全 文 ：HPLC波长切换法测定满山红中杜鹃素和槲皮素的含量
张朝绅　张振秋
【摘要】　目的　建立满山红中杜鹃素和槲皮素的含量测定方法 ,为满山红质量标准的研究提供科
学依据 。方法　采用高效液相色谱法同时测定满山红中杜鹃素和槲皮素的含量;色谱条件为 Diamonsil
C18 (250mm×4.6mm, 5μm)柱 ,以甲醇 -0.2%的磷酸溶液(58∶42)为流动相;检测波长为 0 ～ 10min299
nm, 10 ～ 20 min360 nm。结果　杜鹃素在 0.077 8 ～ 0.389μg、槲皮素在 0.018 8 ～ 0.169 2μg范围内线
性关系良好;杜鹃素平均加样回收率为 97.0%, RSD为 1.4%;槲皮素平均加样回收率为 98.0%, RSD为
1.3%。结论　本方法精密度高 ,分离度良好 ,可用于同时测定满山红中杜鹃素和槲皮素的含量 。
【关键词】　高效液相色谱法;满山红;杜鹃素;槲皮素
　　满山红为杜鹃花科植物满山红(foliumrhododendridauri-
ci)的叶 , 具有止咳 、祛痰的功效 , 用于治疗急 、慢性支气管
炎 [ 1] 。其主要有效成分为杜鹃素 、槲皮素等黄酮类成分 , 本
文采用高效液相色谱法同时测此两种成分的含量 ,为控制满
山红药材的质量提供科学的依据。
1　仪器与试药
1.1　Agilent1000(安捷伦公司);AR2140电子分析天平(奥豪
斯公司);杜鹃素对照品(批号 850-9802)、槲皮素对照品(批
号 100081-200406)。中国药品生物制品检定所提供。 甲醇为
色谱纯 , 水为重蒸馏水 , 其他试剂均为分析纯 , 满山红药材购
于河北安国 , 产地黑龙江。
1.2　色谱条件　色谱柱:DiamonsilC18色谱柱(250 mm×4.6
mm, 5 μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液(58∶42);波长切换
见表 1;柱温:30℃;流速:1 ml/min,进样体积 10μl。
表 1　检测波长切换表
时间(min) 0 ～ 10 10～ 20
波长(nm) 360 299
2　方法和结果
2.1　对照品溶液制备　精密称取在 120℃减压干燥至恒重
的杜鹃素对照品 7.78 mg,槲皮素对照品 1.88 mg, 分别置于
100ml量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀 ,即得。
2.2　分离条件的选择 [ 2] 　用甲醇一水作流动相 ,槲皮素和
杜鹃素不能获得良好的分离 ,而且峰有拖尾;在流动相中加入
0.2%磷酸溶液可使分离效果和峰型得到较大改善 ,同时试验
选用不同比例的甲醇和磷酸溶液分离槲皮素和杜鹃素 , 以磷
酸溶液和甲醇的比例为 42∶58(V/V)时样品中的槲皮素和杜
鹃素达到完全分离 , 故试验选用甲醇-0.2%的磷酸溶液
(58∶42)为流动相。色谱图见图 1、2、3。
2.3　供试品溶液制备 [ 1] 　精密量取药材粉末 1.007 5 g, 置
具塞锥形瓶中 , 精密加入 60%甲醇 50 ml,称定重量 , 超声处
理 15 min, 放冷 ,再称定重量 , 用 60%甲醇补足减失的重量 ,
滤过 , 即得。
2.4　线性关系考察　精密吸取杜鹃素对照品溶液 1、2、 3、 4、
5μl,注入高效液相色谱仪 , 以进样量为横坐标 , 峰面积积分
值为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 其回归方程为:Y=110.68X-
61.87, r=0.999 6;结果表明杜鹃素在 0.077 8 ～ 0.389 μg范
围内具有良好的线性关系;精密吸取槲皮素对照品溶液 1、 3、
5、 7、9 μl,注入高效液相色谱仪 , 以进样量为横坐标 、峰面积
积分值为纵坐标 , 进行线性回归 , 得回归方程分别为:Y=
36.08X-18.52, r=0.999 6;结果表明槲皮素在 0.018 8 ～
0.169 2μg范围内具有良好的线性关系。
3　方法学考察
3.1　精密度试验　精密吸取同一供试品溶液 10 μl, 重复进
样 5次 , 测定峰面积 , 计算得杜鹃素 RSD为 1.9%, 槲皮素
RSD为 2.9%,表明仪器精密度良好。
3.2　稳定性试验　精密吸取同一供试品溶液 10 μl, 分别于
0、2、4、6、8、10 h各进样 1次 ,测定杜鹃素峰面积 , 杜鹃素 RSD
为 1.6%, 槲皮素 RSD为 1.6%,表明供试品溶液在 10 h之内
稳定。
3.3　重复性试验　精密称取满山红样品 5份 , 每份约 1 g, 照
供试品溶液制备方法制备 , 测定杜鹃素及槲皮素含量 , 计算得
杜鹃素 RSD为 2.4%, 槲皮素 RSD为 2.7%,表明方法重复性
良好。
3.4　加样回收率试验　取已知含量药材 5份 , 每份约 0.5 g
(杜鹃素含量 1.354 6 mg/g;槲皮素含量 0.584 8 mg/g), 精密
称定 , 精密加入杜鹃素对照品溶液 10 ml和槲皮素对照品溶
液 7 ml(浓度为 0.047 mg/ml), 照供试品溶液制备方法制备 ,
求得平均回收率分别为 97.0%、98.0%;RSD分别为 1.4%
(n=5)、1.3%(n=5)。见表 2、 3。
表 2　杜鹃素加样回收率试验考察结果
试验号 称样量(g) 样品中杜鹃素含量(mg) 杜鹃素加入量(mg) 测定总量(mg) 回收量(mg) 回收率(%)
1 0.520 0 0.704 5 0.778 1.477 6 0.699 6 99.3
2 0.504 8 0.683 8 0.778 1.444 0 0.666 0 97.4
3 0.513 7 0.695 9 0.778 1.440 5 0.662 5 95.2
4 0.504 2 0.683 0 0.778 1.440 0 0.661 8 96.9
5 0.532 0 0.720 6 0.778 1.472 7 0.694 7 96.4
　　作者单位:116600 大连 ,辽宁中医药大学药学院
·59·中国实用医药 2008年 1月第 3卷第 3期　ChinaPracMed, Jan2008, Vol.3, No.3DOI :10.14163/j.cnki.11-5547/r.2008.03.024
表 3　槲皮素加样回收率试验考察结果
试验号 称样量(g) 样品中槲皮素含量(mg) 槲皮素加入量(mg) 测定总量(mg) 回收量(mg) 回收率(%)
1 0.520 0 0.304 1 0.329 0.634 0 0.305 0 100.3
2 0.504 8 0.295 2 0.329 0.615 9 0.286 9 97.2
3 0.513 7 0.300 4 0.329 0.624 9 0.295 9 98.5
4 0.504 2 0.294 9 0.329 0.616 2 0.287 2 97.4
5 0.532 0 0.311 1 0.329 0.630 5 0.301 5 96.9
4　样品测定
取三批药材各 1 g, 按样品制备方法制备供试品溶液 , 精
密吸取供试品溶液 10 μl, 注入高效液相色谱仪 ,按上述色谱
条件分别测定杜鹃素和槲皮素的含量 ,结果见表 4。
表 4　不同批次满山红药材中杜鹃素和槲皮素的含量
批次 杜鹃素含量(mg/g) 槲皮素含量(mg/g)
1 1.259 8 0.563 7
2 1.354 6 0.584 8
3 1.215 9 0.541 8
图 1　杜鹃素对照品高效液相色谱图　　图 2　槲皮素对照品高效液相色谱图　　图 3　供试品高效液相色谱图
5　讨论
本试验对三批满山红药材进行含量测定 , 结果表明三批
含量接近 , 表明该方法准确 、可靠。
通过对杜鹃素对照品和槲皮素对照品的紫外光谱的波长
扫描选择了各自的最大吸收波长作为高效液相的检测波长 ,
为了能够实现在其他色谱条件不变的情况下在两种成分各自
的最大吸收波长下测定两种成分的含量 ,我们选择了波长切
换方法 , 能够很好的达到实验目的。本试验采用高效液相色
谱法 , 同时测定满山红中两种黄酮的含量 , 进行多指标分析 ,
方法快速 、准确 、稳定 、方便可行 ,为控制穿心莲药材的质量提
供科学依据。
参　考　文　献
1　《中国药典》 2005年版一部.
2　潘馨.RP.HPLC测定几种闽产杜鹃中槲皮素的含量.药物分析杂
志 , 2002, 22(6):436-437.
中心静脉导管置管引流后注博莱霉素和白细胞
介素 -2治疗肺癌并大量恶性胸腔积液
梁永　刘航　龙健中　冯坚
【摘要】　目的　研究中心静脉导管置管引流后联合注博莱霉素和白细胞介素 -2在肺癌并大量恶性
胸腔积液治疗中的疗效和安全性 。方法　将 178例肺癌并大量恶性胸腔积液患者的随机分为三组:A组
60例 ,为实验组 ,胸腔注射博莱霉素和白细胞介素 -2治疗;B组 59例 ,为对照组 ,胸腔仅注射博莱霉素治
疗;C组 59例 ,为对照组 ,胸腔仅注射白细胞介素 -2治疗 ,观察各组的疗效和并发症及进行统计处理 。结
果　A组完全缓解率 28 /60(46.67%),有效率 54 /60(90.00%);B组完全缓解率 14/59(23.73%),有效
率 39 /59(66.10%);C组完全缓解率 13 /56(22.03%),有效率 37 /59(62.71%), A组有效率和完全缓解
率明显高于 B组 、C组 ,统计学处理有非常显著意义 。结论 　中心静脉导管置管闭式引流后胸腔注博莱
霉素和白细胞介素 -2治疗肺癌并大量恶性胸腔积液效果好 ,操作简单 、安全 , 改善了生活质量 , 值得
推广 。
【关键词】　恶性胸腔积液;中心静脉导管;博莱霉素;白细胞介素 -2
　　恶性胸腔积液是恶性肿瘤晚期的常见并发症 ,约 50%以
上的肺癌患者在疾病过程中将出现胸腔积液 , 一旦出现胸腔
积液 , 患者的生活质量将明显下降 , 中位生存时间不超 3个
月 [ 1] , 而在基层医院 ,常见到因延误治疗而导致的大量胸腔积
　　作者单位:537200 广西桂平市人民医院肿瘤科
液。为积极有效地治疗晚期恶性肿瘤所致的胸腔积液 ,减轻
患者痛苦 , 改善生活质量 [ 2] , 自 2003年 4月至 2007年 4月 ,
我们对部分大量恶性胸腔积液的患者 , 应用中心静脉导管置
管闭式引流后胸腔注博莱霉素及白细胞介素-2治疗 , 取得了
较为满意的疗效 , 现报告如下。
1　资料与方法
·60· 中国实用医药 2008年 1月第 3卷第 3期　ChinaPracMed, Jan2008, Vol.3, No.3