全 文 ：书·研究论文·
［基金项目］科技部２０１０年度科技型中小企业技术创新基金（编号：１０Ｃ２６２１４２０４５３４） ［作者简介］叶方，男，学士，副主任药师，研究方向：医
院药学，电话：０７１９－８８０１３９３，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｘｗｅｎ８８０１１２９＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ ［通讯作者］杜士明，男，主任药师，博士研究生，研究方向：中药资源及其品质
评价
鄂西北地区竹叶柴胡高效液相特征图谱分析
叶方１，杨光义１，杜士明１，黄良永１，杜婷１，孙荣进２ （１．湖北医药学院附属太和医院，湖北 十堰４４２０００；２．湖北医药
学院，湖北 十堰４４２０００）
［摘要］ 目的：建立鄂西北地区竹叶柴胡化学成分的 ＨＰＬＣ特征图谱，为竹叶柴胡的质量控制及品种鉴定提供依据。方法：
色谱条件为 Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ?Ｔ３色谱柱（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，３μｍ），流动相为乙腈－水，梯度洗脱，流速为０．８ ｍＬ·ｍｉｎ
－１，检测波
长为２０３ ｎｍ。结果：鄂西北地区竹叶柴胡化学成分特征图谱共检出８个分离度良好的共有峰。北柴胡、小柴胡特征图谱相似
度相差较小，竹叶柴胡地上部分、三岛柴胡特征图谱相似度相差很大。结论：该方法简便、快速，可作为竹叶柴胡药材的质量
控制和品种鉴别的有力手段。
［关键词］ 竹叶柴胡；特征图谱；质量控制；品种鉴别；高效液相色谱法
［中图分类号］Ｒ９３１．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１－５２１３（２０１３）０４－０２５７－０４
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍｆｒｏｍ ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ ａｒｅａ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ ｐｒｏｖ－
ｉｎｃｅ
ＹＥ Ｆａｎｇ１，ＹＡＮＧ Ｇｕａｎｇ－ｙｉ １，ＤＵ Ｓｈｉ－ｍｉｎｇ１，ＨＵＡＮＧ Ｌｉａｎｇ－ｙｏｎｇ１，ＤＵ ｔｉｎｇ１，ＳＵＮ Ｒｏｎｇ－ｊｉｎ２ （１．Ｄｅ－
ｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔａｉｈｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｕｂｅｉ Ｓｈｉｙａｎ４４２０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉ－
ｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｕｂｅｉ Ｓｈｉｙａｎ ４４２０００，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ，ｔｏ ｐｒｏ－
ｖｉｄｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｖａｒｉｅｔｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｆｉｏｎ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａ－
ｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ?Ｔ３（３μｍ，１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ）ａｎｄ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－ｗａｔｅｒ ｉｎ
ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０．８ ｍＬ·ｍｉｎ－１，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅ－ｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ２０３ ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ８ ｃｏｍ－
ｍｏｎ ｐｅａｋｓ ｉｎ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ ａｒｅａ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ
Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｒｅｇｉｏｎｓ．Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｖａｒｉｅｄ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｆｏｒ ｏｖｅｒｇｒｏｕｎｄ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍａｎｄ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｆａｌ－
ｃａｔｕｍ，ａｎｄ ｌｉｔｔｌｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ·ｃｈｉｎｅｎｓｅ ａｎｄ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｔｅｎｕｅ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ
ｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｆｅａｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ．
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ；ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ；ｖａｒｉｅｔｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ
中药柴胡药用历史悠久，《神农本草经》中就有
记载。而柴胡来源比较复杂，除多数为伞形科柴胡
属植物外，还有石竹科等其他科植物［１］。中国药典
规定伞形科植物北柴胡ＢｕｐＬｅｕｒｕｍ ｃｈｉｎｅｓｅ ＤＣ．或
狭叶柴胡ＢｕｐＬｅｕｒｕｍ ｓｃｏｒｚｏｎｅｒｉｆｏＬｉｕｍ ｗｉｌｄ．的
干燥根入药［２］，虽然没有明确收录竹叶柴胡 Ｂ．
ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ．，但我国的云南、贵州、
四川北部、陕西南部、湖北等多个地区均广泛使用，
资源调查结果显示鄂西北地区称为“北柴胡”的柴胡
药材实际均为竹叶柴胡，日本和韩国等地习惯使用
的三岛柴胡在我国湖北南漳等多个地区也有种植。
不同品种、不同产区的柴胡在临床随机使用会因为
化学成分或含量不同而影响临床应用效果，只根据
少数化学成分控制药材质量不符合中医药模糊性和
统一性的特性，利用中药特征图谱考察中药化学成
分以及各成分之间的差异能够比较科学地控制中药
材质量。通过对鄂西北地区竹叶柴胡特征图谱的考
察，可以为其质量控制、品种鉴别以及ＧＡＰ规范化
种植提供科学依据。
１ 材料
戴安ＵｌｔｉＭａｔｅＴＭ３０００型高效液相色谱仪（包括
四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器和
ｃｈｒｏｍｅｌｅｏｎ软件数据处理系统，美国戴安公司）；
ＡＵＷ１２０Ｄ型电子天平（岛津公司）；ＣＱＸ２５－０６型
·７５２·中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第４期Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２０１３ Ｆｅｂ，Ｖｏｌ ３３，Ｎｏ．０４
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2013.04.005
超声波震荡器（上海必能信超声有限公司）。
柴胡皂苷ａ对照品（中国食品药品检定研究院，
批号１１０７７７－２００４０６）；柴胡皂苷ｄ对照品（中国食
品药品检定研究院，批号１１０７７８－２００５０５）。
不同产地及品种柴胡样品见表１，并均经湖北中
医药大学中药资源和中药复方教育部重点实验室陈
科力教授鉴定。样品打粉，过４号筛备用。乙腈、甲
醇为色谱醇，水为自制超纯水，其他试剂均为分析纯。
表１ 柴胡样品及来源
Ｔａｂ １ Ｔｈｅ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍｓａｍｐｌｅｓ
样品编号 药材品种 拉丁名 样品产地 样品来源
１ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北保康高桥镇种植 湖北神农本草饮片有限公司提供
２ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北房县野人谷镇野生 湖北神农本草饮片有限公司提供
３ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 神农架野生 湖北神农本草饮片有限公司提供
４ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北丹江口凉水河镇野生 秋季采集
５ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北竹溪水平镇野生 秋季采集
６ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北竹山柳林镇野生 秋季采集
７ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北竹山官渡镇野生 秋季采集
８ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北郧县大柳乡野生 秋季采集
９ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北郧县鲍峡镇野生 秋季采集
１０ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北秭归县野生 湖北神农本草饮片有限公司提供
１１ 竹叶柴胡 Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 河南省内乡县夏馆镇野生 购于内乡夏馆镇药材收购店
１２ 竹叶柴胡（地上） Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ＷａＬＬ．ｅｘ ＤＣ． 湖北保康县高桥镇种植 秋季采集
１３ 北柴胡 Ｂ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ ＤＣ． 山西省运城县种植 湖北神农本草饮片有限公司提供
１４ 北柴胡 Ｂ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ ＤＣ． 甘肃野生 湖北神农本草饮片有限公司提供
１５ 三岛柴胡 Ｂ．ｆａＬｃａｔｕｍＬ． 湖北南樟种植 湖北神农本草饮片有限公司提供
１６ 小柴胡 Ｂ．ｔｅｎｕｅ Ｂｕｃｈ 湖北保康种植 湖北神农本草饮片有限公司提供
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件和系统适应性试验 Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎ－
ｔｉｓ? Ｔ３色谱柱（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，３μｍ），预柱（１０
ｍｍ×４．６ ｍｍ）；检测波长：２０３ ｎｍ；柱温：３０℃；以
乙腈为流动相 Ａ，以水为流动相 Ｂ，梯度洗脱（０
ｍｉｎ：２５％Ａ，７５％Ｂ；２５ ｍｉｎ：５０％Ａ，５０％Ｂ；３５ ｍｉｎ：
７０％Ａ，３０％Ｂ；４０ ｍｉｎ：８５％Ａ，１５％Ｂ；４５～６３ ｍｉｎ，
９０％Ａ，１０％Ｂ）；流速：０．８ ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量：１０
μＬ。竹叶柴胡药材和柴胡皂苷ａ、ｄ对照品的特征
图谱见图１，图２。
图１ 柴胡皂苷ａ、ｄ对照图谱图
Ｆｉｇ １ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｓａｉｋｏｓａｐｏｎｉｎ ａ ａｎｄ ｄ ｓｔａｎｄａｒｄｓ
图２ 柴胡药材特征图谱图
Ｆｉｇ ２ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍｓａｍｐｌｅｓ
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取柴胡皂苷ａ
（ＳＳａ）和柴胡皂苷ｄ（ＳＳｄ）适量，加甲醇制成每毫升
含柴胡皂苷ａ０．４９ ｍｇ和柴胡皂苷ｄ ０．５９ ｍｇ的溶
液，摇匀，０．４５μｍ微孔滤膜滤过即得对照品溶液。
２．３ 供试品溶液的制备 精密称取柴胡粉末（４号
筛）０．５ ｇ，置具塞锥形瓶中，加入５％浓氨试液的甲
醇溶液２５ ｍＬ，密塞，３０℃水温超声处理（功率２００
Ｗ，频率４０ ｋＨｚ）３０ ｍｉｎ，滤过，用甲醇２０ ｍＬ分２
次洗涤容器及药渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至
干，残渣加甲醇溶解，转移至５ ｍＬ量瓶中，加甲醇
至刻度，摇匀，用０．４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液，
即得。
２．４ 方法学考察
２．４．１ 精密度试验 取同一供试品溶液，按“２．１”
项下方法连续进样６次，记录特征图谱。将测量结
果采用国家药典委员会“中药指纹图谱相似度评价
系统（２００４Ａ版）”软件处理结果表明，其相似度均＞
０．９５，符合特征图谱技术要求，精密度良好。
２．４．２ 重复性试验 取同一样品６份，按“２．３”项
下方法制备供试品溶液，按“２．１”项下方法进样测
定。将测量结果采用国家药典委员会“中药指纹图
谱相似度评价系统（２００４Ａ版）”软件处理，结果表
明，其相似度均＞０．９５，符合特征图谱技术要求，重
复性良好。
２．４．３ 稳定性试验 取同一样品溶液在０、２、４、８、
１２ ｈ分别进样，依法测定。将测量结果采用国家药
典委员会“中药指纹图谱相似度评价系统（２００４Ａ
·８５２· 中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第４期Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２０１３ Ｆｅｂ，Ｖｏｌ ３３，Ｎｏ．０４
版）”软件处理，结果表明，其相似度均＞０．９５，表明
样品供试品溶液在１２ ｈ内检测对结果无影响，稳定
性良好。
２．５ 特征图谱相似性评价
２．５．１ 竹叶柴胡药材特征图谱的建立及对照特征
图谱的生成 按“２．１”项下色谱条件，对１～１１批竹
叶柴胡供试品进样分析，记录色谱图。利用“中药色
谱指纹图谱相似度评价系统（２００４ Ａ版）”软件，采
用自动匹配法生成共有特征图谱Ｒ 并分析各样品
之间共有峰和相似度，确定共有峰。结果发现１１批
供试品共有峰８个，见图３。各特征图谱与共有特
征图 谱 Ｒ 相 似 度 分 别 为０．９８６、０．７１２、０．７１２、
０．９６２、０．９２７、０．９５９、０．９４８、０．９５１、０．７６５、０．９４８、
０．６６３。通过保留时间定性可知２２．５２、２９．４３ ｍｉｎ时
分别为柴胡皂苷ａ、ｄ的色谱峰，２个色谱峰峰形较
好，且含量较高，均可作为参照峰，为用数字统一标
定不同采收期竹叶柴胡的特征图谱特征，将柴胡皂
苷ａ定为参照峰，设其相对保留时间和峰面积为１，
计算各共有峰对它的相对保留时间和相对峰面积，
结果见表２和表３。
表２ 竹叶柴胡特征图谱共有峰相对保留时间
Ｔａｂ ２ Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｆ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｐｅａｋｓ ｏｆ Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ
峰号
样品号
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ １１
ＲＳＤ／％
１ ０．３０９ ０．３１３ ０．３１４ ０．３０９ ０．３１１ ０．３１１ ０．３１０ ０．３１３ ０．３１４ ０．３１１ ０．３１０ １．０３
２ ０．７９３ ０．７９５ ０．７９６ ０．７９４ ０．７９４ ０．７９４ ０．７９４ ０．７９６ ０．７９７ ０．７９４ ０．７９３ ０．６２
３ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ ０．４８
４ １．３０８ １．３０３ １．３０２ １．３０６ １．３０５ １．３０５ １．３０５ １．３０１ １．３０３ １．３０４ １．３０７ ０．３２
５ １．８６９ １．８５１ １．８４９ １．８５９ １．８５７ １．８６０ １．８５７ １．８４８ １．８５４ １．８５５ １．８６７ ０．１３
６ ２．１１６ ２．０９５ ２．０９５ ２．１０６ ２．１０２ ２．１０５ ２．１０２ ２．０９３ ２．０９９ ２．０９９ ２．１１３ ０．１４
７ ２．１５５ ２．１３７ ２．１３９ ２．１５２ ２．１４７ ２．１４７ ２．１４４ ２．１３４ ２．１４２ ２．１４４ ２．１６０ ０．２０
８ ２．７１０ ２．６９４ ２．７０２ ２．７１２ ２．７０２ ２．７０８ ２．７０６ ２．７０１ ２．７０６ ２．６９４ ２．７１２ ０．３７
表３ 竹叶柴胡特征图谱共有峰相对峰面积
Ｔａｂ ３ Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｐｅａｋ ａｒｅａｓ ｏｆ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｐｅａｋｓ ｏｆ Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ
峰号
样品号
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ １１
ＲＳＤ／％
１ ０．１５４ ０．０８４ ０．１１８ ０．０７１ ０．１５４ ０．１１２ ０．０９１ ０．２６４ ０．２７１ ０．０９８ ０．１３９ ３４．８２
２ ０．１２５ ０．１３６ ０．１２１ ０．２７２ ０．２０４ ０．１４９ ０．０８２ ０．１４４ ０．１９４ ０．１０５ ０．１５４ ４１．８９
３ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ １．０００ ２９．３１
４ ０．９０７ ０．９０９ ０．９１２ １．０１０ １．２１６ ０．７９１ ０．７４１ ０．９６０ ０．６４３ １．０２４ ０．９３９ ３５．１４
５ ０．１９０ ０．１８１ ０．１８０ ０．２２６ ０．１７３ ０．２０６ ０．１２３ ０．２７２ ０．４９１ ０．１２１ ０．１９１ １６．１７
６ ０．２１８ ０．２６９ ０．２３７ ０．２３６ ０．２７８ ０．３５５ ０．２２６ ０．３６７ ０．８８５ ０．２１０ ０．１７６ ２０．１５
７ ０．３１７ ３．０５９ ３．０１２ ０．８１０ ０．２７８ ０．４１０ ０．２１０ ０．９７５ １．７００ １．０２６ ３．５１８ １０２．６１
８ ０．１９０ ０．６６０ ０．８５３ ０．３０１ ０．０９７ ０．２２９ ０．０６１ ０．２６０ １．３６８ ０．０６５ １．６１９ １２０．２９
由表２、表３可知，１１批竹叶柴胡各共有峰平均
相对保留时间的ＲＳＤ较小（０．１３％～１．０３％），而相
对峰面积的ＲＳＤ较大，说明竹叶柴胡药材特征图谱
中主要成分基本一致，但各成分含量有较大区别，证
明产区不同对竹叶柴胡的化学成分含量有明显影
响。
２．５．２ 聚类分析的结果 采用组间连接法（Ｂｅ－
ｔｗｅｅｎ－ｇｒｏｕｐｓ ｌｉｎｋａｇｅ）选取欧氏距离平方和作为样品
的测度，运用ＳＰＳＳ１６．０对竹叶柴胡药特征图谱数据
进行聚类分析，结果见图４。聚类分析将１１批竹叶柴
胡分为两类，湖北神农架林区、房县野人谷乡、郧县鲍
峡以及河南内乡的样本为一类，其他产地为另一类，
该结果与特征图谱的相似度分析结果相似。
２．５．３ 不同药用部位、不同品种柴胡之间的相似度
比较 按“２．１”项下色谱条件，分别将其他产地不同
品种的柴胡样品进行分析，记录色谱图。利用中国
药典“中药指纹图谱相似度评价系统Ｂ版”，将鄂西
图３ 鄂西北地区竹叶柴胡相似度比较
Ｆｉｇ ３ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｎ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｏｆ Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍｉｎ ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｈｕｂｅｉ
图４ 竹叶柴胡高效液相色谱法特征图谱聚类图
Ｆｉｇ ４ Ｈｉｅｒａｃｈｉｃａｌ ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｉｇｕｒｅ ｏｆ Ｂ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍｓａｍｐｌｅｓ
·９５２·中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第４期Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２０１３ Ｆｅｂ，Ｖｏｌ ３３，Ｎｏ．０４
北地区竹叶柴胡特征图谱生成的共有特征图谱Ｒ
导入，再将竹叶柴胡地上部分特征图谱、其他产地不
同品种柴胡药材特征图谱数据分别导入进行比较。
结果保康家种竹叶柴胡地上部分特征图谱与共有特
征图谱的相似度为０．１４１；山西、甘肃等地所产北柴
胡特征图谱与共有特征图谱的相似度分别为０．６３２、
０．８１９；湖北南漳种植的三岛柴胡特征图谱与共有特
征图谱的相似度为０．４３６；湖北保康种植的小柴胡特
征图谱与共有特征图谱比较相似度为０．７３５。
３ 讨论
对鄂西北地区柴胡资源分布情况调查表明，该地
区主要分布为竹叶柴胡，没有发现北柴胡，但本地柴
胡以“北柴胡”之名畅销国内外，获得较好的声誉。通
过对鄂西北地区及其临近的湖北秭归县、河南内乡县
等地１１批竹叶柴胡采用高效液相色谱法建立了特征
图谱，取得了较满意的研究结果，共标定了８个共有
特征峰。方法可靠，重复性、稳定性良好，为竹叶柴胡
的质量评价与开发利用奠定了一定的基础，也为竹叶
柴胡作为正品柴胡使用提供了理论依据。
根据分析结果，１１批竹叶柴胡特征图谱与共有
图谱之间的相似度相差较大，各共有峰的峰面积的
ＲＳＤ也较大，结合聚类结果说明同一品种柴胡不同
产区、不同批次化学成分含量有明显的区别。产生
这一现象的原因可能是样品采集的时间有差异和不
同的生长环境影响。王启帅等［３］研究了不同采收期
北柴胡指标性成分和变化情况认为不同采收期柴胡
中的各种成分含量有明显的差别。本研究中的柴胡
样本为８－１２月之间多次采集和收集，而不同地域
柴胡的生长周期也不相同，收集标本时有些样本还
在花期，有些已经结果，所以导致同一品种化学成分
含量的明显差异。也说明中药材在临床应用中以药
材质量作为用药剂量不够科学，将会直接影响临床
用药效果。只有通过ＧＡＰ种植，按照科学的管理、
科学的采收加工才能确保药材用药质量的优质、稳
定、可控。
竹叶柴胡地上部分的特征图谱与共有图谱的相
似度相差很大，说明不宜代替柴胡根使用。山西和
甘肃北柴胡、湖北保康种植的小柴胡的特征图谱与
共有图谱的相似度较高，品质也较为一致，也为竹叶
柴胡作为柴胡药用提供科学依据。但三岛柴胡的特
征图谱和竹叶柴胡共有图谱的相似性较低，相似度
低于０．５，说明不能混用。
在流动相的选择上，参照中国药典测定柴胡皂
苷ａ、ｄ含量的条件进行调整，同时综合考察了２１０、
２４０ ｎｍ［４］以及２０３ ｎｍ波长，结果２１０、２４０ ｎｍ检测
时各色谱峰不能很好地分离，而采用本条件基线平
稳、色谱分离较好、重复性也较好，可以作为竹叶柴
胡特征图谱条件。
参考文献：
［１］ 肖培根．新编中药志［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００２：７８４．
［２］ 中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：２６３－２６４．
［３］ 王启帅，李晓坤，杨云，等．不同采收期北柴胡指标性成分的动
态积累研究［Ｊ］．中药材，２０１０，３３（８）：１２０４－１２０７．
［４］ 李媛媛，秦雪梅，王玉庆，等．北柴胡皂苷类成分的特征（指纹）
图谱研究［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００７，２７（１１）：１５００－１５０３．
［收稿日期］２０１２－０６－２１
［基金项目］国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ．３０５７２３７２；Ｎｏ．３０９７３９４４）；江苏省医药高技术计划项目（编号：ＢＧ２００７６１４） ［作者简介］蒋艳
荣，女，硕士研究生，研究方向：中药药剂新剂型研究，电话：０２５－８５６０８６７２，Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｙａｎｒｏｎｇ０３＠１６３．ｃｏｍ ［通讯作者］贾晓斌，男，研究员，博
士生导师，研究方向：中药复方与新剂型研究，电话：０２５－８５６３７８０９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｏｂｉｎｊｉａ＿ｎｊ＠１２６．ｃｏｍ
酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ
蒋艳荣１，２，张振海１，孙娥１，陈玲玲１，２，崔莉１，２，贾晓斌１，２ （１．江苏省中医药研究院 中药新型给药系统重点实验室，
江苏 南京２１００２８；２．南京中医药大学，江苏 南京２１００４６）
［摘要］ 目的：研究酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法：采用β－葡萄糖苷酶酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ，以
宝藿苷Ⅰ得率为指标，通过单因素考察ｐＨ值、温度、反应时间及酶与底物质量比对宝藿苷Ⅰ得率的影响。结果：酶解反应的
最适条件为温度５０℃、ｐＨ５．０～５．５、反应时间７ ｈ、酶与底物质量比为１∶２０；以淫羊藿总黄酮计，宝藿苷Ⅰ收率为９．２５％。结
论：β－葡萄糖苷酶酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ，得率高、工艺简便可靠、反应条件温和，适合工业化生产。
［关键词］ 宝藿苷Ⅰ；淫羊藿总黄酮；β－葡萄糖苷酶
［中图分类号］Ｒ９５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１－５２１３（２０１３）０４－０２６０－０４
Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｏｈｕｏｓｉｄｅⅠｂｙ ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗｉｔｈβ－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ
·０６２· 中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第４期Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２０１３ Ｆｅｂ，Ｖｏｌ ３３，Ｎｏ．０４