（RSD＝1.03％，n＝6）
and 96.51％（RSD＝1.32％，n＝6）. CONCLUSION：The method is sensitive，accurate，and reproducible for the simultaneous deter-
mination of kaempferol and quercetin in H. ascyron.
KEY WORDS Hypericum ascyron；HPLC；Kaempferol；Quercetin；Content determination
Δ河南省科技厅重点攻关项目（102102310019）
＊讲师，硕士研究生。研究方向：中药活性成分。电话：0371-
66607902。E-mail：zzzwwwqq@126.com
#通讯作者：教授。研究方向：中药活性成分及新药研发。电话：
0378-3880680。E-mail：kangweny@hotmail.com
0 10 20 min
A
0 5 10 15 min
B
0 10 20 min
C
图1 高效液相色谱图
A.山柰酚标准品；B.槲皮素标准品；C.黄海棠；1.山柰酚；2.槲皮素
Fig 1 HPLC chromatograms
A. kaempferide control；B. quercetin control；C. H. ascyron；1.kaemp-
feide；2.quercetin
1 2
2 1
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中国药房 2011年第22卷第19期 China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 19
甲醇制成每1 mL含山柰酚0.009 2 mg和槲皮素0.004 0 mg的
混合标准品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
将干燥的黄海棠全草粉碎，过60目筛，精密称取粉末40.0
mg，置10 mL容量瓶中，精密加入50％甲醇水溶液8 mL，静置
12 h，超声（功率：500W，频率：80 kHz）提取 20 min，放冷，定容
至10 mL，摇匀，以微孔滤膜（0.45 μm）过滤，即得。
2.4 线性关系考察
精密吸取槲皮素和山柰酚混合标准品溶液适量，注入液相
色谱仪，测定峰面积。以进样量（X，μg）为横坐标，峰面积积分
值（Y）为纵坐标，制备标准曲线，得山柰酚的回归方程为 Y＝
3×106X－1 498.2（r＝0.999 8），进样量的线性范围为 0.018 4～
0.128 8 μg；槲皮素的回归方程为Y＝4×106X－199.3（r＝0.999 9），
进样量的线性范围为0.008～0.064 μg。
2.5 精密度试验
取山柰酚和槲皮素混合标准品溶液，连续进样 5次，每次
10 μL，测定峰面积。结果，山柰酚和槲皮素峰面积的RSD分
别为0.38％和1.19％（n＝5），表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取室温放置的同一批号的黄海棠供试品溶液，分
别于 0、2、4、6、8、10、12 h进样10 μL，测定峰面积。结果，山柰
酚和槲皮素峰面积的RSD分别为1.68％和1.03％（n＝7），表明
供试品溶液在 12 h内稳定。
2.7 重复性试验
精密称取同一批号样品 6份，每份 40 mg，分别按“2.3”项
下方法制备供试品溶液，各进样10 μL，测定峰面积。结果，山
柰酚和槲皮素峰面积的RSD分别为1.29％和1.44％（n＝6），表
明本方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
称取已知山柰酚和槲皮素质量分数的黄海棠粉末20 mg，
置于 10 mL容量瓶中，平行 6份，分别加入等量山柰酚和槲皮
素标准品，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件
测定质量分数，计算加样回收率，结果分别见表 1、表2。
表1 山柰酚的加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 1 Results of recovery test of kaempferol（n＝6）
取样量/g
0.040 0
0.040 6
0.039 6
0.038 8
0.041 2
0.038 8
样品含量/mg
0.061 6
0.062 5
0.061 0
0.059 8
0.063 4
0.059 8
加入量/mg
0.064 4
0.064 4
0.064 4
0.064 4
0.064 4
0.064 4
测得量/mg
0.123 2
0.125 8
0.123 9
0.122 8
0.125 7
0.121 9
回收率/％
95.65
98.26
97.70
97.90
96.66
96.51
x/％
97.12
RSD/％
1.03
表2 槲皮素的加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 2 Results of recovery rate of quercetin（n＝6）
取样量/g
0.040 0
0.040 6
0.039 6
0.038 8
0.041 2
0.038 8
样品含量/mg
0.061 6
0.062 5
0.061 0
0.059 8
0.063 4
0.059 8
加入量/mg
0.060 0
0.060 0
0.060 0
0.060 0
0.060 0
0.060 0
测得量/mg
0.119 0
0.120 1
0.118 5
0.117 0
0.122 0
0.118 9
回收率/％
95.62
95.90
95.92
95.46
97.57
98.61
x/％
96.51
RSD/％
1.32
2.9 样品含量测定
取不同批次样品，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶液，
按上述方法测定黄海棠中山柰酚和槲皮素的含量，结果见表3。
表 3 黄海棠中槲皮素与山柰酚的含量测定结果（g·g-1，n＝
3）
Tab 3 Content determination of quercetin and kaempferide
in H. ascyron（g·g-1，n＝3）
批号
1
2
3
山柰酚
含量/mg·g-1
0.001 54
0.001 53
0.001 55
x/mg·g-1
0.001 54
RSD/％
0.65
槲皮素
含量/mg·g-1
0.001 15
0.001 13
0.001 14
x/mg·g-1
0.001 14
RSD/％
0.88
3 讨论
3.1 流动相条件的选择
在选择分离条件时，曾选用甲醇-0.025 mol·L-1磷酸水溶
液和乙腈-0.025 mol·L-1磷酸水溶液等[13，14]不同系统进行洗脱，
结果表明，甲醇与磷酸水的体积比为 60∶40、流速为 1.0 mL·
min-1时分离效果最佳，山柰酚和槲皮素与其相邻峰的分离度＞
1.5，符合定量分析要求，且保留时间较短，分析较快。
3.2 提取条件的选择
山柰酚和槲皮素溶于含水的醇，在此基础上考察了体积
分数分别为 25％、50％、75％、100％的甲醇水溶液的提取效
果，结果发现体积分数为 50％的甲醇水溶液提取率最高。在
50％甲醇水溶液提取的基础上，又考察了提取时间10、20、30、
40 min，结果显示在 20 min时已经提取完全，因此采用体积分
数为50％的甲醇水溶液，提取20 min。
本试验首次建立了同时测定黄海棠中山柰酚和槲皮素含
量的方法。该方法灵敏、准确、重复性好，可用于黄海棠药材
的质量控制。
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（收稿日期：2011-02-28 修回日期：2011-03-29）
＊副主任药师。研究方向：医院药学。电话：0755-83923333-
8201。E-mail：fang.jing608608@yahoo.com
舒血宁注射液分别与5％葡萄糖注射液和果糖注射液配伍的稳定性考察
方 静＊，周学琴（北京大学深圳医院药剂科，深圳市 518036）
中图分类号 R283.611；R968 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）19-1792-02
摘 要 目的：考察舒血宁注射液分别与5％葡萄糖注射液和果糖注射液配伍后，混合液放置时间与药物稳定性的关系。方法：
模拟临床用药浓度，在室温（25℃）下将舒血宁注射液20 mL分别与250 mL 5％葡萄糖、果糖注射液配伍，放置0、1.0、1.5、2.5、3.5 h
后考察配伍液的性状、pH值、不溶性微粒与吸光度的变化。结果：舒血宁注射液分别与5％葡萄糖注射液、果糖注射液配伍后，性
状、pH值无明显变化，吸光度、不溶性微粒都存在着不同程度的变化。结论：在室温25℃时，舒血宁注射液与5％葡萄糖注射液配
伍后建议在1.5～2 h内使用；果糖注射液最好单独使用。
关键词 舒血宁注射液；5％葡萄糖注射液；果糖注射液；配伍稳定性
Comparison of the Compatible Stability of Shuxuening Injection in 5％ Glucose Injection and Fructose In-
jection
FANG Jing，ZHOU Xue-qin（Dept. of Pharmacy，Peking University Shenzhen Hospital，Shenzhen 518036，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To compare the relationship of mixture storage time with drug stability after Shuxuening injection
mixed with 5％ Glucose injection and Fructose injection. METHODS：At room temperature（25 ℃），Shuxuening injection 20 mL
was mixed with 5％ Glucose injection and Fructose injection 250 mL. The changes of property and pH value of mixture，insoluble
particle and absorbance were observed after 0，1.0，1.5，2.5，3.5 h. RESULTS：After mixing，property and pH value of mixture had
no significant change while insoluble particle and absorbance changed to some extent. CONCLUSION：At 25 ℃ Shuxuening injec-
tion can be mixed with 5％ Glucose injection，which is applicable within 1.5～2 h. It is better to use Fructose injection alone.
KEY WORDS Shuxuening injection；5％ Glucose injection；Fructose injection；Compatible stability
􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘
舒血宁注射液主要是由银杏叶加辅料乙醇制成的中药制
剂，具有扩张血管、改善微循环等作用，临床上常用于治疗缺
血性心血管疾病、冠心病、心绞痛、脑栓塞、脑血管痉挛等症。
该药常与 5％葡萄糖注射液配伍后通过静脉给药。作为葡萄
糖同分异构体的果糖，临床用途和用法也与葡萄糖相似，但果
糖的代谢不依赖胰岛素，因此糖尿病患者可将果糖作为葡萄
糖的替代品。但舒血宁注射液与果糖注射液配伍的稳定性相
关文献报道较少。为此，本试验模拟临床配药方法考察舒血
宁注射液分别与5％葡萄糖注射液、果糖注射液配伍后，2种混
合液放置时间与药物稳定性的关系并进行比较，观察配伍液
的性状、pH值、不溶性微粒、吸光度的变化，以为临床安全、有
效用药提供参考。
1 仪器与试药
UV-2401PC紫外分光光度计（日本岛津公司）；ZWF-J6激
光注射液微粒分析仪（天津天河医疗仪器研制中心）；pHS-3C
型酸度计（上海伟业仪器厂）；电热恒温水浴锅（上海精宏实验
设备有限公司）；BP211D电子天平（德国Sartorius公司）。
舒血宁注射液（万荣三九药业有限公司，规格：2 mL，批
号：0908271、0909193、0911131）；5％葡萄糖注射液（浙江济民
制药有限公司，规格：250 mL，批号：10030771）；果糖注射液
（江苏正大丰海制药有限公司，规格：250 mL，批号：1002071）。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备
2.1.1 5％葡萄糖注射液与舒血宁注射液配制 取 3瓶 250
mL5％葡萄糖注射液，另取3批舒血宁注射液各20 mL与之随
机配对。将供试品分成A、B、C、D4组，A组：250 mL5％葡萄
糖注射液（空白）；B组：20 mL舒血宁注射液（批号：0908271）+
250 mL5％葡萄糖注射液；C组：20 mL舒血宁注射液（批号：
0909193）+250 mL5％葡萄糖注射液；D组：20 mL舒血宁注射
液（批号：090911131）+250 mL5％葡萄糖注射液，模拟临床方
法配药。
2.1.2 果糖注射液与舒血宁注射液配制 取3瓶250 mL果糖
注射液，另取3批舒血宁注射液各20 mL与之随机配对。将供
试品分成 E、F、G、H4组，E组：250 mL果糖注射液（空白）；F
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