全 文 ：2011 年 9 月第 31 卷第 9 期
Sep． 2011 Vol． 31 No． 9
湖 南 中 医 药 大 学 学 报
Journal of TCM Univ． of Hunan
〔收稿日期〕2011－03－11
〔作者简介〕陈 征（1969-），男，湖南长沙人，副主任药师，主要从事中药及中药材检验与质量标准研究。
狗脊饮片不同炮制品中原儿茶酸的含量测定
〔摘要〕 目的 通过对狗脊饮片不同炮制品中原儿茶酸的含量测定，探讨狗脊饮片不同炮制品的内在质量。 方法
采用 HPLC，色谱柱：Hypersil ODS C18（4.6 mm×100 mm，5 μm）；流动相为 1%冰醋酸溶液-乙腈(95∶5), 检测波长：260
nm；柱温：25 ℃；流速 :1.0 mL/min。 结果 狗脊片、烫狗脊片、蒸狗脊片中原儿茶酸的含量分别为 0.028%、0.040%、
0.051%，3 组间比较，P<0.05,差异有统计学意义。 结论 蒸狗脊片中原儿茶酸含量最高。
〔关键词〕 狗脊；原儿茶酸；HPLC；含量测定
〔中图分类号〕R284.1 〔文献标识码〕B 〔文章编号〕doi:10.3969/j.issn.1674－070X.2011.09.010.038.02
Determination of protocatechuic acid contents
in different processed products of Rhizoma Cibotii
CHEN Zheng, LI Wen-li, TONG Ke
(Hunan Institute For Drug Control, Changsha, Hunan 410001, China)
〔Abstract〕 Objective To determine the contents of the protocatechuic acid in the different
prepared slices of Rhizoma Cibotii for evaluation of the quality of different processed products of
Rhizoma Cibotii. Methods The HPLC separation was performed with Hypersil ODS C18 (4.6 mm×
100 mm, 5 μm) column, a mixture acetonitrile and 1% glacial acetic acid (5 ∶95）solution as
the mobile phase and a flow rate of 1.0 mL ／min. The detection wavelength was 260 nm and
the column temperature was 25 ℃ . Results The content of protocatechuic acid in the prepared
slices, hot fried and steamed Rhizoma Cibotii were 0.028% , 0.040% and 0.051% respectively.
Conclusion The content of protocatechuic acid in the steamed Rhizoma Cibotii is the highest.
〔Key words〕 Rhizoma Cibotii; protocatcchuic acid; HPLC; content determination
陈 征，李文莉，童 珂
（湖南省药品检验所，湖南 长沙 410001）
狗脊为常用中药，始载于《神农本草经》，列为中
品[1]。 《中华人民共和国药典》一部各版均有收载。具
有祛风湿，补肝肾，强腰膝的功能。 用于风湿痹痛，
腰膝酸软，下肢无力[2]。 中医临床运用确有疗效。 除
药材狗脊片外，主要炮制品有烫狗脊、蒸狗脊 [3]。 其
主成分为原儿茶酸。 为了探讨狗脊饮片不同炮制品
的内在质量，笔者收集了深圳、长沙、邵东、亳州四个
地区使用的部分狗脊饮片， 按检验顺序编号， 参照
《中华人民共和国药典》2010 年版一部狗脊饮片质
量标准， 逐一进行含量测定。 现将实验方法及结果
报道如下。
1 实验材料
1.1 仪器
高效液相色谱仪：Agilent1100系列四元梯度泵、
Agilent1100 手动进样器、 Agilent1100 系列二极管
阵列检测器、万分之一电子分析天平（Adventurer）。
1.2 试药
乙腈为色谱纯，水为注射用水；其余试剂均为分析
纯。 原儿茶酸对照品 （由中国药品生物制品检定所提
供，供含量测定用，110809-200604），对照药材（由中国
药品生物制品检定所提供供鉴别用，121071-200602）。
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注：与狗脊片组相比 *P<0.05，**P<0.01；与烫狗脊片组相比△P<0.05。
表 1 15 个批次狗脊饮片中原儿茶酸含量测定结果 （x，n=5）
A.原儿茶酸对照品；B.狗脊片供试品；C. 烫狗脊片供试品；D.蒸狗脊片供试品
图 1 狗脊不同炮制品高效液相色谱图
1.3 狗脊样品
分别从深圳、长沙、邵东、亳州当地中药饮片公司
或中药店购入，经周新蓓副主任药师鉴定为蚌壳蕨科植
物金毛狗脊 Cibofium barooomet(L.) j. Sm.的干燥根茎。
2 炮制方法[3]
狗脊片：取原药材，除去杂质，洗净，润透，切厚
片，干燥，筛去碎屑。
烫狗脊片：取砂子置锅内，武火炒至油砂滑利时，
投入狗脊片， 照烫法 （《湖南省中药饮片炮制规范》
2010 年版附录 1）［3］烫至鼓起，取出，筛去砂子，摊
凉，除去残存绒毛。
蒸狗脊片：取净狗脊片，加酒拌匀，照蒸法（《湖
南省中药饮片炮制规范》 附录 1） 蒸 4～6 h， 闷 6～
8 h，取出，干燥。 每 100 kg狗脊，用黄酒 15 kg。
3 含量测定
3.1 色谱条件
色谱柱：Hypersil ODS C18（4.6 mm×100 mm，
5 μm）；流动相 :乙腈-1%冰醋酸溶液 (5 ∶95)，检测
波长：260 nm；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL/min。
3.2 对照品溶液的制备
取原儿茶酸对照品约 6 mg， 精密称定， 加甲
醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液制成每 1 mL 含
60.1 μg 的溶液，即得。
3.3 供试品溶液的制备
取狗脊药材与狗脊不同炮制品粉末（过三号筛）
各 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-
1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液 25 mL，称定质量，
超声处理 30 min，放冷，再称定质量，用甲醇-1%冰
醋酸溶液(70∶30)混合溶液补足减失的质量，摇匀，滤
过，取续滤液，即得。
3.4 样品的测定
分别精密吸取原儿茶酸对照品与狗脊供试品溶
液各 10 μL，注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测
定。 测定结果见图 1及表 1。
样品
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
/
样品
来源
湖南长沙
湖南邵东
安徽亳州
广东深圳
平均
批号
20100109
20101020
20101027
20110107
20110228
20100110
20110309
20100922
20101021
20101215
20101223
20101224
20100824
20101227
20110108
/
0.031
0.026
0.028
0.027
0.030
0.022
0.025
0.031
0.030
0.033
0.028
0.026
0.028
0.024
0.026
0.028
1.05
0.71
0.80
0.77
0.81
0.97
0.74
1.09
0.75
0.72
0.94
0.86
1.02
0.87
0.71
/
烫狗脊片
mg/g RSD(%)
狗脊片
mg/g RSD(%)
0.045
0.038
0.040
0.048
0.042
0.032
0.038
0.044
0.040
0.047
0.035
0.042
0.037
0.033
0.034
0.040*
0.68
0.91
1.13
0.72
0.84
1.03
0.75
0.93
0.81
0.73
0.79
0.87
0.88
0.92
0.96
/
0.055
0.051
0.053
0.057
0.050
0.041
0.045
0.056
0.053
0.057
0.047
0.052
0.052
0.046
0.049
0.051**△
0.81
0.97
0.74
1.04
0.91
0.82
0.96
0.93
0.71
0.83
0.98
1.05
1.01
0.76
0.87
/
蒸狗脊片
mg/g RSD(%)
A B C D
陈 征，等 狗脊饮片不同炮制品中原儿茶酸的含量测定第 9 期 39
（上接第 37页）
表 1 加样回收率测定结果 （n=6）
取样量/（g） 样品含量/（mg） 加入量/（mg） 测得量/（mg） 回收率/（%） 平均回收率/（%） RSD/（%）
A B A B A B A B A B A B
0.502 0 0.202 7 0.199 9 0.22 0.21 0.413 1 0.406 9 95.64 98.57
0.523 9 0.198 7 0.218 0 0.22 0.21 0.403 6 0.426 9 93.14 99.48
0.500 4 0.197 8 0.188 0 0.22 0.21 0.419 2 0.400 6 100.60 101.20
0.501 8 0.218 3 0.198 9 0.22 0.21 0.428 3 0.399 5 95.45 95.52 95.93 97.32 2.9 3.0
0.507 5 0.227 8 0.210 7 0.22 0.21 0.433 0 0.412 0 93.27 95.86
0.502 0 0.207 3 0.207 9 0.22 0.21 0.421 7 0.403 8 97.45 93.29
注：A--尿嘧啶，B--次黄嘌呤。
3 讨论
色谱条件的选择：比较了甲醇-水、乙腈-水、甲
醇-0.05 mol/L 磷酸氢二铵水溶液及 0.05 mol/L 磷
酸氢二铵水溶液，因为土鳖虫中尿嘧啶、次黄嘌呤为
核苷类物质，极性较大，在 0.05 mol/L 磷酸氢二铵水
溶液，流速为 0.4 mL/min，柱温为 25 ℃的条件下分
离度最好。
从表 2中结果可知，尿嘧啶、次黄嘌呤在冀地鳖、
地鳖中含量高低不一，种内差异达到 3倍以上，本次
实验以河北产冀地鳖含量最高。金边土鳖虫并没有收
录入 2010年版药典，但在我国福建、广西、广东等地
多有养殖，且价格比地鳖、冀地鳖贵。 本实验收集了 1
批金边土鳖虫药材，从实验结果看，金边土鳖虫中尿
嘧啶、次黄嘌呤的含量均不高。三种土鳖虫中尿嘧啶、
次黄嘌呤的含量是否有差别还有待进一步研究。
参考文献：
[1] 于 燕，刘继兰，王菊英，等．土鳖虫水提物对实验性高脂血症大
鼠血管内皮和内皮素的影响[J]．中国生化药物杂志，2003，24(1)：
15-17．
[2] 景 晶,曹 红.HPLC 法测定土鳖虫中尿嘧啶和尿囊素的含量[J].
药学实践杂志，2010,28(2):134-136.
[3] 刘丽芳,金蓉鸾,徐国钧.HPLC 法测定十种动物药中尿嘧啶、黄嘌
呤、次黄嘌呤、脲苷的含量[J]．中国中药杂志，1999,24(2):73-76.
表 2 不同批次土鳖虫超微粉体
中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量 （mg/g）
No. 产地 种名 批号 尿嘧啶 次黄嘌呤
1 湖南 冀地鳖 20100803 0.40 0.40
2 湖南 冀地鳖 20100508 0.21 0.27
3 湖南 冀地鳖 20100901 0.15 0.12
4 江西 冀地鳖 20100602 0.34 0.34
5 陕西 冀地鳖 20100806 0.19 0.06
6 河北 冀地鳖 20100605 0.49 0.52
7 安徽 地鳖 20100603 0.30 0.25
8 山东 地鳖 20100608 0.15 0.15
9 四川 地鳖 20100403 0.15 0.17
10 广西 金边土鳖 20100902 0.12 0.13
4 统计学分析
采用 SPSS 15.0 软件进行统计，方差齐者，两组
比较用 t 检验，多组样本间比较用单因素方差分析，
组间比较用 LSD 法检验；方差不齐者用近似检验（t’
检验）。
5 讨论
试验结果表明， 狗脊片、烫狗脊片、蒸狗脊片中
原儿茶酸的含量 (平均值) 分别为 0.028%、0.040%、
0.051%，从高到低依次为：蒸狗脊片＞烫狗脊片＞狗
脊片。 与狗脊片组相比， 另外两组均高于狗脊片组
（P<0.05，P<0.01），说明炮制后可提高原儿茶酸的含
量；与烫狗脊片组相比，蒸法原儿茶酸含量高于烫法
（P<0.05），说明蒸法与烫法差异有统计学意义，蒸法
优于烫法。
本实验 15 个批次的狗脊饮片原儿茶酸的含量
差异，不仅是不同炮制品中有差异，同一炮制品中也
存在差异。 如：狗脊片中原儿茶酸高者 0.033%, 低
者 0.022%；烫狗脊片中原儿茶酸高者 0.048%, 低者
0.032%； 蒸狗脊片中原儿茶酸高者 0.057%, 低者
0.041%。 因素分析：（1）狗脊亘货药材本身存在质量
差异；（2） 饮片在加工炮制与贮藏保管方面存在差
异。 通过对 15 个批次的狗脊饮片中原儿茶酸的含
量测定，笔者认为：中药人员在中药饮片炮制操作过
程中，要严格遵守中药炮制操作规程，尽可能减少中
药材主成分或中药有效成分的损失； 中药库房应全
面做好中药饮片保管工作，确保中药饮片质量。
参考文献：
[1] 肖培根.新编中药志[M].北京:化学工业出版社,2002:611－614.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京:中国医药
科技出版社,2010:209.
[3] 湖南省食品药品监督管理局.湖南省中药饮片炮制规范[M].长沙：
湖南科技出版社，2010：45.
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（本文编辑 杨 瑛）
（本文编辑 杨 瑛）
湖南中医药大学学报 2011 年第 31 卷40