全 文 ：[基金项目 ] 　安徽省教育厅自然科学基金研究项目(2005kj200)
[作者简介 ] 　毕淑峰(1975-),男 ,硕士 ,讲师。 主要从事植物生
理与生化研究。
【调查报告】
永瓣藤氨基酸含量的检测与分析
毕淑峰 1 ,尚广群 1 ,李键 2 ,罗文琴 1
(1.安徽省黄山学院 , 安徽黄山　245041;2.牯牛降祁门保护站 ,安徽祁门　245600)
[摘要 ] 　目的:了解永瓣藤氨基酸的含量 ,并对不同部位氨基酸的含量进行比较。方法:利用氨基酸分析仪对永瓣藤氨
基酸含量进行测量。结果:永瓣藤含有 16种氨基酸 ,包括 7种必需氨基酸 、4种半必需氨基酸 、9种药效氨基酸;叶氨基酸
含量高于茎 , 而嫩茎氨基酸含量一般高于老茎。结论:永瓣藤氨基酸种类齐全 ,含量较丰富 , 必需氨基酸与总氨基酸的比
值合理 , 药效氨基酸占总氨基酸的比例高。因此 , 永瓣藤在医学和营养学上有很高的研究价值。
[关键词 ] 　永瓣藤;氨基酸;含量
[中图分类号 ] 　R917　　　　[文献标识码 ] 　B　　　　[文章编号 ] 　1004-8685(2007)05-0893-02
Detectionandanalysisofcontentofaminoacideinmonimopetalumchinese
BiShu-feng1 , ShangGuang-qun1 , LiJian2 , LuoWen-qin1
(1.HuangshanColege, Huangshan245041, China;2.GuniujiangProtectionStationofQimen, Qimen245600, China)
[ Abstract] 　Objective:Todeterminethecontentofaminoacideinmonimopetalumchineseandcomparethecontentindiferent
parts.Methods:Thedeterminationofthecontentofaminoacideinmonimopetalumchinesewasconductedbyautomaticamino
acideanalyzer.Results:Therewere16 kindsofaminoacidesincluding7 kindsofessentialaminoacides, 4 halfessentialamino
acidesand9kindsofdrug-efectiveaminoacides.Thecontentofaminoacidesinleaveswashigherthanthatinstems.Thecon-
tentofaminoacidesintenderstemswashighertnanthatinoldstems.Conclusion:Thekindofaminoacidesiscompleteandthe
contentofaminoacidesishigh.Theratiooftheessentialaminoacidstototalaminoacidsisreasonable.Theproportionofdrug-
effectiveaminoacidstototalaminoacidsislarge.Therefore, monimopetalumchinesehashighresearchvalueinthemedicineand
thenutriology.
[ Keywords] 　Monimopetalumchinese;Aminoacid;Content
　　永瓣藤(MonimopetalumchineseRehd.)原名祁藤 , 系卫矛
科永瓣藤属单型属藤本植物 [ 1] 。药理实验表明 , 永瓣藤全草
对 S180胜利水癌 、L615癌有显著的抑制作用;体外抑菌试验
证明其对金黄色葡萄球菌 、痢疾杆菌 、伤寒杆菌 、副伤寒杆菌 、
大肠杆菌 、绿脓杆菌均有不同程度的抑制作用;民间还用永瓣
藤治疗风湿性关节炎 , 为一味民间草药 [ 2] 。目前人们对永瓣
藤化学成分的研究较少 ,本文对永瓣藤氨基酸含量进行研究 ,
为了解永瓣藤的药用 、营养等价值及其资源开发提供科学依
据。
1　材料与方法
1.1　材料
从安徽省牯牛降自然保护区随机采集永瓣藤样品 , 样品
烘干后粉碎 、过筛 、装瓶保存备用。
1.2　仪器与方法
1.2.1　仪器　试验仪器主要有日本 Hitachi835 -50型氨基酸
自动分析仪 、MettlerToledo电子分析天平等。
1.2.2　方法　准确称取 200 mg粉碎后样品 , 放入水解管 , 加
6mol/LHCl15ml, 真空封管后置于 110℃ 恒温干燥箱水解
22 h, 过滤后定容至 50 ml,取 1 ml滤液在 40℃条件下减压蒸
干 , 用 1 mlpH2.2的缓冲液溶解 , 供仪器测定氨基酸用。
2　结果
2.1　永瓣藤氨基酸的含量
将永瓣藤氨基酸含量的测定结果列于表 1,永瓣藤含有 16
种氨基酸 , 氨基酸种类较齐全 , 各氨基酸含量范围为 0.34 ～
7.40 mg/g, 氨基酸含量存在较大的差异。 16种氨基酸包括 7
种必需氨基酸 、4种半必需氨基酸 、 9种药效氨基酸。其中天
门冬氨酸 、甘氨酸 、谷氨酸 、丙氨酸 、蛋氨酸 、亮氨酸 、丝氨酸 、
赖氨酸 、苏氨酸含量较高 ,占总氨基酸含量的 75.73%;而组氨
酸 、胱氨酸 、缬氨酸 、酪氨酸的含量较低 , 占总氨基酸含量的
9.62%。必需氨基酸总含量占总氨基酸含量的 39.54%, 药效
氨基酸含量占总氨基酸含量的 72.16%, 其中天门冬氨酸 、谷
氨酸 、蛋氨酸 、亮氨酸 、赖氨酸的含量较高 , 半必需氨基酸含量
占总氨基酸含量的 12.23%, 半必需氨基酸含量均较低。
(下转第 913页)
893中国卫生检验杂志 2007年 5月第 17卷 第 5期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology, May2007;Vol17　No5
119cfu/m、10-8 13 cfu/ml、 10-9 0.5 cfu/ml。 MPN确认浓度稍
大 , 说明 MPN计数更敏感。
表 1　加标菌悬液菌量计数结果
加标稀释 检验方法
3M法(cfu/ml) MPN(MPN/ml)
10-6 多不可计 ≥240
10-7 119(106/131) ≥240
10-8 13(10/15) 46
10-9 0.5(1/0) 2.3
2.2　加标后 4种培养基的检测结果
加标污染的样品利用 “食品卫生微生物学检验 李斯特菌
检验标准”修订稿进行检验 ,从表 2可见非加标样品均未检出
目标菌 , 10-6、 10-7两种较高浓度的样品在两种分离平板上是
一致的 , 检测效果很好 , 10 -8、10 -9两浓度 CH比 PAL检出率要
高 , 就是说 CH比 PAL选择性好。该标准总的检出率为
62.5%,如果去除非加标样品及低浓度加标样品 , 可达到非常
满意的检测效果。
3　讨论
该验证方案提供的用TSA-YE平板涂布法进行菌落计数
不可行 , 可能为 TSA-YE平板不适合李斯特菌的生长 ,因此很
表 2　样品加标后利用新国标法检测结果
样品名称 样品数量 分离培养基 0 10 -6 10-7 10-8 10 -9 合计
香肠　　 20(2份 /稀释度) PAL 0 2 2 2 1 7
CH 0 2 2 2 2 8
鲜猪肉馅 20(2份 /稀释度) PAL 0 2 2 0 0 4
CH 0 2 2 2 0 6
合计　　 0 8 8 6 3 25(62.5%)
　　PAL为 PALCAM分离平板 , CH为李斯特显色平板
难达到满意的效果。 3M法取样量为 1 ml, 并且受试验过程影
响小 , 因此结果较可靠。 MPN法要经过增菌 ,并且为 9管法 ,
因此方法更敏感 、确切。但在此方案中 MPN法只作为其他法
的确认试验 , 因此用 3M法计算结果。
通过验证该方法的最低检出限为 0.5cfu/25g～ 13 cfu/25g,
即在无杂菌污染的样品(香肠)中含目标菌 0.5cfu/25g可检出,
在杂菌污染高的样品(肉馅)中含目标菌 13cfu/25g可检出。
通过试验可见 , 该方法分离培养基的选择性强 , 并且目标
菌在该两种培养基上生长均有特点 , 菌落显色及其周围有晕
环。该方法的鉴定方面采用了半自动的 API试条 , 使方法规
范化 ,方法快速 、特异 , 避免了以往检测李斯特菌繁琐 , 检测时
间长 , 试验受很多菌株和试剂等的影响。
本次试验表明目标菌在 PAL上 24 h培养 ,无可疑菌生长但
48h目标菌清晰可见。因此建议方法中PAL培养时间改为 48h。
(收稿日期:2007-02-05)
(上接第 893页)
表 1　永瓣藤氨基酸的含量(mg/g)
叶 嫩茎 老茎 全草
天门冬氨酸 7.40 5.28 4.24 5.64
苏氨酸 3.33 1.24 1.14 1.90
丝氨酸 3.54 1.66 1.45 2.22
谷氨酸 8.15 3.42 2.80 4.79
甘氨酸 3.86 1.35 1.24 2.15
丙氨酸 3.97 1.66 1.45 2.36
胱氨酸 0.53 0.46 0.34 0.44
缬氨酸 1.82 0.52 0.37 0.90
蛋氨酸 1.18 3.21 2.69 2.36
异亮氨酸 2.79 1.14 1.03 1.65
亮氨酸 6.01 1.97 1.76 3.25
酪氨酸 1.93 0.73 0.62 1.09
苯丙氨酸 3.43 1.14 0.62 1.73
赖氨酸 4.29 1.35 1.14 2.26
组氨酸 1.61 0.83 0.52 0.99
精氨酸 2.90 1.04 1.55 1.83
总氨基酸 56.74 27.00 22.96 35.56
必需氨基酸 22.85 10.57 8.75 14.06
半必需氨基酸 6.97 3.06 3.03 4.35
药效氨基酸 40.01 19.90 17.07 25.66
2.2　永瓣藤不同部位氨基酸含量的比较
永瓣藤不同部位氨基酸含量存在很大的差异 , 除蛋氨酸
之外的各种氨基酸和总氨基酸 、必需氨基酸 、半必需氨基酸 、
药效氨基酸含量都是叶高于茎;除了精氨酸 , 其他各氨基酸含
量都是嫩茎高于老茎。叶中亮氨酸含量是嫩茎的 3.05倍 、老
茎的 3.41倍;叶中赖氨酸含量是嫩茎的 3.18倍 、老茎的 3.76
倍;叶中总氨基酸含量是嫩茎的 2.10倍 、老茎的 2.47倍;叶中
必需氨基酸含量是嫩茎的 2.16倍 、老茎的 2.61倍;叶中半必
需氨基酸含量均是嫩茎的 2.28倍 、老茎的 2.30倍;叶中药效
氨基酸含量是嫩茎的 2.01倍 、老茎的 2.34倍;而嫩茎中各类
型总氨基酸含量均高于老茎 , 但相差的幅度不大。
3　讨论
试验数据表明永瓣藤中多种必需氨基酸和药效氨基酸的
含量都较高 , 如药效氨基酸中的天门冬氨酸和谷氨酸含量处
于各种氨基酸含量的第一和第二位 , 必需氨基酸中的亮氨酸
和蛋氨酸含量处于各种氨基酸含量的第三和第四位。 必需氨
基酸与总氨基酸之比为 0.40,必需氨基酸所占比例较高 , 而且
完全符合 WHO/FAO提出的理想蛋白质必需氨基酸与总氨基
酸之比为 0.40的要求;药效氨基酸含量占总氨基酸含量的比
例高达 72.16%。氨基酸是人体必需的营养成分 ,许多氨基酸
还有特殊的药理作用 , 中草药中的氨基酸往往是治病的主要
有效成分或辅助成分。因此永瓣藤具有较高药用 、保健和营
养价值 , 具有一定的开发前景。
永瓣藤不同部位各种氨基酸和各类型氨基酸含量存在很
大的差异 , 其含量排序一般为叶 >嫩茎 >老茎;叶中必需氨基
酸占氨基酸的比例略高于茎 , 而叶中药效氨基酸占总氨基酸
的比例略低于茎。从氨基酸含量角度分析 , 叶的药用 、保健和
营养价值高于茎。
[参考文献 ]
[ 1] 傅立国.中国植物红皮书 [ M].第 1册.北京:科学出版社 , 1992.
[ 2] 谢平 ,朱盛华 ,冯育林 ,等.永瓣藤化学成分的研究(Ⅰ )[ J].江西
中医学院学报 , 2001, 13(4):159.
(收稿日期:2007-01-04)
913中国卫生检验杂志 2007年 5月第 17卷 第 5期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology, May2007;Vol17　No5