全 文 ：JO URNAL OF ZHEJIA NG CO LLEGE OF TRADITIONAL CHINESE M EDICINE Vol.33 No.4 June.2009 中 药 研 究
乌蕨不同部位总黄酮和元素的分析
　　吴晓宁1 , 2 　张春椿1
1.浙江中医药大学　杭州　310053　2.浙江医学高等专科学校
摘要:[ 目的] 比较乌蕨全草 、根 、茎 、叶等不同部位总黄酮和元素的含量差异。[方法] 采用可见分光光度法测定不同部位总黄酮
的含量;采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES 法)测定不同部位元素的含量。[ 结果] 乌蕨全草 、根 、茎 、叶等不同部
位总黄酮含量分别 11.89%、4.47%、3.46%和 11.75%,不同药用部位元素的含量存在一定的差异。[ 结论] 乌蕨含有丰富的黄
酮类化合物和多种元素 ,具开发价值。
关键词:乌蕨;不同部位;总黄酮;元素
中图分类号:R284.1　文献标识码:A　文章编号:1005-5509(2009)04-0587-02
Comparison of the Content of General Flavone and Elements in the Different Parts of StenolomaChusanum(L.)ChingWu Xiaoning1 , 2 ,
Zhang Chunchun2 1.Zhejiang Chinese Medical University ,Hangz hou(310053),China;2.Zhej iang Medical College
Abstract:[ Objective] Comparison of the content of general flavone and elements in the diffe rent par ts of Steno loma chusanum(L.)
Ching .[ Methods] Total flavone was determined by vis spectropho tomete r.Elements w ere determined by inductively coupled plasma-
atomic emission spectrometry (ICP-AES).[ Results] The contents of general flavone in the diffe rent parts of Stenoloma chusanum
(L .)Ching are respectively 11.89%, 4.47%, 3.46%and 11.75%.And there are some diffe rences in the contents of elements be-
tween the diffe rent par ts.[ Conclusion] There are abundant elements and general flavone in the different parts of Stenolom a chusa-
num(L .)Ching.As the result reveals that Stenoloma chusanum(L.)Ching is very valuable.
Key words:Stenoloma chusanum(L .)Ching;diffe rent par ts;general F lavono ids;e lement
　　乌蕨[ S teno loma chusanum(L.)Ching]为鳞始
蕨科植物乌蕨的全草 ,又名野鸡尾 、金花草 、中华金
粉蕨 ,具有清热 、解毒 、利湿 、止血的功效[ 1] 。本文就
乌蕨全草 、根 、茎 、叶等不同部位的总黄酮和微量元
素含量进行比较分析 ,为乌蕨的进一步研究和资源
开发提供依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器　WND-200A 型高速中药粉碎机(上海微
型电机厂),BS224S精密电子天平(北京赛多利斯仪
器系统有限公司), TU-1900双光束紫外可见分光光
度计(北京普析通用仪器有限公司), IRIS/AP 型电
感耦合等离子体发射光谱仪(美国 TJA 公司),全自
动回流消化仪(重庆南岸玻璃仪器厂)。
1.2　试药 　芦丁标准品(中国药品生物制品检定
所 ,批号为 0080-9705);硝酸 、高氯酸均为优级纯 ,
其他试剂均为分析纯 ,测微量元素用水为双蒸水。
乌蕨药材于2008年10月采于杭州九溪 ,经熊耀康教
授鉴定为乌蕨 S teno loma chusanum(L.)Ching 的地
上部分 ,阴干 ,粉碎 ,备用 。
2　实验方法与结果
2.1　总黄酮含量测定[ 4]
2.1.1　对照品溶液的制备:精密称取 105℃干燥恒
重的芦丁对照品 16.50mg ,加 60%乙醇溶解定容于
50ml容量瓶 ,得浓度为 0.33mg/ml对照品溶液 ,备
用 。
2.1.2　供试品溶液的制备:定量称取乌蕨干燥粗粉
5.0g ,加 16倍量 0.1%HCl-60%乙醇回流提取 4h ,
提取 1 次 , 提取液减压浓缩 , 加 60%乙醇定容至
25ml ,作为供试品溶液备用 。
2.1.3　标准曲线的制作:精密吸取标准品溶液 0.5 、
1.0 、1.5 、2.0 、2.5 、3.0ml ,分别置 25ml容量瓶中 ,加
入 5%NaNO2 1.0ml ,摇匀 ,放置 6min 后加入 10%Al
(NO 3)3 1.0ml , 摇匀 , 放置 6min 后加入 4%NaOH
10ml ,再加 60%乙醇稀释至刻度 ,混匀 ,静置 15min ,
于 510nm 处 ,以相应试剂作空白 ,测定吸光度 ,以芦
丁浓度为纵坐标 ,以吸光度值为横坐标 ,绘制标准曲
线 ,得回归方程:Y=2.778X-0.0775(r =0.9991),
结果表明芦丁在 0.016 ～ 0.99mg 范围内呈良好的线
性关系 。
2.1.4　精密度实验:取芦丁对照品溶液 2.0ml ,置
25ml容量瓶中 ,按“2.1.3”项操作 ,平行测定 5 次 ,结
果其 RSD为 0.21%,表明精密度良好。
2.1.5　重复性实验:取同 1份样品溶液 5份 ,分别按
“2.1.3”项操作 ,结果 RSD为 0.72%。
587　浙江中医药大学学报 2009年 6月第 33卷第 4期
DOI :10.16466/j.issn1005-5509.2009.04.044
吴晓宁 ,等:　乌蕨不同部位总黄酮和元素的分析
2.1.6　稳定性实验:取 1份样品溶液 ,按上述实验
方法在显色完全后 0 、10 、20 、30 、45 、60min分别测定
吸光度 ,结果 RSD 为 1.08%。实验表明:供试品溶
液在 1.0h内稳定的。
2.1.7　加样回收率实验:取已知总黄酮含量的乌蕨
样品 6份 ,分别精密添加已知浓度的芦丁对照品适
量。按供试品溶液制备方法制备 ,按“ 2.1.3”项操
作 ,测定总黄酮含量 ,计算测定回收率 ,结果平均回
收率为 99.34%, RSD为 1.82%。
2.1.8　乌蕨不同部位总黄酮含量的测定:精密吸取
提取液适量 ,按“2.1.3”项操作 ,测定吸光度 A ,结果
见表 1。
表 1　乌蕨根 、茎 、叶、全草等不同部位
总黄酮含量测定结果(n=3)
部位 根 茎 叶 全草
含量(mg/g) 4.47 3.46 11.75 11.89
2.2　微量元素含量的测定[ 5]
2.2.1　供试品溶液的制备:各取药材约 0.5g ,精密
称定 , 置 50ml 凯氏烧瓶 , 加 8.0ml 消化液 [ V
(HNO3)∶V(HClO4)=4∶1] ,静置过夜 ,加热回流
消化至无色透明 ,冷却后 ,定量转移至100mL 容量瓶
中 ,加超纯水稀释至刻度 ,摇匀 ,备用。取相同体积
的消化液 ,同法消化 ,制备空白溶液 。
2.2.2　混合标准溶液的制备:分别取各重金属元素
标准品溶液适量 ,用 5%硝酸溶液制成混合溶液 ,梯
度稀释 ,作为混合标准品溶液备用 。
2.2.3　测定方法:仪器工作参数:检测器 CID 的低
波段(<265nm)积分时间:15s;高波段(>265nm)积
分时间:5s;进样蠕动泵转速:100r/min;进样雾化器
氩气压力:28psi;辅助气流量:1.0L/min;高频发生
器功率:1500W;样品冲洗时间:5s;测定波长范围:
193.7 ～ 407.7nm 。
依次将仪器的进样管插入各个浓度的混合标准
品溶液中进行测定 ,以每一浓度测得的 3 次读数的
平均值为纵坐标 ,相应元素标准溶液浓度为横坐标 ,
作标准曲线 ,并进行方法学考察。由各元素的标准
曲线计算微量元素的含量 ,测定结果见表 2。
3　讨论
3.1　由实验可知 ,乌蕨全草 、根 、茎 、叶等不同部位
总黄 酮 含 量分 别 11.89%、 4.47%、 3.46%和
11.75%,总黄酮含量在叶中较高 ,而根与茎中总黄
酮含量较低 。乌蕨富含黄酮类化合物 ,而黄酮类化
合物在临床上具有预防血液类疾病 、治疗冠状动脉
硬化 、抗癌 、抗菌 、抗衰老 、抗糖尿病等作用 ,食品上
作为甜味剂 、天然色素等食品添加剂 。因此提取乌
蕨中的黄酮类化合物 ,不单可以用于临床药物的研
究 ,也可用于食品与工业方面。
表 2　乌蕨根 、茎 、全草 、叶等不同部位
微量元素含量测定结果(μg/g)
部位
含量　　　 根 茎 全草 叶
Na 352.84 220.30 547.7 208.7
As 2.61 - 1.07 0.2484
B 2.41 4.91 5.511 0.2257
Ca 504.5 601.89 1839.31 442.5
Cd 0.30 0.74 0.1636 0.1784
Co 0.514 0.12 0.5330 0.6949
Cr 11.34 1.13 0.3460 0.256
Cu 38.17 7.31 8.564 6.244
Fe 150.7 93.09 300.94 126.3
H g - - 0.03302 0.02089
K 5295.53 5295.53 6136 5416
Zn 120.82 14.87 470.5 560.6
Mn 111.90 183.53 218.9 259.1
Mo 0.14 0.11 0.4229 0.0837
Sn 0.20 1.00 - -
Ni 1.464 1.21 1.403 1.833
P 595.37 461.5 711.98 596.7
Pb 19.77 2.15 2.096 2.741
S 667.90 464.6 799.84 406.2
Se - - - -
Si - - - -
　　“ -”表示未检出 ,小于表 2中对应元素的检出限
3.2　元素测定结果表明 ,乌蕨全草 、根 、茎 、叶等不
同部位均含有丰富的微量元素 ,其中含B 、Ca、K 、Na 、
P 、S等多种常量元素;此外还含 Cu 、Fe 、Zn 、Cr 、Co
等多种人体必需的微量元素 。其中 K 、Fe 、Ca、Na等
元素含量均较高 ,其次为 Mn 、Zn 、Cu 。而有害元素
Pb 、A s 、Cu在地上部分含量较低 ,根中 Pb 、A s 、Cu含
量都高出了《药用植物及制剂进口绿色行业标准》
(Hg≤0.2μg/g 、Pb ≤5.0μg/g 、As≤2.0μg/g 、Cd≤
0.3μg/g 和 Cu≤20.0μg/g),可能是由于本身的沉积
或者土壤受到污染造成。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院.中药大辞典(上册)[ S] .上海:上海人民
出版社 , 1985:157-158.
[ 2] 　马莺 ,王静.功能性食品活性成分测定[ M] .北京:化学
工业出版社 , 2005:253.
[ 3] 　吴巧凤 ,曾晓艳.苏州荠苧总黄酮与微量元素含量的测
定[ J] .广东微量元素科学 , 2004 , 11(9):34-37.
(收稿日期　2008-03-15)
588 浙江中医药大学学报 2009年 6月第 33卷第 4期