全 文 ：·36· Chinese Journal of Information on TCM Nov.2005 Vol.12 No.11
杭白芷香豆素组分解热镇痛抗炎作用的实验研究
王德才,李 珂,徐晓燕,苏雪慧
(泰山医学院药学院,山东 泰安 271000)
摘要：目的 观察杭白芷香豆素组分(CAD)的解热镇痛抗炎作用。方法 采用大鼠酵母致热法观察其解热作用,
用小鼠扭体法和热板法观察其镇痛作用,用小鼠耳廓肿胀法和大鼠足跖肿胀法观察其抗炎作用。结果 CAD 对酵母
引起的大鼠发热有显著解热作用；对热板所致小鼠疼痛和醋酸所致小鼠扭体反应均有显著抑制作用；并能对抗二
甲苯所致的小鼠耳肿胀和蛋清所致的大鼠足肿胀。结论 CAD 具有显著的解热镇痛抗炎作用。
关键词：杭白芷；香豆素类；解热；镇痛；抗炎
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2005)11-0036-02
Experimental Study on the Antipyretic-analgesic and Anti-inflammatory of Total Coumarins
from Radix Angelicae Dahurica WANG De-cai, LI Ke, XU Xiao-yan, et al (Taishan Medical College, Taian
271000, China)
Abstract：Objective To observe the antipyretic-analgesic and anti-inflammatory effects of total
coumarins from Radix Angelicae Dahurica (CAD). Method The rat febrile models were induced by
injecting dry yeast subcutaneously. The pain models were established by acetic acid and hot plate
in mice. The mouse and rat inflammatory models were caused with dimethylbenzene (auricle smear
method) and egg white (injection under the aponeurosis) respectively. Result CAD depressed the
fervescence by yeast effectively in rat, inhibited the pain caused by acetic acid and hot plate
evidently in mice. At the same time, it was found that the mouses ear edema induced by
dimethylbenzene and the rats hind paw edema induced by egg white were all significantly
suppressed by CAD. Conclusion CAD has notable antipyretic-analgesic and anti-inflammatory
effects.
Key words：Radix Angelicae Dahurica；coumarins；pyretolysis；analgesia；anti-inflammation
杭白芷系伞形科植物,是常用中药白芷的品种之一,气芳
香,味辛苦,根入药,具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功
效。现代药理研究表明,杭白芷主要活性成分是香豆素类和挥
发油类,具有解痉平喘、抗菌消炎、降低血压等药理活性[1-2]。
本实验观察了杭白芷中香豆素组分(CAD)的解热、镇痛和抗炎
作用,现报道如下。
1 实验材料
1.1 杭白芷及其香豆素组分的提取分离
杭白芷购自安徽亳州药材市场,经本院生药学教研室周红
英教授鉴定为伞形科植物杭白芷 Angelica dahurica (Fisch.
ex Hoffm.) Benth. et Hook. f. var. formosana (Boiss.)
Shan et Yuan.的干燥根。参照文献[3]方法提取分离香豆素
组分。取杭白芷 2.0 kg 粉碎过 40 目筛,以 95%乙醇浸 24 h
后,回流提取 3 次。合并滤液,回收乙醇后经水蒸气蒸馏去除
挥发油部分,残留物用乙醚萃取,适宜浓缩后,冰室放置过夜,
得粗结晶。将粗结晶用无水乙醇重结晶 2 次,得淡黄色结晶物
3.5 g,即为 CAD。该提取物难溶于水,易溶于乙醇和乙醚,不
易溶解于玉米油,经异羟肟酸铁反应证实为香豆素类化合物。
实验前以吐温-80 为助溶助悬剂,配成 0.5%、1.0%和 2.0%的
悬液供实验用。
1.2 药物与试剂
阿司匹林(ASP)片剂,西安博华制药有限责任公司,批号
0401012；氢化可的松,河南利华制药有限公司,批号 021002；
干酵母,湖北安琪酵母股份有限公司,批号 031206,临用前加
蒸馏水研磨,配成 20%的悬液供实验用。其它试剂均为市售国
产分析纯。
1.3 动物
昆明种小鼠,体重(20±2)g 和(28±2)g,♀♂兼用,山东
省生物制品研究所提供。Wistar 大鼠,♂,体重(200±20)g,
山东大学实验动物中心提供。
1.4 仪器
HSS-1 型数字式超级恒温水浴及热板测痛装置,成都仪
器厂生产；排水法鼠爪体积测定装置,自制。
2 方法与结果
2.1 对致热大鼠的解热作用[4]
大鼠于实验室[室温为(22±1)℃]适应 5 d,每日适应性
测肛温 2次,连续 2 d。正式实验前禁食 12 h,自由饮水,次晨
测肛温 2 次,间隔 1 h,取平均值为正常体温。选取 2 次温差
不超过 0.3 ℃,平均体温在 36.6～38.3 ℃的大鼠,于背部皮
下注射20%酵母悬液10 mL/kg。致热6 h后,取体温升高0.8 ℃
以上的大鼠 30 只,随机分为 4 组,分别给予 5%吐温-80(溶媒
对照组)、2%阿司匹林、1.0%和 2.0% CAD 悬液,药液经 37.5 ℃
水浴温化后,各组大鼠以 10 mL/kg 等容积灌胃给药。药后 1、
2、3、4、5 h 各测肛温 1 次。以正常体温为基数,计算各时
2005 年 11 月第 12 卷第 11 期 中国中医药信息杂志 ·37·
间点体温变化值。结果见表 1。 2.2 镇痛作用
表 1 CAD 对酵母所致发热大鼠体温的影响(—x±s)
药后体温变化
组别 n 剂量(mg/kg) 致热 6 h
温度变化 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h
溶媒组 7 1.61±0.46 1.76±0.36 1.72±0.49 1.65±0.51 1.62±0.61 1.56±0.57
ASP 组 7 200 1.62±0.45 1.31±0.41* 0.98±0.44** 1.02±0.49* 0.92±0.52* 1.06±0.53
CAD 组 8 100 1.61±0.41 1.32±0.45* 1.01±0.39** 0.96±0.45** 0.99±0.37* 0.92±0.39*
8 200 1.61±0.40 1.15±0.40** 0.80±0.44** 0.78±0.43** 0.72±0.38** 0.81±0.47**
注：与溶媒组比较,*P <0.05,**P ＜0.01；与 ASP 组或氢化可的松组比较,△P <0.05,△△P <0.01(下同)
2.2.1 热板法[4] 取体重(20±2)g 小鼠,♀,用超级恒温水
浴调节热板测痛装置温度为(55±0.1)℃,以小鼠舔后足为痛
阈时间,挑选 5～30 s 反应敏感稳定的小鼠 48 只,再重复 2
次测其正常痛阈,间隔 30 min,取平均值为给药前痛阈值。随
机分成 4组,各组小鼠分别等容量灌胃 5%吐温-80、1%阿司匹
林及 0.5%、1.0% CAD 悬液 20 mL/kg,每日 1 次,共 4 次。末
次给药后 0.5、1、1.5 h 分别同法测定各鼠痛阈,超过 60 s
无反应者以 60 s 计,按公式计算。结果见表 2。
痛阈提高百分率=(给药后平均痛阈值－给药前平均痛阈值)/给药前
平均痛阈值×100%
表 2 CAD 对小鼠热板致痛的影响(—x±s,n =12)
药后痛阈(s)
组别 剂量(mg/kg) 药前痛阈(s)
0.5 h 1 h 1.5 h
溶媒组 16.7±4.7 17.0±4.2(1.8) 16.5±4.2(-1.2) 17.0±5.2(1.8)
ASP 组 200 16.9±4.5 24.6±5.6(45.6)** 28.8±6.7(70.4)** 27.1±7.2(60.4)**
CAD 组 100 16.3±4.9 25.3±5.1(55.2)** 28.4±7.1(74.2)** 19.1±6.8(78.5)**
200 16.7±4.8 26.9±7.2(61.1)` 30.7±8.6(83.8)** 31.6±8.8(89.2)**
注：括号内数据为痛阈提高百分率
2.2.2 扭体法[4] 取体重(20±2)g小鼠60只,♀♂各半,随机
分为 4 组。给药方法、剂量、时间同 2.2.1 末次给药后 1 h,
各组小鼠均腹腔注射 0.6%醋酸 10 mL/kg,观察 20 min 内扭体
出现时间(疼痛潜伏期)和扭体次数,按公式计算。结果见表 3。
镇痛百分率=(溶媒组平均扭体次数－给药组平均扭体次数)/溶媒
组平均扭体次数×100%
表 3 CAD 对小鼠醋酸致痛的影响(—x±s,n =15)
组别 剂量(mg/kg) 疼痛潜伏期(min) 扭体次数 镇痛百分率(%)
溶媒组 5.4±2.6 48.3±12.1
ASP 组 200 7.1±2.8 18.1±8.2** 62.5
CAD 组 100 7.2±2.9 19.4±6.5** 59.8
200 8.5±3.2** 11.2±7.1**△ 76.8
2.3 抗炎作用
2.3.1 小鼠耳肿胀法[4] 取体重(28±2)g,♂,小鼠 40 只,
随机分为 4 组。给药方法、剂量和时间同 2.2.1。末次给药
30 min 后,每只小鼠左耳两面各涂二甲苯 10 µL 致炎。致炎
后 1 h 处死动物,沿耳廓基线剪下两耳,用直径 9 mm 打孔器取
两耳对称处的圆耳片,称重,以左右耳片重量差异表示肿胀度,
并按公式计算。结果见表 4。
肿胀抑制率=(溶媒组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/溶媒组平
均肿胀度×100%
表 4 CAD 对二甲苯所致小鼠耳廓炎症的影响(—x±s,n =10)
组别 剂量(mg/kg) 耳廓肿胀度(mg) 肿胀抑制率(%)
溶媒组 17.61±5.10
ASP 组 200 11.13±4.86** 36.8
CAD 组 100 10.26±5.23** 41.7
200 8.18±4.39** 53.5
2.3.2 大鼠足肿胀法[4] 取大鼠 32 只,随机分成 4组。分别
等容积灌胃 5%吐温-80、0.5%氢化考的松及 1%、2% CAD 悬液
10 mL/kg,每日 1 次,共 4 次。实验当日用排水法测大鼠左后
足容积,并于末次给药 30 min 后,给大鼠左后足跖皮下注射
10%蛋清 0.1 mL 致炎。致炎后 0.5、1、2、4、6 h 各测量鼠
足容积 1次,按公式计算。结果见表 5。
足肿胀率=(致炎后足容积－致炎前足容积)/致炎前足容积×100%
抑制率=(溶媒组平均足肿胀率－给药组平均足肿胀率)/溶媒组平均
足肿胀率×100%
表 5 CAD 对大鼠蛋清性足肿胀的影响(—x±s,n =8)
足肿胀率(%)
组别 剂量(mg/kg)
0.5 h 1 h 2 h 4 h 6 h
溶媒组 76.4±9.6 76.3±11.3 72.5±12.7 61.9±10.8 48.3±9.8
氢化可的松组 50 57.1±9.2(25.3)** 40.3±10.9(47.2)** 31.6±10.3(56.4)** 28.5±11.6(54.0)** 18.3±10.5(62.1)**
CAD 组 100 66.5±8.7(13.0)*△ 56.6±9.6(25.8)**△△ 50.4±10.1(30.5)**△△ 41.8±10.7(32.5)**△ 32.2±11.9(33.3)**△
200 60.2±10.2(21.2)** 50.1±12.7(34.3)** 39.3±10.6(45.8)** 34.2±12.4(44.7)** 22.6±11.7(53.2)**
注：括号内数据为足肿胀抑制率 (下转第 52 页)
·52· Chinese Journal of Information on TCM Nov.2005 Vol.12 No.11
2.5 线性关系的考察
称取红景天苷对照品 12.5 mg,置 10 mL 容量瓶中,加水
溶解并稀释至刻度,得每 1 mL 含 12.5 mg 的红景天苷对照品
溶液。精密吸取红景天苷对照品溶液 2、4、6、8、10 µL,
注入高效液相色谱仪,测定峰面积依次为：559857、1232462、
1862457、2548324、3182426；以峰面积积分值为纵坐标,以
对照品浓度为横坐标,绘制标准曲线。结果表明,红景天苷在
2.5～ 12.5 µg 范围内呈线性关系 ,其回归方程为：
Y=262440C -91194.8,r =0.9999。
2.6 稳定性试验
取供试品溶液,分别于配制后 0、1、2、4、8、16、24 h
测定,红景天苷峰面积依次为：1361634、13587112、1370025、
1364238、1381201、1368925、1358984。结果表明在 24 h
内基本稳定。
2.7 精密度试验
精密吸取上述对照品溶液,重复进样 5 次,按本文含量测
定方法进行,峰面积依次为：2493346、2520482、2574364、
2476254、2521626；求得相对标准偏差 RSD=1.32%。
2.8 重现性试验
按本文含量测定方法,对同一批样品(批号 960202)测定
5 次,红景天苷含量(mg/mL)依次为：3.327、3.281、3.316、
3.263、3.297,求得 RSD=0.78%。
2.9 回收率试验
采用加样回收法,精密量取已知含量的同一批(批号
960202)样品 10 mL,分别精密加入一定量的红景天苷对照品,
按上述方法进行测定。结果见表 1。
3 讨论
3.1 检测波长的选择
取对照品适量,分别加流动相使溶解,经紫外光谱测定,
红景天苷在 224.0 nm 和 278 nm 处有最大吸收,故选择 278 nm
表 1 红景天苷回收率试验结果
样品中红景天
苷含量(mg)
加入红景天
苷量(mg)
测得红景天
苷量(mg)
检出红景天
苷量(mg)
回收
率(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
33.21 20.00 52.73 19.52 97.60
33.21 25.00 57.41 24.20 96.80
33.21 30.10 62.84 29.63 98.44 98.23 1.12
33.21 40.10 72.76 39.55 98.63
33.21 50.20 83.26 50.05 99.70
作为测定吸收波长。
3.2 流动相的选择
曾选用乙腈-水(5∶95)、乙腈-水(20∶80)、甲醇-水-
冰醋酸(8∶90∶2)作为流动相,其中乙腈-水(5∶95)的红景
天苷分离效果好,可达到基线分离。
3.3 提取溶剂的确定
由于大株红景天中所含红景天苷可溶于水和乙醇等溶剂,
因此,我们选用水及 40%、60%、80%乙醇加以比较。取大株红
景天根块,粉碎成粗粒,分别取 4 份(各 100 g),1 份用水提 3
次,每次 2.0 h；另 3 份分别用上述各浓度的乙醇回流提取 3
次,每次 1 h,溶媒量均为药材的 8 倍。水煎液减压浓缩成浸
膏,醇提液回收乙醇并浓缩成浸膏,比较几种溶媒提取红景天
苷的提取量。结果显示,水和不同浓度的乙醇作溶媒提取无统
计学差异,考虑到用乙醇提取成本高,故选择水作为提取溶
剂。
参考文献：
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[3] 中国科学院中国植物志编委会.中国植物志(34 卷第 1 分册)[M].北
京：科学出版社,1984.161.
(收稿日期：2005-05-08)

(上接第 37 页)
3 讨论
杭白芷主要含有香豆素类和挥发油等成分。有资料表明,
杭白芷煎剂 8～15 g(原药材)/kg 灌胃,对蛋白胨皮下注射于
家兔背部造成的高热模型有明显解热作用,并能减少醋酸所
致小鼠的扭体反应,也可抑制二甲苯所致的小鼠耳部炎症[1]。
实验结果表明,100、200 mg/kg 的 CAD 对干酵母引起的大鼠
发热有显著解热作用,显著提高小鼠热板法的痛阈值,抑制醋
酸所致的小鼠扭体反应,并显著抑制二甲苯引起的小鼠耳廓
肿胀,作用强度与阿司匹林相当,甚至优于阿司匹林,且具有
作用时间较长的特点。100 mg/kg CAD 对大鼠蛋清性足跖肿
胀模型也有显著抑制作用,但较 50 mg/kg 氢化可的松弱,200
mg/kg CAD 作用强度则近似于氢化可的松。由此可见,CAD 具
有显著的解热镇痛抗炎作用。同时,实验也表明,香豆素类化
合物是中药白芷解热镇痛抗炎的主要有效成分,可能是其治
疗多种炎症性疾病和疼痛的药理学基础。
杭白芷中主要以 6,7-呋喃型香豆素类为主,如欧前胡素
(imperatorin)、异欧前胡素(isoimperatorin)、氧化前胡素
(oxypeucedanin)、比克白芷素(byak-angelicin)、比克白芷
醚(byak-angelicol)等,总香豆素类含量可达 0.2%～1.2%。
本实验所用的 CAD 可能同时含有上述成分,何种成分为主、何
种成分的解热镇痛抗炎作用最强及其作用机制,还有待于进
一步研究。
参考文献：
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生出版社,1994.713－731.
(收稿日期：2005-04-21)